miR-509-3p与Rab11a在喉鳞状细胞癌中的表达及其意义

目的:探讨miR-509-3p和预测靶基因Rab11a在喉癌发病中的作用.方法:通过实时荧光定量逆转录PCR检测15例喉癌组织及癌旁正常组织中miR-509-3p和预测靶基因Rab11a的表达情况.用miR-509-3p mimics转染喉癌Hep-2细胞株后,检测预测靶基因Rab11a的表达情况,并分析其相关性.结果:①实时荧光定量逆转录PCR检测结果显示,在喉癌组织中miR-509-3p表达低于癌旁正常组织;而Rab11a的表达明显高于癌旁正常组织(P＜0.05).②经转染miR-509-3p mimics喉癌Hep-2细胞株实验组中Rab11a的表达较阴性对照组下调,差异有统计学意义(P＜0.05).miR-509-3p作为抑癌因子在喉癌组织表达水平低于正常组;预测靶基因Rab11a在喉癌组织表达水平高于正常组;经转染miR-509-3p的喉癌Hep-2细胞株Rab11a表达明显高于对照组.结论:miR-509-3p可能靶基因之一为Rab11a,通过下调预测靶基因Rab11a表达的负向调控机制,发挥抑癌作用.揭示miR-509-3p在喉癌中可能通过减少致癌基因Rab11a表达发挥抑癌作用.     

微小RNA-152-3p 对结肠癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及其作用机制研究

目的探讨微小RNA(miR)-152-3p对结肠癌细胞的增殖、迁移和侵袭的影响及机制。方法2019年2月至2020年4月,将结肠癌SW480细胞分为miR-152-3p模拟物阴性对照(miR-NC)组、miR-152-3p模拟物(miR-152-3p)组、抑制物(anti-miRNC)组、miR-152-3p抑制物(anti-miR-152-3p)组、阴性对照(si-NC)组、沉默转移相关蛋白2(si-MTA2)组、miR-152-3p模拟物+空载体(miR-152-3p+pcDNA3.1)组、miR-152-3p模拟物+过表达MTA2(miR-152-3p+pcDNA3.1-MTA2)组,均用脂质体法转染至结直肠癌SW480细胞中,另取未转染结直肠癌SW480细胞记为Control组。采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测miR-152-3p和MTA2 mRNA的表达水平;蛋白质印迹法测定蛋白的表达;MTT法检测细胞活性;Transwell检测细胞迁移和侵袭;双荧光素酶报告基因检测实验检测荧光活性。结果结肠癌HCT116、SW480及LoVo细胞中miR-152-3p表达分别为0.72±0.04、0.29±0.02、0.49±0.01,人正常结肠上皮细胞NCM460中miR-152-3p表达为1.06±0.12,与正常结肠上皮细胞NCM460相比,结肠癌细胞HCT116、LoVo、SW480中MTA2 mRNA和蛋白较高,miR-152-3p较低(P<0.05);Control组、miR-NC组、miR-152-3p组、si-NC组及si-MTA2组结肠癌SW480细胞吸光度分别为0.92±0.22、0.96±0.17、0.31±0.07、0.99±0.17及0.32±0.09,细胞迁移数分别为(172.00±23.52)个、(169.00±20.66)个、(53.67±12.22)个、(155.67±16.8)个及(54.33±8.74)个,细胞侵袭数分别为(124.67±10.02)个、(122.33±9.45)个、(26.00±5.00)个、(108.33±10.02)个及(42.00±4.00)个,与miR-NC 组相比,miR-152-3p 组SW480细胞中细胞周期蛋白D1(cyclin D1)、基质金属蛋白酶(MMP)-2及SW480细胞活性、迁移和侵袭数量均较低,周期素依赖激酶抑制剂p21(P21)及上皮钙黏素(E-cadherin)较高(P<0.05);与si-NC组相比,si-MTA2组SW480细胞中cyclin D1、MMP-2及SW480细胞活性、迁移和侵袭数量均较低,P21及E-cadherin较高(P<0.05)。转染miR-152-3p和MTA2野生型表达载体的结肠癌SW480细胞荧光素酶活性显著降低(P<0.05)。相比miR-152-3p+pcDNA3.1组,miR-152-3p+pcDNA3.1-MTA2组SW480细胞中P21、E-cadherin的表达较低,MTA2、cyclin D1、MMP-2蛋白的表达较高,SW480细胞活性、迁移、侵袭数量较高(P<0.05)。结论miR-152-3p可能通过下调MTA2抑制结肠癌细胞的增殖、迁移和侵袭。     

