藻蓝蛋白对野百合碱诱导肺动脉高压大鼠肺血管重构的影响

目的探讨藻蓝蛋白改善肺动脉高压(PAH)大鼠肺血管重构的机制。方法将30只雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠, 采用随机数表法分为3组:正常对照组(对照组)、PAH模型组(PAH组)、藻蓝蛋白治疗组(治疗组), 每组10只。腹腔注射野百合碱(MCT)建立PAH模型, 治疗组在造模后第15天给予藻蓝蛋白灌胃, 持续14d。测量右心室收缩压(RVSP), 计算右心室肥厚指数(RVHI)。苏木精-伊红(HE)染色、马松(Masson)染色观察肺血管, 蛋白印迹法(Western blot)检测转化生长因子-β1(TGF-β1)、核转录因子-κB(NF-κB)、B淋巴细胞瘤-2(bcl-2)、bcl-2相关X蛋白(bax)、天冬氨酸特异半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)、α-肌动蛋白(α-SMA)、增殖细胞核抗原(PCNA)表达, 免疫荧光定位α-SMA和PCNA。多组比较采用单因素方差分析。结果治疗组RVSP、RVHI低于PAH组[(24.60±3.33) mmHg比(40.49±3.76) mmHg, F=140.998, P<0.01;(32.23±2.99)%比(...     

交感神经递质通过促进肺动脉平滑肌细胞增殖参与野百合碱诱导肺动脉高压模型大鼠的肺血管重塑

目的探讨野百合碱诱导的大鼠肺动脉高压(PAH)模型中肺中小血管周围去甲肾上腺素(NE)和神经肽Y(NPY)的水平及其在肺血管重塑的作用。方法将20只6～8周龄的Sprague Dawley(SD)大鼠(安徽医科大学实验动物中心提供)采用抽签法随机分为对照组(Control组) 9只和野百合碱诱导肺动脉高压组(MCT-PAH组)11只。通过腹腔注射野百合碱(MCT, 50 mg/kg)构建PAH模型。通过血流动力学参数、苏木精-伊红(HE)染色评价PAH模型。酶联免疫吸附试验(ELISA)、免疫荧光及蛋白质印迹法评价NE和NPY表达。提取大鼠肺动脉组织做原代肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)培养, 通过细胞计数试剂盒(CCK-8)、流式细胞术检测PASMCs的增殖能力, 两组之间比较采用t检验。结果与Control组比较, HE染色显示MCT-PAH组大鼠右心室心肌排列紊乱, 间隙增宽, 周围可见胶原纤维沉积, 远端肺小动脉呈向心性肥厚, 管壁增厚, 管腔明显变窄;血浆NE[(100.32±8.95) nmol/L比(124.69±20.66) nmol/L, t=-2.892, P<...     

缺血再灌注损伤后大鼠肾小管上皮细胞有机阴离子转运蛋白的表达及其功能

目的 探讨大鼠肾脏缺血再灌注损伤（IRI）后肾小管上皮细胞有机阴离子转运蛋白(OAT)1和3表达及功能变化。 方法 建立大鼠IRI模型，于术后第1、2、4、6天取血及肾组织标本。常规测定Scr浓度及观察肾脏组织形态。分别用免疫组织化学和Western印迹检测肾脏组织OAT1和3蛋白表达。毛细血管电泳仪检测肾脏对氨基马尿酸（PAH）排泄率。钼蓝分光光度法测定基侧膜钠-钾-ATP酶（Na＋-K＋-ATP酶）活性。另设假手术组作对照。 结果 模型组大鼠术后第1天肾小管上皮细胞坏死脱落，管腔内可见大量管型，刷状缘消失，基底膜裸露；Scr显著升高。与假手术组比较，模型组大鼠肾组织匀浆及肾小管上皮细胞OAT1和OAT3表达增强；PAH排泄率降低[(0.53±0.15)比(4.00 ± 0.67) ml/min, P < 0.01]；肾小管上皮细胞基侧膜Na＋-K＋-ATP酶活性降低[(9.33±1.37)比(15.07±0.15) μmol Pi&#8226;(mg蛋白)-1&#8226;h-1, P < 0.01]。损伤后第2天及第4天，损伤的肾小管逐渐修复，OAT1和3表达逐渐降低，PAH排泄率和Na＋-K＋-ATP酶活性逐渐增加；至第6天时肾小管基本恢复正常。 结论 急性肾缺血再灌注导致大鼠肾小管上皮细胞可逆性损伤，损伤初期肾小管OAT1和OAT3 表达增强，转运有机阴离子功能下降，PAH排泄减少。Na＋-K＋-ATP酶活性低下是OAT功能降低的主要机制之一。     

