不同产地和不同品种枸杞子中多糖成分测定

目的 通过比较19批不同产地宁夏枸杞果实和3批北方枸杞果实的总糖含量、重均相对分子质量（M_w）及单糖组成,探索枸杞中多糖成分的差异性。方法 采用水提醇沉法获得22批枸杞的粗多糖成分,以葡萄糖为对照品,采用苯酚-硫酸法测定总糖含量;Shodex SB-806 HQ型凝胶柱和Shodex SB-804 HQ型凝胶柱串联,流动相为0.1%氯化钠溶液,柱温为40 ℃,柱流速为0.5 mL·min^–1,采用凝胶渗透色谱-示差检测器-多角度激光光散射法（GPC-RI-MALLS）测定M_w及分布系数;选择Zorbax Eclipse XDB C₁₈色谱柱（250 mm×4.6 mm,5 μm）,流动相为乙腈-磷酸二氢钾溶液,柱温为35 ℃,流速为1.0 mL·min^–1,检测波长为250 nm,采用1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮（PMP）柱前衍生化-高效液相色谱-光电二极管阵列检测器（HPLC-PDA）测定单糖组成,同时建立单糖组成指纹图谱。结果 22批枸杞样品中粗多糖成分的质量分数为3.24%~8.66%,M_w为0.733×10⁶~3.191×10⁶;多糖成分均由9种单糖组成,其中阿拉伯糖含量最高。结果显示,不同产地宁夏枸杞粗多糖结构较为一致,但北方枸杞中多糖成分在结构上与宁夏枸杞存在较明显差异,主要体现在M_w、色谱峰面积比及半乳糖醛酸含量上。结论 宁夏枸杞和北方枸杞的粗多糖成分在结构上有较大差异,且通过建立的单糖组成及M_w测定方法可以对其进行有效区分,可为枸杞质量标准完善及枸杞资源评价提供方法和思路。     

水溶性壳聚糖-泼尼松龙结合物的合成与表征

 目的合成一系列不同相对分子质量(M_r)的水溶性壳聚糖-泼尼松龙结合物。方法通过控制壳聚糖的乙酰度得到水溶性壳聚糖(WCh i),并用凝胶渗透色谱测定其M_r大小。模型药物通过丁二酸间隔臂与WChi相连,其结构经红外光谱分析、差示扫描量热法分析、高效液相色谱分析和紫外光谱证明,结合的泼尼松龙量用高效液相色谱测定。结果合成的WChi的M_r分别为31×10³,19×10³,11×10³,7.2×10³,3.8×10³,相应的结合物中泼尼松龙含量分别为(8.36±0.04)%,(7.17±0.08)%,(7.21±0.03)%,(6.29±0.03)%,(6.66±0.05)%。结论成功制备了水溶性壳聚糖-泼尼松龙结合物。     

高效凝胶过滤色谱法测定沙漠嘎多糖的重均相对分子质量

目的:建立以高效凝胶过滤色谱法(HPGFC)测定沙漠嘎多糖重均相对分子质量的方法。方法:通过将沙漠嘎多糖分离、柱层析纯化,获得沙漠嘎多糖S1,采用HPGFC法测定重均相对分子质量。色谱条件:AsahipakGS色谱柱GS-3207E(250mm×7.5mmID,9μm)与GS-6207G(500mm×7.5mmID,9μm)串联使用;流动相:0.003mol·L^-1乙酸钠;流速:1mL·min^-1;柱温:35℃;示差折光检测器(RID)。结果:沙漠嘎多糖重均相对分子质量的回归方程为:lg(Mw)=10.167-0.287t_R(r=-0.976),线性范围为:10000～500000Da,测得沙漠嘎多糖S1重均相对分子质量约为8.5×10⁴Da。结论:为沙漠嘎多糖重均相对分子质量测定提供了简便、实用的分析方法。     