食道癌中miR-542-3p对Survivin基因的作用研究

目的研究食道癌中Survivin基因是否受某些miRNA的调控,探讨miR-542-3p的表达变化对Survivin基因的影响。方法细胞水平上通过转染miR-542-3p的模拟物,从而过表达miR-542-3p,通过荧光定量PCR检测Survivin基因的表达变化情况。结果 miR-542-3p过表达后,Survivin基因的表达水平显著降低。结论根据上述结果,笔者推测miR-542-3p对Survivin基因具有负调控作用,有利于改善食道癌的恶化,为食道癌的治疗提供一种潜在的手段。     

lncRNA CASC19通过miR-152-3p上调HMGA2影响骨肉瘤发生发展的机制研究

目的 探讨长链非编码RNA癌症易感基因19(lncRNA CASC19)通过miR-152-3p/高迁移率族蛋白A2(HMGA2)对骨肉瘤发生发展的影响.方法 实验设置si-NC组、si-CASC19组、pcDNA-NC组、pcDNA-CASC19组、miR-NC组、miR-152-3p组、anti-miR-NC组、a...     

p504S和PCNA在前列腺癌中的表达及其意义

目的:探讨前列腺癌及前列腺增生组织中p504S和PCNA的表达与临床意义.方法:采用免疫组织化学方法检测31例前列腺增生及59例前列腺癌患者p504S和PCNA的表达水平.结果:PCNA在前列腺癌组织中表达阳性率较前列腺良性增生组织中明显增加,差异极有统计学意义(P＜0.01),PCNA的表达随着组织学分级及临床分期的增加而增加(P＜0.05); p504S在前列腺癌组织中的表达阳性率明显高于在前列腺增生组织中的表达,差异极有统计学意义(P＜0.0l),其阳性强弱表达在各级前列腺癌组织中差异无统计学意义(P＞0.05).结论:p504S是前列腺癌敏感而特异性的标记物,p504S与PCNA联合检测,可以提高前列腺癌诊断的准确率.     

黄芩苷通过上调miR-485-5p的表达抑制前列腺癌细胞的增殖

目的：从miRNAs的角度研究黄芩苷对前列腺癌细胞增殖的影响及其作用机制。方法：将不同浓度的黄芩苷作用22RV1细胞,应用MTT检测细胞的增殖情况,筛选最佳药物浓度;应用Real-Time PCR检测不同细胞系中miR-485-5p的表达量;检测黄芩苷处理22RV1细胞后miR-485-5p及JAK3 mRNA的表达;应用Western blot检测JAK3蛋白的表达;应用双荧光素酶基因系统验证miR-485-5p与JAK3的靶向作用关系;应用MTT法检测细胞的生存率。结果：筛选出最佳药物浓度为100 μmol·L^-1;22RV1细胞中miR-485-5p的表达量明显低于正常前列腺细胞;黄芩苷刺激细胞后miR-485-5p的表达上调;黄芩苷或miR-485-5p mimics可抑制前列腺癌细胞的JAK3 mRNA和蛋白的表达,miR-485-5p inhibitor可使JAK3 mRNA及蛋白的表达水平上调;黄芩苷或miR-485-5p均可抑制前列腺癌细胞的增殖。结论：黄芩苷通过上调miR-485-5p的表达,抑制前列腺癌细胞的增殖。     