二氯乙酸盐对肺动脉高压大鼠肺组织KV1.5表达的影响

目的 探讨二氯乙酸盐对肺动脉高压大鼠肺组织Kv1.5表达的影响.方法 雄性SD大鼠32只,8周龄,体重200～250 g,采用随机数字表法,将大鼠随机分为4组(n=8):正常对照组(C组)、二氯乙酸盐对照组(D组)、肺动脉高压组(PAH组)和二氯乙酸盐治疗组(PD组).采用左肺切除术联合皮下注射野百合碱60mg/kg的方法制备肺动脉高压模型.PD组于皮下注射野百合碱后,给予二氯乙酸盐80mg/kg灌胃,1次/d,连续28 d,PAH组给予等量生理盐水;D组不制备模型,给予相同剂量二氯乙酸盐灌胃.于皮下注射野百合碱后28 d时测定肺动脉压(PAP),随后处死,取肺组织,计算肺小动脉中膜厚度百分比和右心室肥厚指数,采用Western blot法检测增殖细胞核抗原(PCNA)和Kv1.5蛋白的表达水平,采用RT-PCR法检测Kv1.5 mRNA的表达水平.结果 与C组比较,PAH组和PD组PAP、中膜厚度百分比及右心室肥厚指数升高,肺组织Kv1.5 mRNA及其蛋白表达下调,PCNA表达上调(P＜0.05),D组上述指标差异无统计学意义(P＞0.05);与PAH组比较,PD组PAP、中膜厚度百分比及右心室肥厚指数降低,肺组织Kv1.5mRNA及其蛋白表达上调,PCNA表达下调(P＜0.05).结论 二氯乙酸盐减轻大鼠肺动脉高压与上调肺组织Kv1.5表达,抑制肺血管重构有关.

Abstract：

Objective To investigate the effect of dichloroacetate on the expression of Kv1.5 in a rat model of pulmonary arterial hypertension (PAH) .Methods Thirty-two male SD rats weighing 200-250 g were randomly divided into 4 groups ( n = 8 each): normal control group (group C), dichloroacetate control group (group D),PAH group, and PAH + dichloroacetate group (group PD). PAH was induced by left lung resection combined with subcutaneous injection of monocrotaline 60 mg/kg in PAH and PD groups. In group PD, dichloroacetate 80 mg/kg was given through a gastric tube into stomach once a day for 28 consecutive days after monocrotaline injection,while the equal volume of normal saline was given instead of dichloroacetate in group PAH. Group D only received dichloroacetate 80 mg/kg through a gastric tube into stomach once a day for 28 consecutive days. Pulmonary arterial pressure (PAP) was measured at day 28 after monocrotaline injection. The rats were then sacrificed and lung tissues were removed to calculate the percentage of thickness of the tunica media of pulmonary artery and right venicular hypertrophy index and to determine the proliferating cell nuclear antigen (PCNA) and Kv1.5 protein expression (by Western blot) and Kv1.5 mRNA expression (by RT-PCR).Results Compared with group C, the PAP,percentage of thickness of the tunica media, right ventricular hypertrophy index were significantly increased, Kv1.5 mRNA and protein expression was down-regulated and PCNA expression was up-regulated in groups PAH and PD ( P ＜ 0.05). Compared with group PAH, the PAP, percentage of thickness of the tunica media, right ventricular hypertrophy index were significantly decreased, Kv1.5 mRNA and protein expression was up-regulated and PCNA expression was down-regulated in group PD (P ＜ 0.05). There was no significant difference in the indexes mentioned above between group C and group D ( P ＞ 0.05). Conclusion Dichloroacetat alleviates PAH through upregulating Kv1.5 expression in lung tissues and inhibiting pulmonary vascular remodeling in rats.     

