缺氧诱导因子1和Survivin蛋白在食管鳞癌中的表达及其意义

目的：探讨缺氧诱导因子1（HIF-1α）和Survivin蛋白表达与食管癌浸润及转移预后生物学行为的关系。方法：应用免疫组化SP法检测37例食管癌中HIF-1α和Survivin蛋白的表达。结果：从正常上皮组织、轻度不典型增生组织、重度不典型增生组织到原位癌、浸润癌，HIF-1α和Survivin蛋白表达的阳性率呈逐渐增高趋势，差异均有显著性（P〈0．05）。结论：HIF-1α与Survivin蛋白可作为判断食管癌生物学行为的客观指标，对判断食管癌的预后具有重要意义。     

TrxR、7-AABs、叉头框A1蛋白在早期肺癌组织中的表达水平及其意义

【目的】探讨硫氧还蛋白还原酶(thioredoxin reductase,TrxR)、血清七种自身抗体(seven autoantibodies,7-AABs),叉头框A1蛋白在早期肺癌组织中的表达水平及其意义。【方法】本院收治的100例早期肺癌患者,均在本院进行手术切除癌组织,并留取肺癌组织和距离癌组织边缘2 cm以上的癌旁组织。采用酶联免疫法检测抑癌基因产物、蛋白基因产物9.5(Protein gene product,PGP9.5)、性别决定区Y框蛋白2(The sex-determining region Y box protein 2,SOX2)、肺癌组肿瘤/睾丸抗原G抗原7(Tumor/testicular antigen G antigen 7 in lung cancer group,GAGE7)、ATP结合RNA旋酶GBU4-5、黑色素瘤抗原A1(Melanoma antigen A1,MAGEA1)、肿瘤相关基因(Tumor-associated gene,CAGE)水平,采用免疫组化学染色检测TrxR、叉头框A1蛋白水平。【结果】肺癌患者中7-AABs水平高于对照组(P<0.05),TrxR、叉头框A1蛋白表达水平高于癌旁组织;N1淋巴结转移者7-AABs、TrxR、叉头框A1蛋白表达水平高于无N1淋巴结转移者;低分化者7-AABs、TrxR、叉头框A1蛋白表达水平高于高-中分化者,且差异均具有统计学意义(P<0.05)。【结论】TrxR、7-AABs、叉头框A1蛋白在早期肺癌组织中的表达水平显著升高,且与早期肺癌有无N1淋巴结转移,分化程度有关,三者均参与了早期肺癌的发生和发展。     

p63,p73蛋白在乳腺癌组织中的表达及其意义

目的：探讨p63和p73蛋白在乳腺组织的表达情况及其与乳腺癌生物学行为的关系。方法：用免疫组化SP法检测5例正常乳腺组织（对照组）,5例增生乳腺组织（增生组）,15例原位乳腺癌组织（原位组）,60例浸润性乳腺癌组织（浸润组）中p63蛋白、p73蛋白的表达。结果：乳腺良性病变的腺泡和导管周围可见连续的肌上皮围绕,p63阳性;原位组p63染色显示肌上皮呈不连续表达;乳腺癌早期浸润灶及浸润性癌,p63染色显示肌上皮大部分消失或无肌上皮。p73在对照组、增生组、原位组及浸润组中的阳性率分别为0%（0/5）,20.0%（1/5）,33.3%（5/15）和66.7%（40/60）,差异有显著性（P〈0.05）;在乳腺肿瘤组织中,随组织学病理分级的增加、临床分期的进展和腋窝淋巴结的转移,p73表达阳性率则逐渐上升,差异有显著性（P〈0.05）;p63蛋白、p73蛋白表达无相关性。结论：p63、p73在乳腺癌的发生、发展过程中起着重要的作用;二者联合检测可为乳腺癌的早期诊断、及时治疗及预后判断提供必要的理论依据。     

神经节苷酯GM1对BCL-2及BDNF蛋白表达的调控在原代培养大鼠海马神经元放射性损伤防护中的意义

[目的]研究神经节苷酯GM1对原代培养大鼠海马神经元放射性损伤的保护作用及机制,为放射性脑损伤的预防提供理论依据及新的方法.[方法]30 Gy 的X射线单次照射培养至12d的海马神经元,用DAPI染核法检测海马神经元凋亡,用免疫组化法检测海马神经元BCL-2及BDNF蛋白表达情况.实验分组：0Gy组,单纯神经节苷酯GM1预处理组,30Gy组,30Gy＋神经节苷酯GM1预处理组.[结果]在照射后24 h,30Gy组核固缩百分数为（24.5±3.80）%,较0Gy组（2.00%±0.10%）有显著性差异（P〈0.01）;30Gy＋神经节苷酯GM1 100 ng/mL组核固缩百分数为（7.43±0.61）%,较30Gy组（P〈0.01）及0Gy组（P〈0.01）均有显著性差异.30Gy组海马神经元BCL-2表达阳性率为（32.89±2.82）%,较0Gy组[（93.42±2.70）%]有显著性差异（P〈0.01）,30Gy＋神经节苷酯GM1 100 ng/mL组海马神经元BCL-2表达阳性率为（77.43±0.69）%,较30Gy组（P〈0.01）及0Gy组（P〈0.01）均有显著性差异.30Gy组海马神经元BDNF表达阳性率为（88.18±3.50）%,较0Gy组[（24.28±2.96）%]有显著性差异（P〈0.01）,30Gy＋神经节苷酯GM1 100 ng/mL组海马神经元BDNF表达阳性率为（77.86±0.91）%,较30Gy组（P〈0.01）及0Gy组（P〈0.01）均有显著性差异.[结论]应用神经节苷酯GM1可以分别通过上调及下调X线照射后BCL-2及BDNF的表达而显著减少神经元的凋亡.     

