体外分离培养小鼠骨髓间充质干细胞I、III型前胶原的表达

背景：尽管目前研究将骨髓间充质干细胞的Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白高表达作为细胞向某一方向分化的重要标志，但未分化的骨髓间充质干细胞是否表达该类蛋白目前尚无定论。 目的：观察分离培养的小鼠骨髓间充质干细胞内Ⅰ、Ⅲ型前胶原的表达情况。 设计、时间及地点：细胞学体外对照观察，于2007-10/2008-05在广东药学院完成。 材料：ICR小鼠3只，1 d龄ICR乳鼠1只，由广东省医学实验动物中心提供。 方法：利用差速贴壁法体外分离纯化小鼠骨髓间充质干细胞，待细胞至70%~80%融合时传代。取1 d龄ICR乳鼠皮肤组织，自行分离传代并冻存，经复苏后获得乳鼠皮肤成纤维细胞。实验组将稳定传代3次的小鼠骨髓间充质干细胞接种到6孔培养板中，按109 L-1密度接种，1 mL/孔；对照组同法接种乳鼠皮肤成纤维细胞，培养72 h。 主要观察指标：骨髓间充质干细胞的形态及生长情况，RT-PCR法检测细胞内Ⅰ、Ⅲ型前胶原的表达。 结果：原代培养的小鼠骨髓间充质干细胞集落形成初期，细胞核较大，胞浆较少，细胞呈三角形、多角形和长梭形等多种形态；传代后细胞生长旺盛，多数呈长梭型，细胞表面有大量微绒毛。培养48 h时，实验组无Ⅰ、Ⅲ型前胶原表达，对照组表达Ⅰ、Ⅲ型前胶原；培养72 h时，实验组Ⅰ、Ⅲ型前胶原表达量显著低于对照组（t=42.692，85.349，P < 0.01）。 结论：传代培养48 h时，骨髓间充质干细胞内Ⅰ、Ⅲ型前胶原基因尚未启动，至72 h后Ⅰ、Ⅲ型前胶原基因出现低表达，其并非像成纤维细胞那样在生长过程中持续的表达Ⅰ、Ⅲ型前胶原基因。     

应用组织工程化肌腱修复跟腱缺损

背景: 间质干细胞或间质祖细胞的非造血细胞可在体内或体外分化为骨、软骨、肌肉、肌腱、脂肪及骨髓基质，这使得它们成为组织工程领域内非常有价值的种子细胞来源。 目的：以骨髓间充质干细胞为种子细胞，以Ⅰ型胶原-聚羟基乙酸为支架构建组织工程化肌腱，观察其修复跟腱缺损的效果。 设计、时间及地点：随机对照动物实验，于2003年在中南大学湘雅医学院进行。 材料：1.5~2.5 kg健康成年家兔由中南大学湘雅医学院动物学部提供，雌雄不限。聚羟基乙酸由威高集团康利达医用制品有限公司提供。SD大鼠由中南大学实验动物学部提供。 方法：提取家兔骨髓，通过离心和贴壁法培养获取骨髓间充质干细胞，将骨髓间充质干细胞进行分离、扩增。抽取SD大鼠尾腱，制备鼠尾Ⅰ型胶原溶液，并与聚羟基乙酸缝线混合培养构建胶原-聚羟基乙酸支架。将未经体外诱导的骨髓间充质干细胞接种于胶 原-聚羟基乙酸支架中构建组织工程化兔肌腱模型，以不加入细胞的为对照。切开30只家兔踝部皮肤，分离出兔跟腱，造成3 cm长缺损，实验组15只以自体骨髓间充质干细胞预制的组织工程化肌腱移植于缺损处，对照组15只以Ⅰ型胶原-聚羟基乙酸支架修复跟腱缺损。 主要观察指标：组织工程化肌腱修复兔跟腱缺损的效果。 结果：含自体骨髓间充质干细胞的Ⅰ型胶原-聚羟基乙酸支架及不含自体骨髓间充质干细胞的Ⅰ型胶原-聚羟基乙酸支架回植于体内时大体观察呈条形凝胶状。回植于体内4周后实验组和对照组均可见移植处形成条索状组织，聚羟基乙酸缝线已降解。8周时观察可见实验组组织工程化肌腱与受体肌腱组织完好连接，呈条索状，与周围其他组织无粘连，为白色、有光泽的致密腱样组织，对照组所形成的组织较实验组细小、与周围组织有粘连。 结论：以骨髓间充质干细胞为种子细胞，以Ⅰ型胶原-聚羟基乙酸为支架构建的组织工程化肌腱可明显促进肌腱损伤的修复。     