慢性肾脏病并发肺动脉高压的影响因素及预后价值

目的探讨慢性肾脏病(chronic kidney disease, CKD)3～5期非透析患者并发肺动脉高压(pulmonary arterial hypertension, PAH)的影响因素,观察PAH对CKD非透析患者预后的影响。方法选择2014年1月1日到2017年1月1日在临沂市人民医院肾内科住院且随访资料完整的CKD3～5期患者。按照是否患有PAH分为PAH组和无PAH组。随访终点:(1)全因死亡;(2)进展到肾脏替代治疗(renal replacement therapy, RRT)。使用Kaplan-Meier生存曲线比较两组患者总生存率和肾脏存活率的差异。采用Cox比例风险回归模型分析预后的影响因素。结果共纳入283例患者,年龄(46.06±14.18)岁,其中男166例(58.66%),女117例(41.34%)。与无PAH组比较,PAH组患者的年龄、血压、C反应蛋白(C-reactive protein, CRP)水平均高于无PAH组(均P0.05);血红蛋白(hemoglobin, Hb)、红细胞比容(red blood cell specific volume, HCT)、估算肾小球滤过率(estimate glomerular filtration rate, eGFR)、碳酸氢盐、胆固醇水平均低于无PAH组(均P0.05)。多因素二元Logistic回归分析显示收缩压(systolic blood pressure, SBP)(OR=1.032,95%CI 1.007～1.056,P=0.007)、HCT(OR=0.812,95%CI 0.739～0.892,P0.001)、碳酸氢盐(OR=0.856,95%CI 0.781～0.938,P0.001)是CKD非透析患者PAH发生的影响因素。Kaplan-Meier生存分析显示PAH组的生存率比无PAH组显著降低(χ~2=13.184,P0.001),肾脏存活率显著低于无PAH组(χ~2=21.948,P0.001)。多因素Cox回归模型分析显示PAH组的全因死亡风险是无PAH组患者的2.228倍(HR=2.228,95%CI 1.088～4.564,P=0.029),进展至RRT的风险是无PAH组患者的1.692倍(HR=1.692,95%CI 1.064～2.728,P=0.031)。结论高血压、低HCT、低碳酸氢盐水平是CKD3～5期并发PAH的危险因素;PAH是CKD3～5期非透析患者的全因死亡及进展至RRT的危险因素。     

银杏叶提取物对野百合碱所致肺动脉高压保护作用的实验研究

目的：探讨银杏叶提取物对野百合碱所致肺动脉高压（PAH）的早期保护作用。方法：30只雄性 SD大鼠随机分为3组：对照组、PAH 模型组和治疗组,每组10只。PAH 模型组和治疗组大鼠采用脊背部皮下注射1%野百合碱60 mg/kg的方法复制PAH 模型,注射后第2天开始每日予2 ml 0.9%氯化钠注射液（PAH 模型组）或60 mg/kg银杏叶提取物（治疗组）灌胃;对照组脊背部皮下注射等量溶剂,注射后第2天开始每日予2 ml 0.9%氯化钠注射液灌胃。第22天采用颈外静脉右心导管法测定平均肺动脉压（mPAP）、右心室收缩压（RVSP）,测定右心室、左心室、室间隔的重量,计算右心室肥厚指数（RVHI）;采用 HE染色观察肺细小动脉组织结构情况,并计算直径50~150μm的肺小动脉血管管壁厚度占血管厚度百分比（WA%）和血管管壁面积与血管面积比值（WV%）;采用免疫组化方法观察内皮型一氧化氮合成酶（eNOS）及内皮素-1（ET-1）在大鼠肺组织中的表达情况。结果：PAH 模型组、治疗组的 mPAP、RVSP、RVHI、WA%、WV%与对照组比较均明显升高（P〈0.05）,治疗组的 mPAP、RVSP、WA%、WV%较 PAH 模型组均降低（P〈0.05）,而治疗组与 PAH 模型组的RVHI差异无显著性。免疫组化结果显示,3组 eNOS表达,对照组〉治疗组〉PAH 模型组;3组 ET-1的表达, PAH 模型组〉治疗组〉对照组。结论：银杏叶提取物通过抑制 ET-1的合成、减轻内皮细胞损伤、维持 eNOS的表达,达到减缓PAH 进展的作用。     

瘦素及其受体在精索静脉曲张模型大鼠附睾组织的表达及意义

目的:探讨瘦素及其受体在精索静脉曲张模型大鼠附睾组织的表达及其意义。方法:将40只SD大鼠随机分为精索静脉曲张(EV)持续4、8周组(EV4、EV8组,每组12只)和相应的假手术对照组(Control 4、Control 8组,每组8只)。采用左肾静脉部分结扎的方法建立精索静脉曲张模型。采用免疫组织化学法检测大鼠附睾组织中瘦素及瘦素受体表达情况,采用实时定量PCR法检测大鼠附睾组织中瘦素及瘦素受体mRNA表达量。结果:EV4组、EV8组附睾上皮细胞瘦素及瘦素受体表达分别比Control 4组、Control 8组显著增强(P<0.01);而EV4组附睾上皮细胞瘦素及瘦素受体表达与EV8组比较无显著性差异(P>0.05)。EV4组、EV8组附睾上皮细胞瘦素及瘦素受体mRNA的表达分别比Control 4组、Control 8组显著增加(P<0.01);而EV4组瘦素及瘦素受体mRNA的表达与EV8组比较无显著性差异(P>0.05)。结论:精索静脉曲张大鼠附睾组织中瘦素及瘦素受体的表达明显增加,瘦素可能参与了精索静脉曲张引起男性不育的机制。     

