疏筋解毒方对帕金森病模型大鼠中脑黑质HSP70表达的影响

本实验采用体定位脑内注射6-OHDA建立大鼠模型,观察PD大鼠中脑黑质中HSP70的表达。检测结果显示:假手术组未见HSP70阳性细胞表达或见少量阳性表达;模型组、中药组、西药组均可见HSP70阳性神经元表达,在注射6-羟多巴胺后1 d、7 d的观测点成大面积表达;治疗后模型组HSP70表达呈下降趋势,中西药组HSP70表达呈上升趋势,中西药治疗组和模型组比较具有差异性(P<0.05);各治疗组组间存在显著性差异和时效相关性。     

止颤汤对神经干细胞移植后帕金森病大鼠尿液中DA及其代谢产物含量的影响

目的观察止颤汤对神经干细胞（NSC）移植后帕金森病（PD）大鼠尿液中多巴胺（DA）及其代谢产物含量的影响,探讨其对NSC移植后存活及定向分化的作用。方法 1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶（MPTP）脑内定向注射建立PD大鼠模型,经NSC移植后予止颤汤灌胃。应用高效液相色谱法（HPLC）测定PD大鼠尿液中DA及其代谢产物高香草酸（HVA）、双羟苯乙酸（DOPAC）的含量。结果止颤汤可以提高NSC移植后PD大鼠尿液中DA及其代谢产物的含量并改善其行为学。结论止颤汤可能促进PD大鼠脑内NSC移植后的存活,并且分化为多巴胺能神经元发挥功能,同时抑制DA排泄,从而达到治疗作用。     

银杏平颤方及其拆方对MPTP模型小鼠脑内DA及其代谢产物含量的影响

目的:观察银杏平颤方及其拆方对帕金森病(PD)模型小鼠行为学和前脑纹状体多巴胺及其代谢产物含量的影响.方法:采用爬杆法测量小鼠行为学改变,应用高压液相电化学法测定前脑多巴胺(DA)、高香草酸(HVA)及二羟基苯乙酸(DOPAC).结果:PD小鼠出现爬杆能力下降、时间延长、自发活动次数减少,中药全方组和拆方各组小鼠行为学异常均可不同程度改善(P均＜0.05);中药各组的DA含量较正常组低(P均＜0.001),DA/HVA、DA/DOPAC比值均明显降低(P＜0.01或P＜0.001);拆方组中化瘀通络(H)组HVA、DOPAC的含量明显增加,但DA的含量与模型组相比差异不显著(P＞0.05).结论:银杏平颤方拆方组中化瘀通络(H)组可部分改善PD模型小鼠的行为异常改变,并能调节前脑纹状体DA与其代谢产物含量及DA/HVA、DA/DOPAC比值.     

化浊解毒方对多氯联苯暴露大鼠胰岛素抵抗及糖脂代谢的影响

目的研究化浊解毒方对多氯联苯(polychorinated biphenyls, PCBs)暴露大鼠胰岛素抵抗及糖脂代谢的影响。方法雄性ZDF(fa/fa)大鼠,根据OGTT合格者随机分为模型组与PCBs染毒组,模型组6只,PCBs染毒组12只,另设6只雄性ZDF(fa/+)大鼠为正常对照组,正常组予普通饲料喂养+等体积玉米油灌胃,模型组予PMILabdiet 5008饲料+等体积玉米油灌胃,染毒组予PMILabdiet 5008+PCBs(5μg·kg^-1)灌胃染毒,共染毒4周,染毒后,将PCBs染毒组随机分为染毒组与治疗组(化浊解毒方治疗组),治疗组予化浊解毒颗粒按生药6 g·kg^-1·d^-1灌胃给药,余组灌服等体积的生理盐水,连续处理4周。对不同组别采用葡萄糖氧化酶法进行OGTT检测,放射免疫法测其空腹血清胰岛素水平,全自动生化分析仪检测大鼠血清的三酰甘油(TG)、胆固醇(TC)水平,比色法检测游离脂肪酸(FFA)水平。结果与染毒组比较,治疗组血糖、空腹胰岛素水平、胰岛素抵抗指数及血脂水平均下降,胰岛素敏感指数升高...     

