膜性肾病发病机制研究进展

<正>膜性肾病(membranous nephropathy,MN)是一种自身免疫性疾病,其发病主要是由于自身抗体识别肾小球足细胞靶抗原,在足突下和上皮下沉积电子致密物,激活补体形成膜攻击复合物从而引起足细胞损伤并引发蛋白尿和低蛋白血症等临床症状。按照其发病原因分为特发性MN(idiopathic MN,IMN)和继发性MN(secondary MN,SMN),其中IMN约占所有MN的70%。目前文献报道MN发病机制与     

1型血小板反应蛋白7A域(THSD7A)与膜性肾病

膜性肾性(MN)表现为器官特异性的自身免疫性疾病。1型血小板反应蛋白7A域(THSD7A)是继磷脂酶A2受体(PLA2R)之后发现的导致MN的又一个足细胞抗原。THSD7A及其抗体的发现使人们对MN有了新的认识。血清THSD7A抗体可与足细胞THSD7A抗原结合形成原位免疫复合物,导致足细胞损伤和蛋白尿的发生。初步研究结果显示,与PLA2R抗体类似,THSD7A抗体可用于指导MN的诊断、预后判断和病情监测。与PLA2R不同的是,THSD7A在人类和啮齿类动物的肾小球足细胞均高度表达,故可利用小鼠模型研究THSD7A相关性MN的发病机制。本文就THSD7A在MN中的研究进展作一综述。     

膜性肾病相关靶抗原及自身抗体的研究进展

膜性肾病(MN)是一类较常见的由免疫复合物介导的肾小球疾病,原位免疫复合物的沉积可能是其重要的发病机制之一.对MN相关抗原及相应自身抗体的识别鉴定及临床关联的研究是该领域研究的重要组成.迄今为止,以M型磷脂酶A2受体(PLA2R)和1型血小板反应蛋白7A域(THSD7A)为代表的一系列靶抗原被相继发现,这是数十年来连续...     

肾小球白介素-10基因表达的检测及其在狼疮性肾炎分子诊断中的应用

目的：探讨狼疮性肾炎(LN)患者肾活检组织切片中肾小球IL-10 mRNA表达与临床病理的联系，及其在LN分子诊断中的意义。方法：对20例病理证实的Ⅳ型LN患者，运用激光微分离系统分离其肾活检组织切片中的肾小球，提取总RNA，用荧光定量PCR检测IL-10 mRNA的表达。结果：12例患者的肾小球中检测到IL-10 mRNA表达。肾小球IL-10 CT比值与尿IL-10水平、血IgG水平和肾小球CD68平均计数呈显著正相关，与血C3水平呈显著负相关。结论：应用激光微分离技术精确获取肾小球检测基因表达，发现肾小球IL-l0 mRNA表达与Ⅳ型LN患者的免疫损伤表现及肾小球病理改变特点显著关联。肾小球原位IL-10 mRNA表达的检测为判断LN患者病情，指导治疗提供了新的组织学分子标志。     

膜性肾病的诊断：知其然，知其所以然

膜性肾病(membranous nephropathy,MN)是导致成人肾病综合征的一个常见病因.根据我们对解放军肾脏病研究所13 519例肾活检资料分析,MN占原发性肾小球肾炎的9.89%.MN是一个病理形态学诊断名词.其特征性的病理学改变是肾小球毛细血管袢卜皮侧可见大量免疫复合物沉积.很多疾病可以导致肾小球出现上述膜性病变(继发性MN),还有部分病闪尚不明确者被称为特发性MN.     

经免疫引起的肾小球、肾小管和间质性肾脏疾病

现在普遍认为,过去列为肾小球肾炎的肾小球疾病多数均有免疫机制介入,而肾脏其他一些疾病,从实验模型和人体疾病的观察,亦具有明确的免疫损害。推测或已确定由免疫引起的肾小球疾病这类疾病主要可分二型(表1)。免疫复合体肾小球肾炎免疫复合体肾小球肾炎是指在循环中形成的免疫复合体(抗原抗体复合物)在肾小球内沉积所致的疾病。多种抗原包括异体血清蛋白、病毒抗原和某些自身抗原均可诱发免疫复合体肾小球肾炎。引起循环免疫复合体定位于肾小球的因素不甚了解,一般认为似取决于复合体的物理特性,如大小和溶解度,以及肾小球的滤过机能。     