法舒地尔对肺血管重构的肺动脉高压大鼠的影响

目的 观察法舒地尔对发生肺血管重构的肺动脉高压(PAH)大鼠的影响.方法 将32只雄性Wistar大鼠随机均分为4组:对照3周组,模型3、6周组及治疗组;予野百合碱建模;治疗组于3周后予法舒地尔腹腔内注射.于3、6周末测定各组大鼠右心室收缩压(RVSP)、内皮素-1(ET-1)、N端脑钠素前体(NT-proBNP)、肺小动脉病理等.结果 (1)造模后RVSP随时间升高(31.2±7.6)、(43.3±8.3)、(56.9±6.9)mm Hg(1 mm Hg=0.133 kPa),治疗组(47.3±6.3)mmHg较模型6周组明显降低.(2)ET-1、NT-proBNP与RVSP呈正相关(r=0.721、0.454).(3)病理:造模后肺动脉平滑肌增生,管壁狭窄,至6周时近于闭塞,治疗组则明显好转.结论 对于已发生肺血管重构的PAH大鼠,法舒地尔能阻止肺动脉高压进展,ET-1、NT-proBNP可成为较理想的评估指标.

Abstract：

Objective To investigate the effects of Rho kinase inhibitor fasudil on monocrotaline (MCT)-induced pulmonary arterial hypertension (PAH) with vascular remodeling in rats. Methods Thirty-two male Wistar rats were randomly and equally divided into control group ( C3 ), MCT-PAH 3- and 6-week model groups (H3, H6 ) and fasudil-treated group (F6). The right ventricle systolic pressure( RVSP), right ventricle/left ventricle and septum[RV/( LV + S)], plasma endothelin-1 and NT-proBNP were measured; small pulmonary arterial morphometry, ratio of vascular wall thickness to vascular external diameter (WT) and ratio of vascular wall area to the total area (WA) were also observed. Results ( 1 )The RVSP was highest in H6 group, followed by F6 group, H3 group, and C3 group[(56. 9 ±6. 9), (47. 3±6.3), (43.3±8.3) and (31.2±7.6) mm Hg (1 mm Hg=0. 133 kPa)]. But no significant difference was found between H3 and F6 groups; (2) The levels of plasma ET-1 and NT-proBNP were positively associated with RVSP, RV/(LV +S), WT and WA (r for ET-1 was 0.721, 0.607, 0.652, 0.707,P＜0.01; r for NT-proBNP was 0. 454, 0. 330, 0. 365, 0. 398,P ＜0. 05); (3) Pathematological assessment showed that the thickness and muscularization of small pulmonary artery were increased in H3 group as compared with C3 group, most significantly in H6 group, and those were significantly decreased in F6 group as compared with H6 group. Conclusion Fasudil can improve the MCT-induced PAH with vascular remodeling in rats. The plasma ET-1 and NT-proBNP could be used as good makers to evaluate the severity of PAH.     

5-羟色胺转载体与肺动脉高压复发的关系

5-羟色胺(5-HT)在该肺动脉高压(PAH)发病机制有重要作用[1].本研究旨在观察氟西汀对野百合碱(MCT)诱导的PAH大鼠肺血管重构的远期疗效及病理生理学变化.     

颗粒酶-B在大鼠心肺复苏后脑组织中的表达及其意义

目的 观察大鼠心搏骤停(cardiac arrest,CA)、心肺复苏(cardiopulmonary resuscitation,CPR)后早期,脑中颗粒酶-B(granzyme B,Gra-B)、穿孔素表达及CD8+T细胞含量的变化,探讨其在CPR后脑损伤中的意义. 方法 雄性Wistar大鼠按随机数字表法分为两组:复苏组和假手术组,复苏组又按取材时间不同分为12 h组、1d组、3d组3个亚组.假手术组大鼠仅进行麻醉和气管插管、血管穿刺,不进行窒息及CPR,于术后1d处死取样.以夹闭气管导管,窒息6 min的方法成功建立大鼠CPR模型后,用平衡木行走实验及肌力测定实验检测大鼠神经功能的变化.通过检测脑组织中伊文蓝(evans blue,EB)的含量说明血脑屏障(blood-brain barrier,BBB)的破坏程度,应用免疫组化染色,Western blot以及免疫荧光染色技术检测脑组织内CD8+T细胞浸润、Gra-B和穿孔素表达的变化以及CD8+T细胞和Gra-B的共表达情况. 结果 与假手术组比较,复苏组大鼠CPR后的感觉运动功能和肌力明显减退,其评分在第3天达到最低[复苏组(4.0±0.7)分,假手术组(0.9±0.3)分(P＜0.01)],第4、5天开始恢复.CPR后大鼠BBB通透性增大,脑皮质和纹状体中CD8+T细胞的浸润以及Gra-B的表达增多,在1 d Gra-B的表达增加最明显[皮质中1d组(0.95±0.08)比假手术组(0.35±0.09)(P＜0.05);纹状体中1d组(1.08±0.15)比假手术组(0.39±0.09)(P＜0.05)].CD8+T细胞与Gra-B在脑中共表达. 结论 CA-CPR后,大鼠脑中BBB通透性增加,CD8+T细胞浸润并释放Gra-B及穿孔素,参与脑神经损伤.     

