大鼠体内咪达唑仑及其代谢物1’-羟基咪达唑仑的药动学研究

目的建立快速、灵敏的LC-MS/MS法测定大鼠血浆中咪达唑仑及其代谢物1’-羟基咪达唑仑的血药浓度,并研究其在大鼠体内的药动学行为。方法按1 kg体质量给予大鼠20 mg.kg-1咪达唑仑的剂量灌胃给药,LC-MS/MS法测定不同时间点的血药浓度。色谱条件:色谱柱为Alltima C18(150 mm×2.1mm,5μm),流动相为甲醇-0.025%(体积分数)甲酸(体积比85∶15),流速为0.3 mL.min-1,柱温为40℃;质谱条件:采用正离子模式,以多反应离子监测(MRM)配对离子方式进行定量。采用PKSolution2.0软件计算其药动学参数。结果咪达唑仑及其代谢物1’-羟基咪达唑仑的线性范围分别为1～1 000ng.mL-1和1～100 ng.mL-1,最低检测限分别为0.5、0.25 ng.mL-1,专属性、精密度、稳定性和基质效应都满足要求。咪达唑仑、1’-羟基咪达唑仑的t1/2分别为(0.748±0.05)h、(1.65±0.33)h;AUC分别为(1 038.3±413.2)ng.mL-1.h、(169.5±38.6)ng.mL-1.h。结论本方法专属性强、灵敏度高、准确性好,可用于咪达唑仑及其代谢物1’-羟基咪达唑仑的含量测定及药动学研究。     

基于LC-MS/MS 研究异夏佛塔苷在大鼠体内药代动力学及其绝对生物利用度

建立LC-MS/MS法测定大鼠血浆中异夏佛塔苷的浓度,研究异夏佛塔苷在大鼠体内的药代动力学特性及其绝对生物利用度。分别灌胃给药1.5、3.0、6.0 mg/kg和静脉注射异夏佛塔苷0.5 mg/kg后,建立LC-MS/MS分析方法测定大鼠血浆中异夏佛塔苷的含量,运用 DAS 3.0软件计算药代动力学参数。异夏佛塔苷在1.0~500.0 ng/mL内线性良好(r=0.997 6),专属性、精密度和准确度、基质效应和提取回收率以及稳定性均符合生物样本分析要求。药代动力学参数显示:灌胃给药低、中、高3个剂量组,c_max分别为(109.34±22.87)、(259.84±95.35)、(499.26±288.09)ng/mL,AUC_0-t分别为(310.57±46.18)、(552.67±207.14)、(1 075.03±371.19)h·ng/mL,t_1/2分别为(2.36±0.22)、(2.91±0.19)、(3.04±0.86)h,t_max分别为(1.03±0.25)、(1.18±0.17)、(1.5±0.43)h,MRT_0-t分别为(11.33±1.53)、(11.27±1.09)、(8.29±0.76)h;静脉注射后,AUC_0-t为(1 536±421.3)h·ng/mL,t_1/2为(2.57±0.46)h,MRT_0-t为(9.55±2.37)h,绝对生物利用度分别为6.73%,5.99%,5.80%。结果表明,本研究所建立的LC-MS/MS分析方法可应用于异夏佛塔苷在大鼠体内的药代动力学特性研究。     

LC-MS/MS法测定大鼠血浆中芹黄春浓度及其在药代动力学研究中的应用

目的：研究大鼠分别灌胃和静脉给药芹黄春（芹菜素-7-O-β-D吡喃葡萄糖苷）溶液后,血浆中的芹黄春药物浓度及其药代动力学性质。方法6只雌性Sprague Dawley大鼠随机分为两组,每组3只,分别经灌胃(10 mg/kg)和静脉注射(2 mg/kg)给予芹黄春溶液后,按设计的时间点从大鼠眼内眦静脉丛采集血液样品,置于肝素化的离心管中,低温离心得血浆。采用甲醇沉淀法处理血浆生物样品,利用LC-MS/MS方法对血浆生物样品进行分析。药代动力学参数由Kinetica 2000软件进行计算。结果芹黄春浓度在1~2000 ng/mL范围内线性关系良好(r=0.9974),定量下限为1 ng/mL,低(8 ng/mL)、中(100 ng/mL)、高(1200 ng/mL)3个浓度的提取回收率均大于90%,日内日间精密度和稳定性的RSD均小于12.8%,日内日间准确度在91.5%~107%,方法学考察均符合要求。大鼠经静脉注射和灌胃芹黄春后,Cmax分别为(2363±96) ng/mL和(13.3±5.8) ng/mL,AUC0~∞分别为(796±201) h· ng/mL和(28.9±9.2) h· ng/mL,大鼠经静脉注射和后t1/2为(1.20±0.17) h,芹黄春的口服生物利用度约为0.6%。结论所建立的LC-MS/MS分析方法方便、快速,灵敏度高,准确度好,可用于大鼠血浆芹黄春浓度测定及其药代动力学的研究。     