结缔组织病相关肺动脉高压抗内皮细胞抗体检测及其靶抗原研究

目的 检测抗内皮细胞抗体(AECA)在结缔组织病(CTD)相关肺动脉高压(PAH)患者中的阳性率,探讨其可能的致病机制.方法 试验组选取68例CTD相关PAH患者,对照组为12例特发性肺动脉高压患者、61例CTD无PAH的患者、20例慢性阻塞性肺疾病合并肺源性心脏病患者及20名健康人.提取EA.hy926内皮细胞株的膜蛋白质,免疫印迹法检测以上各组患者血清中AECA阳性率,采用X2检验确定特异性的条带.进而应用液相色谱-电喷雾离子阱质谱分析,分离和鉴定AECA特定的靶抗原.结果免疫印迹法检测结果显示,AECA-78 000条带的阳性率在CTD相关PAH患者79%(54/68)和CTD合并肾小球病变的患者71%(15/21),明显高于特发性PAH患者8%(1/12)、CTD无内脏受累患者50%(10/20)、CTD单纯合并肺间质纤维化患者15%(3/20)和健康对照组(P<0.05或P<0.01).经蛋白质组学方法 分离鉴定,AECA-78 000的靶抗原成分为膜突蛋白.结论 CTD不同靶器官受累的患者AECA78 000条带的阳性率不同,CTD合并PAH患者和CTD合并肾小球病变的患者可能存在有共同的靶抗原(78 000内皮细胞蛋白质),其成分为膜突蛋白.     

继发性膜性肾病的病因诊断

膜性肾病(membra-nous nephropathy,MN)是一个病理诊断名词,包括一组临床和病理表现相似的疾病。病变的主要特点是免疫复合物在肾小球基膜外侧上皮细胞下沉积,引起肾小球毛细血管基膜弥漫性增厚,可形成“钉突”,是成年人肾病综合征最常见的病因。MN病因可分为特发性(idiopathy     

并殖吸虫病感染血清识别的斯氏狸殖吸虫成虫抗原及其特性分析

目的 通过并殖吸虫病患者血清识别斯氏狸殖吸虫成虫抗原,研究特异性抗原的生物学特性,为特异性诊断抗原和疫苗的开发研究提供依据. 方法 成虫可溶性抗原经SDS-PAGE、2-DE、感染血清的免疫印迹识别特异性的蛋白,从识别的蛋白点中选取A、B、C 3个点做进一步分析,采用串联质谱进行蛋白肽段测序,结合免疫金标技术抗原定位,分析感染血清识别蛋白的特性. 结果 A点蛋白与6种并殖吸虫相关蛋白匹配,其中与卫氏并殖吸虫的一新型蛋白westerpain-1/10匹配分值最高,B点蛋白与5种并殖吸虫相关蛋白匹配,其中与卫氏并殖吸虫的半胱氨酸蚩白酶匹配值最高;C点蛋白无相关蛋白与之相匹配.免疫金标记技术显示感染血清识别的虫体抗原位于虫体表膜和肠腔及肠腔内容物. 结论 并殖吸虫病感染血清可识别经SDS-PAGE、2-DE分离的斯氏狸殖吸虫成虫虫体可溶性抗原.串联质谱分析以及免疫金标记检测显示其主要成分为虫体表膜与分泌排泄物.     

并殖吸虫病感染血清识别的斯氏狸殖吸虫成虫抗原及其特性分析

目的 通过并殖吸虫病患者血清识别斯氏狸殖吸虫成虫抗原,研究特异性抗原的生物学特性,为特异性诊断抗原和疫苗的开发研究提供依据. 方法 成虫可溶性抗原经SDS-PAGE、2-DE、感染血清的免疫印迹识别特异性的蛋白,从识别的蛋白点中选取A、B、C 3个点做进一步分析,采用串联质谱进行蛋白肽段测序,结合免疫金标技术抗原定位,分析感染血清识别蛋白的特性. 结果 A点蛋白与6种并殖吸虫相关蛋白匹配,其中与卫氏并殖吸虫的一新型蛋白westerpain-1/10匹配分值最高,B点蛋白与5种并殖吸虫相关蛋白匹配,其中与卫氏并殖吸虫的半胱氨酸蚩白酶匹配值最高;C点蛋白无相关蛋白与之相匹配.免疫金标记技术显示感染血清识别的虫体抗原位于虫体表膜和肠腔及肠腔内容物. 结论 并殖吸虫病感染血清可识别经SDS-PAGE、2-DE分离的斯氏狸殖吸虫成虫虫体可溶性抗原.串联质谱分析以及免疫金标记检测显示其主要成分为虫体表膜与分泌排泄物.     