疏筋解毒方对脂多糖诱导少胶质细胞不同时段形态变化的实验研究

目的:探讨疏筋解毒方治疗帕金森病的疗效机理。方法:利用温和消化法进行小胶质细胞(Microglia,MG)培养,以脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导其激活所介导免疫炎症损伤,通过不同浓度大鼠含药血清及正常血清作用12h、24h、36h及48h后,分别进行MTT细胞活力及增殖活性测定,观察细胞形态的变化。结果:LPS可有效刺激原代培养的小胶质细胞增殖、活化,与对照组相比,中药组的MG着色相对较浅,胞体相对较小,细胞肿胀、裂解的程度有所减轻。结论:疏筋解毒方具有抑制小胶质细胞激活所介导免疫炎症损伤的作用。     

活血解毒方对糖尿病大鼠视网膜病变的影响

目的探讨活血解毒方对糖尿病大鼠视网膜中央动脉(central retinal artery,CRA)和中央静脉血流动力学及血管形态的影响。方法选取SD大鼠60只,禁食12h,一次性腹腔注射链脲佐菌素(streptozotocin,STZ,65mg/kg)诱导糖尿病模型。造模后将大鼠随机分为模型组,活血解毒方高(15.4g/kg)、中(7.70g/kg)、低(3.85g/kg)剂量组及羟苯磺酸钙胶囊组(西药组,0.167g/kg),每组10只。另选取10只大鼠作为正常对照组(正常组),给予等体积蒸馏水灌胃。每组每天干预1次,共20周。检测各组大鼠CRA收缩期峰值血流速度(peak systolic velocity,PSV)、舒张期末期流速(end diastolic velocity,EDV)、平均血流速度(mean velocity,MV)、搏动指数(plusitive index,PI)、阻力指数(resistive index,RI)及视网膜中央静脉血流速度(central retinal vena velocity,CRV),应用视网膜消化铺片方法,观察并比较各组大鼠视网膜血管形态。结果与正常组比较,模型组PSV、EDV、MV及CRV降低,PI、RI、毛细血管面积密度升高,差异均有统计学意义(P<0.01),视网膜毛细血管排列紊乱,毛细血管管径粗细不均匀,可见内皮细胞增生,周细胞减少。与模型组比较,活血解毒方高、中剂量组PSV、EDV、MV及CRV均升高,PI、RI均降低,差异均有统计学意义(P<0.01),各用药组间比较,差异无统计学意义(P>0.05)。活血解毒方各剂量组毛细血管的分布较均匀,血管形态较规则,未见明显扭曲和扩张,内皮细胞增生状况不明显,与模型组比较,毛细血管面积密度显著下降(P<0.01)。活血解毒方各剂量组间比较,差异无统计学意义,与模型组比较,西药组毛细血管面积密度显著下降(P<0.01)。结论活血解毒方能明显改善糖尿病大鼠视网膜血流动力学参数,增加视网膜毛细血管血流量和灌流量,抑制毛细血管内皮细胞的增生。     

麝香草成分对解毒代谢酶活性的影响

在日本药学会第122次年会上曾报告,给予麝香草及其主要成分麝香草酚、香芹酚后,小鼠肝脏的解毒代谢酶谷胱甘肽S-转移酶(GST)活性增强。此次,探讨了麝香草所含成分2-莰醇(BOR)、乙酸龙脑酯(BORAc)、莰烯(CAM)对小鼠肝脏的第一步反应酶与第二步反应酶活性的影响。 方法:实验动物为4周龄ddY系雄性小鼠,每天经口给予BOR、BORAc、CAM(200mg/kg),连续给予7d后,摘除肝脏与肾脏,检测第二步反应酶胞质液中的GST活性与苯醌还原酶活性(QR),并检测第一步反应酶微粒体中的7-乙氧基香豆素O-脱乙基化酶活性(ECOD)。SDS-聚丙烯酰胺凝胶电…     