HPGPC测定注射用灰树花倍他葡聚糖相对分子质量的影响因素研究

 目的考察高效凝胶渗透色谱法(HPGPC)测定注射用灰树花倍他葡聚糖(GFGI)相对分子质量(M_r)的影响因素。方法采用HPGPC分别以不同的流动相、色谱柱、上样浓度、上样体积、温度和辅料比例测定GFGI的M_r,并对测定结果进行比较。结果分别以纯水,质量浓度0.2g·L^-1NaN₃,0.1mol·L^-1NaNO₃和0.1mol·L^-1Na₂SO₄溶液为流动相进行测定,GFGI的M_r依次为822 410,177 520,29 112和25 066;以0.2g·L^-1NaN₃溶液为流动相时,采用TSK G4000PWxl和Shodex OHpak SB-804HQ色谱柱的Mr测定结果相差12.06%;在0.5～10g·L^-1的上样质量浓度内GFGI的M_r测定结果相差8.33%;在上样体积为5～30μL内相差8.65%;在温度为30～45℃范围内相差7.26%;但在不同的辅料比例下M_r的测定结果相近。结论流动相对GFGI的Mr测定结果有很大的影响,色谱柱、上样浓度、上样体积和测定温度对Mr测定结果有明显影响,辅料比例无明显影响。     

低相对分子质量透明质酸的促血管生成作用

 目的研究低相对分子质量透明质酸(LMWHA)的促血管生成作用。方法采用鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)血管生成模型,观察不同相对分子质量(M_r)的LMWHA及不同给药剂量对血管生成的影响。结果M_r低于10×10³的LMWHA对CAM血管生成的影响与溶剂对照组相比,差异有非常显著性意义(P<0.01);随着给药剂量的增大,新生血管总数明显增多(M_r6 000,r=0.992 9;M_r6 240,r=0.994 4)。结论M_r低于10×10³的LMWHA具有促进CAM血管生成作用,且呈剂量依赖性。     

高效液相色谱法测定艾复康胶囊中黄芩苷的含量

目的:建立中药艾复康胶囊中黄芩苷含量的测定方法。方法:采用DiamonsilC₁₈色谱柱(250mm×4.6mm,5μm),0.4%磷酸-甲醇(58∶42)为流动相,检测波长280nm,流速1.0mL·min^-1,柱温35℃。结果:黄芩苷线性方程为Y=2.78×10³X-4.13,在0.0968-0.484μg范围内具良好的线性关系(r=0.9997),平均回收率为99.7%,RSD为3.0%。结论:该法准确、可靠、重复性好,可用于艾复康胶囊中黄芩苷含量的测定。     

积雪草中降血糖多糖的研究

 目的研究中药积雪草(Centellaasiatica)全草中的降血糖活性多糖组分。方法采用DEAE-纤维素柱色谱和凝胶渗透色谱进行分离纯化,化学及光谱方法进行结构分析,并进行免疫及降血糖药理活性测试。结果积雪草多糖组分S5X相对分子质量为1.17×10⁵,含阿拉伯糖、半乳糖、木糖、葡萄糖以及半乳糖醛酸、葡萄糖醛酸等残基,是一个结构复杂的含肽的多糖组分,具有一定免疫和降血糖活性。结论S5X首次从该植物分得的杂多糖,具有降血糖作用。     

黄芪中一种新杂聚多糖的理化分析

 目的分析蒙古黄芪中一种杂聚多糖的理化性质。方法应用微波萃取技术提取黄芪多糖(Astragalus polysaccharides,APS),采用蛋白酶法脱除其中的蛋白质,高效凝胶过滤色谱法(HPGFC)测定其分子量(M_w),柱前衍生化高效液相色谱(HPLC)测定其单糖组成及其分子摩尔比,红外光谱、1H核磁共振测定其主要化学构型,热失重(TG)和差示扫描量热法(DSC)对其进行热分析。结果提取物的分子量(M_w)为1.1×10⁴、纯度为97.16%,其单糖组成及其分子摩尔比为Rha-Glc-Gal-Ara=1.19∶72.01∶5.85∶20.95,主要化学构型为α-吡喃构型,主链部分由Glu1→6糖苷键构成,对光、热及湿均不稳定。结论提取物为黄芪中一种新的杂聚多糖。     

HPLC测定普卢利沙星胶囊的含量和有关物质

 目的采用高效液相色谱法测定普卢利沙星胶囊的含量及有关物质。方法采用Waters Symmetry C₁₈色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);以0.1%三乙胺水溶液(用10%磷酸调节pH为2.8)-乙腈(67.5∶32.5)为流动相;流速1.0 mL·min^-1;柱温25℃;波长275 nm;进样量10μL。结果含量测定的线性范围为0.50～10.00 mg·L^-1,r=0.999 3(n=5),低、中、高3个浓度加样回收率为101.2%,99.8%,98.2%;RSD依次为1.2%,0.9%,0.4%(n=5)。结论本方法简便快速、准确,专属性好。     

