巢式甲基化特异性聚合酶链反应法检测甲状腺患者血浆p16基因启动子区域异常甲基化及其临床意义

目的 探讨甲状腺癌患者血浆p16基因启动子区域异常甲基化及其在甲状腺癌筛查及早期诊断中的价值,为甲状腺癌的早期诊断提供依据.方法 利用巢式甲基化特异性聚合酶链反应(nested methylation specific PCR,nMSP)法检测50例甲状腺癌患者和32例结节性甲状腺肿患者组织和血浆中p16基因启动子区域的异常甲基化情况;分析p16基因异常甲基化与甲状腺癌临床特征的相关性及血浆p16基因异常甲基化与肿瘤组织检测结果之间的一致性.结果 甲状腺癌患者组织中p16基因启动子区甲基化率为54％(27/50),血浆标本中p16基因启动子区甲基化率为52％(26/50),两者有很好的一致性(P＞0.05);结节性甲状腺肿患者组织标本和血浆标本中均未见p16基因启动子区甲基化,与甲状腺癌患者相比,差异均有统计学意义(P＜0.01);血浆标本p16基因甲基化检测敏感度为52％,特异度为100％.结论 血浆中p16基因启动子区域异常甲基化的检测有望成为甲状腺癌筛查和早期诊断的有效指标.     

5-氮-2’脱氧胞苷对急性粒细胞性白血病细胞系HL-60中CDH13基因甲基化的影响

目的分析探讨5-氮-2’脱氧胞苷对急性粒细胞性白血病细胞系HL-60中CDH1基因甲基化的影响。方法5-Aza-dC处理培养的HL-60细胞，用甲基化特异性PCR（MSP）法检测处理前后细胞中CDH13基因的甲基化状态，RT—PCR法检测用药前后细胞中CDH1mRNA表达的变化。结果HL-60中CDH13启动子区发现甲基化，应用5-Aza—dC能使CDH1基因启动子区CpG岛去甲基化，而且经药物处理后CDH13mRNA的表达较前明显增强。结论5-Aza—dC能逆转CDH13基因甲基化状态，从而调控CDH13基因表达。     

过氧化物酶体增殖物激活受体基因甲基化与子痫前期的相关性分析

目的探讨过氧化物酶体增殖物激活受体(PPARα)基因启动子的甲基化水平及基因表达情况与子痫前期之间的相关性。方法选取2016年11月-2017年8月在甘肃省妇幼保健院产科分娩的67例子痫前期患者为观察组,56例正常分娩产妇为对照组。应用甲基化特异度聚合酶链反应(MSP)法和RT-PCR技术分析PPARα基因启动子区Cp G位点的甲基化水平及其mRNA表达情况。结果观察组患者外周血和胎盘组织PPARα基因63位点的甲基化程度明显低于对照组,差异均有统计学意义(均P0. 05)。观察组患者胎盘的PPARα基因mRNA表达量明显高于对照组,其外周血中蛋白浓度也显著高于对照组,差异均有统计学意义(均P0. 05)。胎盘组织和外周血的甲基化率呈显著正相关关系(r=0. 84,P0. 01)。结论 PPARα基因启动子区域Cp G位点低甲基化变化与子痫前期具有相关性。子痫前期发病可能与母体自身密切相关。     

ESR1和 PRKN基因甲基化在多囊卵巢综合征发病中的作用及机制研究

目的探讨ESR1和PRKN基因甲基化水平与多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome, PCOS)发生的关系及其机制。方法采用病例对照研究, 选取2021年1月至2021年6月期间在山西医科大学第一医院生殖医学科就诊的60例PCOS患者(PCOS组)及40例正常育龄妇女(对照组)为研究对象, 提取全血DNA及总RNA, 采用甲基化特异性聚合酶链反应(methylation specific polymerase chain reaction, MS-PCR)技术检测研究对象外周血ESR1和PRKN基因启动子区的甲基化状态, 并采用实时荧光定量PCR检测ESR1和PRKN基因mRNA表达水平, 分析ESR1和PRKN基因启动子区甲基化状态和mRNA表达水平与PCOS发生的关系。结果 PCOS组患者外周血ESR1基因启动子区甲基化水平[56.7%(34/60)]显著低于对照组[77.5%(31/40), P=0.035];PRKN基因启动子区甲基化水平[76.7%(46/60)]显著高于对照组[52.5%(21/40), P=0.012]。PCOS组患者外周血ESR...     

