MEK信号通路抑制剂联合阿糖胞苷对急性早幼粒白血病细胞的生长抑制的研究

目的：研究应用MEK信号通路抑制剂AZD6244联合阿糖胞苷（Ara-C）对急性早幼粒白血病细胞的生长抑制。方法：以人白血病细胞株NB4为研究对象,用四甲基偶氮唑盐比色法（MTT法）检测AZD6244和Ara-C对细胞的生长抑制作用。结果：先用AraC处理NB4白血病细胞株24h后再用MEK/ERK酶抑制剂AZD6244处理24h明显有生长抑制作用,呈时-量效依赖关系。而先用AZD6244处理24h后再用AraC联合处理24h对白血病细胞株的增殖抑制效果明显减弱。结论：MEK选择性抑制剂AZD6244能够增强Ara-C对NB4细胞株的生长抑制作用,并且呈顺序依赖性。     

Wee1抑制剂联合阿霉素对急性白血病细胞的生长抑制作用

目的:研究应用Wee1抑制剂PD0166285联合阿霉素对急性白血病细胞的生长抑制。方法:以人急性白血病细胞株HL60、NB4、EOL-1为研究对象,采用四甲基偶氮唑盐比色法(MTT法)检测PD0166285和阿霉素对细胞的生长抑制作用。结果:单独用药实验结果示,PD0166285或者阿霉素对HL60、NB4、EOL-1均有不同程度的生长抑制作用,并呈明显的浓度一效应关系。联合用药实验结果显示,PD0166285和阿霉素联用后对HL60、EOL-1细胞株的抑制率显著增加,明显高于单一用药,且有显著差异(P<0.05),对NB4细胞株的抑制率也增加,但无显著差异(P>0.05)。结论:相对于单独应用PD0166285或者阿霉素,PD0166285联合阿霉素增强了对急性白血病细胞株HL60、EOL-1的生长抑制作用。     

雄黄抑制宫颈癌细胞株增殖和诱导凋亡的体外研究

目的:体外研究中药雄黄主要成分As4S4对子宫颈癌细胞株Hela细胞的增殖抑制和诱导凋亡的作用。方法:以As4S4不同浓度(7.5、15、30、60mg/L),分12h,24h,36h,48h,60h处理Hela细胞,用光镜观察细胞变化;四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定细胞增殖抑制率;流式细胞仪(FCM)检测细胞凋亡率;用DNA梯状电泳(DNA ladder)检测凋亡的发生。结果:不同浓度(7.5、15、306、0 mg/L)的As4S4处理的Hela细胞,细胞增殖受到抑制,作用呈明显的时效和量效关系,差异有非常显著性(P<0.01);As4S4诱导Hela细胞的凋亡率为(8.13±1.13)%~(62.36±4.42)%,与对照组比较(2.84±1.88)%,差异有极显著性(P<0.01),并呈浓度依赖性;DNA ladder呈梯状条带。结论:雄黄体外对宫颈癌细胞株Hela细胞具有增殖抑制和促进凋亡作用。     

广西瑶药鸡爪风提取物抑制4种人肝癌细胞株体外增殖作用的研究

目的探讨广西瑶药鸡爪风(Desmos chinensis Lour.)体积分数85%乙醇提取物在体外对HCC-LM3、BEL-7404、SMMC-7721、HepG2等4种人肝癌细胞株增殖的影响。方法用体积分数85%乙醇渗漉法提取鸡爪风中组分,采用MTT法评价鸡爪风体积分数85%乙醇提取物对体外培养4种人肝癌细胞株生长的影响情况。结果给予不同质量浓度(0.8,0.4,0.2,0.1和0.05mg·mL-1)体积分数85%乙醇提取物培养HCC-LM3、BEL-7404细胞24和48h,不同质量浓度(0.5,0.25,0.125,0.075和0.037 5mg·mL-1)体积分数85%乙醇提取物培养SMMC-7721、HepG2细胞24和48h,均表现出一定的抑制细胞增殖作用,且作用随药物质量浓度增加而增大、随作用时间的延长而升高,最高抑制率达90%以上。结论鸡爪风体积分数85%乙醇提取物对体外培养的4种不同人肝癌细胞株的增殖均有抑制作用,呈剂量与时间依赖性。     

