深圳市龙岗区空肠弯曲菌的流行状况及分子分型

目的了解并分析深圳市龙岗区腹泻患者粪便、禽肉类等样品中空肠弯曲菌的流行状况及同源性。方法对2016年5—12月深圳市龙岗区某医院腹泻患者粪便或肛拭子样品和来自养鸡场、农贸市场、超市等地的禽畜类等样品进行空肠弯曲菌分离培养,菌株经镜检和生化鉴定后再使用脉冲场凝胶电泳(pulsed field gel electrophoresis,PFGE)对其进行全基因组分子分型。最后应用Bio Numerics软件进行聚类分析。结果 41份腹泻患者样品分离出5株空肠弯曲菌,分离率为12.2%,全部阳性样品均来自11岁以下儿童。53份来自食品和外环境样品分离出14株空肠弯曲菌,分离率为26.4%,其中来自农贸市场的分离率为57.1%(8/14),来自不同超市样品空肠弯曲菌的分离率为11.1%(4/36)。18株菌呈现15种PFGE带型,其中来自市场1的3株菌株带型完全一致,且与病例1只有一条带的差异;来自市场2与病例5的带型完全一致且与病例4的带型只有一条带的差异。结论深圳市龙岗区腹泻患者空肠弯曲菌感染率较高,感染可能是由于食用了来自市场未煮熟的食物或接触了来自市场被空肠弯曲菌污染的食物,农贸市场存在空肠弯曲菌的交叉污染,该地区空肠弯曲菌呈现多样性。     

辽宁省禽肉食品中空肠弯曲菌耐药特征与PFGE分子分型研究

目的 了解辽宁省禽肉食品中空肠弯曲菌（Campylobacter, Campylobacter jejuni）的污染状况，掌握空肠弯曲菌的耐药基因携带特点及抗生素敏感特性、分子型别特征，为辽宁省禽肉食品中空肠弯曲菌污染防控提供依据。方法依据GB4789.9-2014《中华人民共和国国家标准食品微生物学检验空肠弯曲菌检验》及采用PCR扩增技术和哥伦比亚血平板检测的方法对2018—2022年采自辽宁省14个监测点收集的生禽肉食品开展空肠弯曲菌检测，并对检出的菌株进行6种耐药基因进行检测及11种抗生素的药物敏感性试验，同时进行PFGE分子分型溯源。结果 568份生禽肉样本中共检出23株空肠弯曲菌，空肠弯曲菌检出率为4.0%(23/568)。耐药基因检测发现，四环素类耐药基因tet(O)检出率最高，其次是大环内酯类耐药基因ermB和氨基糖苷类耐药基因aph(2”)-If，检出率分别为56.5%、47.8%和39.0%。通过PFGE聚类分析，23株空肠弯曲菌可分成17种带型，有4种带型高度同源。结论 辽宁省生禽肉食品中存在空肠弯曲菌的污染情况，PFGE型别多样，耐药基因主要检出的是四环素耐药基因...     

一起副溶血性弧菌食物中毒的病原学检测与分析

目的 调查一起家庭婚宴中发生的食物中毒事件,运用脉冲场凝胶电泳(PFGE)对所分离的菌株进行同源性分析,为溯源提供依据.方法 调查分析该起事件的流行病学特点,采集患者和食品从业人员肛拭样本及剩余食品和环节样本,采用传统细菌检测的方法进行常规鉴定和血清分型后,对所分离菌株进行PFGE分子分型,用BioNumerics软件对PFGE分型图谱进行聚类分析.结果 本次事件报告确诊发病人数为28例,共检出12株副溶血性弧菌,其中从患者肛拭样本中分离出10株,剩余食品样本中检出2株,血清型均为O4∶K8,菌株经PFGE分子分型和聚类分析得到3种带型,3型之间只有2～4条电泳条带的差异,具有高度相似性.结论 此起食物中毒事件由PFGE型别副溶血性弧菌污染食物引起.     

一起流脑爆发菌株脉冲场凝胶电泳的分子分型研究

目的 运用脉冲场凝胶电泳（PFGE）技术对一起C群流脑爆发疫情所分离的菌株进行同源性分析.方法 对分离的脑膜炎奈瑟菌进行血清学鉴定后,并进行PFGE分析和确定分子分型.结果 在疫情中分离的6株C群脑膜炎奈瑟菌菌株的PFGE谱型相同,聚类图谱分析相似性为100%,而与韶关翁源1株从健康人分离到的菌株谱型完全不同.结论 PFGE可以作为爆发流行中对细菌进行鉴定和确定菌株的感染来源.     