可吸收表皮生长因子复合膜防止肌腱粘连的研究★

背景：采用液态分子生物材料作为屏障预防肌腱粘连发生，存在药物降解快、流失量大、屏障作用不理想等问题，因此研究者们越来越多的倾向于膜态屏障材料的研制开发。同时发现肌腱损伤后，腱细胞在多种内源性的生长因子作用下增殖分化，促进了肌腱的内源性愈合，但究竟哪一种因子是肌腱愈合的特异性因子，也是学者们研究的焦点之一。 目的：观察表皮生长因子复合胶原膜在预防鞘管区肌腱粘连、促进肌腱内源性愈合中的作用。 方法：将30只10月龄雄性leghorn公鸡随机分为3组，每组10只。将每只鸡的左足第三趾造成挤压撕脱伤模型，用改良Kessler缝合法缝接。断端分别包裹复合有表皮生长因子的胶原膜、单纯的胶原膜以及断端不加任何处理。术后4周，对标本进行大体观察、生物力学测试、光镜、电镜等观察。 结果与结论：表皮生长因子胶原膜组肌腱粘连程度较轻，腱缝合段内的胶原纤维数量多，以粗大的Ⅰ型胶原为主；成纤维细胞数量少，腱细胞成熟。单纯胶原膜组肌腱粘连较轻，但腱缝合段内的胶原纤维数量少，排列稀疏，以纤细的Ⅲ型胶原为主；空白对照组肌腱与周围组织粘连重，腱缝合段内的胶原纤维数量较多，排列紊乱，Ⅰ、Ⅲ型胶原交错排列。结果表明表皮生长因子来促进肌腱的内源性愈合，可降解胶原膜修复腱鞘可阻止肌腱的外源性愈合，从而达到防止肌腱粘连的目的。     

新生牛皮胶原蛋白海绵的制备及其体外细胞相容性☆◆

背景：现已证实，人肌腱、牛肌腱、鼠尾、猪皮、新生牛跟腱制备的胶原蛋白海绵有良好的细胞相容性。 目的：采用新生牛皮提取胶原蛋白、制备生物医用胶原蛋白海绵，观察其与羔羊肾成纤维细胞的相容性。 设计、时间及地点：对比观察实验，于2006-05/2007-02在西北民族大学生命科学与工程学院生物工程与技术国家民委重点实验室完成。 材料：出生24 h内宰杀的新生尕里巴牛犊皮，岷县黑裘皮羔羊肾原代成纤维细胞。 方法：取新生牛犊皮，经脱毛、胃蛋白酶+冰醋酸联合处理、盐析、透析、冻干后制备胶原蛋白海绵。将海绵与羔羊肾F3代成纤维细胞混悬液共培养，分别设胶原海绵材料组、阴性对照组（生理盐水）、阳性对照组（橡胶塞浸提液）。 主要观察指标：应用倒置相差显微镜及JVC数码摄像系统观察、拍摄与记录细胞形态、生长情况。培养20，35 d，对共培养物进行AO染色，观察细胞在胶原海绵中的增殖情况。培养65 d后制石蜡切片，行苏木精-伊红染色，观察细胞在胶原海绵中的生长情况。 结果：阳性对照组细胞培养24 h细胞圆缩，不贴壁，3 d后全部死亡。胶原海绵材料组与阴性对照组细胞形态均正常，细胞贴壁生长良好。随着培养时间的延长，海绵孔隙逐渐变小，细胞数量增加，形态变小，海绵外观从柔软、混浊变得挺拔、透明。AO染色显示培养20，35 d的胶原海绵-羔羊肾成纤维细胞共培养物中有大量细胞存在，并且在胶原蛋白空隙中有大量细胞成团簇状生长。苏木精-伊红染色显示有大量蓝色细胞核和新生的红色胶原纤维。 结论：制备的新生牛皮胶原蛋白海绵对岷县黑裘皮羔羊肾成纤维细胞有良好的相容性。     

