ELISA检测中全自动加样引起拖带假阳性现象的对策分析

随着全自动加样设备在血液筛查中的广泛应用,其加样过程导致的拖带现象已引起高度关注。笔者在进行血液标本加样检测过程中,发现抗体强阳性标本,引起拖带现象(以抗-HIV为例)进行统计分析,现报告如下。1材料与方法1.1血清标本均来自我站街头无偿献血者。     

全自动酶免分析仪检测HIV抗体待复检标本确证结果分析

目的对ADCC ELISA 500全自动酶免分析仪检测HIV抗体待复检标本的确证结果进行分析,以探讨试验"灰区"样本的正确处理,从而避免漏报、误报不良医疗事件的发生。方法选择某综合医院2018年12月~2019年6月送检血清标本,采用ADCC ELISA 500全自动酶免分析仪进行HIV抗体初筛,对检测待复检标本送到确证实验室经蛋白印迹试验(WB)确证,并对其结果统计分析。结果共初筛出64份待复检样本,其中50份初筛有反应样本经WB确认均为阳性(100.0%),14份"灰区"样本经确认有6份为不确定,8份为阴性。50份确证阳性样本中,GP160条带出现频率最高(100.0%),P55出现频率最低(48.0%);6份不确定样本中,GP160条带出现频率为100.0%。结论全自动酶免分析仪检测HIV抗体标本S/CO值在"灰区"附近时,S/CO值大小不能有效判断结果,要及时送检确证实验室进行WB确证。     

ELISA检测中全自动加样引起拖带污染现象的原因分析及对策

目的探讨ELISA检测中全自动加样引起拖带污染现象的原因及采取的对应措施。方法分别使用初检试剂检测初检标本,复检试剂检测复检标本,根据检测试剂说明书的要求,在STAR全自动样本处理系统控制微机上编辑初检、复检2个加样程序。2008年以前使用永久性钢针,加样过程中加样探针需冲洗后反复使用;2009年以后全部使用一次性加样探针,设定程序也相应取消了洗涤环节。当结果判读时发现ELISA微板上从A排至H排连续出现2孔或2孔以上阳性结果时,即怀疑是由拖带污染引起的假阳性。首先进行同一检测项目初、复检结果比对,然后重新取1份血袋导管标本,连同初、复检标本,分别用2种试剂进行3孔复试,从而判断是否为强阳性引起的拖带污染现象。结果以HIV检测为例,2008年10月至2008年12月的6142份血液标本检测中共出现2例拖带污染现象,而2009年1月至2011年4月共68073份血液标本检测中未发现1例拖带污染现象。结论使用一次性加样探针可有效避免拖带污染现象的发生。同时根据不同厂家试剂的实际情况,设置科学合理的加样参数;对仪器设备定期进行维护、校准和持续监控管理以及对血液标本进行全程质量控制等综合整治措施,可更好地发挥全自动检测设备的优势,进一步提高检测结果的准确性及血液使用的安全性。     

快速法检测抗-HIV(1+2)

目的探讨硒标法作为HIV(1 2)抗体检测酶联免疫吸附法(ELISA)阳性的标本送确证试验室作确证试验前进行一步筛查的实验方法的可行性。方法取2000年以来本中心ELISA检测初筛阴性、阳性标本与美国雅培公司生产的雅培DETERMINFHIV1／2试剂盒(硒标法)进行比较试验。结果硒标法检测抗-HIV(1 2)与HIV(1 2)抗体确证试验(WB)法之间有着很好的一致性。结论硒标法可作为艾滋病抗体确证试验检测前,初步筛查的另一原理的试剂使用。     

梅州市2007-2012年自愿无偿献血人群HIV抗体阳性情况分析

目的了解梅州市自愿无偿献血人群HIV感染情况,为制定血液安全和管理策略提供科学依据。方法2007—2012年梅州市自愿无偿献血者血液标本HIV筛查采用ELISA试验,HIV抗体初筛可疑标本送梅州市疾病预防控制中心（CDC）使用免疫印迹试验（WB）进行确证,确证阳性者判定为HIV抗体阳性。结果在2007—2012年162896例梅州市自愿无偿献血者中,检出HIV抗体阳性16例,阳性率为9．82／10万,不同年份自愿无偿献血人群HIV抗体阳性率差异无统计学意义（P〉0．05）。HIV抗体阳性者均为男性,以青壮年为主。结论采供血机构要进一步加强实验室质量管理,大力开展大众艾滋病知识普及工作,把输血传播HIV风险降到最低。     