动脉粥样硬化病人雌激素受体基因的甲基化与高同型半胱氨酸血症关系的研究

目的探讨动脉粥样硬化(AS)患者雌激素受体(ER-α)基因启动子区CpG岛的甲基化改变,及其与血总同型半胱氨酸(tHcy)水平的关系。方法82例研究对象分为AS组(54例),对照组(28例),所有入选对象均行颈部血管彩超检查。巢式甲基化特异性PCR(nMSP)法检测研究对象ER-α启动子区CpG岛的甲基化状态,荧光生化法检测血tHcy水平,spearman等级相关分析甲基化程度与tHcy的相关关系。结果54例AS患者中有38例ER-α基因启动子区CpG岛甲基化,甲基化率为70.4%;28例健康对照者中有8例ER-α基因启动子区CpG岛甲基化,甲基化率为28.6%;两组甲基化率差异有显著性(P<0.05)。同时,AS组tHcy水平显著高于对照组(P<0.05),经spearman等级相关分析,ER-α基因启动子区甲基化程度与tHcy相关系数为r=0.809(P<0.05)。且随tHcy升高,AS病损程度亦递次加重。结论AS患者ER-α基因启动子区CpG岛高度甲基化,且甲基化程度与血tHcy浓度呈正相关,提示高Hcy血症很可能通过干扰ER-α基因的甲基化而促进AS的发生、发展。     

子宫内膜异位症中hMLHl表达缺陷与其启动子区甲基化的关系

目的 探讨错配修复基因(mismatch repair gene,MMR)hMLH1(human mutL homolog 1)在子宫内膜异位症(endometriosis,EMs)组织及正常子宫内膜组织中的表达,分析这种差异表达与hMLH1启动子区甲基化的关系.方法 选择2009年1月至10月本院收治的卵巢子宫内膜异位症患者23例的异位内膜标本纳人EMs组(所有患者术前未经激素治疗).选择同期在本院行节育术和子宫脱垂手术患者20例的正常子宫内膜标本纳入对照组.采用免疫组织化学SP法检测两组标本中hMLH1的表达,并从标本中提取DNA.采用甲基化特异性PCR(methylation specificity PCR,MSP)检测hMLH1启动子区的甲基化状态,比较两组hMLH1的表达情况及甲基化状态(本研究遵循的程序符合本院人体试验委员会所制定的伦理学标准,得到该委员会批准).结果 EMs组hMLH1表达阳性率为65%(15/23),对照组为95%(19/20),两组比较.差异有显著意义(P＜0.05).EMs组中,hMLH1启动子区完全和部分甲基化率为39%(9/23),对照组仅l例为部分甲基化,占5%(1/20),两组比较,差异有显著意义(P＜0.05).结论 hMLH1无表达在子宫内膜异位症的发生中起重要作用.hMLH1启动子区甲基化是导致hMLH1表达缺陷的部分原因.     

