血管内皮细胞活性化合物对同型半胱氨酸致内皮细胞损伤的保护作用

目的观察同型半胱氨酸(homocyste ine,HCY)对培养的牛主动脉内皮细胞单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、细胞间粘附分子-1(ICAM-1)、血管细胞粘附分子-1(VCAM-1)mRNA表达水平的影响,并观察槟榔碱、PPVP、DMHPPP、辛伐他汀的干预作用,探讨它们在动脉粥样硬化中的作用机制。方法通过RT-PCR技术,以β2-微球蛋白为内参照检测内皮细胞与不同浓度HCY作用不同时间后,以及用槟榔碱、PPVP、DMHPPP、辛伐他汀预孵育20 h后再给予HCY时内皮细胞MCP-1、ICAM-1、VCAM-1 mRNA表达水平的变化。结果终浓度为0.1、0.5和5.0 mmol.L-1的HCY孵育牛主动脉内皮细胞6 h,以及以终浓度为0.1 mmol.L-1的HCY分别孵育3、6、12、24 h均可使MCP-1 mRNA、ICAM-1mRNA及VCAM-1 mRNA表达上调,且上调作用有浓度与时间依赖性。10μmol.L-1槟榔碱、PPVP、DMHPPP和辛伐他汀与牛主动脉内皮细胞孵育20 h,再给予终浓度为0.1 mmol.L-1的HCY孵育6 h后,与模型组相比,槟榔碱、PPVP和辛伐他汀均可抑制由HCY诱导的牛主动脉内皮细胞MCP-1、ICAM-1、VCAM-1 mRNA表达上调;DMHPPP可抑制MCP-1和VCAM-1 mRNA表达上调。结论HCY可诱导牛主动脉内皮细胞MCP-1,ICAM-1和VCAM-1 mRNA表达水平增加。槟榔碱、PPVP、DMHPPP和辛伐他汀可以减轻其过量表达。     

金属硫蛋白对同型半胱氨酸损伤血管内皮细胞的拮抗作用

目的　观察金属硫蛋白 (metallothionein ,MT)对同型半胱氨酸损伤血管内皮细胞的拮抗作用。方法　人血管内皮细胞培养 ;自动生化分析仪测乳酸脱氢酶 (LDH)漏出量 ;10 9Cd 血红素饱和法测细胞MT含量 ;台盼蓝排除法计算细胞存活率。结果　同型半胱氨酰 (Hcy) (0 1～ 1 0mmol·L-1)呈浓度依赖性地增加细胞LDH漏出和降低细胞存活率。外源给予MT 5× 10 -8μmol·L-1可呈剂量依赖性的抑制Hcy引起的血管内皮细胞损伤 ,5× 10 -8mol·L-1MT与1 0mmol·L-1Hcy共同孵育组较单纯Hcy孵育组血管内皮细胞LDH漏出降低 2 7 1% (P <0 0 5 ) ,细胞存活增加 6 %(P <0 0 5 )。凝血酶预孵育可诱导培养的血管内皮细胞MT生成 ,其含量较对照组增加 32 5 % (P <0 0 1)。凝血酶诱导内源性MT生成亦明显抑制Hcy引起的血管内皮细胞损伤 ,10 0 0U·L-1凝血酶与Hcy共同孵育组较单纯Hcy孵育组血管内皮细胞LDH漏出降低 46 % (P <0 0 1) ;细胞存活率升高 8% (P <0 0 5 )。结论　无论外源给予MT或内源性诱导MT生成均可降低Hcy引起的血管内皮细胞损伤作用     

槲皮素对高同型半胱氨酸血症家兔血管内皮细胞的保护作用

目的　评估槲皮素对高同型半胱氨酸血症家兔血管内皮细胞的影响。方法　制造家兔高同型半胱氨酸损伤血管内皮细胞模型 ,同时灌胃给予槲皮素 5 0、10 0和 2 0 0mg·kg-1,30d后采血进行循环内皮细胞计数 ,测定血清MDA、SOD、NO和血浆ET ,取胸主动脉作血管反应性测定 ,并进行组织学检查。结果　与损伤模型组相比 ,槲皮素给药组循环内皮细胞降低 ,MDA、ET水平降低 ,而NO和SOD水平升高 ,对ACh的内皮依赖性舒张反应趋近正常 ,对NTG的内皮非依赖性舒张反应无影响 ,组织学检查也证实槲皮素有效地对抗高同型半胱氨酸造成的血管内皮细胞损伤。结论　槲皮素对高同型半胱氨酸损伤家兔血管内皮细胞有保护作用。     