猫爪草多糖RTG-Ⅲ的分离纯化及其生物活性

 目的 研究中药猫爪草水提取液中分离纯化得到一种多糖蛋白复合物——RTG-Ⅲ的生化特性、免疫和抑瘤作用。方法 采用DEAE-Cellulose-52和Superdex 200柱色谱得到均一的多糖组分,电泳和凝胶色谱等方法检测纯度,薄层色谱和气相色谱分析单糖组成,红外光谱确定糖苷键类型,噻唑蓝试验测定免疫活性。结果 RTG-Ⅲ为均一组分,单糖组成为鼠李糖、阿拉伯糖、葡萄糖、半乳糖、甘露糖,其摩尔比为1.00:1.17:51.71:2.16:0.46,总糖含量为80.1％,蛋白含量为12.6％,由谷氨酰胺、谷氨酸等16种氨基酸组成,糖肽键为非O-型。结论 RTG-Ⅲ是以β-D-葡萄吡喃糖为主的一种新的多糖-蛋白复合物,相对分子质量为2.3×10⁴,能够增强免疫细胞对肿瘤细胞HL-60的抑制作用。     

HPLC测定御感袋泡茶中葛根素和黄芩苷的含量

 目的：采用高效液相色谱法测定黄芩、葛根及其制剂御感袋泡茶中黄芩苷和葛根素的含量，评价该制剂的质量。方法与结果：黄芩苷测定以KYWG-C₁₈为固定相，0.5%磷酸-甲醇-N，N-二甲基甲酰胺(13∶10∶1)为流动相，UV检测波长为276 nm，黄芩苷在0.1～0.01 mg/ml浓度范围与峰面积呈直线关系，回归方程为Y=0.0018+9.95×10^-8X，r=0.999 6,平均回收率为102.8%，[WTBX]RSD[WTBZ]为1.86%([WTBX]n[WTBZ]=5)。葛根素测定以KYWG-C₁₈为固定相，水-甲醇-N，N-二甲基甲酰胺(40∶10∶3)为流动相，UV检测波长为250 nm，葛根素在0.2～0.020 mg/ ml浓度范围与峰面积呈直线关系，回归方程为Y=1.5×10^-4+1.09×10^-7X，r=0.999 9,平均回收率为101.7%，RSD为1.62%(n=5)。结论：本法简便、快速，结果可靠。     

黑木耳酸性多糖(FⅡ)的分离、纯化及相对分子质量测定

 目的：黑木耳酸性多糖（FⅡ）的分离、纯化及分子质量测定。方法：按文献方法，从黑木耳子实体提取得到酸性多糖（FⅡ），采用20%H2O2溶液脱色，通过纸层析、柱层析、聚丙烯酰胺凝胶电泳法进行纯度鉴定，用小角激光光散射和膜渗透压法测定FⅡ的重均分子质量Mw和数均分子质量Mn。结果：FⅡ纯度较高，它的重均分子质量为58.8×104，数均分子质量为14.3×104。结论：多糖脱色最好用弱氧化剂，不要用强氧化剂，光散射法和膜渗透压法是测定多糖分子量的有效方法。     

大肠杆菌T蛋白的聚合状态分析

 目的解析大肠杆菌T蛋白的四级结构。方法利用分段克隆法克隆表达了T蛋白及其两个独立结构域分支酸变位酶(CM,T/1-94)和预苯酸脱氢酶(PDH,T/93～373),再利用SDS-PAGE测得变性条件下T蛋白、CM和PDH的M_r分别为42×10³,11×10³和32×10³,HPLC测得天然条件下CM和PDH的M_r分别为25×10³和63×10³,再用化学交联法分析聚合状态。结果T蛋白、独立结构域CM和PDH均为二聚体。结论说明大肠杆菌T蛋白二聚体是通过CM与CM、PDH与PDH相连的。     

川芎中多糖的研究

目的研究川芎L igusticum chuanx iong干燥根茎中的多糖组分。方法采用DEAE-纤维素柱色谱和凝胶渗透色谱分离纯化,化学和光谱方法分析其结构特征。结果从川芎水提物中分级得到4个均一多糖组分LCP-1、LCP-2、LCP-3和LCP-4,其相对分子质量分别为3.1×104、5.2×104、9.0×104、3.6×104,四者均为结构复杂的多糖组分。结论首次从川芎中分离得到LCP-1、LCP-2、LCP-3和LCP-4 4种杂多糖。     

