钙调蛋白与特发性脊柱侧凸

机体内几乎所有的生理生化活动均有Ca2 的参与,如细胞间信息的传递,细胞的运动、分化、增殖,神经递质的合成、运输、释放,肌肉及微管的收缩等。而Ca2 的这些功能均需通过与其受体蛋白——钙调蛋白(calmodulin,CaM)相结合后才能完成[1]。近年来人们发现CaM不仅在调节细胞正常的生理活动中起着关键作用,而且参与了许多疾病的发生和发展过程。青少年特发性脊柱侧凸(adolescentidiopathicscoliosis,AIS)是最常见的脊柱畸形,其发病机理目前仍然不清。近年来CaM与脊柱侧凸的关系已有不少研究[2、3],综述如下。1CaM的生化特性CaM是一种酸性可…     

青少年特发性脊柱侧凸患者椎旁肌中钙调蛋白的表达及临床意义

目的:探讨青少年特发性脊柱侧凸(AIS)患者椎旁肌钙调蛋白的表达及其对肌浆网钙离子通道的影响。方法:AIS患者共30例,Cobb角40°～100°,其中Cobb角≥50°者15例(A组),Cobb角<50°者15例(B组);对照组(C组)5例患者均为非脊柱侧凸病例。于手术中取A、B组患者顶椎区两侧椎旁肌、取C组患者非病变部位两侧椎旁肌作为标本进行分子生物学分析,采用RT-PCR方法检测所有标本钙调蛋白和肌浆网钙离子通道的mRNA表达量。结果:A、B组患者椎旁肌钙调蛋白mRNA的表达比C组高(P<0.05),并且A组患者凸侧椎旁肌钙调蛋白mRNA显著高于凹侧(P<0.05),而B组患者其凹凸侧钙调蛋白mRNA没有显著性差异(P>0.05);C组椎旁肌肌浆网钙离子通道mRNA的表达比A组患者高(P<0.05),A组患者凸侧椎旁肌肌浆网钙离子通道mRNA显著低于凹侧(P<0.05),而B组患者其凹凸侧肌浆网钙离子通道mRNA没有显著性差异。结论:钙调蛋白mRNA在AIS患者椎旁肌中的表达较无脊柱侧凸者高,而且其表达随着侧凸程度的加重而增高;AIS患者椎旁肌肌浆网钙离子通道表达有异常,钙调蛋白的过度表达可能导致了钙离子通道的损伤。     

褪黑素受体1B基因多态性与青少年特发性脊柱侧凸的相关性研究

系列研究证明了青少年特发性脊柱侧凸（AIS）存在遗传性。另外，有证据表明AIS可能与褪黑素缺乏及褪黑素信号途径功能障碍有关。褪黑素受体1B（MTNR1B）基因位于与AIS相关的染色体片段上，其可能与AIS的发病有关。本文作者通过人类基因组单体型图（Hapmap）计划采集一组示踪单核苷酸多态性（tagSNPs）来研究MTNR1B基因的多态性，[第一段]     

Matrilin-1基因多态性与青少年特发性脊柱侧凸易感性的关系

疾病严重程度有关.     

褪黑素受体1A基因多态性与青少年特发性脊柱侧凸相关性研究

目的研究褪黑素受体1A基因（MTNR1A）多态性与青少年特发性脊柱侧凸（AIS）发生发展的关系。方法共纳入226例AIS患者及277例正常对照者。记录AIS患者组最大Cobb角。采用PCR-RFLP的方法对MTNR1A基因启动子区域多态性位点rs2119882进行基因分型。结果AIS患者组MTNR1A基因多态性位点rs2119882的基因型及等位基因分布与正常对照组比较没有明显差异。在AIS组内,多态性位点rs2119882不同基因型所对应的最大Cobb角没有明显差异。结论MTNR1A基因rs2119882位点多态性与AIS的发生发展都没有关系。     

褪黑素、5-羟色胺和钙调蛋白在青少年特发性脊柱侧凸发病中的作用

青少年特发性脊柱侧凸（AIS），是一种青春期发病的脊柱不对称性旋转畸形。AIS的发病率为1．5％～3％，男女发病比例约为1：2．1，并且随着弯度的增长，女性比例逐渐增大；弯度分布主要集中在10～20°，约占90％。关于AIS病因的假说众多，本文通过文献回顾，仅对内分泌学说中的褪黑素、5-羟色胺和钙调蛋白展开讨论。[第一段]     

