miR-190b通过PTEN/PI3K/AKT信号通路对肾母细胞瘤细胞SK-NEP-1增殖、迁移和凋亡的影响

目的:探讨miR-190b通过PTEN/PI3K/AKT信号通路对肾母细胞瘤细胞SK-NEP-1增殖、迁移和凋亡的影响.方法:采用qRT-PCR法检测miR-190b在肾母细胞瘤和相应的癌旁正常组织(n=20)中的表达,免疫组化法检测组织中PTEN、PI3K、p-AKT蛋白的表达.TargetScan预测miR-190...     

NOTCH1调控 PTEN/PI3K/AKT信号通路促进肾透明细胞癌发病

研究NOTCH1在肾透明细胞癌中的表达及其对PTEN/PI3K/AKT信号通路的调控。 方法 收集36对肾透明细胞癌及其邻近非肿瘤肾组织,Western blotting和qrt-PCR检测NOTCH1、HES1、PTEN、AKT(p-S473)蛋白及其mRNA的表达,分析NOTCH1表达与肿瘤临床特征之间的关系。在肾透明细胞癌细胞系786-O及人肾小管上皮细胞系HKC中沉默或过表达NOTCH1,Western blotting和qrt-PCR检测HES1、PTEN、AKT(p-S473)蛋白及其mRNA变化,MTS法检测细胞增殖,流式细胞术检测其对细胞周期及凋亡的影响。 结果 肾透明细胞癌组织中NOTCH1的表达明显高于癌旁组织,其表达与患者年龄、肿瘤大小、核分级及肿瘤TNM分期无明显关系（P>0.05）。在两株细胞中,沉默NOTCH1均能抑制细胞生长,引起HES1与AKT(p-S473)蛋白下降,PTEN的蛋白及mRNA水平明显升高。过表达NOTCH1则促进细胞生长,HES1、AKT(p-S473)及PTEN的变化方向同转染siRNA相反。沉默或过表达NOTCH1均对细胞的凋亡无明显影响。 结论 在肾透明细胞癌中,过度活化的NOTCH1信号通路起促癌作用,其机制可能通过调节PTEN/PI3K/AKT信号通路参与发病过程,这为肾透明细胞癌的治疗提供了新思路。     

野黄芩素经Akt/FoxO1信号通路抑制视网膜神经节细胞凋亡

目的探讨野黄芩素经Akt/叉头状转录因子O1(FoxO1)信号通路抑制视网膜神经节细胞(RGC)凋亡的机制。方法构建视网膜神经RGC-5细胞氧化应激损伤模型,野黄芩素组分别给与25和100 μmol/L野黄芩素,阳性对照组给予25 μmol/L拉坦前列素,设模型组和阴性对照组。检测各组细胞增殖和凋亡情况,以及RGC-5细胞活性氧(ROS)、超氧化物歧化酶(SOD)及凋亡相关蛋白的水平。结果与阴性对照组比较,其他组细胞增殖率、SOD、p-Akt/Akt、p-FoxO1/FoxO1和B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)水平降低,细胞凋亡率、ROS、Bcl-2相关X蛋白(Bax)和Caspase-3水平增加(P＜0.05)。与模型组比较,野黄芩素组和阳性对照组细胞增殖率、SOD、p-Akt/Akt、p-FoxO1/FoxO1和Bcl-2水平增加,细胞凋亡率、ROS、Bax和Caspase-3水平降低;且随野黄芩素剂量增加差异更为显著,但阳性对照组作用最明显(P＜0.05)。结论野黄芩素可以抑制RGC-5细胞凋亡,其机制可能与激活Akt/FoxO1信号通路有关。     

