基因芯片检测apoE基因敲除小鼠动脉粥样硬化相关基因的表达节律

目的利用基因芯片筛选apoE-/-动脉粥样硬化小鼠心脏与主动脉内膜中可能受到生物钟调控的动脉粥样硬化基因,并研究其表达情况。方法采用apoE-/-小鼠建立动脉粥样硬化模型,以同品系C57BL/6J小鼠作为对照;使用动脉粥样硬化基因芯片检测在ZT0与ZT12处死的两种小鼠心脏与主动脉内膜中113个动脉粥样硬化相关基因的表达情况;应用Real-time PCR检测在心脏与主动脉内膜中表达均发生改变的ACE与MMP3的昼夜表达节律。结果饲以高脂膳食（含0.15%的胆固醇和21%的脂肪）4周的apoE-/-小鼠主动脉粥样斑块形成;apoE-/-动脉粥样硬化小鼠血清胆固醇与低密度脂蛋白明显高于对照组C57BL/6J小鼠,高密度脂蛋白则明显低于对照组;基因芯片结果显示apoE-/-动脉粥样硬化小鼠与C57BL/6J小鼠心脏与主动脉内膜动脉粥样硬化相关基因表达有较大差异,apoE-/-小鼠心脏与主动脉内膜分别有6个及10个基因在两个时间点表达均下调,此外,心脏与主动脉内膜中分别有15及12个原本在C57BL/6J小鼠表达随时间改变的基因在apoE-/-小鼠中不再随时间改变;Real-time PCR结果显示ACE与MMP3在对照组C57BL/6J小鼠心脏中具有昼夜节律,但在apoE-/-动脉粥样硬化小鼠中,这种表达节律消失,且表达水平降低。结论动脉粥样硬化相关基因表达节律发生改变,这可能在动脉粥样硬化的病理过程中发挥了重要作用,对其机制的研究对我们更好地认识这种心血管疾病将具有重要意义。     

MMP-9在ApoE基因敲除小鼠主动脉粥样硬化斑块的表达及高脂饮食影响

目的研究基质金属蛋白酶9(MMP-9)在载脂蛋白E(apolipoprotein E,ApoE)基因敲除C57BL/6J小鼠[ApoE(-/-)]主动脉粥样硬化斑块中的表达及高脂饮食对其影响,分析其与动脉粥样硬化不稳定斑块的关系。方法16只30周龄ApE(-/-)小鼠,随机分成高脂饮食组[Ch-ApoE(-/-)]和普通饮食组[ApoE(-/-)],8只正常C57BL/6J小鼠为对照组予高脂饮食,喂养4个月后分离主动脉。HE、Masson三色法染色观察小鼠主动脉粥样斑块,免疫组织化学分析斑块内MMP-9及巨噬细胞的表达。结果两组ApoE(-/-)均有明显的动脉粥样硬化,为不稳定斑块,斑块内巨噬细胞表达过量,且MMP-9表达增强。Ch-ApoE(-/-)组动脉硬化及MMP-9表达强于ApoE(-/-)组,两者有统计学意义。结论动脉粥样硬化不稳定斑块与MMP-9的表达密切相关,高脂饮食可加重不稳定斑块。     

高脂饮食对小鼠血脂的影响

目的探讨高脂饮食对C57BL/6J小鼠血脂影响。方法将20只C57BL/₆J小鼠随机分为普食组和高脂饮食组,普食组予100%基础饲料,高脂饮食组予肥甘饲料。各组自由进食,各10只。8周后,眼球取血处死检测指标。结果高脂饮食能够显著提高C57BL/6J小鼠血清中三酰甘油、低密度脂蛋白胆固醇、总胆固醇含量。结论高脂饮食对C57BL/6J小鼠血脂有显著影响。     