基因LSM2甲基化在上皮性卵巢癌发病中的作用研究

目的:检测上皮性卵巢癌患者肿瘤组织DNA中基因LSM2启动子区CpG岛(CpG island,CGI)的甲基化状态,探讨其在上皮性卵巢癌发病机制中的作用。方法:选取50例上皮性卵巢癌患者和25例卵巢良性病变患者作为实验组和对照组,提取肿瘤组织DNA,用Taqman实时荧光定量PCR(MethyLight)方法检测基因LSM2启动子区CGI在肿瘤组织DNA中的甲基化状态。结果:上皮性卵巢癌和卵巢良性病变患者肿瘤组织DNA中,基因LSM2启动子区CGI的甲基化率分别为10%(5/50)和32%(8/25),与卵巢良性病变患者相比,上皮性卵巢癌患者基因LSM2启动子区CGI的甲基化程度降低,差异具有统计学意义(χ2=5.318,P<0.05)。结论:基因LSM2启动子区CGI在上皮性卵巢癌患者肿瘤组织中呈现低甲基化改变,有可能成为新的上皮性卵巢癌特异性的低甲基化肿瘤标志物。     

燃煤污染型砷中毒人群MGMT基因甲基化、转录及表达的研究

目的了解O6-甲基鸟嘌呤DNA甲基转移酶基因(MGMT基因)启动子区甲基化、转录及表达以及DNA甲基转移酶1(DNMT1)的转录及表达与砷中毒的关系。方法采集68例燃煤污染型砷中毒(以下简称砷中毒)患者(轻度24例、中度28例、重度16例)及23例非病区居民外周血。用甲基化特异性PCR法(MSP)检测MGMT基因启动子区甲基化,实时荧光定量PCR(FQ-PCR)法检测MGMT及DNMT1 mRNA的水平。利用自愿手术治疗的砷中毒患者皮肤组织标本(61例,其中34例为一般病变,21例为癌前病变,6例为癌变)和对照皮肤组织标本(15例),以免疫组织化学(IHC)法检测砷中毒患者及对照皮肤组织中MGMT及DNMT1蛋白的表达。结果 MGMT基因启动子区甲基化阳性率与砷中毒程度有关(χ2=13.739,P0.01)。砷中毒组MGMT mRNA表达水平与对照组比较,差异无统计学意义(P0.05);MGMT基因启动子区甲基化患者和非甲基化患者之间MGMT mRNA和DNMT1 mRNA表达差异无统计学意义(P0.05)。但轻、中度患者DNMT1 mRNA表达明显低于对照组(P0.01);癌前病变组和癌变组皮肤组织中MGMT蛋白表达明显低于对照组(P0.01),与皮肤损害程度有关(rs=-0.446,P0.01);MGMT基因启动子区甲基化患者MGMT蛋白表达明显低于非甲基化组(P0.05)。砷中毒组皮肤组织中DNMT1蛋白表达强于对照组(P0.01),并与皮肤损害程度有关(rs=0.740,P0.01);且MGMT基因启动子区甲基化患者组织中DNMT1蛋白表达明显高于非甲基化组(P0.05)。结论 MGMT基因启动子区高甲基化抑制了燃煤污染型砷中毒患者皮肤组织中MGMT蛋白的表达,且DNMT1蛋白的高表达参与了此抑制过程。     

维吾尔族妇女子宫颈鳞癌MGMT基因甲基化检测

目的 检测O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶(O6-methylguanine-DNA methyltransferase,MGMT)基因启动子区甲基化与维吾尔族子宫颈鳞癌之间的相关性.方法 采用甲基化特异性聚合酶链反应(methylation spe-cific PCR,MSP)对41例维吾尔族妇女子宫颈鳞癌组织及32名正常维吾尔族妇女子宫颈组织进行甲基化检测.结果 32名正常子宫颈组织MGMT基因启动子区均未发生甲基化,为非甲基化状态;41例子宫颈鳞癌组织中共有13例发生MGMT基因启动子区甲基化(32%).结论 MGMT基因启动子区甲基化可能部分参与维吾尔族妇女子宫颈癌的发生发展过程,是维吾尔族子宫颈鳞癌发生过程中常见的分子事件,有可能作为维吾尔族妇女子宫颈癌诊断的肿瘤标志物.     