122例艾滋病患者合并乙肝病毒 丙肝病毒感染的临床流行病学研究

目的 研究在抗逆转录病毒药物治疗(HAART)状态下HIV/AIDS患者合并乙肝病毒(HBV)、丙肝病毒(HCV)的流行状况以及相关血清生化和病毒学特征。 方法 对122例正在接受HAART治疗的HIV/AIDS患者采集血标本,使用酶免法(MEIA)检测乙肝五项指标(HBs Ag、抗-HBs、HBe Ag、抗-HBe、抗-HBc)、肝功能,应用酶联免疫吸附法(ELISA)检测丙型肝炎病毒抗体,运用RT-PCR法对丙肝病毒抗体阳性标本以及表面抗原和/或核心抗体阳性标本分别进行HCV-RNA以及HBV-DNA测定。以43名单纯HCV感染者作为对照组进行研究。 结果 122名 HIV/AIDS患者,乙肝五项指标全阴性97例(78.86%),表面抗原阳性3例(2.46%),表面抗体阳性者总计19例(15.57%),单纯核心抗体阳性者3例(2.46%)。HCV 抗体阳性84例(68.85%),84例HCV抗体阳性标本中HCV-RNA 阳性58例(69.05%),HIV/HCV/HBV合并感染者为0。HIV/HCV合并感染组 HCV-RNA 水平与感染者性别,CD4⁺ 细胞数水平无明显差异(P>0.05);HIV/HCV合并感染组与单纯HCV感染组 HCV-RNA水平、肝功能异常率无明显差异(P>0.05)。 结论 HIV感染者HBsAg阳性率低于普通人群,HIV/HCV合并感染的比例显著高于普通人群。HIV/HCV合并感染与单纯HCV感染者血清生化及病毒学改变相似。     

HIV抗体筛查6291例与免疫印迹试验对比研究

目的对比HIV抗体筛查ELISA方法检测HIV抗体试验阳性与免疫印迹试验（WB）确证结果,探讨两种方法检测HIV抗体的差异。方法对6291例筛查样本用ELISA方法检测,将41例复测结果为阳性样本的结果与WB法确证结果进行比较,分析ELISA检测的S／CO值变化与WB确证结果的关系。结果41例HIV抗体筛查阳性标本经免疫印迹确证试验,阳性有12例（均为HIV-1抗体阳性）,阴性13例,结果不确定的16例。确认为阳性标本的S／CO平均值为22．8;不确定的标本S／CO值平均为10．7;阴性的标本S／CO值平均为8．7。在阳性标本中,p55条带出现的频率最低为47．1％,p51条带为58．3％,其它均达到75％以上,其中gpl60、p24达到100％;不确定标本中,gpl60条带出现的几率最高,达62．5％,p24条带次之,达37．5％。结论筛查试验存在假阳性结果,HIV抗体结果的报告必须以确认结果为准。高S／CO值预示HIV抗体阳性的可能性较大,而较低的S／CO值时HIV抗体阴性及不确定的可能性较大。WB确认方法在不确定标本检测中存在一定的缺陷。     

ELISA方法与NAT方法检测HIV结果分析

目的比较第3代HIV抗体检测试剂、第4代HIV（1＋2）抗原抗体联合检测试剂及HIV核酸检测试剂的检测效果。方法分别用无偿献血者血标本、国家参考品、卫生部临检中心室间质评样本、抗-HIV质控血清考评4种ELISA试剂的灵敏度、特异性、假阳性率、精密度、符合率及最低检测限;对经ELISA初筛合格的血标本进行NAT筛查。结果 4种ELISA试剂对无偿献血者标本进行HIV初复检,特异性分别为99.92%,99.86%,99.87%,99.91%,灵敏度均为100%;检测国家参考品的符合率均达到国家要求;检测室间质评样本的符合率均达100%;国产试剂D对质控品检测的灵敏度较弱;2010年NAT检测未发现HIV RNA阳性标本。结论 4种ELISA国产、进口试剂对HIV抗体检测的特异性和敏感性没有显著性差异;目前本中心NAT检测尚未检出HIV窗口期标本。     

酶联免疫吸附试验用于艾滋病筛检人群HIV抗体的临床价值

目的探讨酶联免疫吸附试验用于艾滋病筛检人群人类免疫缺陷病毒(HIV)抗体中的临床价值,为完善疾控中心HIV检测咨询工作提供参考依据。方法选取2018年1月至2019年12月因具有艾滋病高危感染风险而在疾控中心接受艾滋病筛查的75例HIV自愿咨询检测者作为研究对象,所有受检者均采用酶联免疫吸附法、胶体金法对HIV抗体进行检测,比较2种检测方法对艾滋病高危受检者HIV抗体的筛查结果,并针对HIV抗体阳性患者进行分析。结果 75例HIV自愿咨询检测者中,经酶联免疫吸附法初筛阳性共13例,经胶体金法初筛阳性共9例,2种试剂检测结果比较差异无统计学意义(P> 0.05);酶联免疫吸附法对HIV抗体初筛阳性的灵敏度、约登指数、阴性预测值、假阴性率均高于胶体金法(P <0.05),酶联免疫吸附法与胶体金法的特异度、阳性预测值、假阳性率比较,差异均无统计学意义(P> 0.05)。结论酶联免疫吸附法用于艾滋病高危风险人群HIV抗体筛查中具有良好的诊断价值,可提高初筛HIV抗体阳性检出率,为艾滋病的防治提供参考依据。     