青少年特发性脊柱侧凸生长激素基因多态性研究

目的 研究生长激素(GH)基因多态性与青少年特发性脊柱侧凸(AIS)发生发展的关系.方法 本研究包括265例AIS患者及193名正常对照.在AIS患者组,记录其最大Cobb角.采用PCR-RFLP的方法 对GH基因启动子区域多态性位点rs2854184进行基因分型.结果 在AIS患者组,GH基因rs2854184多态性位点的3个基因型AA、AT、TT分别占38.3%,50.3%,11.4%,正常对照组分别占39.6%,50.2%,10.10k,2组比较差异无统计学意义.同样,在MS患者组rs2854184多态性位点的2个等位基因A、T分别占63.5%,36.5%,正常对照组分别占64.7%,35.3%,2组比较差异无统计学意义.另外在AIS组内,多态性位点rs2854184不同基因型所对应最大Cobb角分别是从33.8°±10.0°,AT 36.4°±15.0°,TT34.5°±9.1°,3者比较差异无统计学意义.结论 GH基因rs2854184位点多态性与AIS的发生发展没有明显关系.     

青少年特发性脊柱侧凸患者胰岛素样生长因子-1受体基因多态性研究

目的 探讨胰岛素样生长因子-1受体(IGF-1R)基因多态性与青少年特发性脊柱侧凸(AIS)易感性之间的关联性.方法 实验对象为200例MS患者(AIS组)和200名年龄、性别匹配的健康青少年(对照组),记录AIS组的身高、体蓖、月经初潮年龄(女性)、侧弯类型、最大Cobb角和Risser征等临床指标.采用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)的方法对所有研究对象进行IGF-1R基因分型,比较不同基因型在AIS组和对照组之间的分布差异,并分析基因多态性与临床指标的相关性.结果 AIS组与对照组的IGF-1R基因等位基因及基因型分布无统计学差异(P＞0.05).女性AIS患者不同基因型所对应的最大Cobb角、Risser征及月经初潮年龄之间差异也无统计学意义(P＞0.05).结论 IGF-1R基因多态性与AIS的发生发展均无相关性.     

Matrilin-1基因多态性对青少年特发性脊柱侧凸进展的预测价值

目的 探讨Matrilin-1基因多态性在预测青少年特发性脊柱侧凸(adolescent idiopathicscoliosis,AIS)是含进展为严重脊柱侧凸方面的价值.方法 2006年6月至2007年3月在我院就诊的AIS患者267例,男40例,女227例.104例手术治疗,163例定期门诊随访,记录患者末次随访或术前最大Cobb角、初潮年龄、侧凸弯型、身高、臂长及体重.选取Matrilin-1基因启动子区域位点rs1149048进行聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(polymerase chain reaction-restriction fragment length poly-morphism,PCR-RFLP)基因分型.进展型侧凸(脊柱侧凸进展成为严重脊柱侧凸)定义为骨骼发育未成熟时Cobb角>40°或骨骼发育成熟时Cobb角>50°.AIS患者被分为进展型与非进展型两组,比较两组间的临床特征及基因型分布的差异.分析侧凸进展的危险因素.结果 267例AIS患者中162例(60.7%)为非进展型,105例(39.3%)为进展型.进展型组月经初潮年龄较晚(>13岁),且三弯及胸腰双主弯所占比例高,基因型GG的个体在进展型组比例高(55.2%).初潮年龄晚、三弯、胸腰双主弯及基因型CG为侧凸进展的危险因素.结论 Matrilin-1基因多态性可被用来预测AIS进展,结合其他相关预测因素可提高预测的准确性.     