载脂蛋白E基因缺陷(C57BL/6J-ApoE)小鼠血脂及病理组织学观察

目的观察我部饲养的不同年龄、不同性别的载脂蛋白E基因缺陷小鼠的血脂及病理组织学状况。方法选取2月龄和6月龄C57BL／6J-apoE小鼠，以C57BL／6J小鼠为对照组，测定血清中甘油三酯、总胆固醇、高窑度脂蛋白、低密度脂蛋白和载脂蛋白B的含量；小鼠全心脏液氮骤冷，冰冻切片，油红O染色，观察动脉粥样硬化斑块的形成。结果C57BL／6J-apoE小鼠血清中总胆固醇和低密度脂蛋白的含量显著高于同龄同性别C57BL／6J小鼠，高密度脂蛋白的含量显著低于同龄同性别C57BL／6J小鼠；不同性别、年龄的C57BIJ6J-ApoE小鼠血脂变化差异显著；ApoE小鼠血清中载脂蛋白B水平显著高于同龄同性别C57BL／6J小鼠，且随年龄增长显著升高。6月龄却oE小鼠主动脉切面可见脂质斑块。结论该模型小鼠较C57BL／6J小鼠血清中总胆固醇和低密度脂蛋白含量明显升高，高密度脂蛋白含量明显降低；血脂变化与年龄性别有关。6月龄时已形成脂质斑块，是研究动脉粥样硬化等心血管疾病较佳的动物模型。     

葡萄籽提取物抗动脉粥样硬化形成的实验研究

目的：探讨葡萄籽提取物对C57BL／6J小鼠动脉粥样硬化形成的影响。方法：将48只C57BL／6J小鼠，随机分为正常对照组（饲普通饲料）、高胆模型组（饲高脂饲料：含2％胆固醇、0．4％胆酸盐、10％猪油）、葡萄籽提取物低，高剂量组（在饲高脂饲料的同时，分别添加葡萄籽提取物0.2,0.6mg/g体重）。实验至第21周末，眼球放血处死小鼠，检测血清甘油三酯（TG）、胆固醇（Chol)、氧化型低密度脂蛋白（OX－LDL）和红细胞丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）活性，同时取主动脉作病理形态学观察。结果：与高脂模型组比较，葡萄籽提取物组小鼠血清TG、Chol、OX－LDL、MDA含量明显降低，而红细胞SOD活性明显提高（P＜0．01）。同时葡萄籽提取物组小鼠主动脉壁厚度和泡沫细胞数量明显较高脂模型组减轻，小鼠主动脉损伤评分差异显著P＜0．01。结论：葡萄籽提取物具有减缓C57BL／6J小鼠动脉粥样硬化形成的作用，其作用可能与降低TG、Chol、OX－LDL水平，抗脂质过氧化作用有关。     

三七总皂苷对载脂蛋白E基因敲除小鼠动脉粥样硬化斑块的影响

目的研究三七总皂苷对高脂饮食(15.00%脂肪,0.25%胆固醇,84.75%基础饲料)诱导的载脂蛋白E基因敲除(ApoE-/-)小鼠主动脉组织动脉粥样硬化斑块的影响。方法以高脂饮食喂养ApoE-/-小鼠12周制作动脉粥样硬化模型,然后随机分为3组(模型组、三七总皂苷组和辛伐他汀组),并以野生型C57BL/6J小鼠作为对照组,ApoE-/-小鼠继续高脂喂养并灌胃给药8周后,取血及主动脉根部组织,采用ELISA检测血清中MMP-9和TIMP-1水平,油红O染色观察主动脉组织脂质沉积情况,HE染色测量血管壁内中膜厚度及斑块的面积。结果高脂诱导的模型组小鼠血清中MMP-9、TIMP-1显著升高,主动脉组织油红O阳性染色细胞显著增多,斑块脂质沉积明显,可见较明显的点状或斑片状斑块突向管腔,管腔狭窄明显,HE染色显示主动脉血管内可见明显粥样斑块沉积,管腔狭窄,斑块面积显著增大,主动脉血管内膜明显增厚。与模型组比较,三七总皂苷组和辛伐他汀组小鼠血清中MMP-9、TIMP-1均显著降低,但TIMP-1较对照组显著升高,主动脉组织中油红O阳性染色细胞明显减少,斑块脂质沉积减少,面积减小,凸向管腔程度明显降低,HE染色显示主动脉粥样斑块沉积明显减少,斑块面积明显缩小,血管壁内中膜厚度显著减少。结论三七总皂苷可以抑制动脉组织脂质沉积,调节MMP-9和TIMP-1的表达,进而起到稳定斑块的作用。     