复方红景天对大鼠高原严重烧伤后早期心肌损伤的保护作用

目的　观察高海拔 (3480m)地区大鼠 30 %TBSAⅢ度烧伤后心肌损害的程度 ,探讨使用复方红景天后对大鼠心肌损伤的作用机制。　方法　 10 4只Wistar大鼠 ,随机分为红景天组 (48只 )、盐水组 (48只 )、正常对照组 (8只 )。正常对照组大鼠不作烧伤和其他处理。红景天组伤前 1周向大鼠胃内灌注复方红景天液 4ml,2次 /d;盐水组同方法灌注等量等渗盐水。分别在伤后 3、6、12、2 4、4 8、72h(每时相点 8只大鼠 )剖腹抽血 ,检测大鼠心肌酶谱及动脉血气变化 ,再摘取大鼠心脏作病理学检查。　结果　烧伤后 3h盐水组大鼠心肌组织损害明显 ,随后逐渐减轻 ,伤后 72h接近正常对照组水平。红景天组与盐水组大鼠心肌酶谱值均明显高于正常对照组 (P <0.0 1),但红景天组则明显低于盐水组 (P <0.0 1)。血气分析 :pH值 :盐水组与红景天组均低于正常对照组 (P <0.0 5 ),红景天组伤后 12～ 2 4h高于盐水组 (P <0.0 5)。剩余碱 :盐水组与红景天组均明显低于正常对照组 (P <0.0 1)。红景天组伤后 6h后高于盐水组 (P <0.0 5～ 0.0 1)。二氧化碳分压 :盐水组与红景天组均明显低于正常对照组 (P <0.0 5～ 0.0 1),伤后 4 8h红景天组 (35 .70± 4 .2 3)mmHg(1mmHg =0.133kPa)与正常对照组 (37.5 0± 6 .5 3)mmHg比较 ,差异无显著性意义     

晚期糖基化终产物及其受体对大鼠阴茎海绵体组织中内皮素-1活性的影响

目的:通过观察大鼠阴茎海绵体组织中晚期糖基化终产物(AGEs)及其受体(RAGE)的变化对内皮素1(ET-1)活性的影响,探讨AGEs在糖尿病性勃起功能障碍(DMED)发生发展中的作用。方法:成年雄性SD大鼠60只,随机取40只用于制作糖尿病模型,造模后共27只大鼠成模,将其分为两组:糖尿病(DM)组15只和糖尿病+氨基胍给药(DM+AG)组12只;另20只大鼠平分为两组:正常对照(NC)组和正常对照+氨基胍给药(NC+AG)组;两组氨基胍(AG)给药组大鼠造模后即在其饮水中按1g/L剂量加入AG。饲养8周后取各组大鼠阴茎海绵体组织,一部分用于免疫组化法观察分析AGEs及其受体的分布和表达,剩余部分匀浆后检测AGE-肽(AGE-P)含量和ET-1活性。结果:DM组阴茎海绵体组织中AGEs和RAGE的表达、AGE-P含量及ET-1活性明显高于正常对照组(P<0.05);正常对照组与NC+AG组间比较在各项指标上则无明显差异(P>0.05)。结论:糖尿病状态下AGEs与RAGE的结合效应可以引起大鼠阴茎海绵体组织中ET-1活性的增强,从而促进DMED的发生发展。     

低雄激素通过抑制大鼠阴茎海绵体组织Tie2的表达抑制勃起功能

目的:研究雄激素是否通过富含内皮的外膜内皮细胞激酶2(Tie2)/磷酸激酶(AKT)调控大鼠阴茎海绵体组织内皮一氧化氮合酶(eNOS)的表达,并影响阴茎勃起功能。方法:将8周龄雄性SD(Sprague Dawley)大鼠随机分为6组(n=6):假手术组、去势组、睾酮替代组(去势1 d后隔日1次丙酸睾酮3 mg/kg皮下注射)、假手术+Tie2转染组(去势术后4周大鼠阴茎海绵体注射20 ul携带Tie2基因的慢病毒,滴度1×10⁸TU/ml)、去势+Tie2转染组、去势+空载体组。去势术后5周,测定各组大鼠的最大阴茎海绵体内压与平均动脉压比值(ICPmax/MAP)、血清睾酮(T)水平、一氧化氮(NO)含量,以及Tie2、AKT、P-AKT、eNOS、P-eNOS在各组大鼠阴茎海绵体中的表达水平。结果:去势组大鼠的T、阴茎海绵体组织中NO的含量和ICPmax/MAP明显低于假手术组大鼠(P<0.01)。而经过Tie2过表达慢病毒转染后,去势+Tie2组大鼠的NO含量及ICPmax/MAP明显高于去势组大鼠(P<0.01)。去势组大鼠阴茎海绵体组织中Tie...     