HBcAb,HBcAg同时阳性的探讨

在我们日常工作中经常出现HBcAb、HBcAg同时阳性的血清标本,为了探讨其发生机制及临床意义,我们对500份血清标本进行了研究;现将结果报道如下．1材料和方法1．1标本来源所有的血清标本均来自我院门诊及住院患者,采用固相放射免疫和酶免疫吸附试验两种方法检测表面抗原、核心抗体,对两者都阳性的500份标本检测表面抗体、e抗原、e抗体、核心抗原（放免法）。1．2试剂和仪器固相放射免疫试剂购于三V公司,酶免试剂购干上海荣盛生物技术公司,仪器分别使用GC-1200全自γ计数器和ZS板式酶标仪．1.3HBcAg检测原理将人血清加入内壁涂有…     

Drugs of abuse detection in meconium: a comparison between ELISA and biochip microarray

The results of meconium specimens and fortified samples screened for drugs of abuse by both enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA, Immunalysis) and biochip microarray (Randox) methods were compared. The ELISA method was semi-automated using a TECAN Genesis. The Randox assay used the Randox Evidence Investigator system. Previously validated gas chromatography-mass spectrometry (GC-MS), GC-GC-MS, or liquid chromatography-MS-MS methods were used for confirmation and quantitation. Results from the two techniques compared well. Agreement of the Randox assay was greater than 90% when compared to the ELISA assay for all drug classes except cannabinoids (88%). Specificity of the biochip assay was slightly better for amphetamines and cocaine.     

单人份核酸检测在降低输血感染人类免疫缺陷病毒残余风险中的应用

目的 分析单人份核酸检测技术(individual donor-nucleic acid amplification test,ID-NAT)对窗口期人类免疫缺陷病毒(HIV)阳性标本的检出能力,探讨ID-NAT对降低输血感染HIV残余风险的作用.方法 采用Procleix Tigris单人份核酸检测系统和两种不同厂家的ELISA试剂对采集的血液标本进行平行检测,对ELISA检测阴性ID-NAT检测阳性标本进行HIV鉴别试验,并对HIV鉴别阳性的献血者进行追踪检测.结果 采集血液标本196900份,检出ELISA阴性ID-NAT联检阳性标本256例,HIV鉴别实验阳性标本2例.第1例HIV阳性献血者献血后29 d免疫印迹确证试验为HIV-1抗体阳性,且HIV(1+2)抗体及HIV-1 P24抗原ELISA双试剂检测均呈阳性反应.第2例HIV阳性献血者,献血后第0、4、7 d血液标本病毒载量呈上升趋势,第4天仅单试剂ELISA检测呈阳性反应,第7天和第14天时,双试剂ELISA检测已均呈阳性反应,且第30天确证试验为HIV-1抗体阳性.结论 ID-NAT应用于血液筛查可缩短HIV检测窗口期,降低输血感染HIV残余风险,从而有效提高血液安全性.     

尿液与血液标本中HIV-1抗体的检测结果分析

目的 比较应用ELISA法检测尿液和血液标本中HIV-1抗体结果的一致性.方法 对15244例被检测尿液和血液HIV-1抗体者进行回顾性分析,应用ELISA方法分别采用尿和血初筛试剂检测尿液和血液标本中HIV-1抗体.结果 15244例被检测的样本中,26份样本尿和血标本检测结果同时为阳性,以血液标本为标准,检测尿液HIV-1抗体的灵敏度为100%,特异性为99.33%,尿液标本和血液标本检测的符合率达99.25%.结论 可通过尿液ELISA初筛诊断试剂进行HIV-1感染情况的监测和筛查.     

Diagnostic detection of human immunodeficincy virus type-1 antibodies in urine, Jimma Hospital, south west Ethiopa