液相色谱-串联质谱法测定大鼠血浆中forsklin的浓度及其药代动力学

建立了测定大鼠血浆中forsklin的液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)。方法 血浆样品经叔丁基甲醚萃取后,以水(0.1%甲酸)-乙腈为流动相梯度洗脱, BetaBasic-C₁₈柱分离。通过电喷雾离子化四极杆串联质谱,以多反应监测(MRM)方式进行正离子检测,用于定量分析的离子对分别为m/z 411→375.3(forsklin)和285→193(地西泮)。结果 在本实验条件下,forsklin血浆浓度测定方法的线性范围为0.5~1000 ng/ml,定量下限为0.5 ng/ml。日内、日间精密度(相对标准差 RSD)均小于14.4 %;准确度(相对误差 RE)在-3.5 %和3.8%之间。方法的专属性,绝对回收率,稳定性和基质效应均符合要求。结论 该法快速、灵敏、准确,可用于forsklin的药代动力学研究。     

同时测定小鼠血浆中氯吡格雷及其代谢产物浓度的LC-MS/MS法及其药代动力学研究

目的：建立并验证小鼠血浆中氯吡格雷及其代谢物的LC-MS/MS检测方法,研究氯吡格雷在小鼠体内的药代动力学特征。方法：以吡罗昔康为内标,经乙腈沉淀蛋白后,采用电喷雾离子源（ESI）正离子扫描模式多反应监测（multiple reaction monitoring,MRM）方式检测氯吡格雷及其活性代谢物、羧酸代谢物和葡萄糖醛酸代谢物的血药浓度。色谱柱为安捷伦Poroshell 120 SB-C18柱（100 mm×2.1 mm,2.7 μm）;流动相为水（含0.1%甲酸）和乙腈（含0.1%甲酸）并按梯度洗脱。小鼠单次灌胃给予氯吡格雷10 mg/kg,测定氯吡格雷及其3种主要代谢物的血药浓度,并研究其药代动力学特征。结果：氯吡格雷及其代谢产物在一定测定范围内均呈现良好的线性关系（r > 0.99）,提取回收率均大于80%,未见明显基质效应,其日内、日间精密度均较好（RSD <15%）,准确度相对误差（RE）为-2.40%~5.00%,稳定性较好。在小鼠的药代动力学研究中,该方法能达到预期的实验要求。结论：所建立的LC-MS/MS分析方法能快速、准确地测定小鼠血浆中氯吡格雷及其代谢产物浓度,其专属性、回收率、基质效应、稳定性、精密度和准确度等均符合生物样品测定要求。     

LC-MS/MS法测定大鼠血浆中阿霉素的药物浓度及应用

目的：建立液相色谱-串联质谱（LC-MS/MS）法测定大鼠血浆中阿霉素的血药浓度,并用于阿霉素载药纳米粒的体内药动学研究。方法色谱柱采用Shim-pack XR-ODS柱（2.0 mm＆#215;100 mm,2.2μm）,仪器采用API 4000三重四极杆串联质谱仪,采用多反应监测（multiple reaction monitoring,MRM）定量离子对为m/z544.2→m/z396.9（阿霉素）和m/z357.3→m/z133.8（吡格列酮,内标）;甲醇沉淀蛋白法处理样品。结果阿霉素在2.0-2000μg/L范围内线性关系良好,定量下限为2.0μg/L,血浆中的内源性物质不干扰阿霉素的测定;日内和日间精密度RSD均小于±15.0%;阿霉素低、中、高3个QC浓度的提取回收率分别为（92.1±5.9）%、（82.8±2.9）%和（80.1±9.7）%,基质效应分别为（91.1±2.4）%、（82.1±1.7）%和（81.2±2.5）%。结论该方法适用于阿霉素纳米粒在大鼠体内的药物动力学研究。     