外周血中PCA3基因表达及其在前列腺癌诊断中的意义

目的探讨PCA3对活检阴性的前列腺癌（Pca）临床诊断的应用价值研究。方法收集2011年01月至2012年12月间在我院就诊病理诊断为前列腺癌及前列腺增生患者。同时纳入健康的男性志愿者为正常对照。对所有监测对象,采用荧光定量PCR检测外周血PCA3 mRNA的表达。结果共纳入66例做为对象,其中前列腺癌患者26例,良性前列腺增生共30例,正常对照组10例。健康男性及前列腺增生患者外周血均无PCA3基因的表达,前列腺癌患者有21例表达,PCA3表达阳性率为80.8%（21/26）。前列腺癌组与健康组及增生组均有明显统计学差异（P〈0.01）。PCA3阳性率与PCa临床病理差异无统计学意义,但PCA3基因的表达与PCa临床病理参数差异有统计学意义。结论PCA3基因在外周血的mRNA表达在前列腺癌诊断上有良好特异性。     

尿PCA3评分在前列腺癌的诊断意义分析

目的探讨尿前列腺癌基因3(PCA3)评分在前列腺癌的诊断意义。方法选取前列腺直肠指诊异常的受检者82例作为观察组,另选取30例同期健康查体者作为对照组。检测两组尿液中前列腺特异抗原(PSA)和PCA3 mRNA的表达并计算尿PCA3评分,观察组均行超声引导下穿刺检查确定前列腺癌发生情况,并采用ROC曲线分析尿PCA3评分诊断前列腺癌的准确性。结果观察组的尿PSA mRNA、PCA3 mRNA及PCA3评分分别为(490.12±373.42)、(62.52±54.16)和(159.85±118.78)分,高于对照组的(352.42±326.62)、(4.21±4.03)和(11.95±6.25)分,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组确诊为良性前列腺增生、前列腺癌的患者比例分别为43.90%和56.10%,前列腺癌患者尿PSA mRNA、PCA3 mRNA及PCA3,差异有统计学意义(P<0.05),而良性前列腺增生患者和对照组尿PSA mRNA、PCA3 mRNA及PCA3评分比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。尿PCA3评分经ROC曲线分析,其ROC-AUC=0.893[95%CI(0.834,0.942)],本研究中以截断值65为前列腺癌诊断的临界值时截断值以上有41例前列腺癌患者,敏感性为89.13%,截断值以下63例良性前列腺增生患者和健康人群,特异性为95.45%,阳性预测值和阴性预测值分别为93.18%和92.65%,尿PCA3评分诊断前列腺癌发生的价值良好。结论尿PCA3评分在前列腺癌患者中的水平较高且其截断值为65时诊断前列腺癌可获得较高的诊断价值,因此尿PCA3评分可能作为前列腺癌诊断的参考指标之一。     

LncRNA KIF9-AS1靶向miR-152-3p调控肺癌细胞的顺铂敏感性

目的 探讨长链非编码RNA(lncRNA)驱动蛋白家族成员9反义RNA1(KIF9-AS1)对肺癌细胞的顺铂(DDP)敏感性的影响和作用机制.方法 实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和蛋白质印记(western blot)检测检测A549、A549/DDP中KIF9-AS1、miR-152-3p和多药耐药相关蛋白1(...     

姜黄素介导微小RNA-199a-3p基因对前列腺癌细胞的影响

目的 探讨姜黄素调控微小RNA-199a-3p(miR-199a-3p)的表达对前列腺癌C4-2细胞增殖、迁移和侵袭的影响.方法 (1)将体外培养的前列腺癌C4-2细胞分为4组:空白组(无药物干预)和低、中、高3个剂量实验组(20,40,80μmol·L-1姜黄素干预),选取对C4-2细胞的增殖抑制最明显姜黄素浓度用于...     