丙丁酚对高脂高胆固醇饮食小鼠肝脏SR-BI表达的影响

目的观察丙丁酚对高脂高胆固醇饲养的载脂蛋白E（ApoE）基因敲除小鼠和C57BL/6J小鼠肝脏SR-BI和PPARγ表达的影响。方法以载脂蛋白E基因敲除小鼠和具有相同遗传背景的C57BL/6J小鼠为研究对象,饲以高脂高胆固醇饲料和/或丙丁酚。动物喂养12周,摘眼球取血,采用酶比色法及直接检测试剂盒分别测定小鼠血清甘油三酯、总胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇的含量;采用HE染色检测肝脏蓄脂情况;免疫组织化学法检测小鼠肝脏SR-BI及PPARγ蛋白质表达;RT-PCR检测小鼠肝脏SR-BI和PPARγ基因的表达。结果血脂检测显示,丙丁酚可以显著降低高脂高胆固醇饲喂的小鼠血清中的TG、TC和LDLC水平（P〈0.05）。HE染色显示,丙丁酚处理组小鼠的肝脏脂肪空泡少于未加丙丁酚组。免疫组织化学显示丙丁酚可以上调高脂高胆固醇饲养的小鼠肝脏SR-BI和PPARγ蛋白质的表达（P〈0.05）。RT-PCR检测也显示,丙丁酚可以明显增加高脂高胆固醇饲养的C57BL/6J小鼠及ApoE-/-小鼠肝脏SR-BI和PPARγmRNA的表达（P〈0.05）。结论丙丁酚可以减轻高脂高胆固醇饲养ApoE-/-小鼠的肝脏蓄脂,其机制可能是上调高脂高胆固醇饲养小鼠肝脏的SR-BI和PPARγ的表达。     

探究动脉粥样硬化疾病进程中三个关键DNA甲基转移酶的表达变化

目的:通过构建体内外动脉粥样硬化(AS)模型探究动脉粥样硬化疾病进程中三个关键DNA甲基转移酶的表达变化。方法:14只6周龄的Apo E基因敲除(ApoE~(-/-))的C57BL/6J雄性小鼠,14只6周龄的野生型C57BL/6J雄性小鼠分别随机分两组进行高脂喂养或正常饮食喂养,构建AS体内模型观察主动脉组织病理形态学改变,全自动生物分析仪测定血脂水平,实时荧光定量PCR(qPCR)检测小鼠肝脏组织DNA甲基转移酶(DNMT1,DNMT3A,DNMT3B)的表达变化;利用THP-1构建泡沫细胞模型,qPCR检测DNMTs表达变化。结果:ApoE~(-/-)高脂饮食和ApoE~(-/-)正常饮食小鼠主动脉弓和无名动脉均出现粥样硬化斑块;ApoE~(-/-)高脂饮食和正常饮食小鼠外周血总胆固醇TC显著高于野生型小鼠对应饮食组(P<0.01),同一组内(ApoE~(-/-)小鼠组或野生型小鼠组)高脂饮食小鼠TC显著高于正常饮食小鼠;同普通饮食野生型小鼠组相比,野生型小鼠高脂饮食组和ApoE~(-/-)高脂饮食组DNMT3A表达水平降低(P=0.025,P=0.018),DNMT3B表达水平降低(P=0.006,P=0.013);THP-1细胞泡沫化过程中,DNMT1表达水平显著降低(P=0.022)。结论:肝脏组织及单核细胞DNA甲基转移酶DNMTs的表达改变,可能在动脉粥样硬化疾病发生中发挥重要作用。     