为进一步提高膜性肾病的缓解率而努力

<正>膜性肾病(membranous nephropathy,MN)是一种以足细胞损伤以及肾小球基底膜上皮下免疫复合物弥漫性沉积伴基底膜弥漫增厚为主要特征的肾小球疾病,是肾病综合征(nephrotic syndrome,NS)的主要病理类型,约占NS的22%～33%~([1])。MN依     

并殖吸虫病感染血清识别的斯氏狸殖吸虫成虫抗原及其特性分析

目的 通过并殖吸虫病患者血清识别斯氏狸殖吸虫成虫抗原,研究特异性抗原的生物学特性,为特异性诊断抗原和疫苗的开发研究提供依据. 方法 成虫可溶性抗原经SDS-PAGE、2-DE、感染血清的免疫印迹识别特异性的蛋白,从识别的蛋白点中选取A、B、C 3个点做进一步分析,采用串联质谱进行蛋白肽段测序,结合免疫金标技术抗原定位,分析感染血清识别蛋白的特性. 结果 A点蛋白与6种并殖吸虫相关蛋白匹配,其中与卫氏并殖吸虫的一新型蛋白westerpain-1/10匹配分值最高,B点蛋白与5种并殖吸虫相关蛋白匹配,其中与卫氏并殖吸虫的半胱氨酸蚩白酶匹配值最高;C点蛋白无相关蛋白与之相匹配.免疫金标记技术显示感染血清识别的虫体抗原位于虫体表膜和肠腔及肠腔内容物. 结论 并殖吸虫病感染血清可识别经SDS-PAGE、2-DE分离的斯氏狸殖吸虫成虫虫体可溶性抗原.串联质谱分析以及免疫金标记检测显示其主要成分为虫体表膜与分泌排泄物.     

应用免疫蛋白质组学方法鉴定日本血吸虫虫卵诊断抗原

目的虫卵可溶性抗原（soluble egg antigen,SEA）是目前日本血吸虫病免疫诊断中最常用的抗原。本研究联合应用双向凝胶电泳（2-DE）、Western blot和MALDI-TOF质谱等技术,鉴定SEA中诊断抗原蛋白质。方法 SEA经2-DE分离蛋白质后进行银染,或应用日本血吸虫感染兔血清Western blot筛选抗原蛋白点,用MALDI-TOF/TOF串联质谱鉴定每一抗原蛋白质分子。结果虫卵可溶性蛋白分子经2-DE分离后转印PVDF膜上,与感染兔血清孵育出现29个特异性阳性反应点,与健康兔血清出现3个非特异的阳性反应点;29个特异性抗阳性反应点中,从银染2-DE胶图上找到21个匹配的抗原蛋白质点;MALDI-TOF/TOF质谱鉴定和NCBI数据库检索,13个点（61.9%）获得匹配蛋白质,4个点（19.0%）获得匹配EST,4个点（19.0%）未能从数据库中找到相匹配的信息。重组表达筛选出的SjCHGC06040和SjP40两个抗原蛋白质,Western blot结果显示reSjCHGC06040、reSjP40均能与感染兔血清抗体发生特异性反应,具有潜在的应用价值。结论 2-DE、MALDI-TOF质谱联合Western blot的免疫蛋白质组学研究方法,用于筛选、鉴定SEA中诊断抗原蛋白质,是切实可行的;但该方法存在一定的局限性,有待进一步改进。     

膜性肾病仍然是治疗上的难题

在临床上膜性肾病(MN)主要见于中年伴有蛋白尿的患者中,这些患者虽说往往以大量蛋白尿起病,但很少出现典型的肾病综合征的表现。MN在病理上的特征性改变是在肾小球毛细血管袢基底膜上皮侧有大量的免疫复合物沉积,同时不伴有肾小球内固有细胞的明显增殖和炎细胞浸润。典型的     

葡萄球菌肠毒素A和B7.1双刺激分子共转染人肝癌细胞及其免疫学效应

超抗原(SAg)是来源于细菌和病毒家族的蛋白组份,可未经处理而直接结合于组织相容性复合物Ⅱ分子并激活含特定Vβ成份的T细胞。为开辟超抗原在T细胞介导的肿瘤免疫排斥中的新途径,我们将葡萄球菌肠毒素A(SEA)超抗原分子及共刺激分子B7.1的基因直接转入人肝癌细胞,从而诱发强的免疫排斥反应。     