青少年特发性脊柱侧凸患者雌激素受体基因多态性与骨密度的关系

目的探讨青少年特发性脊柱侧凸患者雌激素受体基因多态性与骨密度的关系。方法取青少年特发性脊柱侧凸女性患者92例,年龄10～19岁,Cobb角25°～134°,应用聚合酶链反应限制性片段长度多态(PCRRFLPs)的方法分析雌激素受体基因型,同时用双能X线骨密度吸收仪分别对其腰椎(L24)和股骨近端(股骨颈、大转子、Wards三角)的骨密度进行测量。结果特发性脊柱侧凸患者雌激素受体基因型PvuⅡ多态性PP,Pp,pp型分别为19.6%,46.7%,33.7%,XbaⅠ多态性XX,Xx,xx型分别为22.8%,33.7%,43.5%;XX型的腰椎、股骨大转子和Wards三角的骨密度明显低于xx型(P<0.05),而PvuⅡ基因的各基因型与骨密度无关;联合分析PvuⅡ和XbaⅠ位点,PPXX基因型的腰椎、股骨大转子和Wards三角的骨密度明显低于Ppxx和ppxx型(P<0.05)。结论雌激素受体XbaⅠ基因多态性与特发性脊柱侧凸患者的骨密度有关,PPXX基因型的骨密度较低,有助于较早发现特发性脊柱侧凸的低骨量者。     

Association of calmodulin1 gene polymorphisms with susceptibility to adolescent idiopathic scoliosis

Objective: To investigate whether: (i) rs12885713 (?16C > T) and rs5871 polymorphisms in the Calmodulin1 (CALM1) gene are predisposing factors for adolescent idiopathic scoliosis (AIS); and (ii) different single nucleotide polymorphisms (SNP) correlate with different subtypes of AIS. Methods: A total of 100 AIS patients with Cobb angle above 30° were recruited for this study together with 100 healthy controls. Curve pattern, Cobb angle, and Risser sign were recorded. Two polymorphic loci, rs12885713 (?16C > T) and rs5871 loci, of the CALM1 gene were analyzed. All patients were grouped according to the Peking Union Medical College (PUMC) classification, the apical location of the major curve, and the Cobb angle. Results: There was a statistically significant difference in the distribution of rs12885713 site polymorphism (P = 0.034) between PUMC type II (double curve) patients and controls, in the distribution of rs12885713 site polymorphism (P = 0.009) between lumbar curve cases and controls and in the distribution of rs5871 site polymorphism (P = 0.035) between thoracic curve patients and controls. Conclusion: Different subtypes of AIS might be related to different SNP. The susceptibility of PUMC type II (double curve) AIS and lumbar curve might be related to CALM1 rs12885713 site polymorphism, while rs5871 site polymorphism might be a risk indicator for thoracic curve cases.     

Association between adolescent idiopathic scoliosis with double curve and polymorphisms of calmodulin1 gene/estrogen receptor‐α gene

Objective: To investigate whether single nucleotide polymorphisms (SNP) of the calmodulin1 (CALM1) and estrogen receptor‐α genes correlate with double curve in adolescent idiopathic scoliosis (AIS). Methods: A total of 67 Chinese patients with AIS with double curve and 100 healthy controls were recruited. Curve pattern and Cobb angle of each patient were recorded. The Cobb angle is at least 30°. There were 60 patients with Cobb angle ≥ 40°. According to the apical location of the major curve, there were 40 thoracic curve patients. Four polymorphic loci, including rs12885713 (−16C > T) and rs5871 in the CALM1 gene and rs2234693 (Pvu II) and rs9340799 (Xba I) in the estrogen receptor 1 (ER1) gene were analyzed by the ABI3730 genetic analyzer. Results: The current study indicates that: (i) there are statistical differences between patients with double curve, with Cobb angle ≥ 40° and with thoracic curve and healthy controls in the polymorphic distribution of the rs2234693 site of the ER1 gene, (P= 0.014, 0.0128, 0.0184 respectively); (ii) there is a difference between patients with double curve and controls in the polymorphic distribution of the rs12885713 site in the CALM1 gene (P= 0.034); and (iii) there is a difference between thoracic curve patients and controls in the polymorphic distribution of the rs5871 site in the CALM1 gene (P= 0.0102). Conclusions: Different subtypes of AIS might be related to different SNP. A combination of CALM1 and ER1 gene polymorphisms might be related to double curve in patients with AIS. Further study is necessary to confirm these hypotheses.     