紫杉醇抗人舌癌细胞株的体外研究

目的：观察紫杉醇对人舌癌细胞的体外作用，探讨其抗癌效果及作用机制。方法：MTT法检测紫杉醇体外抗Tca8113人舌癌细胞作用，光镜和电镜下观察受处理细胞形态学变化，并用流式细胞仪分析其细胞周期的改变。结果：MTT法和形态学观察显示紫杉醇对Tea8113人舌癌细胞增殖有明显抑制作用，流式细胞仪分析经处理的癌细胞有G2／M期阻滞和细胞凋亡现象。电镜下可见紫杉醇处理的癌细胞的微管聚合。结论：紫杉醇是一种抗微管类的抗癌药物和G2／M阻滞剂。     

TPZ联合LY294002对人宫颈癌细胞的体外抑制作用

目的 研究替拉扎明(TPZ)联合磷脂酰肌醇-3激酶抑制剂(LY294002)对人宫颈癌细胞HELA的体外抑制作用.方法 乏氧及空气条件下,TPZ单独及与LY294002联合用药,在不同药物浓度下,作用于HELA细胞株,用MTT法评价其抑癌效果.结果 乏氧条件下,TPZ单独及与LY294002联用对Hela的IC50分别为14.2、3.0 μmol·L-1,空气条件下为17.5、2.0μmol·L-1.结论 TPZ对Hela有抑制作用;LY294002和TPZ联合用药较TPZ独用降低其IC50,LY294002对TPZ有显著增效作用.TPZ对Hela的细胞生长抑制在乏氧与空气条件下无显著差异.     

LY294002对多药耐药急性白血病细胞株HL60/VCR的凋亡及细胞周期的影响研究

目的:研究磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)抑制剂LY294002对多药耐药急性白血病细胞株HL60/VCR凋亡与细胞周期的影响及可能机制。方法:取耐长春新碱(VCR)的HL60/VCR多药耐药急性白血病细胞株分为未加药的对照组及加入不同浓度的LY294002(其终浓度为1.0、2.5、5.0、10μmol.L-1)组,MTT法检测2种细胞的半数抑制浓度(IC50),流式细胞仪检测细胞凋亡及细胞周期分布,半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测抗凋亡蛋白Bcl-2、细胞周期调控分子CyclinD1mRNA表达。结果:与对照组比较,LY294002可明显降低HL60/VCR对VCR的IC50(P<0.05),且与剂量相关;LY294002可显著增加HL60/VCR细胞凋亡率,阻滞细胞于G0/G1期,降低HL60/VCR细胞的Bcl-2、CyclinD1mRNA的表达(P均<0.05)。结论:LY294002可能是通过影响Bcl-2及CyclinD1基因的表达,从而促进HL60/VCR细胞凋亡及抑制细胞增殖。     

虫草素体外抑制NB4细胞增殖与诱导细胞凋亡作用研究

目的观察虫草素体外对急性早幼粒细胞性白血病细胞（NB4细胞）的抑制增殖和诱导凋亡作用。方法将0.5,1.0,1.5,2.0 mg&#8226;mL 1虫草素在体外与NB4细胞共同培养,采用细胞计数、噻唑蓝（MTT）法检测不同浓度虫草素在24,48,72 h对NB4细胞增殖的抑制作用;用细胞瑞氏染色法、Hoechst33258荧光染色法、DNA亚二倍体检测法和线粒体膜蛋白检测法观察虫草素诱导NB4细胞凋亡的作用。结果与对照组比较,不同浓度虫草素均能显著抑制NB4细胞增殖,并呈剂量和时间依赖的量效关系;不同浓度虫草素作用24 h后均能显著促进NB4细胞凋亡。结论虫草素在体外能明显抑制NB4细胞增殖,并诱导细胞凋亡。     

SRB法急性白血病体外药敏试验适用性研究

目的 探索最简便、准确、敏感可靠的化疗药物敏感性试验,经指导临床急性白血病个体化治疗的药物选择。方法 用ＳＲＢ法肿瘤药敏试验检测白血病细胞株ＨＬ６０及１２例急性白血病对六种化疗药物的敏感性。结果 ＳＲＢ法检测ＨＬ９０细胞对六种药物中的五种均敏感;１２例急性白血病患者ＳＲＢ法检测结果：体外敏感预测值（ＰＶ＋）为７５％,体外抗药预测值（ＰＶ－）为６６．６７％。结论 ＳＲＢ法急性白血病体外药敏试验可用于     

LY294002联合姜黄素对人膀胱癌EJ细胞的体外抑制作用

目的 研究磷脂酰肌醇-3激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)特异性抑制剂LY294002与姜黄素联合对体外培养的人膀胱癌EJ细胞的抑制作用.方法 用MTT法,检测姜黄素单独或联合PI3K/Akt特异性抑制剂LY294002对人膀胱癌EJ细胞的抑制率;用流式细胞技术及Western blotting法,检测药物单独或联合...     