微小RNA-6775-3p在乳腺癌组织中的甲基化状态及其临床意义

目的探讨微小RNA-6775-3p(miR-6775-3p)在乳腺癌组织中的甲基化状态及其临床意义。方法甲基化特异性PCR检测63例乳腺癌患者乳腺癌组织及其癌旁正常组织中miR-6775-3p启动子区CpG岛甲基化水平。实时荧光定量PCR法分析乳腺癌组织中miR-6775-3p表达。分析miR-6775-3p启动子区甲基化状态与乳腺癌患者临床病理参数及预后关系。结果乳腺癌组织中miR-6775-3p启动子区甲基化阳性率高于癌旁正常组织(76.2%vs.19.0%)(P<0.01)。miR-6775-3p启动子区甲基化阳性率与TNM分期、肿瘤浸润深度、淋巴结转移及远处转移或复发密切相关(P<0.05)。与15例miR-6775-3p启动子区未甲基化患者比较,48例miR-6775-3p启动子区甲基化患者乳腺癌组织中miR-6775-3p基因表达水平较低(2.743±0.257 vs.4.521±0.399)(P<0.01),生存时间较短[(40.44±4.18)个月vs.(48.80±2.59)个月](P<0.05),累计生存率较低(75.0%vs.80.0%)(...     

长链非编码前列腺癌相关转录因子6靶向微小RNA-139-3p对骨肉瘤细胞增殖和凋亡的影响

目的 探讨长链非编码RNA(LncRNA)前列腺癌相关转录因子6(PCAT6)对骨肉瘤细胞增殖和凋亡的影响和分子机制.方法 实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测20例骨肉瘤组织和与其对应的癌旁组织中PCAT6和微小RNA-139-3p(miR-139-3p)的表达水平.双荧光素酶报告基因实验和RT-qPCR验证PC...     

尿液PCA3基因检测在前列腺癌诊断中的意义

近年来临床上前列腺癌的患者明显增多,其诊断指标有血清PSA和前列腺穿刺活检,由于临床上影响PSA升高的因素很多,临床假阳性的概率高;其穿刺活检是一种有创性检查,感染和出血的机会大,所以有必要用一种更特异的检测方法来诊断前列腺癌。PCA3是近几年来所发现的一种最佳的前列腺癌特异基因,其表达仅在前列腺上皮细胞,且具有肿瘤特异性。本实验建立在RT—PCR基础上检测尿液中PCA3基因表达情况,以探讨其在前列腺癌诊断中临床意义。     

妊娠期高血压孕妇血清miR-212-3p和miR-590-3p水平与胎儿生长受限的相关性分析

目的 探讨妊娠期高血压孕妇血清微小RNA-212-3p(miR-212-3p)、微小RNA-590-3p(miR-590-3p)与胎儿生长受限的关系。方法 选取我院2020年6月～2022年12月收治的172例妊娠期高血压孕妇,根据胎儿生长情况将其分为正常组（胎儿正常）93例和病例组（胎儿生长受限）79例。采用实时荧光定量PCR(q RT-PCR)法检测血清miR-212-3p、miR-590-3p水平;采用Pearson相关分析检验发生胎儿生长受限的妊娠期高血压孕妇血清miR-212-3p、miR-590-3p水平与一般资料的相关性;绘制受试者工作特征曲线（ROC）评估血清miR-212-3p、miR-590-3p水平对妊娠期高血压孕妇胎儿生长受限的预测价值;采用多因素Logistic回归分析检验妊娠期高血压孕妇发生胎儿生长受限的影响因素。结果 病例组血清miR-212-3p、miR-590-3p水平及子宫动脉阻力指数（RI）、子宫动脉搏动指数（PI）、子宫动脉收缩末期峰值流速/舒张末期峰值流速（S/D）高于正常组,新生儿体质量低于正常组,差异有统计学意义（P<0.05）。发生...     