错配修复基因启动子甲基化对食管癌发生的作用

目的探讨食管癌组织中错配修复基因1(hMLH1)启动子区甲基化状态及与食管癌发生、发展的关系。方法应用甲基化特异性PCR和免疫组织化学链霉菌抗亲生物素蛋白-过氧化物酶连接法(S—P法)，检测92例人食管癌组织中hMLH1启动子甲基化状态及蛋白表达。结果92例食管癌组织中hMLH1基因启动子区甲基化有30例，占32．6％。HMLH1基因启动子区甲基化与食管癌的临床病理无明显相关性；hMLH1基因蛋白表达阳性率为76．1％；hMLH1基因蛋白表达阴性的22例病例中，17例发生了甲基化(77．6％)；而70例hMLH1基因蛋白表达阳性者中，只有13例发生甲基化(18．6％)。结论食管癌组织中hMLH1基因启动子区甲基化与hMLH1基因蛋白表达缺失密切相关，是导致其错配修复功能缺陷的重要原因之一，hMLH1基因启动子区甲基化可能在食管癌的发生和发展过程中发挥重要作用。     

维吾尔族妇女子宫颈癌CCNA1基因甲基化检测

目的:探讨CCNA1基因启动子区域甲基化与维吾尔族妇女子宫颈癌的相关性。方法:采用甲基化特异性PCR(MSP)方法,对40例子宫颈癌患者手术切除肿瘤组织及其40例正常子宫颈组织CCNA1基因启动子区域甲基化进行检测。结果:CCNA1基因在40例子宫颈癌中甲基化率为87.5%,正常子宫颈组织中甲基化率为2.5%,两者比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论:CCNA1基因启动子甲基化与维吾尔族妇女子宫颈癌发生相关。     

RASSF1A基因在膀胱移行细胞癌中转录表达和启动子甲基化的研究

目的探讨RAssF1A（RAS association domain family1A）基因mRNA表达水平和基因启动子区CPG岛甲基化的关系。方法：用半定量逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）技术鉴测37例膀胱移行细胞癌（bladdert tansitional cell Carcinoma,BTCC）组织和8例正常膀胱组织中RASSFIA基因mRNA表达水平;用甲基化特异性PCR（Methylation—Specific PCR,MSP）。方法研究膀胱移行细胞癌组织和正常膀胱组织中的RASSF1A基因启动子区CPG岛甲基化状态。结果RASSF1 AmRNA在8份正常膀胱组织中全部表达,在BTCC组织中的表达率为35．1％（13／37）,二组间表达差异有显著性（P〈0．05）,但在各肿瘤分期、病理分级间的表达差异无显著性（P〉0．05）。在正常膀胱组织中RASSF1A基因启动子未发生甲基化,但在BTCC组织中RASSFIA基因启动子甲基化频率为51．3％（19／37）。二组间表达差异有显著性（P〈0．05）。在19份启动子异常甲基化的BTCC标本中,有16份同时伴有RASSF1AmRNA表达缺失．,两者存在明显相关性（P〈0．05）。结论RASSFIA基因启动子在BTCC组织中发生异常甲基化,使RASSF1AmRNA表达缺失或下调,从而使RASSF1A基因失活,参与了肿瘤的发生,而与肿瘤的进展可能无关。     

SOCS-1基因启动子区甲基化与胃癌的关系

[目的]探讨细胞因子信号转导抑制分子-1（SOCS-1）基因启动子区甲基化在胃癌发生和发展过程中的意义。[方法]收集南京市原发性胃癌患者102例为胃癌组;采用1：1病例-对照研究方法,随机选取非消化系统疾病、非肿瘤患者102例为对照组。取外周血提取DNA,采用甲基化特异性PCR检测胃癌组及对照组外周血DNASOCS-1基因启动子区甲基化状态。[结果]胃癌组SOCS-1基因启动子区甲基化率为38.24％（39／102）,对照组为12.75％（13／102）。两组OR=4.2381（95％CI：2.0924-8.5840）。两组中年龄及性别亚组问的甲基化率差异均无统计学意义（P〉0.05）。[结论]SOCS-1基因启动子区异常甲基化可能是肿瘤特异性的,在胃癌的发生、发展中可能具有一定的作用。     