天麻素对PD模型大鼠纹状体DA、DOPAC、HVA含量的影响

目的 进一步观察天麻素对帕金森病(PD)模型大鼠生化指标的药理作用.方法 应用高压液相色谱法(HPLC)测定大鼠纹状体多巴胺(DA)、高香草酸(HVA)及二羟苯乙酸(DOPAC),观察天麻素对PD模型大鼠纹状体DA及其代谢产物含量的影响.结果天麻素(中、小剂量)组PD模型大鼠DA/HVA比值有不同程度的升高,说明天麻素可以抑制DA的代谢率,使DA含量升高.结论天麻素对PD模型大鼠DA能神经元功能可能具有保护作用.     

PD小鼠脑内SOD、MDA和GSH-Px含量的变化和银杏平颤方及其拆方的影响

目的:探讨中药治疗帕金森病(PD)的作用和机制,观察银杏平颤方及其拆方对帕金森病(PD)模型小鼠前脑纹状体SOD、MDA和GSH-Px含量的影响.方法:应用MPTP制作PD小鼠模型.应用光电比色法测定前脑SOD、MDA和GSH-Px.结果:(1)模型组SOD、GSH-Px活力明显低于正常组(P＜0.001),而MDA含量显著高于正常组(P＜0.001);(2)14天、28天中药组脑组织中SOD、GSH-Px活力明显高于模型组(P＜0.001),而MDA含量低于模型组(P＜0.001).结论:银杏平颤方及其拆方组能增加PD模型小鼠脑组织内自由基清除酶类的活力,降低脂质过氧化物的含量.     

补肾解毒方与健脾解毒方对慢性乙肝患者不同阶段的T淋巴细胞功能影响的研究

目的:比较补肾解毒方和健脾解毒方对乙肝病毒(Hepatitis B virus,HBV)慢性感染患者在不同免疫状态下外周血T淋巴细胞(Ts)功能影响。方法:选取本院感染科2013年9月至2014年5月门诊慢性HBV感染患者40例,据患者不同免疫状态分为清除组和耐受组,另选本院健康职工10例作为对照组。采用大鼠补肾解毒药物血浆和健脾解毒药物血浆进行干预。以T淋巴细胞亚群CD3+、CD4+、CD8+、CD28+分子的表达及干扰素-γ(Interferon-γ,IFN-γ)的水平作为研究指标,判断干预对外周血T淋巴细胞(Ts)功能影响情况。结果:各组健脾组和补肾组血浆在干预后CD3+、CD4+、CD8+、CD28+的表达均显著升高,耐受组中P<0.05,补肾组血浆干预后CD28+及CD8+分子显著高于健脾组,P<0.05;两种药物血浆分别干预后,CD28+分子表达均显著高于清除组同期,P<0.05。结论:健脾解毒法和补肾解毒法均能促进慢性HBV感染患者T细胞功能的恢复,免疫耐受期可能是中医药治疗的一个重要时期,补肾解毒药物效果优于健脾毒药物,需要分子实验和临床实验提供更多循证依据。     