AANAT基因与青少年特发性脊柱侧凸的关联研究

目的 探讨人体内褪黑素合成通路与青少年特发性脊柱侧凸(adolescent idiopathic scoliosis,AIS)发病之间的关系.方法 以单核苷酸多态性(SNP)位点为遗传标记,用测序法对性别(女性比率分别为77.67%和75.00%,P=0.648)和年龄[平均年龄分别为(15.18±2.15)岁和(15.58±2.50)岁,P=0.217]匹配的103例AIS患者和108例对照组进行基因分型筛查,对最小等位基冈频率(MAF)≥5%的位点结果 分别用SNPStats软件在线进行Hardy-Weinberg遗传平衡检验和单位点统计分析,用Unphased V3.07进行连锁不平衡(LD)检验和单倍体分析.结果 位于功能区的9个SNPs位点中只有rs28936679、rs4238989和rs3760138三个位点满足MAF≥5%,并满足Hardy-Weinberg遗传平衡检验;单位点分析结果 显示,5个Logistic回归分析模型检验的所有P值均＞0.05,提示这3个位点与AIS的发病无关;LD检验显示它们之间没有两个处在同一个单倍体块(D＞0.8)上,因而无法进行单倍体检验.结论 AANAT基因不是AIS的易感基因,我们需要对其他褪黑素合成相关的酶基因进行筛查研究.     

Matrilin-1基因多态性与青少年特发性脊柱侧凸支具疗效的相关性

目的 探讨matrilin-1基因多态性与青少年特发性脊柱侧凸(AIS)患者支具治疗效果的相关性.方法 自2005年1月至2008年12月,对门诊行规范化支具治疗的AIS患者进行前瞻性研究.入选对象要求:女性患者;骨骼发育为未成熟状态(Risser征0～3级);月经初潮未至或来潮1.5年以内;标准站立位全脊柱X线片上侧凸Cobb角为20°～40°;排除了先天性和神经肌源性以及其他原因引起的侧凸;无已知的可影响骨塑型和钙代谢的病史和药物使用史;初诊前无支具治疗史;接受支具治疗(Boston支具或Milwaukee支具)期间每3个月复诊1次,随访时间超过2年.符合下述条件之一者,则予以剔除:最终随访不足2年;支具治疗过程中依从性(每日实际佩戴时间与建议佩戴时间的比值)较差(<75%);支具治疗期间未按照医嘱自行更换支具.根据患者侧凸类型选择相应的支具进行治疗.记录初次就诊及末次随访的原发弯的Cobb角.支具治疗失败的标准为原发弯增加>5°.选取matrilin-1基因启动子区域位点rs1149048进行PCR-RFLP基因分型.按支具疗效分为治疗失败和治疗成功两组,比较两组之间的初诊年龄、Risser征、侧凸类型、初诊Cobb角及基因型分布的差异并进行统计学分析.结果 共有77例AIS女孩入选并完成本研究.初诊时平均年龄为(13.0±1.5)年,平均主弯Cobb角为29.5°±7.8°.在平均(2.6±0.3)年随访后,平均主弯Cobb角为30.3°±11.9°.支具治疗失败总共19例(24.7%),支具治疗成功58例(75.3%).支具治疗失败组的初诊Cobb角较大(P>0.05).在不同的侧凸类型中,胸腰双主弯的支具治疗失败率最低(19.4%).基因型GG个体支具治疗失败率(66.7%)明显高于基因型为从或AG的个体.结论 通过早期规范化支具治疗,大部分脊柱侧凸进展可得到控制.初诊Cobb角较大及基因型GG的AIS患者支具疗效较差.     

HTR1A和HTR1B基因与青少年特发性脊柱侧凸的关联研究

目的 研究HTR1A和HTR1B基因多态性与青少年特发性脊柱侧凸(MS)的发生及其表型(性别、Cobb角和PUMC分型)间的关系.方法 对2006年1月至2007年3月诊治的103例MS患者和同期就诊或健康体检的性别和年龄匹配的108例对照者,以单核苷酸多态性(SNPs)位点(rs6294和rs6296)为遗传标记进行分型筛查,对结果分别进行基于等位基因和基因型的单位点关联分析、基因型与表型关联分析.结果 rs6294位点(THR1A基因)的等位基因A在病例组中的频率要明显高于对照组,差异有统计学意义(P=0.041).该位点在病例组中的基因型分布与PUMC分型相关(P=0.008),它的基因型A/A+A/G与PUMCⅢ型患者的发病相关.结论 HTR1A基因可能是PUMCⅢ型脊柱侧弯的一个易感基因,PUMC分型可能有一定的遗传学基础.