BACKGROUND: Testing for human immunodeficiency virus (HIV) specific antibodies continues to be the most important measure in diagnosis and HIV intervention. Detection of anti-HIV antibodies in serum or plasma samples are common strategies. However, body fluids such as urine and saliva could serve as an alternative sample for diagnosis of HIV infection. OBJECTIVE: To determine the diagnostic accuracy of Calypte HIV-1 urine EIA test kits for detection of HIV antibodies in urine sample. METHODS: Urine and serum samples were collected from a total of 365 subjects (HIV suspected (n=156), VCT clients (n=129) and 80 known HIV positive individuals at Jimma Hospital VCT center, OSSA, Red Cross and Mekaneyessus Jimma cohort sites in unlinked anonymous testing method. Urine sample were tested using Calypte HIV-1 urine EIA kits parallel to the golden standard method of testing serum samples by combination of Determine and Vironostica (Rapid test followed by ELISA) test algorithm. All discordant samples (by urine serum tests) were resolved using urine western blot (Calypte HIV-1 urine Western Blot). RESULT: Comparing the results obtained with a golden standard (HIV test algorithm) the sensitivity and specificity of urine EIA test kit were 99.5% (187/188) and 98.3% (174/177) respectively. Beside to this kappa's test of agreement showed perfect agreement with kappa 0.98. CONCLUSION: The result showed the utility of urine test as an alternative method for HIV antibody detection. Since the method of collection of urine specimen is non-invasive, it reduces occupational exposure for health professionals involved in collecting samples. Furthermore patient's stronger acceptance to give urine samples will make this test more applicable than serum or whole blood test.     

2005～2010年医院HIV抗体检测结果分析

目的 调查医院人类免疫缺陷病毒(HIV)感染状况及分布特征.方法 对2005年1月至2010年12月在泸州医学院附属医院就诊的患者用酶联免疫吸附试验(ELISA法)检测HIV抗体,统计分布科室、年龄、性别比例及各年度的感染状况.结果 56 208例中,共检出HIV抗体阳性血清142例(142/56 208),其中青壮年占78.87％,男女比例为2.55∶1,科室分布以门诊、内科为主,年检出率0.055％～0.481％.结论 HIV感染率以较大幅度逐年上升,且分布科室较广.建议综合性医院对所有住院患者均进行HIV抗体筛查.     

3000例海洛因依赖者HIV抗体检测

目的·· :了解住院海洛因依赖者HIV抗体阳性率及HIV抗体阳性者的人口学特征。方法·· :采用金标快速测试卡进行初筛 ,阳性标本用酶联免疫吸附试验复试 ,阳性者再经北京市卫生防疫站进行确诊。结果·· :3000例海洛因依赖者中HIV抗体阳性者44例 ,阳性率占总样本的1.47 % ,全部为静脉注射毒品者。HIV抗体阳性者中男性41例,占阳性者的93.18 %,女性3例 ,占6.82% ;少数民族25例,占56.82 % ;无业37例 ,占84.09 % ;初中以下文化水平40例 ,占90.91 % ;20-29a年龄组26例 ,占59.09 %。结论·· :海洛因滥用者 ,特别是静脉注射者是HIV易感人群 ;感染者中男性多于女性 ;少数民族、无业、初中以下文化水平和20 -29a年龄组的感染率高     

Detection of the marijuana metabolite 11-nor-Delta9-tetrahydrocannabinol-9-carboxylic acid in oral fluid specimens and its contribution to positive results in screening assays

The detection of the marijuana metabolite 11-nor-Delta(9)-tetrahydrocannabinol-9-carboxylic acid (THC-COOH) in oral fluid specimens is described, and its contribution to an immunoassay for the detection of cannabinoids is investigated. Oral fluid specimens, screened using an enzyme-linked immunosorbent immunoassay (ELISA), were carried forward to confirmation for both tetrahydrocannabinol (THC) and THC-COOH using gas chromatography-mass spectrometry (GC-MS). One hundred and fifty-three specimens were analyzed, of which 143 screened positive for cannabinoids. Ninety-five (66.4%) of these specimens were positive for both THC and THC-COOH; 14 (9.7%) were positive for THC-COOH only, and 27 (18.8%) were positive for THC only. The GC-MS assay for the detection of THC-COOH in oral fluid was linear to 160 pg/mL with a limit of quantitation of 2 pg/mL. The detection of the marijuana metabolite, THC-COOH, in 76.2% of oral fluid specimens screening positive for cannabinoids is reported. As a potential defense against passive exposure claims, proposed SAMHSA regulations may require the simultaneous collection of a urine sample when oral fluid samples are used. The detection of the metabolite, THC-COOH, is a significant alternative to this approach because its presence in oral fluid minimizes the argument for passive exposure to marijuana in drug testing cases.     

湖北省HIV-2抗体确证及HIV-1和HIV-2血清学双重感染状况分析

目的 对HIV-2可疑样品进行确证,了解我省HIV/AIDS人群中HIV-1和HIV-2双重感染状况.方法 用新加坡Genelabs Diagnostics公司生产的HIV-2抗体确证试剂检测16份HIV-1抗体阳性并且有HIV-2特异性指示带的样品.结果 11份样品结果为HIV-2抗体阳性,3份样品为不确定,2份阴性.结论 我省可能存在HIV-1和HIV-2型双重感染者,需从分子生物学水平进一步验证.