川芎嗪对左旋多巴处理的PD大鼠纹状体细胞外液DA及其代谢产物、羟自由基水平的影响

 目的探讨川芎嗪对左旋多巴(L-DOPA)处理后帕金森病(PD)大鼠纹状体细胞外液多巴胺(DA)及其代谢产物、羟自由基水平的影响。方法SD大鼠,随机分为对照组、模型组、川芎嗪大剂量组、川芎嗪小剂量组、古拉定组。脑内注射6-羟基多巴胺(6-OHDA)制造部分损伤的PD大鼠模型,并应用脑微透析技术在清醒、自由活动状态下,各组进行L-DOPA脑内灌流处理。动态观察大鼠纹状体细胞外液DA及其代谢产物浓度和羟自由基的变化。结果L-DOPA处理后,对照组DA浓度在4个时间点较模型组显著增高;模型组DA代谢率在9个时间点较对照组增高、羟自由基的指标2,3-DHBA和2,5-DHBA浓度分别有6和7个时间点显著增高(P<0.05或P<0.01);川芎嗪大、小剂量组、古拉定组与模型组相比,多个时间点降低了2,3-DHBA,2,5-DHBA水平和DA代谢比率(P<0.05或P<0.01)。结论川芎嗪对L-DOPA处理的PD大鼠具有改善纹状体细胞外液DA代谢率和减轻其氧化应激损伤的作用。     

天麻乙酸乙酯萃取物对帕金森病大鼠单胺类神经递质DA及NE含量的影响

目的建立单胺类神经递质多巴胺(DA)及去甲肾上腺素(NE)的高效液相色谱-电化学检测法(HPLC-ECD),探讨天麻乙酸乙酯萃取物对帕金森病(PD)大鼠脑组织中DA及NE含量的影响。方法 (1)色谱条件:色谱柱:QU-3C18-15021型C_(18)反相色谱柱(150 mm×2.1 mm);流动相为∶水相∶有机相(90∶10,V/V)[其中水相为磷酸二氢钾(0.076 mol/L),辛烷磺酸钠(25 mg/L),用磷酸调节pH至4.6;有机相为甲醇];流速:0.1 mL/min;柱温:28℃。电化学检测器工作电极:玻璃碳电极;参比电极:银/氯化银(Ag/AgCl)电极;检测电压:+0.7 V。(2)天麻乙酸乙酯萃取物对大鼠脑组织中神经递质含量的影响:选取健康成年SD大鼠,采用脑内定位注射6-羟基多巴胺(6-OHDA)建立PD大鼠模型。随机分为8组,即空白对照组、假手术组、模型对照组、阳性对照组(美多芭7.8 mg/kg)、吐温溶剂组、天麻乙酸乙酯萃取物低剂量组(5 g生药/kg)、中剂量组(10 g生药/kg)、高剂量组(20 g生药/kg)。各组灌胃给药治疗30 d。于末次给药2 h后分离取出大鼠脑组织,经处理后采用HPLC-ECD测定脑组织中神经递质-DA、NE的含量变化。结果 (1)HPLC-ECD方法学考察结果表明,在本色谱条件下可以很好的分离单胺类递质DA、NE(R1.5),且阴性对照(空白溶剂)在相应位置无干扰,线性关系、精密度、重复性、稳定性、加样回收率良好,可以用于DA、NE的检测;(2)样品检测结果表明,与模型组比较,天麻乙酸乙酯萃取物高剂量组(20 g生药/kg)能显著增加PD大鼠脑中DA的含量(P0.05),天麻乙酸乙酯萃取物低、中、高剂量组(5、10、20 g生药/kg)对NE亦有明显增高作用(P0.05)。结论采用HPLC-ECD方法进行单胺类神经递质DA、NE的检测,方法简便,结果准确;其检测结果表明,天麻乙酸乙酯萃取物能升高脑内单胺类神经递质的水平,显示出抗PD的作用。     