化浊颗粒对2型糖尿病大鼠肝组织微小RNA-21/PTEN/PI3K/AKT信号通路的调控作用

目的 观察化浊颗粒对2型糖尿病(Type 2 diabetes mellitus, T2DM)大鼠肝组织微小RNA-21(microRNA-21,miR-21)/磷酸酶及张力蛋白同源基因(PTEN)/PI3K/AKT信号通路的调控作用。方法 将40只SPF级雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组、模型组、中药组、罗格列酮组。除正常对照组外,其余组别采用高糖、高脂饲料喂养联合小剂量链脲佐菌素(STZ)腹腔注射建立T2DM大鼠模型。造模后中药组及罗格列酮组分别以化浊颗粒和罗格列酮灌胃,模型组与正常对照组给予生理盐水灌胃。连续灌胃10周后处死各组大鼠,Q-PCR检测大鼠肝组织中miR-21、PTEN、PI3K、AKT mRNA水平,Western blot检测大鼠肝组织PTEN、PI3K、AKT、p-AKT蛋白表达。结果 与正常对照组比较,模型组PTEN蛋白及mRNA表达下调,miR-21、PI3K、AKT mRNA表达水平升高,PI3K、AKT、p-AKT蛋白表达明显上调,差异有统计学意义(P<0.01);与模型组比较,中药组及罗格列酮组大鼠肝组织中PTEN蛋白及mRNA表达上调,m...     

姜黄素调控LncRNA MEG3/miR-21/PTEN通路促HPV阳性宫颈癌细胞凋亡

目的：探究姜黄素杀伤HPV阳性宫颈癌细胞的作用机制。方法：采用细胞活性检测实验和细胞凋亡检测实验分析姜黄素对HPV阳性宫颈癌细胞活性以及细胞凋亡的影响;采用实时定量PCR实验和蛋白质印迹（Western blot）法检测姜黄素促进HPV阳性宫颈癌细胞凋亡过程中关键信号通路因子LncRNA MEG3、miR-21、PTEN和活化的caspase3的变化水平。结果：姜黄素显著促进了HPV阳性宫颈癌细胞凋亡,升高了LncRNA MEG3、PTEN和活化的caspase3的表达水平,下调了miR-21的表达（P＜0.05）;利用siRNA敲低LncRNA MEG3的表达,能够逆转姜黄素对miR-21、PTEN和caspase3的调控（P＜0.05）。结论：姜黄素可能通过上调LncRNA MEG3而降低miR-21的表达,从而上调PTEN的表达,最终促进HPV阳性宫颈癌细胞的凋亡。     

水仙环素通过调控PLK1/AKT信号通路诱导三阴性乳腺癌细胞细胞周期阻滞和凋亡

摘 要：目的 研究水仙环素（Narciclasine，Nas）对人三阴性乳腺癌（Triple negative breast cancer，TNBC）细胞周期和凋亡的抑制作用及分子机制。方法 采用细胞增殖-毒性检测试剂盒（Cell Counting Kit-8，CCK-8）、克隆形成、Transwell、流式细胞术等实验分析Nas对TNBC细胞株MDA-MB-231细胞增殖和侵袭能力的抑制作用，及对细胞周期和凋亡的诱导作用；利用免疫印迹（Western blot，WB）实验分析Nas对MDA-MB-231细胞株cle-Caspase-3、PARP、cle-PARP、PLK1、PI3K、p-PI3K、AKT、p-AKT、CDK1、Cyclin B、Cyclin A、p-21、p-27、p-62、LC3、γ-H2AX等蛋白质的影响。结果 不同浓度的Nas（浓度分别为0.5 μmol/L、1.0 μmol/L、2.0 μmol/L）能抑制MDA-MB-231细胞株的克隆形成（48 h抑制率分别为15.99%、24.76%和54.17%）、侵袭能力（48h抑制率分别为0.68%、23.20%和45.27%），可将细胞周期阻滞于G2期（48 h阻滞率分别为75.50%、140.56%和316.06%），可对细胞凋亡起到诱导作用（48 h凋亡诱导率分别为105.39%、199.73%和375.74%；72 h凋亡诱导率分别为104.45%、244.96%和709.60%）。分子机制实验显示Nas可以显著促进cle-Caspase-3、cle-PARP、γ-H2AX、p-21及p-27等蛋白质的表达，显著抑制PLK1、p-PI3K、p-AKT、CDK1、Cyclin B等蛋白质的表达水平，而对PARP、p-62、LC3-II/I、PI3K、Cyclin A等蛋白质的表达水平影响不明显。结 论 Nas能抑制MDA-MB-231细胞株的克隆形成、侵袭能力，对凋亡起到诱导作用，并将细胞周期阻滞于G2期，该机制可能通过调节PLK1/AKT信号通路来实现。     