日本血吸虫虫卵排泄分泌物中具有诊断价值的抗原分子的初步鉴定

目的鉴定日本血吸虫虫卵分泌排泄物(ESA)中有血吸虫病诊断价值蛋白分子,为建立新的高敏感性和特异性的日本血吸虫病诊断方法奠定基础。方法日本血吸虫尾蚴感染家兔后42d,解剖家兔,取肝脏,匀浆后收集虫卵,置于PBS中,4℃过夜,收集上清,制备虫卵排泄分泌物。以虫卵排泄分泌物包被酶标板,采用ELISA检测不同感染度、不同感染时间小鼠血清抗体滴度。同时以虫卵ESA ELISA分别检测血吸虫病患者血清、健康人血清和弓形虫病患者血清,观察虫卵ESA用于血吸虫病诊断的敏感性和特异性及交叉反应性。通过一维电泳免疫印迹、二维电泳免疫印迹和飞行质谱分析,鉴定虫卵ESA中具有诊断潜能的蛋白分子。结果 ELISA检测结果显示血吸虫感染小鼠血清中抗虫卵ESA抗体IgG水平随着感染时间的延长而升高,且与血吸虫感染度呈正相关,在感染早期即检出相应抗体。虫卵ESA检测血吸虫病患者血清的敏感性为97.2%,检测健康人血清的特异性为95.2%,与弓形虫病患者血清的交叉反应性为25.0%。一维电泳免疫印迹试验显示血吸虫感染兔血清可识别170×10~3、150×10~3、130×10~3、100×10~3、72×10~3、70×10~3、30×10~3 ku左右的ESA蛋白;二维电泳免疫印迹试验显示血吸虫感染兔血清可识别8个蛋白斑点,质谱分析其中1个蛋白斑点为日本血吸虫主要的虫卵蛋白P40。结论日本血吸虫虫卵排泄分泌抗原具有一定的血吸虫病诊断与早期诊断价值,虫卵的主要蛋白P40可能是一个具有诊断潜能的抗原分子。     

CpG寡核苷酸的筛选及其对rSj28GST的免疫佐剂作用

目的研究CpG寡核苷酸(CpG ODN)对日本血吸虫重组28 kDa GST(rSj28GST)抗原分子的免疫佐剂作用和诱导Th1型反应的效应.方法用淋巴细胞增殖试验筛选对鼠有良好免疫刺激作用的CpG ODN;用基因工程方法生产rSj28GST抗原分子;ELISA检测小鼠抗rSj28GST的同型抗体IgG1、IgG2a水平.结果筛选出的CpGODN如1826、2002、18264、2102等具有良好的免疫刺激活性,其SI＞2;纯化的rSj28GST抗原分子,呈单一电泳条带;以CpG ODN为rSj28GST免疫佐剂,其免疫小鼠产生的抗体滴度显著高于对照组,且同型抗体IgG2a与IgG1比值也明显升高.结论 CpG ODN 18264是一种良好的免疫佐剂,并可显著诱导Th1型免疫应答.     

日益增多的肾脏疾病:膜性肾病

原发性膜性肾病是成人肾病综合征最常见的病理类型。近年的机制研究发现,该病是一种自身免疫性肾病,主要的靶抗原是磷脂酶A2受体(PLA2R),表达在肾小球足细胞膜上,与自身抗体结合,形成上皮下免疫复合物,刺激基底膜增厚和足细胞足突融合,破坏肾小球滤过屏障,出现蛋白尿。近年来,我国膜性肾病的患病率显著升高。控制混杂因素的影响后发现,长期暴露在高浓度PM2.5环境中会增加患膜性肾病的风险。在遗传易感性方面,人类白细胞抗原(HLA)-DRB1*1501是罹患膜性肾病的风险基因型,该基因编码的HLA分子更易于递呈PLA2R的抗原表位。在遗传、环境和其他因素的共同作用下,机体发生针对PLA2R的自身免疫紊乱,导致膜性肾病的发生。对发病机制的深入研究,将为开发新的特异性治疗提供线索。     

免疫-PCR检测肾综合征出血热患者血清中抗核衣壳蛋白抗体方法的建立

目的　建立高灵敏性和高特异性的免疫 -PCR方法检测肾综合征出血热 (HFRS)患者血清中抗核衣壳蛋白抗体。方法　用汉坦病毒 ( 76 - 118株 )重组核衣壳蛋白为抗原包被聚苯乙烯微滴度板 ,与经ELISA法和临床均已确诊为HFRS患者的血清进行抗原抗体特异性反应 ,以链霉亲和素为桥梁将生物素标记的抗体与生物素标记的DNA指示分子相连 ,PCR扩增DNA指示分子 ,通过检测指示分子DNA来反映肾综合征出血热患者血清中抗核衣壳蛋白抗体的水平 ,并与传统的ELISA法进行比较。结果　免疫 -PCR检测肾综合征出血热患者血清中抗核衣壳蛋白抗体的敏感性是ELISA法的 2 5 0 0 0倍 ;30例HFRS阳性患者血清免疫 -PCR检测均为阳性 ,2 0例甲型肝炎阳性血清和 2 0例正常人血清免疫 -PCR检测均为阴性。结论　免疫 -PCR方法敏感性高 ,特异性强 ,有可能作为一种高敏感性的检测方法用于HFRS的临床辅助诊断     

膜性肾病的发病机制新进展

膜性肾病(MN)特征性的病理改变为肾小球上皮下免疫复合物的沉积致基底膜的弥漫性增厚,临床上主要表现为大量蛋白尿.MN发病机制复杂,是多种因素综合作用的结果.本文对MN发病机制的新进展综述如下.