LC-MS/MS法测定人血浆中福辛普利及其活性代谢物福辛普利拉

目的:建立人血浆中福辛普利及其代谢物福辛普利拉的LC-MS/MS测定方法,研究健康志愿者口服福辛普利片后的药代动力学。方法:血浆样品加入内标扎来普隆,血浆样品酸化后用乙醚-二氯甲烷(3∶1)混合溶剂提取处理,LC-MS/MS分析。流动相为甲醇-10mmol/L醋酸胺水溶液,色谱柱为LichrospherC8,梯度洗脱,流速1.0mL/min,柱温25℃。质谱检测方式:选择性反应检测(SRM),20名健康受试者口服20mg福辛普利钠片,计算主要药代动力学参数。结果:福辛普利在0.1～15.0ng/mL,福辛普利拉1.0～700ng/mL范围内线性关系良好。福辛普利的日内RSD小于3.7%,日间RSD小于6.9%;福辛普利拉的日内RSD小于2.4%,日间RSD小于5.2%。福辛普利与福辛普利拉的t1/2分别为(2.72±1.75)h和(7.25±0.81)h,cmax分别为(4.61±2.34)ng/mL和(409.43±136.28)ng/mL,tmax分别为(1.21±0.42)h和(3.74±0.87)h。结论:本方法灵敏度高,测定结果准确,可用于人体药代动力学及相对生物利用度研究。     

LC-MS/MS测定人血浆中替米沙坦的浓度

目的:建立测定人血浆中替米沙坦浓度的LC-MS/MS方法,并用该法研究替米沙坦片在健康人体内的药代动力学。 方法:采用LC-MS/MS测定人血浆中不同时间点替米沙坦的浓度,以地西泮为内标,血浆样品用乙腈沉淀蛋白,色谱柱为Agilent Zorbax SB-C18 (100 mm×2.1 mm,3.5 μm),流动相为乙腈-0.3%甲酸水溶液(55∶45),流速0.3 ml/min,柱温30℃。 结果:替米沙坦的线性范围为2.5～500 ng/ml (r=0.995 7),最低定量限为2.5 ng/ml(S/N>10),日内和日间RSD<8%。 结论:本法操作简单,选择性好,灵敏度高,适用于替米沙坦的人体药代动力学研究。     

LC-MS/MS法测定人血中埃博霉素B浓度及其在Ⅰ期临床药代动力学研究中的应用

建立一种快速测定人全血中埃博霉素B血药浓度的LC-MS/MS法,并研究其在中国晚期肿瘤患者体内的Ⅰ期临床药代动力学行为。以埃博霉素A作为内标,采用C18色谱柱(150 mm×2.0 mm,4.6μm),柱温40℃。流动相为乙腈-水(含0.05%甲酸)(64∶36),流速0.2 mL/min,电喷雾离子化(ESI),正离子扫描,多反应监测(MRM)。药物和内标分别为埃博霉素B(m/z 508.3→490.4)和埃博霉素A(m/z 494.3→476.1)。在本文建立的方法下,埃博霉素B在0.1～20 ng/mL以及5～500 ng/mL呈良好的线性关系(r=0.999 5和0.999 4),方法回收率、日内及日间精密度均符合方法学要求。该方法适用于埃博霉素B血样的定量分析。     

LC-MS/MS法测定大鼠血浆中芍药内酯苷的浓度及其在毒代动力学研究中的应用

目的 建立测定大鼠血浆中芍药内酯苷的液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)法.方法 血浆样品经乙酸乙酯-异丙醇(95:5,V/V)提取后,以Poroshell 120 EC-C18柱(50 mm×2.1 mm,2.7μm)为分析柱,乙腈-水为流动相梯度洗脱,采用ESI源在多反应监测(MRM)方式下进行正离子检测.用于定量分析的离子反应为m/z 498.5→m/z 197.1(芍药内酯苷)和m/z 251.3→m/z 108.2(拉科酰胺,内标).结果 芍药内酯苷血浆浓度测定方法的线性范围为20~2000 ng/ml,日内、日间精密度RSD%均<15%,准确度(RE)在±8.06%之间.结论 该法适用于芍药内酯苷在大鼠体内的毒代动力学研究.     