活血解毒方对糖尿病大鼠神经中AC-cAMP-PKA途径的影响

目的:观察腺苷酸环化酶(AC)-环磷腺苷(cAMP)-蛋白激酶A(PKA)途径在糖尿病大鼠周围神经中的变化及活血解毒方对其的影响。方法:雄性SD大鼠分为正常组、模型组、甲钴胺组、活血解毒方高低剂量组。链脲佐菌素(streptozocin,STZ)腹腔注射65mg/kg造模,放免法检测坐骨神经内cAMP水平,免疫组化法检测坐骨神经中AC、PKA的表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠坐骨神经内AC、cAMP水平降低;与模型组比较,活血解毒方高、低剂量组大鼠坐骨神经内AC表达升高,高剂量组cAMP含量升高。结论:AC-cAMP在糖尿病大鼠周围神经中表达水平下降,活血解毒方可能通过调控AC-cAMP途径防治糖尿病神经病变。     

解毒扶阳方对2型糖尿病大鼠炎症因子的影响

目的： 探讨解毒扶阳方对2型糖尿病（T2DM）模型大鼠炎症因子的调节作用。方法： 取雄性大鼠,随机分为正常对照组,高脂高糖模型（模型）组,模型+二甲双胍（降糖）组,模型+解毒扶阳（试药）高、中、低剂量组,共6组,除正常对照组外,其他各组按60 mg·kg^-1剂量尾静脉一次性快速注射链脲佐菌素制备动物模型,并于模型制作当日各给药组大鼠分别ig给予药物治疗,每日1次,连续12周。每10 d称量各组动物体重1次;给药最后1 d取血测定空腹血糖;取血清采用酶联免疫吸附分析方法测定血清瘦素（LEP）、胰岛素（INS）、白细胞介素（IL）-1、IL-6、C-反应蛋白（CRP）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）水平,计算胰岛素敏感指数（ISI）。结果： 实验结果显示,解毒扶阳方与模型组比较,低剂量组有显著差异。血清LEP与模型组比较,试药3个剂量组均显示有非常显著的差异。ISI与模型对照组比较,3个剂量组均有非常显著性的差异。与模型组比较,中剂量组IL-1具有显著差异,高剂量组具有非常显著性差异。解毒扶阳方对TNF-α含量有降低作用,与模型组比较,高、中、低3个剂量组均有非常显著差异。结果表明,对CRP也有调节作用,与模型组比较,高、中、低3个剂量组均具有非常显著的差异。结论： 解毒扶阳方对T2DM所致血糖、LEP、INS、IL-1、IL-6、CRP、TNF-α含量升高,均有一定调节作用,使之降到正常或接近正常水平。提示解毒扶阳方对T2DM所致炎症因子含量升高以及糖代谢紊乱,有调节作用。     

益气解毒方对大鼠局灶性脑缺血氧化应激的影响

目的:研究中药益气解毒方对大鼠局灶性脑缺血后氧化应激损伤的影响。方法:取健康雄性SD大鼠60只,随机分为6组:假手术组、模型组、阳性药银杏叶提取物组(4 mg.kg-1)、益气解毒高、中、低剂量组(25,5,1 mg.kg-1)。给药组于手术麻醉前10 min灌胃给药,用线栓法制作大鼠大脑中动脉闭塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)模型,12 h后取血清和缺血脑组织制备组织匀浆液,用酶标仪定量检测超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、单胺氧化酶(MAO)、髓过氧化物酶(MPO)。结果:与假手术组比较,模型组脑组织SOD和GSH-Px活性明显降低(P<0.01),MDA含量和MAO,MPO活性明显升高(P<0.05)。与模型组比较,益气解毒方高、中、低剂量组、阳性药组SOD和GSH-Px显著性升高(P<0.01),MAO,MDA和MPO显著性降低(P<0.05,P<0.01)。结论:益气解毒方对大鼠局灶性脑缺血有保护作用,其作用机制可能与抗氧化应激作用有关。     

