三种玻璃化冷冻法保存小鼠早期囊胚的效果观察

目的 比较三种不同的冷冻载体玻璃化冷冻保存小鼠早期囊胚,复苏后胚胎的存活率及体外继续发育能力.方法 分别应用普通麦管、CPS及冷冻环玻璃化冷冻小鼠早期囊胚,以同期未冷冻早期囊胚作对照,观察冷冻复苏后胚胎存活率及继续发育能力.结果 复苏后胚胎丢失率:冷冻环组显著低于普通麦管组和CPS组(P＜0.05);存活率:冷冻环组和CPS组均高于普通麦管组,差异有显著性意义(P＜0.05);囊胚孵出率:冷冻环组高于CPS组,二者之间有显著性差异(P＜0.05),冷冻环组与对照组(同期新鲜未冷冻的早期囊胚)比较无显著性差异(P＞0.05).结论 冷冻环能明提高囊胚的玻璃化冷冻效率.     

4702例两种方法冷冻卵裂期胚胎移植的临床结局分析

目的分析比较玻璃化冷冻与程序化冷冻卵裂期第3d(D3)胚胎解冻周期移植的临床妊娠及出生结局。方法对我院生殖中心2008年10月至2013年7月2901例玻璃化解冻周期及1801例程序化解冻周期进行回顾性研究,比较两组的临床妊娠结局和新生儿出生情况。结果玻璃化冷冻组的胚胎复苏率、临床妊娠率、胚胎种植率(分别为97.41%、47.64%、30.99%)均显著高于程序化冷冻组的胚胎复苏率、临床妊娠率、胚胎种植率(52.23%、32.56%、17.40%),差异均有统计学意义(P<0.001);玻璃化冷冻组新生儿的早产率(15.02%)、低出生体重儿发生率(20.85%)、出生缺陷率(1.11%)均高于程序化冷冻组的早产率(14.12%)、低出生体重儿发生率(17.45%)、出生缺陷率(0.60%)的趋势,但统计学上均无显著性差异(P>0.05)。结论玻璃化冷冻可明显提高胚胎复苏率和改善临床妊娠结局,但并没有改善新生儿出生结局,与程序化冷冻相比具有相似甚至有可能更差的新生儿出生结局。     

抗坏血酸盐对小鼠囊胚冷冻结果的影响

目的:探讨在慢速冷冻和玻璃化冷冻中添加抗坏血酸盐对小鼠囊胚冷冻结果的影响。方法:用慢速冷冻法和玻璃化法冷冻小鼠囊胚,将0.1mmol/L抗坏血酸盐分别加到冷冻和解冻液中作为观察组,不加抗坏血酸盐冷冻作为对照组,观察解冻后囊胚腔重新扩张率和囊胚孵出率。结果:在慢速冷冻方法中观察组囊胚腔重新扩张率和囊胚孵出率高于对照组(P<0.05)。而玻璃化法两者差别无统计学意义(P>0.05)。结论:抗坏血酸盐可在慢速冷冻方法中提高冻融囊胚继续生长发育能力,玻璃化法没有此作用。     

海藻糖应用于人类成熟卵母细胞玻璃化冷冻研究

目的 探讨海藻糖的应用能否改善人成熟卵母细胞玻璃化冷冻效果、提高冻融后卵母细胞的发育潜能.方法 从该中心IVF/ICSI治疗的病人中经知情同意获取卵母细胞248枚,随机分成四组：显微注射海藻糖组（A组）、细胞外海藻糖组（B组）、常规蔗糖组（C组）、新鲜对照组（D组）.卵母细胞复苏后,所有存活卵母细胞均行卵胞浆内单精子显微注射（ICSI）,观察各组卵母细胞冻融后存活率、受精率、卵裂率、囊胚率、优质胚胎率、优质囊胚率.结果 A、B、C三组存活率、优质胚胎率、囊胚率差异无统计学意义（P〉0.05）,A组受精率、卵裂率、优质囊胚率高于B组和C组,差异均有统计学意义（P〈0.05）,其中与B组受精率、卵裂率差异极显著（P〈0.01）,与C组卵裂率差异极显著（P〈0.01）;B组与C组存活率、受精率、卵裂率、优质胚胎率、囊胚率、优质囊胚率差异均无统计学意义（P〉0.05）;A组与D组优质胚胎率、优质囊胚率差异有统计学意义（P〈0.05）;B组及C组与D组受精率、卵裂率、优质胚胎率、优质囊胚率差异极显著（P〈0.01）.结论 海藻糖作为细胞内冷冻保护剂似乎能够改善人卵母细胞玻璃化冷冻效果及冻融后卵母细胞发育潜能.     