PI3K/AKT/mTOR信号传导通路在胃癌中的研究进展

胃癌的形成是一个十分复杂的过程,不但涉及到基因的突变,还涉及到细胞内信号传导通路的改变.PI3K/AKT/mTOR通路是细胞内重要的信号传导通路之一,该通路活化可以抑制多种刺激诱发的胃癌细胞凋亡,促进细胞周期进展,促进血管形成,参与胃癌的侵袭和转移[1-2].现就PI3K/AKT/mTOR通路的结构特点及在胃癌发生、发展中作用的研究进展进行综述.     

miR-16-5p靶向PTEN/PI3K/AKT信号通路对非小细胞肺癌细胞活性和迁移能力的影响

目的 探讨AS-miR-16-5p对非小细胞肺癌(NSCLC)A549细胞活性和迁移能力的影响及潜在的作用机制.方法 将NSCLC A549细胞分为3组,分别为Black组、miR-NC组和AS-miR-16-5p组.miR-NC组和AS-miR-16-5p组分别转染阴性对照miRNA(miR-NC)及AS-miR-1...     

DIS3通过调控PI3K/AKT/mTOR信号通路促进人骨髓瘤细胞凋亡

目的 探究DIS3对人骨髓瘤细胞凋亡的影响及其作用机制.方法 选取人骨髓瘤细胞株NCI-H929、RPMI 8226和U266为研究对象,分别设计并构建DIS3基因过表达载体和DIS3-siRNA,3种细胞均随机分成5组:对照组、DIS3-siRNA阴性对照(negative control,NC)组、DIS3空载组、...     

PTEN/PI3K/AKT信号通路在胃癌中的研究进展

胃癌是全球最常见的消化道恶性肿瘤之一,多种信号途径在胃癌的侵袭和转移等机制中发挥着作用.最近的研究证据表明,PTEN/PI3K/AKT信号通路在胃癌发生发展过程中起到了至关重要的作用,并与细胞的增殖、凋亡、血管生成、侵袭与转移息息相关.本文就近年来PTEN/PI3K/AKT信号通路在胃癌中的发病机制中的研究进展作一综述.     

肉豆蔻木脂素通过PI3K/AKT信号通路诱导胃癌细胞凋亡的研究

目的 探讨肉豆蔻木脂素（myrislignan, MYR）对胃癌细胞凋亡的影响及与磷脂酰肌醇-3-激酶（phosphatidylinositol 3 kinase, PI3K）/蛋白激酶B(protein kinase B, AKT)信号通路的关系。方法 采用不同浓度的MYR（即0、25、50、100和200μmol/L）作用胃癌细胞（SGC-7901）48 h和72 h,CCK8法检测细胞活性。选择MYR(50、100和200μmol/L)作用胃癌细胞（SGC-7901）48 h,同时设置正常对照（Control）组和溶剂对照（0.1%DMSO）组,采用流式细胞仪检测凋亡率,蛋白质印迹法检测PI3K、AKT、Bcl2关联X蛋白（Bcl-2 associated X protein, BAX）、半胱天冬酶（cysteine-dependent aspartate-specifc protease, Caspase）-3和Caspase-9蛋白的表达水平。特异性PI3K激活剂（20μmol/mL）作用胃癌细胞（SGC-7901）48 h（分组为：Control组、0.1%DMSO组、MY...     