活血解毒方对糖尿病大鼠视网膜PEDF表达的影响

目的:观察活血解毒方对糖尿病大鼠视网膜色素上皮衍生因子(PEDF)的影响。方法:采用链脲佐菌素(65 mg.kg-1)一次性ip SD大鼠建立糖尿病大鼠模型,随机分为模型组和活血解毒方高、低剂量组(15.8,7.7 g.kg-1)及导升明组(0.167 g.kg-1),另设正常对照组。ig给药,20周后处死动物。腹主动脉取血检测血清中PEDF;摘除眼球应用免疫组织化学观察PEDF蛋白的表达;取视网膜组织,采用荧光定量PCR法检测视网膜PEDFmRNA的表达。结果:糖尿病模型组大鼠血清中PEDF的含量(89.96±18.12)ng.L-1,比正常组降低(P<0.01),与模型组相比,活血解毒方各剂量组的含量均上升。糖尿病模型组大鼠视网膜LSAB法标记染色病理切片中PEDF表达降低,积分吸光度(IA)为(10.49±2.37),与正常组相比(41.75±10.25)有显著性差异(P<0.01),活血解毒方各剂量组与模型组相比显著升高(P<0.01)。与正常组相比,PEDFmRNA在糖尿病模型组的表达降低,而活血解毒方各剂量组的表达比模型组升高。结论:活血解毒方能够升高糖尿病大鼠视网膜PEDF蛋白和mRNA的表达,从而对糖尿病大鼠视网膜起保护作用。     

温胆汤及其配伍对大鼠纹状体DA代谢的影响

目的 :探讨温胆汤对精神分裂症模型大鼠纹状体多巴胺 (DA)代谢的影响。方法 :测定纹状体中单胺氧化酶(MAO)活性 ,并应用高效液相 -电化学法 (HPLC -EC)测定了实验大鼠纹状体DA及其代谢产物 3,4 -二羟基苯乙酸(DOPAC)、高香草酸 (HVA)的含量。结果 :温胆汤组可升高MAO活性及DA、DOPAC、HVA的含量 ,使DA/HVA下降 (P <0 .0 1 ) ;其祛痰健脾组药可降低DA/HVA比例 (P <0 .0 5 )。结论 :温胆汤与氯丙嗪均可增强DA代谢     

活血解毒方对糖尿病大鼠坐骨神经AGEs-RAGE-NF-κB途径的影响

目的观察活血解毒方对糖尿病大鼠坐骨神经中糖基化终产物(Glycation end products,AGEs)-糖基化终产物受体(Glycation end product receptor,RAGE)-核因子-κB(nuclear factor-B,NF-κB)途径的影响。方法雄性SD大鼠分为正常组、模型组、甲钴胺组、活血解毒方高、低剂量组。链脲佐菌素(streptozocin,STZ)腹腔注射65mg/kg造模,免疫组化法检测坐骨神经中AGEs、RAGE、NF-κB蛋白的表达。结果与正常组比较,模型组大鼠坐骨神经内AGEs、RAGE、NF-κB水平升高;与模型组比较,活血解毒方组大鼠坐骨神经内AGEs、RAGE、NF-κB表达降低。结论活血解毒方可能是通过抑制AGEs-RAGE-NF-κB途径从而防治糖尿病神经病变。     

清热散瘀解毒方对EP性发热大鼠血清、下丘脑组织中cAMP含量的影响

目的:通过观察清热散瘀解毒方对EP性发热大鼠c AMP的影响,探讨该方的退热机理。方法:应用随机分组方法将大鼠分为清热散瘀解毒方组(12只)、萘普生药物组(12只)、模型组(12只),每组注射2,4-二硝基苯酚进行小鼠非感染发热造模,然后分别灌入中药、西药、生理盐水(模型组和空白组)。2 h后测定体温及血清中c AMP的含量,比较分析不同药物对EP性发热大鼠体温的影响以及c AMP含量的变化。结果:中药组和西药组灌药2 h后,体温明显低于模型组(P0.05);中药组、西药组血清和下丘脑c AMP含量明显低于模型组(P0.05)。结论:清热散瘀解毒方能降低EP性发热大鼠体温,其作用机理可能与下调机体血清和下丘脑组织中c AMP含量相关。