大肠杆菌T蛋白的聚合状态分析

 目的解析大肠杆菌T蛋白的四级结构。方法利用分段克隆法克隆表达了T蛋白及其两个独立结构域分支酸变位酶(CM,T/1-94)和预苯酸脱氢酶(PDH,T/93-373),再利用SDS-PAGE测得变性条件下T蛋白、CM和PDH的M_r分别为42×10³,11×103和32×10³,HPLC测得天然条件下CM和PDH的M_r分别为25×10³和63×10³,再用化学交联法分析聚合状态。结果显示T蛋白、独立结构域CM和PDH均为二聚体。结论说明大肠杆菌T蛋白二聚体是通过CM与CM、PDH与PDH相连的。     

趁鲜切制和传统切制金荞麦饮片糖类组分比较研究

目的 比较趁鲜切制和传统切制方法对金荞麦Fagopyri Dibotryis Rhizoma饮片糖类组分的影响,基于糖组分探究适宜的金荞麦饮片切制方法。方法 采用多维色谱技术表征2种饮片中多糖含量、相对分子质量分布、单糖组成及物质的量比以及寡糖和游离单糖的含量,结合统计分析,比较2种饮片的糖组分特征。结果 与传统切制法相比,趁鲜切制饮片中多糖、寡糖含量较高;2种饮片中多糖的相对分子质量分布范围相似,但传统方法切制饮片在4.456×10⁶～8.095×10⁶区域占比较高;2种饮片多糖都主要由D-甘露糖、D-半乳糖醛酸、D-葡萄糖、半乳糖和阿拉伯糖组成,但传统方法切制饮片的D-葡萄糖物质的量比较高,D-甘露糖、半乳糖和阿拉伯糖物质的量比较低。结论 趁鲜切制能更好地保留多糖和寡糖组分,且操作方法相对简便,可以考虑作为金荞麦饮片的候选切制方法。     

转基因西洋参冠瘿组织中多糖的分离和纯化

目的分离纯化转基因西洋参冠瘿组织中多糖组分,为从该转基因材料中寻找重要生物活性前体多糖药物提供科学依据。方法用水醇提取法,以DEAE Sepharose FF和Sephacryl S-100柱色谱进行多糖的分离纯化,采用高效液相色谱测定单糖组成,色谱和光谱学方法鉴定其纯度和化学结构。结果分离得到4个精多糖(PPQ50-1、PPQ50-2、PPQ70-1和PPQ70-2),凝胶色谱法(Sephadex G-200)和旋光法证实了它们为化学均一性多糖;凝胶色谱法测得4种精多糖的相对分子质量分别为4.7×104,2.9×105,7.5×104和1.3×105;对得量较多的PPQ50-2和PPQ70-2进行了结构分析,证明二者均为葡聚糖;并利用NaIO4氧化反应和核磁共振谱等方法对PPQ50-2的化学结构进行了初步的糖基键合分析。结论首次从转基因西洋参冠瘿组织中分离得到4种化学均一性多糖成分,其中PPQ50-2和PPQ70-2均为葡聚糖。     

裙带菜茎中褐藻糖胶的组成及生物活性研究

 目的从褐藻裙带茎中分离纯化得到褐藻糖胶UPPSⅡ,并研究其组成性质及生物活性。方法热水提取粗褐藻糖胶,采用DEAE-52和Sephadex G-200柱分离纯化得到纯褐藻糖胶UPPSⅡ,GC-MS分析多糖组成,凝胶色谱法测定其相对分子质量,红外光谱测定其糖苷键构型,并研究其对酪氨酸酶活性的抑制作用。结果UPPSⅡ由岩藻糖、甘露糖、木糖、葡萄糖、半乳糖以β-糖苷键构成。相对分子质量为1.7×10⁵。其对酪氨酸酶活性呈浓度依赖性抑制。结论UPPSⅡ为首次从裙带菜茎中分离得到,主要成分为岩藻糖,并具有抑制酪氨酸酶活性的作用。     

石见穿中两个酸性多糖的化学研究

目的　研究石见穿 Salvia chinensis全草中的多糖组份。方法　采用 DEAE-纤维素柱色谱和凝胶渗透色谱进行分离纯化 ,化学和光谱方法分析其结构特征。结果　分别从石见穿水提取物和稀碱提取物中分得 2个均一多糖组份 SC5和 SC6 ,其相对分子质量分别为 4 .8× 10 4和 >1.0× 10 6 ,二者均为结构复杂的酸性多糖组份。结论　SC5和 SC6都是首次从该植物分得的酸性杂多糖。