miR-331—3p在肝细胞癌中表达的研究

目的运用实时荧光定量PCR（qRT—PCR）技术检测miR-331—3p在肝癌细胞株和肝癌组织中的表达,探讨其在肝癌中表达的临床意义及潜在临床价值。方法采用基于2^-△△Cr的qRT—PCR检测miR-331—3p在正常肝细胞株（HL-7702）、不同侵袭转移能力的肝癌细胞株（HepG2、MHCC97-H、HCCLM3）的表达,同时收集5例正常肝组织、30例肝癌组织及癌旁组织,进行定量分析,并分析miR-331—3p与肝癌患者临床病理特征的关系。结果与正常肝细胞株相比,miR-331—3p在肝癌细胞株中表达下调,且随着肝癌细胞株侵袭转移程度增加,其表达下调越明显（P〈0．05）;与正常肝组织相比。肝癌组织中miR-331—3p有不同程度的表达下调（P〈0．05）,且与肝癌患者肿瘤多发结节（P=0．036）、低分化程度（P=0．035）以及伴有静脉浸润（P=0．016）等临床病理特征相关。结论miR-331-3p在肝癌的发生、发展过程可能发挥重要作用,miR-331—3p有望成为肝癌新的生物标志物或预后因子。     

p53和miRNA之间的联系被发现

p53肿瘤抑制因子是一种具有很多生长抑制目标的众所周知的转录激活因子。p53功能的破坏在多数癌症的发展过程中是一个根本性事件。微RNA（miRNA）已成为肿瘤抑制中的重要因子，在这项研究工作中。p53和miRNA之间一个出乎意料的联系被发现。     

miR-1915-3p和Bcl-2在结肠癌组织中的表达及其临床意义

目的 研究miR-1915-3p及Bcl-2在结肠癌组织中的表达及作用意义。方法 选取2013年2月至2016年2月辽宁省朝阳市第二医院收治的85例结肠癌患者作为研究对象。采集所有患者癌组织及癌旁正常组织,采用RTqPCR检测比较不同结肠组织中的miR-1915-3p及Bcl-2 mRNA表达水平。并分析结肠癌患者不同临床病理特征及预后的miR-1915-3p及Bcl-2 mRNA表达水平。结果 结肠癌组织中miR-1915-3p mRNA表达水平低于癌旁正常组织,而Bcl-2 mRNA表达水平高于癌旁正常组织,差异有统计学意义（P<0.05）。TNM分期Ⅲ～Ⅳ期、低分化程度及淋巴结转移的结肠癌患者miR-1915-3p mRNA表达水平低于Ⅰ～Ⅱ期、中高分化程度及无淋巴结转移结肠癌患者,而Bcl-2mRNA表达水平高于Ⅰ～Ⅱ期、中高分化程度及无淋巴结转移结肠癌患者,差异有统计学意义（P<0.05）。结肠癌死亡患者miR-1915-3p mRNA表达水平低于存活患者,Bcl-2 mRNA表达水平高于存活患者,差异有统计学意义（P<0.05）。结论 miR-1915-3...     

大鼠miR-142-3p、 miR-145-3p表达模式分析

摘要： 目的 筛选并鉴定对大鼠乳腺发育和泌乳调控起关键作用的微 RNAs （miRNAs）。方法 以 U6 为内参基因, 运用实时荧光定量 PCR, 比较 miR-142-3p、 miR-145-3p 在泌乳 21 d 大鼠乳腺、 肝、 心、 脾、 肺、 肾、 卵巢、 子宫各器官的组织样品表达量的差异及不同泌乳阶段 （1、 7、 21 d） 乳腺组织 miR-142-3p、 miR-145-3p 的表达规律。结果 miR-142-3p 在泌乳 21 d 各组织的表达存在差异, 乳腺中的表达量显著高于心、 脾、 肺、 肾、 卵巢和子宫, 仅次于肝中的表达量 （P < 0.05）。miR-145-3p 在乳腺中的表达量显著高于肝、 脾和肾, 而在心、 肺、 卵巢和子宫中差异无统计学意义 （P > 0.05）。乳腺组织在泌乳 1、 7、 21 d 比较, miR-142-3p 的相对表达量持续下调, 而 miR-145-3p 的相对表达量先下调后上调。结论 miR-142-3p 和 miR-145-3p 在大鼠各组织及不同生理时期存在表达差异; miR-142-3p 可通过调节靶基因催乳素受体 （Prlr） 来调控乳腺的发育和泌乳的形成, miR-145-3p 可能具有与 miR-145、 miR-145-5p 相似的功能。