LC-MS/MS法同时测定大鼠血浆中黄芩素及黄芩苷浓度

目的:建立LC-MS/MS法同时测定大鼠血浆中黄芩素及其代谢物黄芩苷浓度。方法:色谱分离采用C18色谱柱,流动相为甲醇-0.2%甲酸(74∶26),流速1 mL/min。血浆中加入内标木犀草素,甲醇沉淀蛋白,离心后上清液进行LC-MS/MS分析。检测离子:黄芩素[M+H]+270.9→122.8,黄芩苷[M+H]+447.0→271.3,内标[M+H]+286.9→153.0。结果:黄芩苷、黄芩素在10-2 000 ng/mL范围内,线性关系良好,平均回收率大于75%,日内和日间的RSD小于15%。结论:建立的LC-MS/MS法符合生物样品分析的要求,可用于研究大鼠静注黄芩素后,血浆中黄芩素、黄芩苷的同时测定。     

LC-MS/MS法同时测定人血浆中盐酸二甲双胍和罗格列酮浓度及其药代动力学

目的:建立LC-MS/MS同时测定人血浆中盐酸二甲双胍及罗格列酮浓度的方法,测定志愿者单次和多次顿服二甲双胍罗格列酮胶囊后盐酸二甲双胍和罗格列酮的血药浓度,估算其药代动力学参数。方法:血浆中加入盐酸苯乙双胍为内标,经乙腈沉淀蛋白,取上清直接进行LC-MS/MS测定。色谱柱为Phenomenex Luna CN 100A(150 mm×2.0 mm ID),流动相为CH3OH-30 mmol/L NH4Ac,pH 5.0(80∶20),流速为0.2 mL/min;ESI-MS/MS选择性反应正离子检测。临床试验方案采用拉丁方试验设计。结果:盐酸二甲双胍和罗格列酮的血浆线性范围分别为5~3 000 ng/mL和1.5~500 ng/mL,检测限均为1ng/mL。测定了12名志愿者单次和多次顿服二甲双胍罗格列酮胶囊后的血药浓度经时过程。结论:本方法操作简单,专属性强,灵敏度高,准确性好。盐酸二甲双胍和罗格列酮体内动力学行为符合线性药物动力学特征。     

LC-MS/MS法测定人血浆中奈比洛尔浓度及其在中国人体内的药代动力学

本文建立了一种快速测定人血浆中奈比洛尔血药浓度的LC-MS/MS法,并研究其在中国健康人体内的药代动力学行为。以氨氯地平作为内标,采用C₁₈反相柱(150 mm×2.0 mm,4.6 μm),柱温35 ℃。流动相为乙腈-水（含0.05%甲酸）（45∶55）,流速0.2 mL/min;电喷雾离子化（ESI）,正离子扫描,选择性反应监测（SRM）药和内标分别为：奈比洛尔m/z 406.2→151.0;氨氯地平m/z 409.0→238.2。在本文建立的方法下,奈比洛尔在0.025~25 ng/mL呈良好的线性关系,r=0.998 6,最低检测浓度为0.008 ng/mL,低、中、高浓度下的回收率、日内及日间精密度均符合方法学要求。健康受试者口服5 mg奈比洛尔片后的t_1/2,AUC_0-t,c_max,MRT分别为：(14.4±5.5) h,(7.35±2.48)ng?h/mL,(1.05±0.35) ng/mL,(16.5±5.3) h。结果表明：该方法专属性强,适用于奈比洛尔血样的定量分析。     