重建胶原纤维对细胞生长的影响*★

背景：胶原种类很多，而不同细胞只在特定类型的胶原环境中才表现出最佳的增殖和表型。 目的：观察Ⅰ型胶原和Ⅱ型胶原对小鼠皮肤成纤维细胞、人牙周膜成纤维细胞和兔软骨细胞生长的影响。 设计、时间及地点：对比观察，细胞学体外实验，于2007-09/2008-09在四川大学生物材料工程研究中心胶原研究室完成。 材料：自制达到中试水平的猪皮Ⅰ型胶原和猪软骨Ⅱ型胶原。 方法：分别将3种细胞在猪皮Ⅰ型胶原和猪软骨Ⅱ型胶原环境中进行体外培养，比较不同细胞在材料上的行为差异。 主要观察指标：傅里叶变换红外光谱、示差扫描热分析和凝胶动力学分析比较2种胶原的热变性温度及在结构和性质上的差异；MTT法观察细胞在2种胶原环境中的黏附、增殖情况。 结果：猪软骨Ⅱ型胶原和猪皮Ⅰ型胶原的热变性温度分别为105.8，87.5 ℃，2种胶原的官能团区相似。凝胶化曲线的对比中猪皮Ⅰ型胶原的成纤维过程较猪软骨Ⅱ型胶原迅速。MTT值显示细胞生长初期，小鼠皮肤成纤维细胞在软骨Ⅱ型胶原环境表现了较好的黏附性，但是更适于在猪皮Ⅰ型胶原上生长；人牙周膜成纤维细胞与小鼠皮肤成纤维细胞对胶原纤维的反应恰好相反。兔软骨细胞第2天在两种胶原上的黏附相似，第4天时在猪软骨Ⅱ型胶原环境中表现出较大的细胞生长密度。 结论：不同细胞对Ⅰ，Ⅱ型胶原纤维表现了不同的时间依赖性，但猪软骨Ⅱ型胶原环境更接近于软骨生长的真实环境，更有利于软骨细胞朝特定方向分化，使软骨细胞维持稳定的表型。     

人肾间质成纤维细胞体外增殖及胶原的合成*★

背景：肾间质成纤维细胞体外研究时间点的选取多在72 h以内，但对于体外长时间动态观察培养过程中成纤维细胞增殖及胶原分泌规律少见报道。 目的：观察人肾间质纤维化来源的成纤维细胞体外增殖及胶原蛋白合成的规律。 方法：采用组织块培养法获取、纯化并鉴定肾间质纤维化来源的人肾间质成纤维细胞，选取第3 代对数生长期细胞用于实验。MTT 比色法及Masson三色染色结合图像分析法分别检测体外培养第1，3，5，7，9 天细胞的吸光度值和成纤维细胞胶原蛋白染色阳性细胞的平均吸光度值。 结果与结论：肾间质成纤维细胞体外生长曲线呈“S”形，体外培养第3~5天为细胞倍增时间，随培养时间延长，胶原蛋白由线状分布转变成片状分布，其中以第3~5天增长最快(P < 0.05)。结果证实，肾间质成纤维细胞在体外培养第3~5天增殖能力和胶原合成活性最强。     