玻璃化冷冻法在人桑葚胚胎和卵裂期胚胎冻融周期中的临床研究

目的探讨玻璃化冷冻法对人桑葚胚和卵裂期胚胎解冻后的妊娠结局。方法回顾性分析河北医科大学第二医院生殖中心行冻融胚胎移植患者的解冻及妊娠情况,并根据冷冻方法和胚龄分为3组。A组为前期采用慢速程序法冷冻卵裂期胚胎的冻融移植周期,共215周期;B组为前期采用玻璃化法冷冻卵裂期胚胎的冻融移植周期,共208周期;C组为前期采用玻璃化法冷冻桑葚期胚胎的冻融移植周期,共159周期。比较A组和B组解冻后的胚胎存活率、存活胚胎的完整率、临床妊娠率、胚胎种植率和流产率;比较B组和C组解冻后的胚胎存活率、存活胚胎的完整率、临床妊娠率、胚胎种植率和流产率。结果 A组和B组比较,胚胎存活率和存活胚的完整率差异有统计学意义(P<0.01),胚胎种植率、临床妊娠率、流产率差异有统计学意义(P<0.05),临床妊娠率差异无统计学意义(P>0.05),而胚胎种植率、流产率差异有统计学意义(P<0.05)。B组和C组比较,存活胚完整率差异有统计学意义(P<0.01),胚胎种植率差异有统计学意义(P<0.05),胚胎存活率和临床妊娠率C组高于组B,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论玻璃化冷冻法在冷冻人卵裂期胚胎由于具有较高的胚胎存活率和存活胚完整率而优于慢速程序化冷冻法。而桑葚期胚胎的玻璃化冷冻法在存活胚的完整率和胚胎种植率上优于卵裂期胚胎,可能是玻璃化法冷冻保存胚胎的较好时期。     

冻融周期不同时期形成囊胚对临床妊娠结局的影响及囊胚形成影响因素分析

目的 比较冻融周期D5形成囊胚和非D5形成囊胚的临床妊娠结局,并分析囊胚形成的影响因素.方法 选取2013年1月至2015年6月期间在我院行复苏周期囊胚移植的患者作为研究对象,根据冷冻时间,将其分成D5冷冻组和非D5冷冻组,其中D5冷冻组80个周期,非D5冷冻组78个周期,比较两组患者的一般资料、囊胚复苏率以及临床结局,并分析囊胚形成影响因素.结果 D5冷冻组囊胚复苏率(99.3％)显著高于非D5冷冻组(95.5％)(P＜0.05);D5冷冻组临床妊娠率、囊胚着床率均显著高于非D5冷冻组(P＜0.05),D5冷冻组流产率显著低于非D5冷冻组(P＜0.05);年龄＜35岁组、BMI＜ 24组、D3胚胎评分为Ⅰ～Ⅱ组、D3卵裂球为7～9组、碎片比例＜25％组囊胚形成率显著高于年龄≥35岁组、BMI≥24组、D3胚胎评分为Ⅲ～Ⅳ组、D3卵裂球非7～9组、碎片比例≥25％组(P＜0.05).结论 D5形成囊胚妊娠结局优于非D5形成囊胚,复苏周期优先移植D5形成囊胚可获得更高的临床妊娠率,年龄、BMI、D3胚胎评分、D3卵裂球数及碎片比例影响囊胚形成,临床治疗过程中应加以关注.     

卵裂期胚胎玻璃化冷冻解冻后继续培养至囊胚的妊娠结局分析

目的了解卵裂期胚胎玻璃化冷冻解冻后行囊胚培养的妊娠结果。方法回顾性分析2013年5月-2013年9月在郑州大学第二附属医院生殖中心行玻璃化冷冻解冻后移植的患者共202周期的妊娠情况;其中卵裂期胚胎冷冻解冻后移植者136周期,卵裂期胚胎解冻后行囊胚培养后移植者66周期。结果卵裂期胚胎冻融移植者136周期,均有胚胎可移植,获得妊娠45周期,妊娠率为33．08％（45／136）、着床率为17．35％（55／317）,早期流产率为17。78％（8／45）;卵裂期胚胎解冻后行囊胚培养者66周期212个胚胎,其中43个周期共形成囊胚87个,囊胚形成率为41．03％（87／212）、获得妊娠22周期,妊娠率为51．16％（22／43）、着床率为32．94％（28／85）、早期流产率14．29％（3／22）。囊胚期移植者的着床率及临床妊娠率显著高于卵裂期移植者,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论卵裂期胚胎解冻后培养至囊胚能获得较高的着床率和妊娠率。     