盐酸埃他卡林对同型半胱氨酸致内皮细胞损伤的保护作用研究

高浓度同型半胱氨酸具有血管内皮细胞毒性。高血压病理过程中存在血管内皮细胞功能紊乱。盐酸埃他卡林（Iptakalim hydrochloride，Ipt）为新型降血压药物。本实验以逆转录-聚合酶链式反应检测单核细胞趋化蛋白-1（monocyte chemoattractant protein-1，MCP-1）、细胞间粘附分子-1（intercellular adhesive molecule-1，ICAM-1）、血管细胞黏附分子-1（vascular cell adhesive moleculel-1，VCAM-1）mRNA表达水平，观察埃他卡林对同型半胱氨酸（homocysteine，HCY）诱导内皮细胞损伤的作用。     

阿魏酸钠对同型半胱氨酸致人脐静脉内皮细胞功能障碍的影响及机制

目的：采用人脐静脉内皮细胞建立了同型半胱氨酸血管内皮细胞损伤模型,研究阿魏酸钠对胞外同型半胱氨酸损伤的内皮细胞功能障碍的保护作用。方法：采用CCK8法检测不同浓度阿魏酸钠对人脐静脉内皮细胞活性的影响;人脐静脉内皮细胞与不同浓度阿魏酸钠和同型半胱氨酸共同孵育后,直接观察同型半胱氨酸对人脐静脉内皮细胞形态的影响,检测一氧化氮、一氧化氮合成酶、内皮素、丙二醛、超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶含量变化及相应阿魏酸钠的保护作用。结果：阿魏酸钠能够减少同型半胱氨酸对人脐静脉内皮细胞的损伤,降低同型半胱氨酸对人脐静脉内皮细胞产生的氧化压力,减轻同型半胱氨酸诱导的人脐静脉内皮细胞分泌功能异常。结论：阿魏酸钠能够缓解同型半胱氨酸导致的人脐静脉内皮细胞功能障碍。     

同型半胱氨酸诱导人血管平滑肌细胞氧化损伤的研究

目的探讨同型半胱氨酸（Hcy）对人脐静脉血管平滑肌细胞（VSMCs）氧化损伤的作用及机制。方法用含不同剂量Hcy（50～1000μmol/L）的培养基培养VSMCs24h后,以分光光度比色法分别测定细胞内丙二醛（MDA）含量和超氧化物酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）活力的改变。结果随Hcy浓度增加,VSMCs内MDA的含量明显增加,SOD和CAT的活力也显著升高。Hcy明显促进了VSMCs的氧化。结论Hcy可直接诱导VSMCs的氧化损伤。     

丙丁酚对脑微血管内皮细胞损伤的保护作用研究

目的:观察同型半胱氨酸(Hcy)对大鼠脑微血管内皮细胞(RCMEC)损伤的保护作用。方法:将RCMEC分为损伤组和正常对照组,观察Hcy对RCMEC的影响;另将RCMEC分为正常对照组、损伤组和丙丁酚不同剂量组,观察各组细胞乳酸脱氢酶(LDH)释放率及细胞生长曲线。结果:与正常对照组比较,损伤组RCMEC生长受抑且细胞LDH释放率明显增加;丙丁酚浓度在10~50μmol/L范围内细胞LDH释放率依次减少。结论:Hcy对RCMEC有毒性损伤作用,丙丁酚呈剂量依赖性拮抗Hcy所致RCMEC损伤。     

同型半胱氨酸对人脐静脉内皮细胞MCP-1 mRNA表达的影响

目的:探讨同型半胱氨酸(Hcy)对人脐静脉内皮细胞单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)mRNA表达的影响.方法:人脐静脉内皮细胞CRL-1730融合至90%分别加入不同浓度Hcy:空白组0 mmol/L、生理剂量组0.01 mmol/L、病理剂量组0.1 mmol/L、非毒性药理剂量组1.0 mmol/L.毒性药理剂量组5.0 mmol/L,分别刺激细胞6 h,用1.0 mmol/L Hcy刺激内皮细胞1、6、24 h;收集细胞提取总RNA,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)测定Hcy对MCP-1 mRNA的表达情况.结果:不同浓度Hcy刺激CRL-1730 6 h,细胞内MCP-1 mRNA表达差异有统计学意义(P < 0.05).与生理剂量组相比,非毒性药理剂量组MCP-1 mRNA表达升高,毒性药理剂量组表达降低;1.0 mmol/L Hcy刺激CRL-1730不同时间后,MCP-1 mRNA表达随刺激时间延长呈逐渐降低的趋势,24 h表达量最低(P < 0.01).结论:Hcy可以影响人脐静脉内皮细胞MCP-1 mRNA的表达,在动脉粥样硬化的发生过程中发挥重要的作用.     