华蟾素对非小细胞肺癌细胞株A549细胞增殖及PTEN/AKT/mTOR信号通路表达的影响

目的观察华蟾素对肺癌细胞A549及PTEN/AKT/mTOR信号通路蛋白表达的影响。方法在培养肺癌细胞株NCI-A549中分别加入不同浓度的华蟾素,应用细胞计数试剂盒-8检测24、48、72 h后细胞增殖活力,Ki67及EdU检测72 h细胞增殖活力,免疫印迹法检测磷脂酰肌醇-3激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白以及磷酸化第10号染色体缺失的磷酸酶和张力蛋白的同源基因（phosphorylated-phosphatase and tensin homolog deleted on chromosome ten,p-PTEN）蛋白表达。结果0.2 μg/mL华蟾素作用于A549细胞株48 h后显示明显抑制增殖作用（P < 0.01）,0.8 μg/mL华蟾素处理12 h后均具有不同程度抑制增殖作用（P < 0.05~P < 0.01）。不同浓度华蟾素作用于细胞72 h后,p-PI3K、p-AKT、p-mTOR、p-S6、p-PTEN表达量均较对照组下降（P < 0.05~P < 0.01）,而PI3K、AKT、mTOR、S6及PTEN表达量与对照组差异无统计学意义（P>0.05）。结论华蟾素可能通过抑制PI3K/AKT/mTOR信号通路蛋白磷酸化,抑制肺癌细胞A549的增殖。     

lncRNA TTN-AS1靶向抑制miR-1271的表达对肺癌细胞增殖、侵袭和凋亡的影响及机制

目的：探讨lncRNA TTN-AS1调控miR-1271表达对肺癌细胞增殖、侵袭和凋亡的影响及机制。方法：在人肺癌A549细胞中转染TTN-AS1 siRNA或miR-1271 mimics,采用qRT-PCR检测TTN-AS1和miR-1271的表达,CCK-8实验检测细胞增殖,Transwell实验检测细胞侵袭,流式细胞术检测细胞凋亡,Western blot检测PI3K、p-AKT、PCNA、E-cadherin和cleaved caspase 3表达。共转染miR-1271 inhibitors和TTN-AS1siRNA,观察抑制miR-1271对抑制TTN-AS1诱导的A549细胞增殖、侵袭和凋亡的影响。双荧光素酶报告基因实验检测TTN-AS1和miR-1271及miR-1271和PDK1的靶向作用关系,Western blot分析过表达或抑制TTN-AS1/miR-1271对PDK1表达的影响。结果：抑制TTN-AS1及过表达miR-1271均可明显抑制A549细胞增殖和侵袭能力,促进细胞凋亡,下调PI3K、p-AKT和PCNA表达,上调E-cadherin和cleaved caspase 3表达（P ＜0.05）。抑制miR-1271可逆转抑制TTN-AS1对A549细胞增殖和侵袭能力的抑制作用以及对细胞凋亡的促进作用。TTNAS1和PDK1与miR-1271均存在靶向调控关系。结论：lncRNA TTN-AS1可通过靶向调节miR-1271/PDK1并抑制PI3K/AKT信号通路降低A549细胞增殖和侵袭能力,促进细胞凋亡。     

结核分枝杆菌对miR-21和TLR-4/NF-κB信号通路的影响研究

目的 研究结核分枝杆菌(Mtb)H37Rv及BCG感染RAW264.7和THP-1细胞后,对miR-21表达及Toll样受体(TLR)-4/核因子-κB(NF-κB)信号通路的影响.方法 体外培养RAW264.7和THP-1细胞及Mtb H37Rv、BCG;建立Mtb感染RAW264.7和THP-1细胞模型;RAW26...     

MiR-21通过PTEN/PI3K/AKT信号通路抑制胰腺癌细胞系生长侵袭能力的体外研究

目的 探讨MiR-21对胰腺癌细胞生长和侵袭的影响.方法 采用脂质体Lipofectamine 2 000将MiR-21 inhibitor和MiR-21 inhibitor阴性对照转染至胰腺癌细胞ASPC-1,qRT-PCR检测转染效果,细胞免疫荧光、Western blot检测转染后目的蛋白的表达,Transwell、划痕实验检测细胞迁移侵袭能力,MTT法检测细胞的增殖活性,流式细胞术检测细胞周期分布的改变.结果 成功构建稳定下调MiR-21的胰腺癌细胞亚系ASPC-1-MiR-21,荧光定量PCR结果显示MiR-21表达量明显下调,抑制MiR-21表达后ASPC细胞的侵袭和增殖能力均受到明显抑制;抑制MiR-21能明显增强PTEN蛋白和减低p-AKT蛋白表达水平,对AKT蛋白水平无明显影响.结论 抑制MiR-21表达可能通过调控PTEN/AKT通路抑制胰腺癌细胞AS-PC-1增殖和侵袭.     