碱性成纤维细胞生长因子对离心管内培养骺板细胞生成软骨组织的作用**☆

背景：采用离心管技术体外培养骺板细胞的报道已很多。 目的：观察碱性成纤维细胞生长因子对离心管内培养的骺板细胞生成类骺板组织的影响。 方法：获取3周龄新西兰白兔股骨远端的骺板组织，利用组织块纱巾培养法获得骺板细胞，加入含有10 μg/L碱性成纤维细胞生长因子的DMEM培养液，连续培养4周。 结果与结论：离心管内聚集的骺板细胞在含有碱性成纤维细胞生长因子的DMEM培养液中形成类骺板样组织块。在组织块外周形成类似骺软骨的生发层，中心的骺板细增殖情况良好，向肥大细胞方向分化。类骺板样组织甲苯胺蓝及番红“O”染色阳性，Ⅱ型胶原免疫组织化学染色呈强阳性。说明碱性成纤维细胞生长因子能够促进离心管中的骺板细胞形成富含蛋白聚糖及Ⅱ型胶原等细胞外基质的类骺板样软骨组织。     

重组人骨形态发生蛋白2及制动因素对兔肌腱端重建的影响*

背景：骨-肌腱结合结构的重建可能类似于软骨内成骨,只有形成坚固的止点,重建的韧带才能够真正发挥其生理功能。重组人骨形态发生蛋白2(recombinant human bone morphogenetic protein-2,rhBMP-2)可使未分化间质细胞、成纤维细胞、成肌细胞及骨髓的基质细胞逆转分化为骨系细胞。 目的：观察rhBMP-2和制动因素对肌腱止点结构重建的影响。 方法：新西兰白兔建立肌腱止点结构重建模型后,随机分成3组。向rhBMP-2短期制动组和rhBMP-2长期制动组实验兔靠近胫骨隧道入口的屈趾总腱内注入重组人骨形态发生蛋白2溶液20 µL,模型组不予注射。术后rhBMP-2短期制动组术肢石膏固定1周后拆除;rhBMP-2长期制动组和模型组兔术肢全程石膏固定。各组分别于手术后2,4,8周通过免疫组化法和RT-PCR测定隧道入口部肌腱中的Ⅰ,Ⅱ型胶原、骨碱性磷酸酶和骨钙素的表达。 结果与结论：rhBMP-2可使肌腱止点结构重建兔Ⅰ型胶原、骨碱性磷酸酶和骨钙素表达水平随时间的延长而增加,而Ⅱ型胶原在术后增加至4周时表达至峰值,8周表达有所下降。注射rhBMP-2未对腱重建兔Ⅰ型胶原mRNA表达产生明显变化;而注射rhBMP-2可使Ⅱ型胶原、骨碱性磷酸酶和骨钙素mRNA表达显著增加(P < 0.05),减少制动时间也能使Ⅱ型胶原、骨碱性磷酸酶和骨钙素mRNA表达显著增加(P < 0.05)。rhBMP-2能促进Ⅰ,Ⅱ型胶原、骨碱性磷酸酶和骨钙素的表达,并具有诱导肌腱内异位软骨成骨的作用,使肌腱端结构重建成为可能;长时间制动阻碍肌腱附着点的重建。 关键词：肌腱止点;重组人骨形态发生蛋白2;胶原;碱性磷酸酶;骨钙素;肌肉肌腱;组织工程     