丹参酮类化合物对NB4细胞的增殖抑制与构效关系探讨

目的比较丹参酮类化合物对人急性早幼粒细胞白血病NB4细胞的体外增殖抑制作用,并探讨其分子结构与细胞毒性之间的关系。方法采用改良MTT法测定不同浓度的丹参酮类化合物与细胞共培养一定时间后对NB4细胞的增殖抑制作用;采用倒置显微镜观察其细胞形态。结果供试丹参酮类化合物均能有效抑制NB4细胞的增殖,其抑制作用呈明显的时间和剂量依赖性。与NB4细胞共培养24 h后,二氢丹参酮Ⅰ与丹参酮Ⅰ的IC50值分别为1.86、3.62μg·mL-1,丹参酮ⅡA和隐丹参酮的IC50值均大于10μg·mL-1;共培养48 h后二氢丹参酮Ⅰ、丹参酮Ⅰ、丹参酮ⅡA、隐丹参酮的IC50值分别为0.65、1.41、1.83、5.41μg·mL-1;72 h后的IC50值分别为0.28、0.33、0.45、2.59μg·mL-1。结论 4种丹参酮类化合物对NB4细胞均具有增殖抑制作用,作用强度大小依次为二氢丹参酮Ⅰ、丹参酮Ⅰ、丹参酮ⅡA、隐丹参酮,提示丹参酮类化合物的A环为芳环时可增强细胞毒性,C环的呋喃环结构可能影响其细胞毒性。     

菲索抗单纯疱疹病毒Ⅱ型的体外实验研究

为了解菲索 (FESOL )在体外抗单纯疱疹病毒 型 (HSV-2 )的效果 ,以临床常用的无环鸟苷 (ACV)作对照药 ,采用细胞病变抑制法 (CPE)抑制法和 MTT法进行实验。结果显示 ,CPE抑制法测得 FESOL的 TC50 为 3 mg/ ml,IC50 为 0 .0 3 2 mg/ ml,治疗指数 TI为 93 .75 ;以 MTT法测得 FESOL的 TC50 为 2 .5 mg/ ml,IC50 为 0 .0 3 1mg/ ml,TI为 80 .65。与 ACV相比 ,FESOL在体外有明显抑制 HSV-2的作用     

四硫化四砷对急性早幼粒细胞白血病细胞株NB4的凋亡作用

目的　研究四硫化四砷对NB4细胞的促凋亡作用及这一过程中早幼粒细胞白血病 维甲酸受体α(PML RARα)融合基因及其表达产物的变化。方法通过细胞形态学观察 ,流式细胞仪检测及DNA电泳等方法观察四硫化四砷对NB4细胞的诱导凋亡作用 ,用荧光染色体原位杂交技术 ,反转录PCR及Western印迹技术测定这一过程中PML RARα融合基因及其表达产物的改变。结果　四硫化四砷在 0 .5～ 3μmol·L- 1之间能诱导NB4细胞凋亡 ,在此过程中 ,PML RARα融合基因无明显变化 ,但PML RARα融合蛋白和野生型RARα蛋白的表达明显减少。结论　四硫化四砷能诱导NB4细胞凋亡 ,其作用靶点可能在PML RARα融合蛋白和野生型RARα蛋白。     

四硫化四砷对急性早幼粒细胞白血病细胞株NB4的凋亡作用

目的 研究四硫化四砷对NB4细胞的促凋亡作用及这一过程中早幼粒细胞白血病-维甲酸受体α(PML-RARα) 融合基因及其表达产物的变化。方法 通过细胞形态学观察, 流式细胞仪检测及DNA电泳等方法观察四硫化四砷对NB4细胞的诱导凋亡作用，用荧光染色体原位杂交技术, 反转录PCR及Western印迹技术测定这一过程中PML-RARα融合基因及其表达产物的改变。结果 四硫化四砷在0.5～3 μmol·L^-1之间能诱导NB4细胞凋亡，在此过程中，PML-RARα融合基因无明显变化，但PML-RARα融合蛋白和野生型RARα蛋白的表达明显减少。结论 四硫化四砷能诱导NB4细胞凋亡，其作用靶点可能在PML RARα融合蛋白和野生型RARα蛋白。     