螺旋藻对高同型半胱氨酸血症大鼠氧化应激水平及动脉损伤的影响

目的研究螺旋藻对高同型半胱氨酸血症（HHcy）大鼠氧化应激水平及动脉损伤的影响。方法雄性Wistar大鼠60只随机分成6组：正常对照组、HHcy模型组、螺旋藻低、中、高剂量组和叶酸组，每组10只均喂以普通鼠饲料。除正常对照组外，其余各组均给予1g／（ks·d）L-蛋氨酸灌胃，同时螺旋藻各剂量组与叶酸组以灌胃方式给予相应药物。连续喂养12周后，以高效液相色谱法测定血浆同型半胱氨酸（Hcy）水平。以硫代巴比妥酸反应比色法测定血浆丙二醛水平，以黄嘌呤氧化酶法检测血浆超氧化物歧化酶（SOD）活力，以光镜检测腹主动脉组织学变化并以免疫组化方法检测大鼠腹主动脉增殖细胞核抗原（PCNA）蛋白表达。结果HHcy模型组大鼠血浆Hey水平、丙二醛浓度和SOD活力均明显高于正常对照组（P〈0．05和P〈0．01）。以螺旋藻低、中、高剂量和叶酸干预后，血浆Hcy和丙二醛浓度均较HHcy模型组显著下降（P〈0．05，P〈0．01），SOD活力较正常对照组有升高趋势。组织学检测发现，HHcy模型组大鼠腹主动脉受损，PCNA阳性细胞数量与正常对照组相比明显增加（P〈0．05），而螺旋藻各剂量组腹主动脉损伤轻于HHcy模型组，PCNA阳性细胞数量亦较HHcy模型组减少（P〈0．05）。结论螺旋藻能有效降低HHcy大鼠血浆Hey浓度，降低HHcy所引起的氧化应激反应，对HHcy所致的动脉损伤具有保护作用。     

叶酸对高同型半胱氨酸血症的拮抗作用

为探讨实验性高同型半胱氨酸 (Hcy)血症中叶酸的拮抗作用 ,采用高蛋氨酸饮食复制高 Hcy模型 ,测定了血浆总 Hcy水平和血脂、一氧化氮 (NO)、丙二醛 (MDA)。结果显示 ,血浆总 Hcy含量在对照组、蛋氨酸组和叶酸组分别为 3.5 5± 0 .47、90 .2 4±10 .84、75 .2 7± 14 .35 umol/ml。与对照组相比 ,蛋氨酸组和叶酸组的 Hcy均增高 ,差异有显著性 ;叶酸组和蛋氨酸组相比 ,Hcy降低 ,差异也有显著性     

同型半胱氨酸对大鼠主动脉内皮细胞脂质过氧化的影响

目的：探讨同型半胱氨酸（ＨＣＹ）对大鼠主动脉内皮细胞（ＥＣ）脂质过氧化的影响。方法：取体重１５０～２００ｇ健康雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠胸主动脉,以组织贴块法进行ＥＣ培养,第５代用于实验,各实验组及对照组均为６孔细胞,实验组加入５ｍｍｏｌ／ＬＨＣＹ或５ｍｍｏｌ／ＬＨＣＹ＋２５μｍｏｌ／ＬＣｕ＾２＋对照组不加ＨＣＹ。分别在不同时限观察细胞形态并测定丙二醛（ＭＤ）浓度,超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）活性和乳酸脱氢     

同型半胱氨酸对人脐静脉内皮细胞IкB和NF-кB表达的影响

目的:观察同型半胱氨酸(Hey)对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)核因子(NF)-кB的表达、激活的影响及其诱导动脉粥样硬化形成的分子机制.方法:将体外培养的HUVECs分为对照组、2.5(H1),5(H2),10(H3)及15 mmol/L(H4)5组,培养24 h.通过四甲基噻唑氮蓝(MTT)比色法测定细胞活力,采用RT-PCR法检测NF-кB p65 mRNA的表达,Westem blot检测NF-KB抑制蛋白-α(IKB-α)的蛋白降解,免疫组化法检测NF-кB的核转移趋势.结果:H2,H3,H4组HUVECs细胞活力较对照组明显下降(P<0.01);Hey可使NF-кB p65 mRNA的表达明显增强(P<0.05或P<0.01);Hey可促进IкB-α蛋白降解,且呈现明显的剂量依赖性;Hey处理HUVECs后,大量的NF-кB p65从细胞质进入细胞核.结论:Hey可通过增强NF-кB p65 mRNA的表达,加速IкB-α蛋白的降解,促进NF-кB p65的释放、活化,从而转移进细胞核,调节其下游的趋化因子、细胞黏附分子的表达,促进动脉粥样硬化的形成和发展.     