皮肤鳞状细胞癌中FHIT基因启动子甲基化与FHIT蛋白表达的临床意义

[目的]检测皮肤鳞状细胞癌中FHIT基因的异常甲基化及其表达情况,探讨其异常甲基化与皮肤鳞状细胞癌发生的相关机制及其与临床病理分型的关系。[方法]采用甲基化特异性PCR应方法,测定32例皮肤鳞状细胞癌组织标本FHIT基因启动子甲基化情况,免疫组织化学方法检测其蛋白表达情况。[结果]32例病变癌组织中,有17例发生了甲基化,阳性率为53.1%;皮肤鳞状细胞癌及正常皮肤组织中FHIT蛋白的阳性表达率分别为43.75%(14/32)和100%(20/20),FHIT基因的甲基化与其蛋白的表达和病变组织的组织学分级、淋巴结转移状况均有一定的关联(P﹤0.01)。[结论]FHIT基因的甲基化可能参与疾病的发生发展,且与其临床病理有一定关系,是影响皮肤鳞状细胞癌预后的重要因素之一。     

IL-10基因启动子区CpG岛甲基化与宫颈癌的相关性研究

目的:探讨IL-10基因启动子甲基化与HPV感染导致宫颈癌的相关性。方法:采用PCR和甲基化特异性PCR(MSP)分别检测宫颈癌49例、癌前病变50例(19例CIN1、10例CIN2、21例CIN3)及正常对照50例宫颈组织中HPV16及IL-10基因启动子甲基化状态,并分析IL-10基因甲基化状态与不同临床病理特征之间的联系。结果:宫颈癌组及癌前病变组IL-10基因甲基化率与对照组比较差异均有统计学意义(P﹤0.05)。宫颈癌组IL-10基因甲基化和HPV16 E7 DNA检测结果有一定的关联性(χ2=20.163,P<0.05,Pearson列联系数r=0.345)。不同年龄、肿瘤组织大小、病理分级、临床分期及有无淋巴结转移和IL-10基因甲基化未见明显关系(P>0.05)。结论:宫颈癌IL-10基因启动子CpG岛甲基化与高危型HPV16感染具有关联性,IL-10基因启动子区低甲基化与宫颈癌发病相关。     

PTEN异常表达及甲基化与膀胱移行细胞癌的关系

目的:探讨PTEN基因mRNA异常表达及其启动子甲基化与膀胱移行细胞癌的关系。方法:应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测膀胱移行细胞癌组织48例和正常对照15例PTEN基因mRNA的表达水平和应用甲基化特异性PCR(MSP)法检测启动子的甲基化。结果:PTEN基因mRNA在膀胱癌患者的表达在48例中有27例,而正常对照全部有表达;正常对照全部未检测到PTEN基因启动子甲基化,而膀胱癌患者启动子甲基化有23例。结论:PTEN基因mRNA表达缺失可能与启动子甲基化有关,在膀胱移行细胞癌的发生、发展及转移过程中起重要作用。     