利拉鲁肽对糖尿病大鼠阴茎海绵体eNOS表达的影响

目的:研究胰高血糖素样肽-1(GLP-1)类似物利拉鲁肽对糖尿病(DM)大鼠阴茎海绵体内皮型一氧化氮合酶(e NOS)表达的影响,探讨利拉鲁肽对DM勃起功能障碍(DED)大鼠勃起功能的作用。方法:取6周龄雄性SD大鼠,分为正常对照组(NC,n=10)与实验组(n=20),实验组构建DM大鼠模型,随机将实验组分为DM组(n=8)与GLP-1组(n=8)。干预12周后,检测各组空腹血糖(FPG)、空腹胰岛素(FINS)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、睾酮、白介素-6,计算胰岛素敏感指标Homa-IR与Homa-β,比较各组大鼠勃起功能;Western印迹检测各组大鼠阴茎海绵体组织Akt/p-Akt、e NOS/p-e NOS的表达。结果:DM组大鼠勃起次数(0.90±1.14)及勃起率(37.5%)较GLP-1组(2.90±1.53,25.0%)、NC组(4.20±1.05,100%)均明显减少(P0.05);GLP-1组大鼠勃起率及勃起次数亦少于NC组大鼠(P0.05)。免疫荧光染色提示e NOS主要表达在海绵体血管、血窦内皮细胞的细胞质中,DM组、GLP-1组e NOS蛋白表达水平显著低于正常对照组(P0.05),且GLP-1组明显高于DM组(P0.05)。DM、GLP-1组大鼠阴茎组织e NOS/p-e NOS表达水平较NC组明显下降(P0.01或0.05)。与DM组相比,GLP-1组大鼠阴茎组织p-e NOS表达水平明显升高(P0.05)。3组大鼠阴茎组织Akt比较无显著差异(P0.05)。DM、GLP-1组大鼠阴茎组织p-Akt表达水平较NC组明显下降(P0.01或0.05)。与DM组相比,GLP-1组大鼠阴茎组织p-e NOS表达水平明显升高(P0.05)。结论:GLP-1可能通过调节Akt/e NOS信号通路,保护阴茎海绵体组织内皮细胞功能,改善DED大鼠的勃起功能,提示GLP-1的使用可能是将来治疗和预防DED的重要方法之一。     

生存素在二氯乙酸盐治疗大鼠肺动脉高压中的表达变化

目的 观察早期和晚期二氯乙酸盐(dichloroacetate,DCA)干预对左肺切除(pneumonectomy,PE)联合野百合碱(monocrotaline,MCT)皮下注射诱导大鼠肺动脉高压(pulmonary arterial hypertension,PAH)的治疗作用以及对生存素(survivin)表达的影响.方法 雄性SD大鼠(体重200 g～250 g)采用随机数字表法随机分为5组,每组8只:正常对照组(N),DCA对照组(D),肺高压模型组(PM),早期DC预防组(PMD1),晚期DCA治疗组(PMD2).除N组和D组外,其余组别大鼠均行左肺切除,并于14 d后项背部皮下注射MCT(剂量为60 mg/kg).同时PMD1组和PMD2组分别在左肺切除14 d和35 d后开始每天给予DCA(剂量为80 mg· kg-1·d-1)灌胃,而PM组在左肺切除14 d后给予相同容积的生理盐水灌胃,D组同N组大鼠,只是左肺切除14 d后同样给予相同剂量的DCA灌胃.PMD1组和PMD2组大鼠分别在左肺切除35 d和56 d行开胸进行肺动脉压力(PAP)的测量.测量后处死动物,取肺组织进行常规病理染色,采用荧光定量PCR法检测survivin mRNA的表达,采用western blot法检测大鼠survivin蛋白的表达.结果 PM组大鼠平均PAP为(37.8±1.3) mm Hg(1 mm Hg=0.133 kPa),肺小血管中膜厚度占外径的百分比(WT％)和右心室与左心室加室间隔之比(RV/LV+S)分别为(40±8)％和(44.8±2.2),survivin mRNA和Western blot蛋白表达分别为(4.03±0.27)和(0.684±0.055),与N组、D组比较均明显升高(P＜0.05).早期DCA预防后PAP明显下降为(26.2±1.5) mm Hg,WT％和RV/LV+S分别降为(24±3)％和(29.5±1.9),而survivin mRNA和western blot蛋白表达也分别降为(2.00±0.12)和(0.415±0.027),与PM组比较均明显下降(P＜0.05),而晚期干预后PAP为(36.0±1.6) mm Hg,WT％和RV/LV+S分别为(38±3)％和(42.0±1.3),survivin mRNA和western blot蛋白表达也分别(3.77±0.45)和(0.732±0.101),与PM组比较没有统计学差异(P＞0.05).结论 Survivin在PAH的发生及肺血管重构中起重要作用,而DCA早期预防能缓解PAP升高和肺血管中膜增厚以及降低survivin的表达量,然而晚期干预后和PM组比较差异没有统计学意义.     