胶原海绵和温敏型Ⅰ型胶原细胞相容性比较★

背景：因心脏结构高度复杂、心肌组织有很高的机械顺应性，心肌组织工程对材料的要求高。以往研究表明Ⅰ型胶原和胶原海绵材料均适宜心肌细胞生长及分化。 目的：拟进一步对比观察胶原海绵和温敏型Ⅰ型胶原与骨髓间充质干细胞的相容性, 为心肌组织工程选择更理想的载体材料。 设计、时间及地点：在解放军第四军医大学西京医院心血管内科实验室2007-03/10完成对比观察设计的实验。 材料：胶原海绵由上海其胜制剂有限公司提供；温敏型Ⅰ型胶原由第四军医大学组织工程中心提供。 方法：将体外培养的大鼠骨髓间充质干细胞分别复合于胶原海绵和温敏型Ⅰ型胶原材料，共同培养7 d，分别于培养第1，3，5 和7天取材。 主要观察指标：扫描电镜和苏木精-伊红染色观察骨髓间充质干细胞细胞形态及附着情况；MTT检测骨髓间充质干细胞细胞增殖情况。 结果: ①扫描电镜检测显示温敏型Ⅰ型胶原材料中骨髓间充质干细胞细胞黏附优于胶原海绵材料，细胞在Ⅰ型胶原材料中生长连接成片，表面有大量分泌颗粒。②MTT检测表明在培养第1，3，5，7天温敏型Ⅰ型胶原材料中骨髓间充质干细胞细胞活性（吸光度值）及细胞分裂增殖速度均高于胶原海绵材料（P < 0.01）。 结论:温敏型Ⅰ型胶原体外与骨髓间充质干细胞的相容性优于胶原海绵。     

低渗结合自然沉降法分离兔骨髓间充质干细胞及其鉴定

背景：骨髓间充质干细胞数量极少,10万个骨髓有核细胞中才有1个骨髓间充质干细胞,如何成功分离并鉴定骨髓间充质干细胞是研究中的关键工作。 目的：建立完善的骨髓间充质干细胞体外分离培养体系,从细胞的形态、表型和功能方面鉴定骨髓间充质干细胞。 方法：低渗原理去除杂细胞,结合自然沉降分离骨髓间充质细胞,并对其形态学特征进行光镜观察。对骨髓间充质细胞的表型进行流式细胞仪检测。并将骨髓间充质细胞向成骨细胞和脂肪细胞进行诱导分化,行形态学观察和碱性磷酸酶、Von kossa、Ⅰ型胶原、油红O染色检测。 结果与结论：实验分离获取的骨髓间充质细胞经表型鉴定为：CD29(+),CD45(-);向成骨细胞诱导后,碱性磷酸酶、矿化结节染色及Ⅰ型胶原检测均为阳性;向脂肪细胞诱导后,油红O染色阳性。结果表明实验分离的骨髓间充质细胞为类成纤维细胞样非造血类干细胞,此类细胞具有向成骨细胞和脂肪细胞分化的功能。     

组织工程化肌腱修复运动训练致肌腱组织缺损：细胞材料及其过程中的相关研究

背景：传统的肌腱修复方法主要采用自体肌腱移植和自体肌腱转移方法修复，但这两种方法因供区有限及新增的创伤制约，发展受到很大限制。 目的：总结肌腱组织缺损修复中的种子细胞、支架及生物反应器中的生物力学刺激相关研究，为训练、竞赛中肌腱损伤的防治提供理论依据。 方法：以“运动训练，肌腱组织，修复”为检索词，检索维普数据库2004-01/2009-10相关研究。纳入与运动训练所造成的肌腱组织损伤的研究；排除重复研究或Meta分析类文章。 结果与结论：目前组织工程化肌腱的研究已经取得了显著的成果，但要真正应用于临床，大批量生产，仍存在一些问题。种子细胞的来源不能仅限于自体肌腱细胞，对皮肤成纤维细胞及肌腱细胞进行比较，通过基因芯片等方法，了解二者的区别，对成纤维细胞进行基因改造，以此解决组织工程肌腱的种子细胞来源问题。肌腱再生过程中正常的力学刺激对新生肌腱的塑形至关重要，这种刺激才可能诱导新生胶原纤维并取向排列。进而提高新生肌腱的力学强度，保证早期功能锻炼的实施，有效减少肌腱黏连。使肌腱的修复过程步入一个良性循环寻找理想的支架。所以，教练员、运动员在运动训练、竞赛中，应该遵守训练学原则，进行科学训练，尽量避免肌腱组织缺损。尽管肌腱组织工程发展得很好，但它还会给身心一些不良影响。 关键词：运动训练；肌腱组织；修复；生物材料 doi:10.3969/j.issn.1673-8225.2010.16.031     