子宫内膜癌miR-129-2甲基化与微卫星不稳定性的关系研究

目的探讨子宫内膜癌患者miR-129-2甲基化状态与微卫星不稳定性的关系及其与子宫内膜癌临床病理特征间的关系。方法选取2017年3月-2019年3月温州市中心医院接受治疗的子宫内膜癌患者51例作为子宫内膜癌组,另选取因绝经期阴道不规则出血和月经紊乱需行子宫内膜病理检查者59例作为对照组,检测两组子宫内膜癌组织中miR-129-2基因启动子甲基化状态与微卫星不稳定状态,检测两者与子宫内膜癌临床病理参数相关性,检测miR-129-2基因启动子甲基化状态与微卫星不稳定状态之间相关性,采用Logistic分析影响子宫内膜癌发生危险因素。结果与对照组相比,子宫内膜癌组miR-129-2基因Cp G岛发生甲基化率、微卫星不稳定阳性率显著升高,差异有统计学意义(P<0.05);miR-129-2甲基化状态、微卫星不稳定状态与子宫内膜癌分化程度、临床分期、远处转移密切相关,差异有统计学意义(P<0.05);根据微卫星不稳定状态,将子宫内膜癌患者分成微卫星不稳定阴性组36例,微卫星不稳定阳性组15例,两组miR-129-2甲基化比例差异无统计学意义(P>0.05);Logistic分析显示,miR-129-2甲基化、微卫星不稳定是子宫内膜癌发生危险因素(OR=2.726,1.898,P<0.05)。结论子宫内膜癌组织中miR-129-2基因甲基化、微卫星不稳定性可能参与子宫内膜癌进程,miR-129-2基因甲基化与微卫星不稳定性无明显相关性。     

MSP法检测膀胱移行细胞癌PTEN启动子甲基化的实验研究

目的:探讨甲基化特异性PCR(MSP)法检测膀胱移行细胞癌PTEN基因启动子甲基化的方法及意义。方法:应用甲基化特异性PCR(MSP)法检测膀胱移行细胞癌组织(48例)和正常膀胱组织(15例)PTEN基因启动子甲基化状态。结果:膀胱癌组织中PTEN启动子甲基化率为47.9%(23/48),而在15例正常膀胱组织中其启动子未发生甲基化,两组间差异具有统计学意义(P<0.01)。结论:MSP法检测膀胱移行细胞癌PTEN基因启动子甲基化可行。     

p53基因甲基化和突变与燃煤污染型砷中毒关系研究

目的 探讨燃煤砷污染对人体p53基因甲基化(启动子区及第5外显子)和突变(第5外显子)的影响,分析其与燃煤型砷中毒的关系.方法 在贵州省兴仁县燃煤型砷中毒病区选择112例砷中毒患者,根据病情将其分为轻度中毒组(38例)、中度中毒组(43例)和重度中毒组(31例);根据有皮肤病理学诊断患者(43例)的病理结果,将其分为非癌变组(24例)和癌变组(19例).选择条件相似的非砷暴露村90名居民作为对照组.在知情同意原则下,采集上述观察对象的外周血,应用限制性内切酶-PCR法检测p53基因启动子区及第5外显子甲基化情况,应用PCR-单链构象多态性技术及PCR产物克隆测序技术检测p53基因第5外显子突变情况.结果 p53基因启动子区甲基化阳性率在轻、中、重度组分别为13.16%(5/38)、27.91%(12/43)、45.16%(14/31),与对照组[1.11%(1/90)]比较差异均有统计学意义(χ2值分别为8.679、23.690、41.199,P值均＜0.017);在非癌变组和癌变组分别为25.00%(6/24)和63.16%(12/19),与对照组[1.11%(1/90)]比较差异均有统计学意义(χ2值分别为18.762、57.497,P值均＜0.025).p53基因第5外显子甲基化阳性率在轻、中、重度组分别为55.26%(21/38)、51.16%(22/43)、48.39%(15/31),与对照组[88.88%(80/90)]比较差异有统计学意义(χ2值分别为18.151、23.168、22.420,P值均＜0.017);在非癌变组和癌变组分别为54.17%(13/24)和42.11%(8/19),与对照组[88.88%(80/90)]比较差异有统计学意义(χ2值分别为15.201、22.075,P值均＜0.025).p53基因第5外显子突变率在轻、中、重度组分别为5.26%(2/38)、16.28%(7/43)、25.81%(8/31),中、重度组与对照组(0.00%)比较差异均有统计学意义(χ2值分别为15.465、24.870,P值均＜0.017);在非癌变组和癌变组分别为16.67%(4/24)、31.58%(6/19),与对照组(0.00%)比较差异均有统计学意义(χ2值分别为15.545、30.077,P值均＜0.025).启动子区高甲基化与第5外显子突变相关(列联系数为0.294,P＜0.05);第5外显子低甲基化与第5外显子突变相关(列联系数为0.410,P＜0.05).结论 燃煤砷污染可致人体p53基因启动子区高甲基化、第5外显子低甲基化和突变,上述甲基化改变均与p53基因突变相关联;p53基因甲基化改变可能是砷致p53基因突变以及砷致病或致癌的重要原因之一.