中国小型猪空肠弯曲菌的首次分离及其鉴定

目的对中国小型猪空肠弯曲菌进行分离鉴定。方法采集发病小型猪标本,采用细菌学分离培养、生化鉴定、药敏试验、血清学试验、PCR检测等方法进行鉴定,并对细菌的分子生物学特征进行分析。结果分离到1株细菌,经鉴定为空肠弯曲菌（CJp0812）。用空肠弯曲菌flaA基因特异引物对CJp0812细菌的PCR扩增为阳性,经核苷酸序列测定分析证实上述序列与空肠弯曲菌NCTC11168基因序列（GenBank登录号：NC002163）同源性高达99%。结论首次从中国小型猪中分离到了空肠弯曲菌,为进一步研究该菌及开展流行病学调查提供了科学依据。     

深圳市腹泻患者、禽源和牛源空肠弯曲菌的脉冲场凝胶电泳分析

目的 对深圳市禽源、牛源空肠弯曲菌进行脉冲场凝胶电泳,与相同时期和地区腹泻患者分离的空肠弯曲菌比较,寻找空肠弯曲菌传播的证据。方法 对深圳市2016年3—11月分离的不同来源空肠弯曲菌进行复苏、鉴定和脉冲场凝胶电泳,应用BioNumerics软件进行聚类分析。结果 共收集到空肠弯曲菌126株,其中腹泻患者来源22株、禽源44株、牛源60株。除3株不能分型外,其他123株菌成功获得PFGE图谱。不同来源空肠弯曲菌呈现不同的基因特征：人源菌株PFGE带型高度多态化,未发现集中型别;P1是禽源空肠弯曲菌的主要型别;牛源菌株呈现多型别分布,主要型别有C1~C6。综合分析发现,有3个型别（T1、T2和T3）同时包含患者和禽牛来源的菌株。T1型别有12株菌,分别来自患者（3株）、禽类（6株）和牛（3株）,T2型别包含5株菌,来自患者（1株）、禽类（2株）和牛（2株）;T3型别包含7株菌,仅来自患者（1株）和牛（6株）。结论 本研究发现3个空肠弯曲菌型别（T1,T2和T3）同时包含腹泻患者和禽牛来源菌株,为空肠弯曲菌的溯源提供证据。T1可能是深圳市空肠弯曲菌的主要流行型别,在腹泻患者、禽源、牛源菌株中均有分布。     

一起肠炎沙门菌引起的食物中毒事件的病原学检测及溯源

目的 通过实验室检测分析,查明某起食物中毒事件的原因,为今后防控细菌性食物中毒提供参考。方法 针对各县区送检的病人肛拭子或粪便、市场监督管理局送检的食品样本进行食源性致病菌PCR检测、分离培养、生化鉴定、血清学分型、药敏实验、脉冲场凝胶电泳（PFGE）,分析不同菌株之间的同源性。结果 61份临床及食品样本经荧光定量PCR检测,59份为沙门菌阳性,并分离鉴定到59株沙门菌,经血清分型确认均为肠炎血清型,59株肠炎沙门菌的药敏结果大致相同,PFGE带型完全一致。结论 本次食物中毒事件是由于患者食用了经相同肠炎沙门菌污染的食物引起的,通过PFGE基因分型技术,对本次肠炎沙门菌引起食物中毒事件成功溯源。     

一起肠炎沙门菌食物中毒事件病原学分析

目的对一起肠炎沙门菌引起的食物中毒事件开展病原菌分离鉴定及分型分析,为临床治疗和类似事件处置提供参考依据。方法收集中毒事件流行病学资料;采集患者排泄物、从业人员肛拭、可疑食品和环境样本,运用PCR方法快速筛查病原菌;采用实验室传统方法进行细菌分离和病原学鉴定;利用脉冲场凝胶电泳(Pulsed Field Gel Electrophoresis, PFGE)对病原菌进行分子分型及同源分析。结果 23份可疑样本中检出8株肠炎沙门菌,其中可疑食品、患者排泄物和环境样本中分别检出4株、2株和2株。PFGE分型结果显示8株肠炎沙门菌DNA条带图谱完全一致,属同一克隆株。结论本起事件为肠炎沙门菌污染食品引起的食物中毒事件,PCR快速筛查和PFGE同源分析对食物中毒事件快速判定及有效控制提供技术支持。     

脉冲场凝胶电泳在沙门菌鉴定中的应用

目的 探讨脉冲场凝胶电泳(PFGE)在沙门菌分型鉴定中的应用价值.方法 用PFGE方法对一起食物中毒分离出的68株肠炎沙门菌菌株进行分子分型.结果 180份标本经传统生化和血清分型鉴定出的68株肠炎沙门菌,通过PFGE分型后,均产生14条电泳条带,且分子量大小一致.通过BioNumerics软件的数据化处理分析,得到聚...     

山东省食品中单核细胞增生李斯特菌脉冲场凝胶电泳分型

目的了解山东省2007~2009年不同食品来源的单核细胞增生李斯特菌(LM)各菌株之间的遗传相关性和流行病学意义,建立分子分型数据库。方法采用PulseNet标准方法对分离到的100株单核细胞增生李斯特菌进行脉冲场凝胶电泳(PFGE),不同菌株产生的电泳图谱经BioNumerics软件进行比对,分析菌株间的相关性。结果单核细胞增生李斯特菌DNA用AscⅠ酶切后,经PFGE得到10~15个条带,可将100株菌分为31个PFGE型别,其中以4型为主。结论山东省食品中的LM来源于不同的克隆株,但部分LM有不同程度的相关性;PFGE是分析LM同源性的有效方法,对LM的流行趋势、分布特点和分子流行病学研究具有重要的意义。     