组织工程肌腱材料修复肌腱损伤

摘要 目的：总结和分析组织工程肌腱研究进展，在此基础上进一步分析组织工程肌腱作为替代物对于肌腱损伤修复的可能性，以及对未来发展进行展望。 方法： 以“组织工程，种子细胞，肌腱，损伤修复，支架材料”为中文关键词，以“tissue engineering，seed cells，tendon，damage repair，scaffold”为英文关键词，应用计算机检索1994-01/2009-12 Pubmed数据库(http://www.ncbi.nlm. nih.gov/PubMed)及维普数据库(http://www.cqvip.com/)有关运动性肌腱损伤与组织工程肌腱的文献，排除重复研究或Meta分析类文章。共纳入25篇文献，重点对以下4个问题进行讨论：①运动性肌腱工程生物力学研究进展。②肌腱组织工程种子细胞的分类与筛选。③肌腱组织工程支架材料应具备的特点。④组织工程肌腱面临的问题与研究方向。 结果：目前，在肌腱组织工程中研究的种子细胞有肌腱细胞、皮肤成纤维细胞和骨髓基质干细胞。标准种子细胞的难以确立一直制约着组织工程的发展，如何获得大规模、再生性的种子细胞是当前组织工程化肌腱研究面临的最为关键的问题。组织工程化人工肌腱修复缺损肌腱，与其他传统方法相比，主要具有以下优点：①所形成的肌腱组织有活力和功能，可对肌腱缺损进行形态修复和功能重建，并达到永久性替代。②以相对少量的肌腱细胞经体外培养扩增后，修复严重的肌腱缺损。③按缺损肌腱形态任意塑形，达到形态修复。 结论：组织工程肌腱要真正应用于临床，关键是如何模拟体内环境，在体外成功构建肌腱组织，因而在体外模拟体内环境进行组织工程的构建是未来的研究方向。     

组织工程化肌腱的构建与运动性肌腱损伤

目的：总结评价构建组织工程化肌腱生物支架材料的性能及作用,以寻找合理的肌腱替代物。 方法：以 “组织工程;肌腱修复;生物材料支架;运动性肌腱损伤” 为中文关键词,“tissue engineering, tendon repairing,biological material scaffold,sport injury of tendon” 为英文关键词,采用计算机检索1994-01/2009-12相关文章。纳入与有关运动性肌腱损伤与组织工程肌腱相关的文章;排除重复研究或Meta分析类文章。以16篇文献为主,重点对一下5个问题进行了讨论：①肌腱的组织学特征？②肌腱移植材料种类及组织工程肌腱种子细胞的来源？③如何解决同种异体肌腱细胞的免疫学反应？④如何制备与筛选特殊力学强度的支架材料？⑤伦理学问题。 结果：与传统肌腱修复比较,组织工程化肌腱具有许多优点：解决了供体肌腱来源问题;组织工程化肌腱具有活力和功能,植入后可与受体肌腱愈合,永久性替换缺损肌腱;可根据缺损肌腱任意塑型,在重建功能的同时达到形态修复的目的。但是构建组织工程化肌腱,还有许多问题有待研究和解决。如何提高支架材料应用性,研制具有与正常人体肌腱组织相接近的力学性能的支架材料是其中的关键性问题。 结论：模拟体内环境,解决组织工程肌腱构建的生物材料、种子细胞,以及在体外成功构建肌腱组织是未来组织工程肌腱构建过程中的研究的重点。 关键词: 组织工程化肌腱;肌腱修复;支架材料;运动性肌腱损伤;种子细胞 doi:10.3969/j.issn.1673-8225.2010.12.038     