LC-MS/MS测定大鼠血浆中的野漆树苷及其药代动力学研究

目的：建立大鼠血浆中野漆树苷的LC-MS/MS测定方法,并研究静脉注射后野漆树苷在大鼠体内的药代动力学特征。方法大鼠血浆样品经乙酸乙酯萃取处理,用色谱柱Phenomenex C8（30 mm×2.00 mm,3μm）进行分离,以甲醇-水为流动相梯度洗脱,采用电喷雾离子源（ESI）,负离子模式,多反应监测（MRM）,选择离子分别为野漆树苷（m/z 577.6→269.1）,内标柚皮素（m/z 271.0→151.0）,将建立的方法应用于测定大鼠静脉注射野漆树苷后血浆的药物浓度,并采用DAS 2.0计算得主要药代动力学参数。结果大鼠血浆中野漆树苷在1～2000μg/L浓度范围内线性关系良好,日内、日间精密度（RSD）均＜10%,准确度（RE）在±7%之间,低、中、高3个浓度下提取回收率为86.8%～91.0%,无明显基质效应且稳定性良好。大鼠静注该药（5 mg/kg）后AUC0-t为（72627.8±18067.9）μg·min/L,t1/2为（52.1±14.3）min,CLz为（0.07±0.02）L/（min·kg）。结论该检测方法简单、快速、灵敏、准确,适用于野漆树苷血药浓度监测及其药动学研究。药代动力学参数表明大鼠静注该药后体内消除较快。     

LC-MS/MS同时测定人血浆中阿莫西林和克拉维酸及其生物等效性研究

建立了同时测定人血浆中阿莫西林和克拉维酸浓度的LC-MS/MS方法。采用50%乙酸水溶液作为稳定剂,采用冰浴条件下蛋白沉淀后取上清液吹干复溶的方法进行血浆样品前处理。采用Hedera ODS-2(2.1 mm×150 mm)色谱柱进行梯度洗脱,水相为含0.2%乙酸的水溶液,有机相为甲醇。选择三重四极杆串联质谱仪(Triple Quad TM 6500⁺),采用电喷雾离子化方式(ESI),在多反应监测(MRM)模式下进行负离子检测,同时对阿莫西林(364.1→223.1)和克拉维酸(198.1→135.9)进行定量分析。结果表明,阿莫西林在20.0~5 000 ng/mL范围内线性关系良好,克拉维酸在10.0~2 500 ng/mL范围内线性关系良好,批内和批间准确度偏差均在±15.0%内,批内和批间精密度均小于15.0%,基质效应、回收率均满足接受标准,阿莫西林和克拉维酸在试验条件下稳定性良好。采用该方法对健康受试者服用受试制剂阿莫西林克拉维酸钾颗粒1袋(每袋颗粒中含有125 mg的阿莫西林和31.25 mg的克拉维酸钾)和参比制剂阿莫西林克拉维酸钾干混悬剂Augmentin^® 5 mL(每5毫升干混悬剂中含有125 mg的阿莫西林和31.25 mg的克拉维酸钾)进行阿莫西林和克拉维酸的血药浓度测定,进行非房室模型药代动力学参数的估算分析,计算阿莫西林和克拉维酸的药代动力学参数,评价受试制剂与参比制剂是否等效,评估饮食对阿莫西林和克拉维酸的药代动力学的影响。实验结果表明,该方法经考察符合生物样品的分析要求,可以应用于阿莫西林克拉维酸临床血药浓度的测定和生物等效性研究。     

HPLC-MS/MS法测定大鼠血浆中麻黄碱、伪麻黄碱浓度及药动学研究

[目的]建立同时检测大鼠血浆中麻黄碱、伪麻黄碱的高效液相色谱-质谱联用法(HPLC-MS/MS),并对大鼠口服三拗汤后的麻黄碱、伪麻黄碱进行药代动力学研究。[方法]血浆样品经碱化和乙酸乙酯液-液萃取,以盐酸苯丙醇胺为内标,乙腈-0.1%甲酸水(4∶96)为流动相,经Agilent Zorbax SB-C18柱(4.6 mm×150 mm,5μm)分离,采用电喷雾离子源(ESI),以多反应监测(MRM)模式进行正离子检测,定量分析的离子反应分别为:m/z 166.2→m/z 148.2(麻黄碱),m/z 166.2→m/z 148.2(伪麻黄碱)和m/z 152.1→m/z 134.1(盐酸苯丙醇胺)。[结果]麻黄碱和伪麻黄碱血药浓度在20~10 000μg/L范围内线性关系良好,批内、批间精密度RSD均小于5.3%,高、中、低3种浓度平均方法回收率大于64.7%。[结论]该方法专属、快速、灵敏,可用于麻黄碱、伪麻黄碱的药代动力学研究。     