化痰活血法对ApoE（-/-）小鼠主动脉胆固醇逆向转运相关蛋白表达的影响

目的：观察化痰活血法对ApoE基因敲除[ApoE（-/-）]小鼠主动脉胆固醇逆转运（RCT）主要相关蛋白小凹蛋白-1（caveolin-1）、清道夫受体BI（SR-BI）的影响。方法：4～6周龄ApoE（-/-）小鼠高脂饲料喂养16周后,分为化痰组、活血组、化痰活血组、普伐他汀组和模型对照组;另5周龄正常C57BL/6J家系小鼠10只,高脂饲料喂养16周,设为正常对照组。化痰组灌服小陷胸汤加枳壳水提液2.5 mL/100 g体质量,活血组灌服芎芍胶囊0.05 g/100 g体质量,化痰活血组灌服小陷胸汤加枳壳水提液2.5 mL/100 g体质量＋芎芍胶囊0.05 g/100 g体质量,普伐他汀组灌服普伐他汀0.3 mg/100 g体质量;模型对照组及正常对照组均灌服生理盐水1 mL/100 g体质量,连续给药16周。取主动脉常规石蜡切片光镜下观察,测量动脉面积及斑块面积;免疫组化观察caveolin-1、SR-BI表达。结果：在高脂刺激下,ApoE（-/-）小鼠主动脉caveolin-1及SR-BI表达均有所增加（P〈0.01）;普伐他汀组、化痰组、活血组及化痰活血组均可显著提高ApoE（-/-）小鼠主动脉caveolin-1及SR-BI的表达,组间比较显示化痰活血组caveolin-1及SR-BI表达显著高于单纯化痰组和活血组（P〈0.05,P〈0.01）。活血、化痰以及活血化痰三种治法均可显著减缓ApoE（-/-）小鼠主动脉粥样硬化病变程度,效果与普伐他汀相当。结论：活血、化痰或活血化痰法均可提高caveolin-1和SR-BI的表达,促进RCT过程,减少ApoE（-/-）小鼠主动脉粥样硬化斑块形成,其中活血化痰组在促进胆固醇逆向转运方面优于单纯活血组或化痰组。     

芍药苷对ApoE^-/-小鼠血脂及主动脉斑块的影响

[目的]观察芍药苷对ApoE^-/-小鼠血脂及主动脉斑块形成的影响。[方法]6周龄ApoE^-/-雄性小鼠经普通饲料饲养4周,髙脂饲料饲养12周后,随机分为ApoE^-/-模型组及芍药苷60 mg/kg、30 mg/kg剂量组,相同遗传背景的同龄正常C57BL/6J小鼠作为空白对照组。药物干预12周后,检测血脂的变化,并测量主动脉弓部、胸段、腹段斑块面积。[结果]ApoE^-/-模型组甘油三酯（TG）、总胆固醇（TC）和低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）显著高于C57BL/6J组（P〈0.01）,芍药苷60 mg/kg、30 mg/kg组的血脂水平显著低于ApoE^-/-模型组（P〈0.05,P〈0.01）,并且不同程度减小主动脉各段斑块的面积。[结论]芍药苷具有降脂和抑制主动脉斑块形成的作用,表明芍药苷具有抗动脉粥样硬化作用。     

麝香保心丸对小鼠动脉粥样硬化的作用及机制研究

目的探究麝香保心丸在载脂蛋白E(ApoE)敲除小鼠中的抗动脉粥样硬化作用及其作用机制。方法2019年9月—2020年8月于武汉科技大学实验动物中心进行实验。ApoE基因敲除雄性小鼠60只,按照随机数字表法分为2组,各30只。干预组小鼠予麝香保心丸(25 mg/kg)研沫+生理盐水灌胃,对照组予生理盐水(与干预组等体积)灌胃。2组小鼠均高脂饲养20周后处死,取主动脉树及主动脉窦染色,比较2组小鼠主动脉树及主动脉窦部斑块面积,取血液检测血清三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平,免疫荧光法及PCR法检测小鼠主动脉组织白介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达水平,PCR及Western-blot法检测小鼠主动脉组织肝细胞X受体-α(LXRα)、LXRβ、ATP结合盒转运蛋白A1(ABCA1)、ABCG1表达水平。结果干预组小鼠主动脉树及主动脉窦部斑块面积均低于对照组(t/P=3.021/0.019、3.238/0.001);血清TG、TC、LDL-C水平均低于对照组(t=5.074、6.327、4.492,P均<0.001),而HDL-C水平高于对照组(t/P=3.138/0.001)。干预组小鼠主动脉组织IL-6及TNF-αmRNA水平明显低于对照组(t/P=3.027/0.017、2.478/0.019),主动脉组织LXRα、LXRβ、ABCA1、ABCG1 mRNA均高于对照组(t=5.276、6.137、4.565、5.136,P均<0.01)。结论麝香保心丸通过抑制炎性反应和促进胆固醇流出,可达到抗动脉粥样硬化的目的。     