组织工程化肌腱在肌腱修复过程中的作用

摘要 目的：综述肌腱组织工程在肌腱修复过程中的应用进展。 方法：应用计算机检索1993-01/2009-10 PubMed数据库及维普数据库有关肌腱组织工程研究进展、肌腱支架材料生物力学分析、生物材料在肌腱组织工程中应用及组织工程技术在修复肌腱缺损临床应用方面的相关文献,英文检索词为“tendon transplantation,tissue engineering,biologicalmaterial,cell stent”,中文检索词为“肌腱移植,组织工程,生物材料,细胞支架”。检索文献量总计132篇。 结果：目前组织工程化肌腱的研究已经取得了显著的成果,但要真正应用于临床,大批量生产,仍存在一些问题。诸如最适的种子细胞来源、理想的支架材料、最佳的培养条件以及植入体内的检测方法等,在组织工程真正成为一种治疗肌腱缺损和功能重建的选择之前,这些问题都是有待进一步研究和解决的。 结论：要真正实现体外预制有生命的种植体完全替代人体组织、器官功能,尚面临着许多挑战。 关键词：肌腱组织工程;生物材料;细胞支架;修复;综述文献 doi:10.3969/j.issn.1673-8225.2011.03.042     

人工肌腱材料与运动性肌腱损伤的修复

摘要 背景：运动或疾病导致肌腱损伤，若未予以及时修复常会导致肢体功能障碍，植入人工肌腱后，可形成类似生物腱的组织。 目的：分析运动导致肌腱损伤的原理，以及人工肌腱在运动导致的肌腱损伤的应用价值。 方法：作者检索1990/2010 PubMed数据库及中国知网数据库检索与人工肌腱在运动导致的肌腱损伤的应用的相关研究。 结果与结论：过度运动可导致肌腱断裂损伤，人工肌腱由细胞、生长因子及可降解生物材料构成，在植入人体后，能恢复患者肌腱原有的生物学特性，部分人工肌腱甚至可以增殖和合成胶原。随人工肌腱支架材料的降解，患者体内将逐渐形成在功能和形态上与正常肌腱相似的新生肌腱组织。且随组织工程学的发展，将出现更多应用于运动导致的肌腱损伤、断裂等疾病治疗的新型人工肌腱。 关键词：运动损伤；肌腱损伤；人工肌腱；生物材料；组织工程 doi:10.3969/j.issn.1673-8225.2011.08.041     

组织工程化肌腱应用于肌腱运动损伤的修复：研究与应用现状

目的：总结和分析肌腱组织工程应用于肌腱运动损伤修复的研究现状。 方法：以“tissue engineering,artificial biocompatible tendon”,为英文检索词,以“组织工程,肌腱”为中文检索词,计算机检索PubMed和万方数据库1994-01/2009-12的相关文献。纳入具有原创性,论点论据可靠的实验文章,排除重复性的研究,选择符合标准的33篇文献做进一步分析。 结果：肌腱运动损伤后若未予以及时修复常会导致肢体功能障碍,组织工程化人工肌腱修复缺损肌腱可对肌腱缺损进行形态修复和功能重建,并达到永久性替代。目前,组织工程学研究进展迅速,但要真正应用于临床仍存在一些问题。文章就以下问题进行了讨论：①种子细胞的来源。②对材料选取及如何合理改进,从而塑造理想的器官形状三维支架材料。③如何模拟体内环境,在体外构建肌腱组织。④如何使制造出来的组织工程肌腱有更好的生物力学性能。 结论：如何在体外利用生物反应器模拟体内环境,进行组织工程化肌腱的构建,将是未来的研究方向。 关键词：组织工程;肌腱;运动损伤;修复;材料 doi:10.3969/j.issn.1673-8225.2010.12.034     