胃转流术对非肥胖型GK大鼠脂肪组织中SPARC蛋白和GLUT-4蛋白表达的影响

目的观察胃转流术(GBP)对Goto-Kakizaki(GK)/Wister大鼠脂肪组织中葡萄糖转运体4(GLUT-4)和富含半胱氨酸的酸性分泌蛋白(SPARC)表达的影响,探讨GBP改善胰岛素抵抗(IR)的可能机制。方法将健康雄性GK大鼠随机分为糖尿病手术组(DO组,行GBP)、糖尿病假手术组(DS组,行假手术)和糖尿病对照组(DC组,不做任何处理),另设健康雄性Wister大鼠作为正常对照组(NC组,不做任何处理),每组8只。分别于术前及术后第1、2、4和8周记录4组大鼠的体质量,检测空腹血糖(FPG)、空腹血清胰岛素(Fins)和糖化血红蛋白(HbA1c)水平,并计算术前及术后第8周时的胰岛素敏感指数(QUICKI);采用Western blot法检测4组大鼠术后第8周脂肪组织中GLUT-4蛋白和SPARC蛋白的表达水平。结果①体质量:DO组大鼠术后第2周和4周的体质量与术前相比均降低(P0.05),而术后第8周时体质量逐渐上升至正常水平,与术前比较差异无统计学意义(P0.05);术后各时点DO组大鼠的体质量低于同时间点DS、DC和NC组(P0.05)。②FPG:DO组大鼠术后第2、4和8周的FPG水平与术前相比均较低(P0.05);DO组大鼠自术后第2周开始FPG水平低于DS组和DC组(P0.05),而DS组和DC组大鼠各时间点的FPG水平比较差异均无统计学意义(P0.05)。③Fins:DO组大鼠术后第2周时的Fins水平高于术前(P0.05),第4周和第8周逐渐下降至正常水平,同时点与NC组比较差异不大;术后第2周时,DO组大鼠的Fins水平高于DS组和DC组(P0.05),而DS组和DC组大鼠的Fins水平比较差异无统计学意义(P0.05)。④HbA1c:与术前比较,DO组大鼠自术后2周开始HbA1c水平有逐渐下降趋势,但术后各时点与术前比较差异均无统计学意义(P0.05);术后第8周时,4组大鼠的HbA1c水平比较差异无统计学意义(P0.05)。⑤QUICKI:与术前比较,术后8周时DO组大鼠的QUICKI值上升,差异有统计学意义(P0.05);术后8周时,DO组和NC组大鼠的QUICKI值较DS组和DC组高,差异有统计学意义(P0.05),但DO组和NC组、DS组和DC组比较差异均无统计学意义(P0.05)。⑥GLUT-4和SPARC蛋白:术后8周时,与DC组、DS组和NC组比较,DO组大鼠的GLUT-4蛋白的相对表达水平升高,而SPARC蛋白的相对表达水平降低(P0.05),但DC组、DS组和NC组大鼠的GLUT-4蛋白和SPARC蛋白的相对表达水平比较差异均无统计学意义(P0.05)。结论 GBP可能通过调节GK大鼠脂肪组织中GLUT-4/SPARC蛋白的表达水平,改善脂肪细胞的胰岛素抵抗,从而提高GK大鼠的胰岛素敏感性。     