大鼠肢体缺血再灌注后海马N-甲基-D-天冬氨酸受体2B亚单位表达的变化

目的：观察肢体缺血再灌注后海马N-甲基-D-天冬氨酸受体2B亚单位表达的变化.方法：实验于2005-04在河北医科大学解剖系中心实验室完成.选用10～12周龄健康雄性SD大鼠66只,随机数字表法分为3组：正常组（n=6）、假手术模型组、缺血-再灌注组,后2组又分为6,12,24,48及72 h 5个时间点,每个时间点6只.制备大鼠肢体缺血-再灌注模型,夹闭双侧股动脉根部4 h,去夹再分别开放6,12,24,48,72 h,假手术模型组同样手术处理,但不夹闭股动脉,不环扎橡皮筋.将正常组、不同时间点（6,12,24,48及72 h）的缺血-再灌注组以及假手术模型组大鼠,常规灌注取材及制备石蜡切片,免疫组织化学染色并利用图像分析系统分析.结果：在实验过程中,实验动物无脱失值,全部进入结果分析.①肢体缺血-再灌注6,12,24,48,72 h后,N-甲基-D-天冬氨酸受体2B亚单位蛋白在海马CA1区锥体层神经元表达灰度值分别为（14.64&;#177;2.71）,（18.90&;#177;1.40）,（24.71&;#177;2.89）,（22.10&;#177;2.62）和（21.62&;#177;1.98）,与正常组和假手术模型组灰度值比较,缺血-再灌注6 h未见显著变化,再灌注12,24,48,72 h的表达都有显著升高,差异均有显著性意义（P＜0.01/0.05）.其中再灌注24 h前后达到峰值,灰度值是正常组的172%.②肢体缺血-再灌注6,12,24,48,72 h后,N-甲基-D-天冬氨酸受体2B亚单位蛋白在海马CA3区锥体层神经元表达灰度值分别为（10.47&;#177;2.13）,（14.26&;#177;1.54）,（26.32&;#177;2.83）,（16.18&;#177;2.43）和（15.60&;#177;2.70）,与正常组和假手术模型组灰度值比较,缺血-再灌注6 h组未见显著变化,再灌注12,24,48,72 h的表达都有显著升高,差异均有显著性意义（P＜0.01/0.05）;其中再灌注24 h前后达到峰值,灰度值是正常组的261%.③假手术模型组与正常组比较,N-甲基-D-天冬氨酸受体2B亚单位蛋白在海马CA1、CA3区锥体层神经元表达灰度值未见显著性变化.结论：N-甲基-D-天冬氨酸1/2B型受体介入了肢体缺血-再灌注致海马损伤的病理过程.     

谷氨酸转运体和γ-氨基丁酸转运体在脑缺血模型中的表达意义

目的探讨谷氨酸转运体和γ-氨基丁酸转运体在脑缺血模型中的表达意义。方法在体内缺血、体外缺氧2种模型中利用免疫荧光、Westen-blot、RT-PCR等技术定性定量的检测主要的谷氨酸转运体-1(EAAC-1)和γ-氨基丁酸转运体-1(GAT-1)的表达情况。结果在局灶性脑缺血模型(大鼠脑中动脉缺血模型)和缺氧条件下培养的原代神经元中均发现,EAAC1表达下降,GAT1表达上升。结论在脑缺血缺氧状态下EAAC1表达下降,GAT1表达上调。     

HPV16-E6蛋白和Survivin在宫颈鳞癌及其癌前病变中的表达及意义

目的探讨HPV16-E6蛋白和Survivin在宫颈鳞癌和宫颈上皮内瘤变组织中的表达以及在宫颈癌发生、发展中的作用。方法取宫颈鳞癌30例、宫颈上皮内瘤变90例(其中CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ分别30例),采用免疫组化EnVision二步法检测标本中HPV16-E6和Survivin的表达,另取正常宫颈者10例为对照组。结果 HPV16-E6和Survivin在宫颈鳞癌及宫颈上皮内瘤变中的表达随宫颈病变进展而呈递增趋势,且二者呈正相关;HPV16-E6和Survivin在宫颈鳞癌中的表达与患者年龄,临床分期、病理分级、淋巴结转移无关。结论 HPV16-E6和Sur-vivin与宫颈癌的发生、发展密切相关。     