Active Achilles tendon kinesitherapy accelerates Achilles tendon repair by promoting neurite regeneration

Active Achilles tendon kinesitherapy facilitates the functional recovery of a ruptured Achilles tendon. However, protein expression during the healing process remains a controversial issue. New Zealand rabbits, aged 14 weeks, underwent tenotomy followed immediately by Achilles tendon microsurgery to repair the Achilles tendon rupture. The tendon was then immobilized or subjected to postoperative early motion treatment (kinesitherapy). Mass spectrography results showed that after 14 days of motion treatment, 18 protein spots were differentially expressed, among which, 12 were up-regulated, consisting of gelsolin isoform b and neurite growth-related protein collapsing response mediator protein 2. Western blot analysis showed that gelsolin isoform b was up-regulated at days 7-21 of motion treatment. These findings suggest that active Achilles tendon kinesitherapy promotes the neurite regeneration of a ruptured Achilles tendon and gelsolin isoform b can be used as a biomarker for Achilles tendon healing after kinesitherapy.     

自体与同种异体肌腱重建膝关节前交叉韧带的比较*

背景：关节镜辅助下重建前交叉韧带的移植物主要有自体移植物、同种异体移植物和人工韧带3种,关于移植物的选择,存在较多争议。 目的：评估自体健侧腘绳肌腱和同种异体肌腱两种移植物在膝关节前交叉韧带重建中的效果。 方法：纳入2007-01/2009-01在承德医学院附属医院骨科就诊的经关节镜检查证实为前交叉韧带损伤的患者70例(70膝),分别采用自体健侧腘绳肌腱和同种异体肌腱重建前交叉韧带,记录膝关节Lysholm功能评分、KT-1000测量值及不良反应。 结果与结论：患者随访18~24个月,均未发生血管神经损伤,无感染、植入物断裂等并发症;同种异体肌腱移植患者有2例膝关节引流管口持续渗出,经换药半月后愈合,其余切口均一期愈合。末次随访时,自体健侧腘绳肌腱和同种异体肌腱重建患者的Lysholm评分均显著提高,双侧膝关节前向松弛度差值显著减少,且两种方法比较差异无显著性意义(P > 0.05)。说明应用自体健侧腘绳肌腱与同种异体肌腱重建膝关节前交叉韧带疗效相当,效果满意。     

肌腱的生物学特性及缺损后修复材料的性能评价

目的：探讨肌腱的生物学特性及肌腱缺损修复材料的性能。 方法：用计算机检索中国期刊全文数据库(CNKI：1985/2009)和Medline database(1985/2009)，纳入主题内容与肌腱生物学特性和肌腱缺损修复材料联系紧密的文章；排除Meta分析、与主题无关的文章及重复性研究。对文献进行筛选、资料收集和质量评价，共纳入29篇文章，其中中文文献16篇，英文文献13篇。从肌腱的生物学特性及肌腱缺损修复材料的性能进行总结。 结果：肌腱的营养主要由肌腱当中的血管通过血液供给，肌腱在重复性载荷下会发生疲劳，但和其他工程材料不同之处在于肌腱具有自我修复能力；肌腱的生物力学特性与胶原纤维密切相关，应力应变曲线与胶原纤维基本相同，表现出明显的黏弹性体特性——滞后、蠕变和应力松弛。当前对肌腱缺损的修复材料主要有自体肌腱、同种异体肌腱、异种肌腱、人工肌腱替代物及组织工程化人工肌腱。 结论：虽然肌腱缺损的修复材料较多，但是均具有其优缺点，目前仍未找到一种最理想的修复方法。目前对肌健的研究已进入分子水平，相信在不久的将来，组织工程和基因工程将制造出理想的肌腱替代品。 关键词：修复材料；肌腱；生物学；生物材料 doi:10.3969/j.issn.1673-8225.2010.03.035