AdipoR1在ApoE基因敲除小鼠粥样斑块中的表达及其变化

目的 探讨脂联素(adiponectin)1型受体(AdipoR1)在载脂蛋白E(ApoE)基因敲除小鼠动脉粥样硬化形成过程中的变化.方法 取野生型C57BL/6J小鼠作为对照组,ApoE基因敲除小鼠分为10周龄、20周龄和30周龄组,观察不同组别小鼠血清甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白(LDL)、高密度脂蛋白(HDL)及脂联素的含量及主动脉斑块面积的变化.免疫组织化学染色法对AdipoR1进行半定量及定位分析.结果 ApoE基因敲除小鼠的血清TG、TC、LDL水平与对照小鼠比较显著升高,并随小鼠周龄增加而升高;斑块面积也随小鼠周龄增加而增大.ApoE基因敲除小鼠血浆脂联素水平低于对照小鼠,免疫组织化学染色法显示AdipoRl在ApoE基因敲除小鼠血管内膜表达阳性减弱,其程度随周龄增加有减少趋势.结论 ApoE基因敲除小鼠动脉粥样硬化的形成不仅与低脂联素血症相关,而且与主动脉血管组织中AdipoR1型脂联素受体表达下调也相关.     

枸骨叶水提物对高脂小鼠胆固醇合成代谢的影响

目的  探讨枸骨叶水提物对高脂小鼠血清胆固醇水平及合成代谢信号通路的影响机制。方法  实验小鼠随机分5组,其中3组用高、中、低剂量枸骨叶水提物灌胃30 d后,测其血清总胆固醇（TC）、三酰甘油 （TG）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-c）和低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）含量,并与辛伐他汀组进行比较;采用酶联免疫吸附测定（ＥLISA）肝脏细胞中3-羟基-3-甲戊二酸单酰辅酶A还原酶（HMG-CoA）;采用蛋白质印迹法（Western blot）检测磷酸化表皮生长因子受体（p-EGFR）的表达。结果  枸骨叶高、中、低剂量组有降低TC的作用（P <0.01）,与辛伐他丁组降低TC作用无差异;此外枸骨叶组均可降低HMG-CoA水平,降低肝细胞中p-EGFR的表达。结论  枸骨叶水提物对高脂饮食小鼠在清除TC方面发挥重要作用,它降低肝细胞中p-EGFR的表达,抑制HMG-CoA活性,进而降低高脂饮食小鼠体内TC水平而发挥降血脂作用。

     

高脂血症小鼠心脏和肺组织中eNOS及HO-1的表达

 目的 观察高脂饲料喂养的小鼠心脏和肺组织中内皮型一氧化氮合酶（endothelial nitric-oxide synthase, eNOS）及血红素氧合酶-1（heme oxygenase-1, HO-1）的含量变化，探讨高脂血症对eNOS和HO-1表达的影响。方法 高脂饮食组（n=8）和普通饮食组（n=8）C57BL/6小鼠分别经高脂饲料和普通饲料喂养18周后，测血清总胆固醇（total cholesterol, TC）、甘油三酯（triglyceride, TG）、高密度脂蛋白（high density lipoprotein, HDL）和低密度脂蛋白（low density lipoprotein, LDL）含量，采用Real-Time PCR检测心脏和肺组织中eNOS及HO-1的mRNA水平，以免疫组化方法检测其蛋白表达。结果 高脂饮食组TC、TG和LDL明显高于普通饮食组，HDL则低于普通饮食组；高脂饮食组心脏和肺组织中eNOS的mRNA和蛋白水平低于普通饮食组，HO-1的mRNA和蛋白水平高于普通饮食组。结论 高脂饲料喂养能使小鼠形成高脂血症，并引起心脏和肺组织中eNOS的表达降低，同时HO-1的表达升高。     