两种人工皱缩预处理方法在人囊胚玻璃化冻融中的应用

目的比较两种囊腔人工皱缩(AS)预处理方法在人囊胚玻璃化冻融中的应用效果。方法囊胚玻璃化冷冻复苏患者564例分为两组:A组201例,采用注射针抽穿AS法;B组363例,采用激光打孔AS法。比较两组的相关结果。结果 A组平均移植囊胚数(1.72±0.67)个,B组平均移植囊胚数(1.72±0.52)个;A、B组冷冻囊胚复苏后的存活率和孵出率分别为92.1%和79.0%、94.6%和79.6%,A组和B组玻璃化冻融移植后临床妊娠率、种植率、活产率、流产率分别为51.8%、38.4%、42.4%、18.2%和56.4%、43.2%、46.7%、16.3%,两组在以上各指标间均无统计学差异(P>0.05)。结论两种囊腔AS法均是有效的预处理方法,激光打孔AS法效果可能稍好一些。     

1658例玻璃化冻融周期的临床结局分析

目的：探索应用玻璃化冻融技术冻融卵裂期胚胎及囊胚的临床效果。方法来源于江西省妇幼保健院生殖中心2012年9月至2014年1月1658例玻璃化冻融移植周期（其中卵裂期胚胎1426周期共2907枚胚胎,囊胚232周期共341枚胚胎）,用自制麦管作为胚胎载体及相同的玻璃化方法进行冷冻、复苏,及胚胎移植,观察其复苏存活率、全胚融解率、临床妊娠率、植入率和流产率等。结果卵裂期胚胎复苏率为98.5%,全胚融解率是0.35%。囊胚复苏率为99.7%,全胚融解率是0.43%。卵裂期胚胎的胚胎植入率显著低于囊胚（35.4%vs 49.3%）（P〈0.05）,平均每周期移植胚胎数显著高于囊胚（2.0±0.3 vs 1.5±0.5）（P〈0.05）,临床妊娠率低于囊胚（50.7%vs 55.4%）,差异无显著性意义,P〉0.05,双胎率卵裂期胚胎显著高于囊胚（38.3%vs 28.9%）（P〈0.05）,早期流产率无显著性差异（6.8%vs 7.8%,P〉0.05）。结论使用相同的玻璃化冷冻方法对人类卵裂期胚胎和囊胚可获得理想的冷冻效果。     

RapidWarm Blast玻璃化解冻液对囊胚复苏的效果观察

目的 观察在囊胚复苏周期中,RapidWarm Blast玻璃化解冻液对囊胚的复苏效果。方法 回顾性分析2018年12月至2019年12月在安徽医科大学第一附属医院首次行囊胚复苏移植的655例患者临床资料,根据囊胚解冻液不同分A组357例及B组298例。A组采用传统Vitrification Media解冻液进行囊胚复苏,B组采用新型RapidWarm Blast解冻液复苏。比较两组囊胚复苏后整体存活率,解冻2 h后囊胚重扩张率、孵化率,囊胚种植率及临床妊娠率;同时比较两种解冻液对囊胚不同发育阶段(第5天囊胚、第6天囊胚)的重扩张率、孵化率及临床妊娠率的影响。结果 两组囊胚复苏后的存活率、重扩张率、孵化率、临床妊娠率比较,差异均无统计学意义(P>0.05);B组囊胚种植率(55.45%)高于A组(48.76%),差异有统计学意义(P<0.05)。两组中发育第5天的囊胚复苏2 h后重扩张率及孵化率均高于发育第6天的囊胚,差异均有统计学意义(P<0.05);两组间发育第5天的囊胚复苏2 h后重扩张率及孵化率比较,差异无统计学意义(P>0.05),B组发育第6天的囊胚复苏2 h后扩张率及孵化率均高于A组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 新型RapidWarm Blast解冻液用于囊胚玻璃化复苏,可获得与传统的Vitrification Media相似的临床结局,但新型解冻液对发育第6天囊胚的复苏效果更好,胚胎种植率更高。     