化妆品中糖皮质激素类非法添加物的LC-MS/MS分析

建立化妆品中醋酸可的松、泼尼松、泼尼松龙、曲安西龙、地塞米松和醋酸地塞米松等非法添加物的LC-MS/MS同时测定方法。化妆品经酸化甲醇(冰醋酸调pH为4.0)超声提取,正己烷除脂净化,HPLC-MS/MS分析,流动相为甲醇-0.1%甲酸(60∶40),色谱柱为岛津Shim-pack VP-ODS C18(150 mm×2.0 mm,5μm)。方法学试验表明:本方法可作为化妆品中非法添加糖皮质激素的常规分析方法。     

LC-MS/MS法测定人尿液中索法酮的浓度及其尿药排泄研究

目的:建立测定人尿液中索法酮浓度的LC-MS/MS方法,用于研究健康受试者口服索法酮后药物在体内的尿药排泄特征?方法:尿液经甲醇处理后,进行LC-MS/MS分析?色谱柱为Poroshell 120 SB-C18柱,柱温为30℃?流动相为甲醇∶2 mmol/L 醋酸铵(85∶15),流速为0.20 ml/min?负离子模式下使用电喷雾离子化和多反应离子监测?2名健康志愿者单次口服索法酮胶囊200 mg后,测定尿药浓度并研究尿药排泄特征?结果:索法酮的最低定量限为1 ng/ml,在1~500 ng/ml范围内线性关系良好,高中低3个浓度的批内?批间差均小于6%,基质效应在93.1%~114.8%范围内,提取回收率为84.7%~93.6%?尿液中索法酮的累积排泄率小于0.01%?结论:所建立的LC-MS/MS分析方法能快速?准确地测定尿液中索法酮的浓度?     

高效液相色谱一质谱联用法测定人血浆中非索非那定的浓度

目的：建立以高效液相色谱-质谱联用法测定人血浆中非索非那定浓度的方法。方法：以苯乙双胍为内标物,采用C18柱,流动相由乙腈及30 mmol/ml NH4Ac（含0.1%甲酸,0.01%三氟乙酸）组成,采用梯度洗脱程序,测定血浆中非索非那定浓度。结果：非索非那定在2.26～676.46 ng/ml线性关系良好（r=0.999 6,n=7）,定量下限浓度为2.26 ng/ml,RSD为0.7%,高、中、低浓度测定的相对回收率分别为（109.9±1.7）%、（103.1±7.2）%和（101.5±13.4）%,日内RSD分别为2.1%、2.5%和9.8%,日间RSD分别为1.3%、5.7%和7.1%。结论：所建方法预处理简单﹑专属性强、灵敏度高,适合测定非索非那定的血药浓度。     

Development of a UHPLC-MS/MS method for the quantification of ilaprazole enantiomers in rat plasma and its pharmacokinetic application

In Korea and China, ilaprazole is a widely used proton pump inhibitor in the treatment of gastric ulcers. In this study, a specific and sensitive LC-MS/MS method has been developed and validated for the quantification of ilaprazole enantiomers in the rat plasma, using R-lansoprazole as the internal standard. The enantioseparation was achieved on a CHIRALPAK AS-RH column (4.6 mm × 150 mm, i.d. 5 μm), with a mobile phase composed of 10 mM ammonium acetate aqueous solution and acetonitrile (60:40, V/V), at a flow-rate of 0.5 mL/min. The method was validated over the concentration range of 0.5–300 ng/mL for both, R- and S -ilaprazole. The lower limit of quantification was 0.5 ng/mL for both enantiomers. The relative standard deviation (RSD) of intra- and inter-day precision of R-ilaprazole and S-ilaprazole was less than 10.9%, and the relative error accuracy (RE) ranged from −0.5%–2.0%. Finally, the method was successfully evaluated in rats in a stereoselective pharmacokinetic study of the ilaprazole racemate.