瑞舒伐他汀对载脂蛋白E基因敲除小鼠动脉粥样硬化的治疗作用及其机制

目的: 探讨瑞舒伐他汀对载脂蛋白E基因敲除(ApoE^-/-)小鼠动脉粥样硬化模型血脂水平、动脉粥样硬化斑块及斑块内细胞凋亡的影响,阐明瑞舒伐他汀抑制动脉粥样斑块进展及斑块内细胞凋亡的机制。方法: 选取健康6周龄雄性ApoE^-/-小鼠30只,随机分为高脂饮食组、高脂+他汀组和普通饮食对照组,每组10只。前2组小鼠给予高脂饮食,普通饮食对照组小鼠给予普通饲料,喂养4周后,3组小鼠分别给予0.9%生理盐水、瑞舒伐他汀(10mg·kg^-1·d^-1)和0.9%生理盐水灌胃8周,ELISA法检测各组小鼠血清血脂水平,HE染色观察小鼠动脉粥样硬化斑块大小,TUNEL法检测斑块内细胞凋亡,免疫组织化学染色法检测凋亡相关基因Bax蛋白表达。结果: 高脂+他汀组小鼠血清总胆固醇(TC)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平明显低于高脂饮食组(P<0.05或P<0.01),高脂+他汀组高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平明显高于高脂饮食组(P<0.01)。高脂饮食组小鼠主动脉粥样斑块呈巨块型,斑块内可见大量泡沫细胞、胆固醇结晶、坏死细胞及炎性细胞;高脂+他汀组小鼠主动脉粥样斑块较小,泡沫细胞、坏死细胞和炎性细胞均较少;高脂+他汀组小鼠主动脉粥样斑块面积明显小于高脂饮食组(P<0.01);高脂+他汀组小鼠主动脉粥样斑块内细胞凋亡指数明显低于高脂饮食组(P<0.01)。与高脂饮食组比较,高脂+他汀组小鼠Bax蛋白表达明显降低。结论: 瑞舒伐他汀可以抑制动脉粥样斑块进展,抑制斑块内细胞凋亡,其作用机制可能与线粒体途径有关。     

阿托伐他汀影响C57BL/6J小鼠主动脉粥样硬化的机制

目的:探讨阿托伐他汀对C57BL/6J小鼠动脉粥样硬化的影响机制。方法:将24只雄性C57BL/6J小鼠随机分为对照组、模型组和药物干预组。12周后酶法和免疫比浊法检测血清甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)和apoA-I;HE染色观察主动脉病理形态学改变;高效液相色谱法检测动脉壁胆固醇含量;PepTag@Assay法检测蛋白激酶C活性变化;Westernblot检测动脉壁CD36蛋白表达。结果:相较于模型组,阿托伐他汀可以显著下调血清总胆固醇和LDL胆固醇水平,上调血清apoA-I水平,抑制胆固醇在血管壁的蓄积,降低内膜/中膜厚度比,下调动脉壁蛋白激酶C活性和CD36蛋白表达,有效地抑制了动脉粥样硬化的发展。结论:阿托伐他汀可能是通过抑制胆固醇合成、下调蛋白激酶C活性和CD36蛋白表达而发挥降脂、消斑、改善动脉壁功能的作用。     

三七总皂甙对动脉粥样硬化斑块P-选择素和VEGF的影响

目的:主要通过建立高脂饮食的家兔AS模型,观察PNS对AS斑块形成及在应用后对其相关因素的影响。为PNS对斑块稳定性的影响的基础研究提供新的方法。方法:雄性健康新西兰大白兔40只,进行随机分成4组:(1)正常组10只。(2)模型组10只,(3)干预组Ⅰ10只。(4)干预组Ⅱ10只。确定造模成功后,对各组行病理形态学观察。HE染色,准备镜下观察病理变化,观察各组别以及不同部位的动脉管壁的动脉粥样硬化斑块的形态及大小和最大纤维帽厚度。光镜下观察各组的血管内膜P-选择素和VEGF表达情况。结果:血脂检测结果,与模型组比较,干预组和干预组Ⅱ血清TC、TG、LDL-C明显低于模型组(P<0.05)。病理形态学分析结果,干预组较模型组的斑块较明显减少,斑块面积减少了不少,呈现散在的趋势。干预组斑块最大纤维帽厚度分别增加。HE染色结果,干预组见动脉内膜轻度增生,动脉粥样硬化斑块厚度和面积均小于模型组,泡沫数量减少,可见少量形态不规则的平滑肌细胞。斑块内p选择素和VEGF的表达情况,干预组有部分P-选择素表达,呈现弱表达,明显呈减少态势。结论:PNS干预组可显著降低血清总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白胆固醇的水平,具有明显的有降血脂的能力。PNS干预组的斑块其内膜厚度、斑块面积、斑块面积/主动脉内膜总面积与对照组比较有显著下降,说明PNS在对已形成的斑块也有疗效。三七总皂甙能减少动脉粥样硬化斑块的P选择素和VEGF的表达。     