玻璃化法冷冻和慢速冷冻对人类卵巢组织的影响

目的比较玻璃化冷冻和慢速冷冻对人类卵巢组织的影响。方法采集19例人类卵巢组织,随机分成3组：玻璃化冷冻组、慢速程序冷冻组、新鲜对照组。对新鲜的和冻融后的卵巢皮质中的间质细胞和卵泡进行光学显微镜观察。同时,通过原位末端转移酶标记技术（TUNEL）实验观察卵泡凋亡的情况。结果慢速程序冷冻组异常卵巢间质细胞比率高于玻璃化冷冻组,差异有统计学意义（P〈0.05）。各冷冻组的异常始基卵泡及初级卵泡比率均高于新鲜对照组,差异有统计学意义（P〈0.05）。冷冻组与对照组的卵泡凋亡率差别无统计学意义（P〉0.05）。结论玻璃化冷冻是人类卵巢组织适宜的冷冻保存方案。     

卵子玻璃化冷冻复苏后行卵母细胞胞浆内单精子显微注射27例临床结局

目的：探讨卵子玻璃化冷冻技术在辅助生殖中的临床应用价值。方法回顾性分析2013年1月－2015年12月在解放军174医院生殖医学中心行体外受精,取卵日因男方因素未取到精子而行卵子玻璃化冷冻保存的27对不孕夫妇的资料。卵子解冻后均行夫精卵母细胞胞浆内单精子显微注射,记录卵子受精情况及临床结局。结果27例患者共冷冻卵子245枚,并全部解冻,解冻后存活214枚,存活率84．79％;其中第二次减数分裂中期（ metaphase Ⅱ,MⅡ）卵198枚,并全部行ICSI,受精138枚,受精率74．49％;卵裂99枚,卵裂率71．74％;形成87枚2PN（原核,pronucleus）胚胎,优质胚胎34枚,优质胚胎率39?08％。20个移植周期移植胚胎41枚,临床妊娠6例,临床妊娠率34．82％。结论玻璃化冷冻技术应用于卵子冷冻保存,并对复苏卵子进行卵母细胞胞浆内单精子显微注射可以取得一定的临床妊娠率,在辅助生殖技术临床上具有很强的实用价值。     

玻璃化全胚冷冻在382例多囊卵巢综合征不孕患者中的临床价值

目的：评价玻璃化全胚冷冻在PCOS不孕症患者治疗中的临床价值。方法回顾分析2010年4月-2012年7月间我院生殖中心收治行IVF的382例促排周期的PCOS患者,按我科全胚冷冻标准行玻璃化冷冻。分为250例新鲜胚胎移植组（A组）和115例玻璃化全胚冷冻组（B组）。其中首次解冻移植95例,比较两组间结局。结果 IVF治疗中,A组移植后有7例中度OHSS发生;B组取卵后3d有113例患者向中度OHSS进展,2例向重度OHSS进展。与全胚冷冻标准相符,B组Gn天数、HCG日E2水平、HCG日孕酮水平、获卵数均高于A组（P＜0.05）,差异有统计学意义。⑵B组复苏率为96.6%,移植后的临床妊娠率56.84%与A组新鲜周期60.00%比较差异无统计学意义（P＞0.05）。结论易发OHSS的PCOS患者进行玻璃化全胚冷冻后移植,避免了OHSS进一步发展,又不影响妊娠率。     

玻璃化冷冻对冻融卵裂期胚胎移植周期结局的影响

目的探讨玻璃化冷冻法对卵裂期冻融胚胎移植周期结局的影响。方法将接受体外受精-胚胎移植患者剩余的可利用胚胎进行玻璃化冷冻或者慢速程序化冷冻,比较胚胎复苏后的复苏率、胚胎存活率、完整存活率、种植率、妊娠率等指标。结果玻璃化冷冻复苏248个周期、746个胚胎,存活643个（86．2％）,完整存活594个（79．4％）,移植244个周期,临床妊娠107个周期（43．9％）,种植率26．1％,流产9个周期（8．5％）。慢速程序冷冻复苏225个周期、818个胚胎,存活598个（73．1％）,完整存活436个（53．3％）,移植225个周期,临床妊娠74个周期（32．9％）,种植率15．2％,流产7个周期f9．5％）。玻璃化法冷冻后的胚胎存活率、完整存活率、临床妊娠率、种植率明显高于慢速程序冷冻法（P〈0．05）。结论玻璃化冷冻法是冻存人类卵裂期胚胎理想的方法,可以提高胚胎的有效利用。     