芦荟大黄素调控Notch-1/Akt/NF-κB信号通路对胃癌SGC-7901细胞生物学行为的影响

目的:观察芦荟大黄素调控Notch-1/AKT/NF-κB信号通路对胃癌SGC-7901细胞增殖、侵袭、迁移和凋亡的影响。方法:实验分为对照组(正常培养SGC-7901细胞)、芦荟大黄素低剂量组(SGC-7901细胞+芦荟大黄素10 mg·L^-1)、芦荟大黄素中剂量组(SGC-7901细胞+芦荟大黄素30 mg·L^-1)及芦荟大黄素高剂量组(SGC-7901细胞+芦荟大黄素50 mg·L^-1)。噻唑蓝比色法检测各组细胞培养后的增殖抑制率;Transwell小室检测细胞侵袭能力;划痕实验检测细胞迁移能力;流式细胞仪检测细胞周期分布;Annexin V-APC/7-AAD双染法检测细胞凋亡情况;Western blot法检测Notch-1/AKT/NF-κB信号通路蛋白及凋亡蛋白Bax、Bcl-2表达。结果:与对照组比较,芦荟大黄素低剂量组、中剂量组、高剂量组细胞增殖抑制率升高(P<0.05),细胞穿膜个数和划痕闭合率明显降低(P<0.05),G0/G1期肿瘤细胞比例增加(P<0.05),细胞凋亡AI值升高(P<0.05),Notch-1、p-Akt、P65、Bcl-2表达及Bcl-2/Bax比值降低,Bax表达升高(P<0.05)。结论:芦荟大黄素可能通过阻滞SGC-7901细胞在G0/G1期,抑制其增殖能力,降低迁移和侵袭能力,并通过抑制Notch-1/AKT/NF-κB信号通路起到诱导细胞凋亡作用。     

吴茱萸碱调控PI3K/AKT信号通路抑制鼻咽癌细胞增殖和诱导凋亡

目的 研究吴茱萸碱对鼻咽癌5-8F细胞增殖、凋亡及PI3K/AKT信号通路的影响。方法 (1)将5-8F细胞分为溶剂对照组、不同浓度吴茱萸碱组(0.5、1.0、2.0、4.0μmol·L^-1)、顺铂组(cisplatin,4.0μg·mL^-1);(2)将5-8F细胞设为5组：溶剂对照组、SC792.5μmol·L^-1组、SC79+吴茱萸碱2.0μmol·L^-1组、吴茱萸碱2.0μmol·L^-1组、LY294002 50μmol·L^-1组。采用实时无标记细胞功能分析仪(real time cellular analysis technology,RTCA)监测细胞增殖的情况;Annexin V-FITC/PI双荧光染色法检测细胞凋亡率,Hoechest 33342染色法观察细胞凋亡形态;Western blot法检测磷酸肌醇3-激酶蛋白(phosphatidylinositol 3-kiases,PI3K)、磷酸化蛋白质激酶蛋白B(phosphorylate...     

PI3K-AKT 信号通路在胃癌中的作用机制及研究进展

胃癌的发生和发展是一个多步骤、多因素的复杂过程,主要涉及DNA 突变、遗传因素的改变、多种细胞信号传导的异常变化。磷脂酰肌醇3- 蛋白激酶（phosphatidylinositol 3-protein kinase,PI3K）/ 蛋白激酶B（protein kinase B,AKT）信号通路参与肿瘤细胞的恶性进程,该通路紊乱可引起多种疾病。近年来,由于对肿瘤分子基础的深入研究,发现该通路的激活与胃癌细胞的增殖、侵袭、转移、凋亡、血管生成紧密相关。目前,靶向该信号通路已经成为抗肿瘤研究的新趋势,该文就PI3K/AKT 信号通路与胃癌研究进展综述。