Effect of Huxin Formula (护心方) on reverse cholesterol transport in ApoE-gene knockout mice

Objective:To observe the effect of Huxin Formula(护心方,HXF)on expressions of the chief reverse cholesterol transport(RCT)associated genes,caveolin-1 and scavenger receptor-BⅠ(SR-BⅠ)in ApoE-gene knockout[ApoE(-/-)]mice.Methods:Thirty ApoE(-/-)mice of 4-6 weeks old were randomly divided into three groups(A-C).After being fed with high-fat diet for 16 weeks,they were treated with HXF(1 mL/100 g),pravachol (0.3 mg/100 g),and saline in equal volume respectively for 16 weeks successively;in addition,a blank group was set up with 10 C57BL76J mice of 6-week old received 16-week high-fat feeding and saline treatment.Animals were sacrificed at the termination of the experiment,their paraffin sections of aortic tissue were used to measure the size of plaque,expressions of cavolin-1 and SR-BⅠwere detected by immunological histochemical method.Results:As compared with the blank group,levels of caveolin-1 and SR-BⅠwere increased in Groups A and B(P<0.01);but the increase in Group A was more significant than that in Group B(P<0.05).The plaque/aorta area ratio decreased significantly in Groups A and B,but showed insignificant difference between the two groups.Conclusion:HXF could obviously increase the expressions of RCT associated genes,caveolin-1 and SR-BⅠ,promote the RCT process, so as to reduce the formation of aorta atherosclerotic plaque in ApoE(-/-)mice.     

RNAi介导的SOCS3基因沉默对高脂肥胖大鼠瘦素抵抗的影响

目的研究RNA干扰(RNAi)介导的细胞因子信号转导抑制因子3(SOCS3)基因沉默对高脂肥胖大鼠瘦素抵抗的影响。方法选用5周的SD大鼠60只,随机分为3组,实验组:下丘脑注射SOCS3基因RNA干扰慢病毒(LV-shSOCS3),高脂饲料喂养;阴性组:下丘脑注射阴性序列慢病毒(LV-negtive),高脂饲料喂养;对照组:下丘脑注射生理盐水,高脂饲料喂养。饲养8周末,检测血总胆固醇、三酰甘油、高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇,放射免疫法检测血清瘦素,利用荧光实时定量PCR(real-time PCR)技术检测各组下丘脑内SOCS3和瘦素受体(OB-Rb)的mRNA表达水平。结果实验组体重、瘦素、三酰甘油、总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇低于阴性组和对照组(P<0.05)。实验组下丘脑的SOCS3mRNA水平低于阴性组和对照组(P<0.05)。实验组下丘脑的OB-RbmRNA水平高于阴性组和对照组(P<0.05)。而阴性组和对照组比较无差异(P>0.05)。结论下调SOCS3基因可以减轻高脂肥胖大鼠瘦素抵抗,对肥胖症可能有预防和治疗作用。     

小檗碱对兔动脉粥样硬化、易损斑块及血脂的影响

目的观察小檗碱对兔动脉粥样硬化、易损斑块及血脂的干预作用。方法将40只雄性新西兰大白兔随机分为正常组、动脉硬化组、小檗碱和辛伐他汀组,每组10只。正常组以普通饲料喂养,其余各组高脂喂养并行主动脉内膜损伤术,小檗碱组和辛伐他汀组分别口服小檗碱和辛伐他汀。处死动物前予药物激发,行腹主动脉病理学检查,并检测血清总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白（LDL）和高密度脂蛋白（HDL）水平。结果动脉硬化组中有5只发生斑块破裂和血栓形成,其余3组无斑块破裂和血栓形成。小檗碱组、辛伐他汀组的主动脉斑块评分、内中膜和弹力纤维的破坏程度较低,内中膜比增加较少。小檗碱组TC、TG、LDL水平较动脉硬化组低（P〈0.05）。结论小檗碱具有降低血TC、TG、LDL水平,改善动脉粥样硬化和稳定斑块的作用。