丹参酮ⅡA磺酸钠抑制膀胱出口部分梗阻大鼠a-SMA的表达及其机制研究

目的:观察丹参酮ⅡA磺酸钠(STS)对膀胱出口部分梗阻(PBOO)大鼠膀胱中a-SMA表达的影响,探究其可能的作用机制。方法:通过膀胱颈部分结扎法建立大鼠PBOO模型,24只SD大鼠随机分为PBOO组、STS治疗组(STS组)以及假手术组(Sham组),每组8只。STS组每天给予STS腹腔注射(10 mg/kg),持续4周。PBOO组及Sham组给予等量生理盐水腹腔注射。应用透射电镜及Masson染色检测膀胱组织中胶原纤维的表达,免疫组化和RT-PCR检测膀胱中a-SMA的蛋白及mRNA的表达,应用Western blot检测膀胱组织中ERK1/2、P-ERK1/2蛋白的表达。结果:PBOO组胶原纤维表达量高于Sham组(P0.05),STS组胶原纤维表达量低于PBOO组(P0.05)。PBOO组a-SMA蛋白及mRNA表达高于Sham组(P0.05),STS组低于PBOO组(P0.05)。三组ERK1/2蛋白表达差异无统计学意义(P0.05),P-ERK1/2蛋白的表达,PBOO组高于Sham组,STS组低于PBOO组(P0.05)。结论:STS能够抑制PBOO大鼠a-SMA的表达,其机制可能是通过抑制MAPK通路中ERK1/2蛋白的活化实现的。     

辛伐他汀促进脊髓损伤后神经功能修复的实验研究

目的:探讨脊髓损伤后急性期应用辛伐他汀对大鼠脊髓神经功能修复的影响。方法:成年雌性SD大鼠32只,假手术组(A组)8只,只做椎板切除,不损伤脊髓,不给药,重物坠落法制作脊髓损伤模型24只,损伤大鼠随机分为三组:羧甲基纤维素钠溶液组(B组)、5mg/kg辛伐他汀治疗组(C组)和10mg/kg辛伐他汀治疗组(D组)(n=8)。术后1d开始灌胃给予辛伐他汀每天一次,连续治疗5周。术后1d、3d以及1～8周,进行BBB评分、斜板试验评价大鼠脊髓神经功能,在第8周时电生理检测大鼠运动及感觉功能的恢复情况,随后处死取材,病理学检查(Luxol fast blue染色)观察残余髓鞘情况。结果:术后2周时,BBB评分D组高于B组(P<0.05);建模3周～8周,BBB评分D组及C组均高于B组(P<0.05),且D组最高(P<0.05)。建模3周时,斜板试验D组及C组均大于B组(P<0.05),且4周～8周,D组角度均大于C组(P<0.05)。感觉诱发电位检查发现,D组,C组的潜伏期小于B组(P<0.05),且D组波幅高于B组(P<0.05)。病理学检查,D组,C组比B组有更多的髓鞘残余(P<0.05)。结论:辛伐他汀急性期治疗脊髓损伤可以促进大鼠损伤脊髓神经功能修复。     

大鼠椎骨错缝模型下丘脑及背根神经节P物质含量的实验研究

目的:检测腰椎椎骨错缝对大鼠下丘脑及背根神经节中P物质含量的影响。方法:选取120只体质量为350~450 g的SPF级雄性SD大鼠随机分为旋转固定组(RF组)、单纯固定组(SF组)和假手术组(Sham组)。RF组和SF组大鼠腰椎L4-L6节段植入的椎体外部连接固定装置,RF组大鼠使L5棘突向右侧旋转,造成L5棘突与L4和L6棘突的不共线;SF组大鼠单纯植入椎体外部连接固定装置不进行旋转。Sham组大鼠不植入椎体外部连接固定装置,只切开后缝合。分别于手术后1、4、8和12周结束时,检测各组大鼠下丘脑及背根神经节中P物质含量。结果:手术1、4、8周后,RF组和SF组大鼠下丘脑中P物质含量均低于Sham组大鼠(P<0.05);手术1、4、8、12周后,RF组和SF组大鼠背根神经节中P物质含量均高于Sham组大鼠(P<0.05);固定12周后,RF组和SF组大鼠下丘脑中P物质与Sham组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:椎骨错缝可抑制下丘脑中P物质的镇痛作用,促进背根神经节中P物质的合成和传递,从而引起或加剧疼痛。     

山莨菪碱对急性坏死性胰腺炎肺损伤的治疗作用

我们以牛磺胆酸钠诱导大鼠 ,观察山莨菪碱对急性坏死性胰腺炎 (ＡＮＰ)大鼠肺脏形态和功能变化的影响以及对炎症介质的调节作用。一、材料和方法1 .材料 :雄性ＳＤ大鼠 69只 ,体重32 0～ 350 ｇ。肿瘤坏死因子 α(ＴＮＦ α)测试盒为Ｅｎｄｏｇｅｎ公司产品。2 .方法 :(1 )ＡＮＰ模型制备 :ＡＮＰ模型制备参照文献 [1 ]。假手术组 (ＳＯ)大鼠仅作剖腹术。 (2 )实验分组 :大鼠随机分 3组 :ＡＮＰ +ＮＳ组 (ｎ =2 3)、ＡＮＰ +山莨菪碱组 (ｎ =2 3)和ＳＯ组 (ｎ =2 3)。ＡＮＰ山莨菪碱治疗组术后 2、5、8、1 1ｈ分次经腹腔注射山莨菪碱生理盐…