Abstract：

Objective To explore the influence of arsenic pollution caused by coal-burning on methylation(promoter and exon 5 ) and mutation (exon 5 ) of human p53 gene, and to analyze the relationship between methylation, mutation and arsenism. Methods According to the diagnostic criteria of endemic arsenism, 112 patients with arsenism (including 38 mild cases,43 moderate cases and 31 severe cases) were selected in the areas with endemic arsenism from Xingren, Guizhou province. Among the subjects ,43 cases were diagnosed by dermatopathological methods, and they were divided into non-cancerous group (24 cases) and cancerous group ( 19 cases ). 90 controls were selected from the non-arsenic polluted areas. Under the principle of informed consent, blood samples were collected from individuals. The methylation of p53 gene in promoter region and exon 5 were detected by extinction enzyme-PCR,the mutation of p53 gene (exon 5 ) was detected by PCR-SSCP,PCR products cloning and sequencing technology. Results The positive rates of methylation of p53 gene in promoter region were 13. 16% ( 5/38 ), 27.91% ( 12/43 )and 45. 16% (14/31) respectively among mild, moderate and severe arsenism group, which were obviously higher than the rates in the control group (1.11% (1/90), χ2 values were 8.679,23.690, 41. 199,respectively,both P values ＜ 0. 017 ). The positive rates of methylation of p53 gene were 25.00% (6/24)and 63. 16% (12/19)in non-cancerous and cancerous group respectively, which were obviously higher than those in the control group ( 1. 11% (1/90) ,χ2 values were 18. 762,57. 497,respectively,both P values ＜0. 025 ). The positive rates of methylation of p53 gene ( exon 5 ) were 55.26% ( 21/38 ), 51. 16% ( 22/43 )and 48. 39% (15/31)respectively among mild, moderate and severe arsenism group,which were obviously lower than the rates in the control group ( 88. 88% ( 80/90 ), χ2 values were 18. 151 , 23. 168,22. 420,respectively, both P values ＜ 0. 017 ). The positive rates of methylation of p53 gene (exon 5 ) were 54. 17%(13/24) and 42. 11% (8/19) in non-cancerous and cancerous group respectively, which were obviously lower than those in the control group ( 88. 88% (80/90), χ2 values were 15. 201,22. 075, respectively, both P values ＜ 0. 025 ). The mutation rates of p53 gene ( exon 5 ) were respectively 5. 26% ( 2/38 ), 16. 28%(7/43) and 25.81% (8/31 )among mild, moderate and severe arsenism group; while the results in moderate and severe arsenism group were obviously higher than in the control group (0. 00% ,χ2 values were 15.465,24. 870,respectively,both P values ＜ 0. 017). The positive rate of mutation of p53 gene ( exon 5 ) were respectively 16. 67% (4/24) and 31.58% ( 6/19 ) in non-cancerous and cancerous group, which were obviously higher than it in the control group (0. 00%, χ2 values were 15. 545,30. 077, both P values ＜0. 025). The hypermethylation of p53 gene in promoter region was related with the mutation of p53 gene ( exon 5) ( coefficient of association was 0. 294, P value ＜ 0. 05 ); and the hypomethylation of p53 gene (exon 5 ) was related with the its mutation ( coefficient of association was 0. 410, P value ＜ 0. 05 ).Conclusion Arsenic pollution caused by coal-burning can cause the hypermethylation of p53 gene in promoter region, hypomethylation and mutation of p53 gene ( exon 5 ), and the changes of methylation of p53 gene are related with its mutation and might be one of the important etiological factors of arsenic pathogenicity or carcinogenesis.