同型半胱氨酸对人脐静脉内皮细胞IκB和NF-κB表达的影响

目的:观察同型半胱氨酸(Hcy)对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)核因子(NF)-κB的表达、激活的影响及其诱导动脉粥样硬化形成的分子机制。方法:将体外培养的HUVECs分为对照组、2.5(H1)、5(H2)、10(H3)及15mmol/L(H4)5组,培养24h。通过四甲基噻唑氮蓝(MTT)比色法测定细胞活力,采用RT-PCR法检测NF-κBp65mRNA的表达,Westernblot检测NF-κB抑制蛋白-α(IκB-α)的蛋白降解,免疫组化法检测NF-κB的核转移趋势。结果:H2、H3、H4组HUVECs细胞活力较对照组明显下降(P<0.01);Hcy可使NF-κBp65mRNA的表达明显增强(P<0.05或P<0.01);Hcy可促进IκB-α蛋白降解,且呈现明显的剂量依赖性;Hcy处理HUVECs后,大量的NF-κBp65从细胞质进入细胞核。结论:Hcy可通过增强NF-κBp65mRNA的表达,加速IκB-α蛋白的降解,促进NF-κBp65的释放、活化,从而转移进细胞核,调节其下游的趋化因子、细胞黏附分子的表达,促进动脉粥样硬化的形成和发展。     

高同型半胱氨酸血症与脑梗死的相关性观察

本文通过检测急性脑血栓形成患者血浆HCY（Homocysteine）和叶酸的浓度,探讨高HCY与急性脑梗死的关系及HCY的影响因素。     

同型半胱氨酸与血管内皮功能障碍研究进展

自1969年McCully在病理上发现高同型半胱氨酸尿症患者存在广泛的动脉粥样硬化之后,许多研究已经证实同型半胱氨酸(Homocysteine,HCY)是动脉粥样硬化的一个独立危险因素。Hanrany等认为同型半胱氨酸引起内皮功能障碍是导致动脉粥样硬化的重要机制之一。     

同型半胱氨酸在糖尿病肾病中的作用

糖尿病可引起多种并发症,如视网膜病变、周围神经病变、糖尿病肾病（ DN）等。 DN是临床常见和多发的糖尿病并发症,是糖尿病最严重的全身性微血管病变之表现。 DN时肾小球肥大,基底膜增厚,细胞外基质积聚,导致弥漫性或结节性肾小球硬化和肾功能衰竭［1］。研究证明,高同型半胱氨酸（ Hcy）血症是影响糖尿病预后特别是引发血管并发症的重要因素［2,3］。Hcy是人体蛋氨酸循环中的代谢产物硫基氨基酸,体内该水平达到一定程度时会导致血管内皮细胞的毒性作用,并干扰机体凝血系统及血脂代谢等［4］,对微血管造成一定程度的损害,进而引起血管性疾病的发生。本文就Hcy在糖尿病肾病中所起的作用进行研究,探讨通过降低血清Hcy水平而达到糖尿病肾病的可能性治疗。     

板蓝根注射液对人脐静脉血管内皮细胞的作用

目的 研究板蓝根注射液对人脐静脉血管内皮细胞的作用机制.方法 用不同浓度的板蓝根注射液与人脐静脉血管内皮细胞(ECV-304)共同培养后,采用MTY法及形态学方法观察板蓝根注射液对人脐静脉血管内皮细胞的作用.结果 不同浓度的板蓝根注射液对细胞生长具有抑制作用.结论 板蓝根注射液对人脐静脉血管内皮细胞的增殖不但具有抑制作用,且与浓度呈正相关.     

高同型半胱氨酸血症对帕金森病的影响

目的研究高同型半胱氨酸血症对帕金森病的发病与药物治疗的影响。方法选择正常老年组30例和未治疗帕金森病(PD)患者组30例,应用高效液相色谱法测定血浆同型半胱氨酸(hcy)水平。选择治疗中的PD患者60例,分为治疗组(应用美多巴)30例和对照组30例(应用其他抗震颤麻痹药物),同样方法测定其血浆中hcy水平。结果未治疗PD组、治疗组和对照组的hcy水平分别为:18.79±2.14、21.30±3.57和19.82±2.80,与正常老年组(12.31±1.26)比较显著升高(P<0.05),治疗组与未治疗PD组、对照组比较hcy水平无明显差异。结论高同型半胱氨酸血症是PD的危险因素,但对PD的治疗无明显影响。