衰老与海马CA1区锥体细胞退行性变及自由基和空间记忆的关系

目的:研究衰老大鼠记忆行为、自由基含量和CA1区细胞超微结构的特征以及衰老所致记忆减退的神经生物学机制。方法:雄性SD大鼠40只,青年和老年组各20只。应用Morris水迷宫测量大鼠空间记忆水平,分光光度计测量海马组织蛋白质的含量;巴比妥酸还原法测定海马脂质过氧化物含量;透射电镜观察海马CA1区锥体细胞的形态;体视学分析细胞内粗面内质网和线粒体的面数密度。结果:较之青年大鼠,衰老大鼠寻找平台的潜伏期延长(38与12s,t=8.04,P<0.01);跨平台次数的百分比减少(50%与82%,t=10.17,P<0.05)。海马脂质过氧化物(146.2与178.4nmol/g,t=5.61,P<0.01)、组织总蛋白(127.9与168.8μg比较,t=8.25,P<0.01)和非水溶性蛋白(21.1与34.3μg比较,t=9.53,P<0.01)的含量增高;海马CA1区250μm锥体细胞的数量(51.9与40.7个比较,t=6.55,P<0.01)、核仁体积(5.34与4.02μm3,t=7.71,P<0.01)、粗面内质网面密度(1.47与0.94μm2/μm3,t=6.55,P<0.01)减少。结论:海马CA1区锥体细胞的退行性变化是衰老致记忆减退的原因之一,而过量的脂质过氧化物可能是导致锥体细胞变性的原因。     

survivin在胰腺癌组织中的表达及其意义

[目的]检测生存素基因(survivin)在胰腺癌组织中的表迭情况,并分析其与临床病理指标的关系.[方法]应用免疫组化法检测35例胰腺癌手术切除标本和10例癌旁正常组织,分析survivin的表达与病理分级和临床分期的关系.[结果]免疫组化显示胰腺癌组织中有survivin的阳性表达,而癌旁组织中无sur-vivin的表达.胰腺癌组织中其表迭的阳性率(26/35,74.29%)明显高于癌旁组织(0/10,0%)(P<0.05),survivin在胰腺癌组织中的表达水平与肿瘤的临床分期和病理分级有关;两病理因素分组间差异有显著性(P<0.05),而与肿瘤的远处转移无明显关系;远处转移分组间差异无显著性(P>0.05).[结论]Survivin在胰腺癌组织中的阳性率高于癌旁组织,并与其病理分级和临床分期相关,可作为早期判别胰腺癌及其预后的指标.     

脑性瘫痪幼鼠脑谷氨酸脱羧酶、γ-氨基丁酸A受体表达的变化

目的:观察缺氧缺血窒息脑性瘫痪(简称脑瘫)幼鼠脑中谷氨酸脱羧酶(GAD),氨基丁酸A受体(GABAA)α1,β2两种亚单位受体表达的变化,探讨GAD,GABAAα1,β2在脑瘫中的作用机制。方法:采用改良的Philip方法,建立缺氧缺血窒息脑瘫模型;应用免疫组织化学ABC方法,检测缺氧缺血后不同时间大脑、海马中GAD,GABAA受体α1,β2亚单位表达的变化情况。结果:单位面积(mm2)大脑皮质中GAD阳性细胞数在缺氧缺血后2h增高48%,24h接近正常,海马中变化不明显;1mm2皮层及海马中GABAA受体α1mRNA阳性细胞数在缺氧缺血后12h下降分别达49%和60%,96h最为显著,分别达66%和70%;而大脑皮质和海马中β2亚单位1mm2阳性细胞数在2h下降分别达41%和38%,48h下降最为明显均为57%。结论:缺氧缺血初期脑瘫鼠脑中GAD的增加是机体的一种自我保护机制;GABAA受体α1,β2亚单位的减少,使GABA作用于GABAA受体所产生的突触后抑制效应降低,参与了脑瘫的形成。     

Notch1受体蛋白在成人肺癌中的表达

【目的】研究Notchl蛋白在成人小细胞肺癌（SCLC）及非小细胞肺癌（NSCLC）中的表达,探讨Notchl受体在原发性支气管肺癌发生中的作用。【方法】采用免疫组织化学方法分别检测肺鳞癌、腺癌、小细胞癌及阴性组织切缘各组肺组织中Notch1蛋白的表达,并用Image-Pro Plus6．0图像分析系统进行定量分析,比较Notchl蛋白在各组中的表达。【结果】肺鳞癌及腺癌标本中Notchl的表达强于相应的阴性组织切缘标本（P〈0．05及P〈0．01）;肺小细胞癌标本中Notchl的表达弱于相应的阴性组织切缘标本,但组间比较差异无统计学意义（P〉0．05）。在三组肺癌标本中,以肺腺癌中Notch1的表达最强（P〈0．01）;鳞癌组中Notchl的表达亦强于小细胞癌组（P〈0．01）。[结论]Notchl信号在支气管肺癌的发病机制中可能发挥一定作用,且在不同的病理类型中起到的作用有差异。