脂多糖联合α-干扰素抑制体外白血病细胞株U937的增殖及凋亡效应研究

目的 实验观察α-干扰素(IFN-α)和/或脂多糖(LPS)对体外白血病细胞株U937的增殖及凋亡效应.方法 MTT法检测IFN-α和/或LPS对U937细胞增殖效应的影响;同时采用流式细胞仪对U937细胞的凋亡率的影响.结果 等剂量合用IFN-α和LPS后对U937细胞的增殖率和凋亡率均有明显的升高作用(P<0.05),具有统计学意义.结论 IFN-α和LPS联用后对白血病细胞株U937的增殖抑制率及凋亡率有明显增强作用.     

抗TfR抗体联合姜黄素体外抗瘤效应研究

目的:观察姜黄素联合抗TfR抗体对人黑色素瘤细胞系A375的体外抗瘤效应。方法:通过流式细胞术分析姜黄素和抗TfR抗体联合作用对A375细胞增殖和凋亡的影响。结果:与姜黄素和抗TfR抗体单独作用相比,姜黄素和抗TfR抗体联合作用于肿瘤细胞A375可显著诱导肿瘤细胞的凋亡并抑制其增殖。结论:抗TfR抗体作用可增强黑色素瘤细胞对化疗药物的敏感性。     

Hsp90抑制剂HDN-1诱导急性早幼粒细胞白血病NB4细胞凋亡的研究

目的：探讨南极土壤来源真菌的次级代谢产物HDN-1对人急性粒细胞白血病NB4细胞的增殖抑制,诱导凋亡作用及其机制。方法：采用MTT法检测HDN-1对NB4细胞的增殖抑制作用;DNA结合染料Hoechst 33324染色,Western Blot实验,流式细胞仪检测细胞凋亡以及凋亡相关蛋白的变化。结果：HDN-1能显著抑制NB4细胞的增殖,并呈剂量－时间依赖性;HDN-1作用后,细胞核形态发生明显变化且流式细胞仪分析表明NB4细胞凋亡数量明显增加;HDN-1可引起Caspase-3, 8, 9激活,bid减少,线粒体中凋亡蛋白Bcl-2, Mcl-1的表达降低,以及γ-H2AX、Parp剪切带增加。但是NB4细胞中融合蛋白PML-RARα的表达不能被HDN-1所抑制。结论：HDN-1诱导凋亡是通过Caspase依赖的线粒体途径和死亡受体途径共同介导的,PML-RARα不是Hsp90的客户蛋白,其诱导凋亡机制可能是通过抑制Hsp90的其它蛋白表达进行的。     

中草药抗矽肺的体外实验研究

目的 本研究创用大鼠实验性矽肺体外组织培养新模型初筛抗矽肺药物。方法 这种新的体外实验性矽肺模型是用Sio2颗粒先造成大鼠矽肺模型,然后取出该大鼠肺组织剪碎,进行体外培养,加入药物后再用MTT法检测药物的疗效。结果 利用该方法进行了多种中草药及处方的初步筛选,有效的药物有黄芪、复方转移因子。结论 这种筛选方法周期短,筛选量大,一次可进行10种以上药物的初步筛选,初筛有效的药物再进行动物实验,从而节省了时间、费用。     

螺内酯诱导人急性白血病细胞Jurkat凋亡的作用研究

目的研究螺内酯对人急性白血病细胞Jurkat体外增殖的抑制及诱导凋亡的作用。方法将终浓度分别是10、50及100μmol/L的螺内酯加入Jurkat细胞的培养体系中,24 h内每隔4 h通过MTT法分析Jurkat细胞的增殖抑制率,Annexin V/PI流式细胞术法分析Jurkat细胞的早期凋亡率。结果螺内酯与Jurkat细胞共同培养12 h后,螺内酯能显著增加对细胞的增殖抑制作用,并且与药物浓度成正相关,各浓度组的抑制率随着培养时间的延长而升高,与药物干预时间成正相关;螺内酯处理Jurkat细胞24 h,各浓度组诱导细胞凋亡率分别为:10μmol/L组(11.2±0.35)%、50μmol/L组(29.8±1.27)%及100μmol/L(56.5±1.41)%,各个浓度组诱导细胞凋亡率与药物浓度成正相关。结论螺内酯对人T淋巴细胞白血病Jurkat细胞具有抑制增殖和诱导凋亡的作用,提示该药可能具有潜在抑瘤作用。