44例子宫肉瘤诊治的临床体会

目的：探讨分析子宫肉瘤的临床手术资料,了解其预后因素,寻求更有效的治疗方法。方法：回顾性分析我院10年间收治的44例子宫肉瘤的组织学类型、临床特点、治疗方法及预后因素。结果：总的3年及5年生存率分别为84．1％和70．1％：3年复发率为38．6％,5年复发率为47．7％。手术分期对3年及5年生存率差异有显著性（P〈0.05）,对复发有明显影响（P〈0.01）。绝经前患者5年生存率为83．3％,绝经后的患者5年生存率为61．5％（P〈0.05）。不同手术方式与3年及5年生存率差异无显著性（P〉0．05）,但广泛全子宫双附件＋盆腔淋巴结清扫术与其它手术方式对复发的影响差异有显著性（P〈0.05）。结论：子宫肉瘤的预后与临床和手术病理分期、绝经前后有明显关系。子宫肉瘤的盆腔复发率高,盆腔淋巴结清扫术虽不一定能改善其5年生存率,但能减少子宫肉瘤的复发。术后加放疗或化疗不能提高其5年生存率。采用手术加放疗加化疗的综合治疗,其对中位复发时间有明显影响（P〈0.01）,其5年生存率比手术加放疗或加化疗有明显提高（P〈0．05）。     

Expression of ganglioside GT1b in mouse embryos at different developmental stages after cryopreservation

Gangliosides are a family of sialic acid-containing glycosphingolipids that are abundant in neurons and have a variety of functions in developing and mature tissues. We examined the expression of ganglioside GT1b in the embryonic preimplantation stage after freezing and thawing processes to determine the regulatory roles of ganglioside GT1b in early embryonic development. ICR mouse embryos at the two-cell stage obtained by flushing the oviducts were frozen by two cryopreservation procedures, slow freezing using a programmable freezer or vitrification by direct plunging into liquid nitrogen. Slow freezing was conducted with equilibration in 1.5 M 1,2-propanediol or 5% equilibration glycerol. Vitrification was applied with a 10–15 min equilibration in 7.5% ethylene glycol (EG), 7.5% dimethylsulfoxide (DMSO), and 30 sec in a solution of 15% EG, 15% DMSO and 0.5 M sucrose. Immediately after thawing, the survival rate of the embryos was assessed by their morphology and ability to develop to blastocysts in culture. The survival rate of vitrified and thawed embryos (92%) was significantly higher than that of slow frozen and thawed embryos (76%) (P<0.05). A tendency of higher blastocyst rate was found in the vitrified and thawed embryos compared to that of the slow frozen and thawed embryos. Confocal immunofluorescence staining confirmed that surviving embryos expressed ganglioside GT1b, with the strongest expression at the compacted eight-cell or later stage embryos. Ganglioside GT1b was not observed in the TUNEL-positive, apoptotic embryos, suggesting that cryopreservation had induced DNA breaks in them. These results suggest that ganglioside GT1b may play an important role in embryo survival or development. These authors contributed equally to this work.     

顺铂与多西紫杉醇同期放化治疗ⅡB～ⅣA期宫颈癌30例初步疗效分析

目的探讨ⅡB～ⅣA期宫颈癌低毒高效的放化联合治疗方式。方法 30例患者随机分为每周顺铂同期放化疗组(18例)和多西紫杉醇同期放化疗组(12例)。顺铂同期放化疗组化疗用药顺铂30mg/(m2?周),每周放疗的第1天同步静脉滴注,连续6周;多西紫杉醇同期放化疗组化疗用药多西紫杉醇25mg/(m2?周),每周放疗的第1天同步静脉滴注,多西紫杉醇常规抗过敏预处理,连续6周。结果两组患者总有效率91%vs83%,临床获益率91%vs89%,差异无统计学意义(P>0.05);两组随访12个月无进展生存率(PFS)比较83%vs78%,总生存率(OS)100%vs94%,差异无统计学意义(P>0.05);但多西紫杉醇同期放化组较顺铂同期放化组治疗无论在血液系统毒副反应和非血液系统毒副反应方面都明显降低(P<0.05)。结论多西紫杉醇同期放化疗可取得不亚于顺铂同期放化治疗的疗效,但多西紫杉醇方式患者的毒副反应明显降低。     

不同干预方式对Ⅱ-ⅢA肝癌患者的疗效分析

目的:通过对Ⅱ-ⅢA肝癌患者进行不同干预方式,为临床手术为主的综合治疗提供数据支持.方法:从2004年6月到2008年6月我院手术65例Ⅱ-ⅢA肝癌患者,分为单纯手术组、手术+ IDDS组和手术+TACE组,比较三组的术后生存时间及1年、2年无瘤生存率.结果:单纯手术组1年、2年无瘤生存率为(20％、4％)、手术+TA...