食物中毒中分离的副溶血性弧菌的分子分型研究

目的运用脉冲场凝胶电泳(PFGE)技术研究深圳市罗湖区2005-2007年食物中毒事件中分离获得的49株副溶血性弧菌的分子流行情况。方法样品采用荧光PCR与传统分离培养同时检测,对分离获得的副溶血性弧菌阳性菌株进行脉冲场凝胶电泳(PFGE),BioNumerics软件对图谱进行聚类分析。结果 49株副溶血性弧菌中,有12株不能分型,其余36株副溶血性弧菌分离株大致可分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ3个群,相同血清型的菌株其PFGE型大致相同,同一起食物中毒的菌株间有较高的相关性。结论罗湖区副溶血性弧菌食物中毒存在流行克隆株,PFGE分子分型技术在食物中毒追踪溯源方面有重要提示性作用。     

广州市首例利齐菲尔德沙门菌食物中毒的病原学分析

目的对2011年7月广州市发生的一起细菌性食物中毒进行病原学特征分析。方法对送检病人粪便、厨工肛拭及食物等样品进行荧光PCR检测和分离培养,对分离株进行生化鉴定,血清分型、脉冲场凝胶电泳（PFGE）分型和药敏分析。结果从病人粪便、肛拭和厨房抹布共分离到18株利齐菲尔德沙门菌,为相同的PFGE型别,药敏结果显示菌株对实检和定阿米卡星,庆大霉素及妥布霉素耐药,对头孢噻肟、亚胺培南、甲氧苄啶/磺胺甲恶唑等15种抗生素均敏感。结论实验判定这是一起由同一克隆型的利齐菲尔德沙门菌污染厨房环境所引起的食物中毒事件,PFGE分型法为暴发溯源提供分子流行病学证据和支持。     

Genetic and Antibiotic Resistance Characteristics of Campylobacter jejuni Isolated from Diarrheal Patients,Poultry and Cattle in Shenzhen

Objective To investigate genetic and antibiotic resistance characteristics of Campylobacter jejuni(C. jejuni) isolated from Shenzhen. Methods Multilocs sequence typing and agar dilution methods were used to define the genotype and antibiotic resistance of C. jejuni, respectively. Results In total, 126 C. jejuni strains were isolated. The prevalence of C. jejuni was 5.3% in diarrheal patients. The prevalence in poultry meat(36.5%) was higher than that in cattle meat(1.1%). However, the prevalence in poultry cloacal swabs(27.0%) was lower than that in cattle stool(57.3%). Sixty-two sequence types were obtained, among which 27 of the STs and 10 alleles were previously unreported. The most frequently observed clonal complexes were ST-21(11.9%), ST-22(10.3%), and ST-403(7.1%). ST-21, ST-45, ST-354, ST-403, and ST-443 complexes overlapped between isolates from patients and cattle, whereas ST-45 and ST-574 complexes overlapped between isolates from patients and poultry. All C. jejuni were resistant to at least one antibiotic. The highest resistance rate was toward ciprofloxacin(89.7%), followed by tetracycline(74.6%), and nalidixic acid(69.0%). Conclusion This is the first report of the genotypes and antibiotic resistance of C. jejuni in Shenzhen. Overlapping clonal complexes were found between isolates from patients and cattle, and between patients and poultry.     

广东省茂名市2017—2018年空肠弯曲菌食品分离株病原特征

目的 采集2017—2018年茂名市禽类和畜类食品（仅宰杀切割）,了解空肠弯曲菌携带率,分析其病原学特征。方法 对茂名市禽类和畜类食品（仅宰杀切割）监测过程中分离的空肠弯曲菌进行了抗生素敏感性检测、耐药基因检测和全基因组测序,并基于全基因测序进行遗传进化分析。结果 2017—2018年共检出空肠弯曲菌食品分离株14株,对链霉素、环丙沙星、克林霉素、萘啶酸、阿奇霉素、强力霉素、四环素等抗生素高度耐药,携带着多种耐药基因;基于全基因组的遗传进化分析显示,茂名市检出的12株空肠弯曲菌分离株处在不同进化分支上,显示出多样遗传性。结论 在茂名地区,家禽和畜牧类食品的空肠弯曲菌感染率很高,具有多种抗药性,对畜牧农场和饲料中这种细菌抗药性的监测需要加强,以便为有效防治空肠弯曲菌引起的相关疾病提供参考。     

一起副溶血性弧菌食物中毒的溯源及毒力基因研究

目的对一起副溶血性弧菌引起的食物中毒病原菌进行分型溯源和毒力基因分析。方法采用荧光定量PCR对分离副溶血性弧菌株检测致热性溶血素TDH基因,并利用脉冲场凝胶电泳进行分子分型,利用BioNumerics软件对图谱进行聚类分析。结果从抽检食物中毒样品中分离的5株副溶血性弧菌TDH基因检测结果显示均为阳性;PFGE分型4株副溶血性弧菌带型一致,1株带型与其他分离株有1条带的差异。结论利用脉冲场凝胶电泳对食物中毒病原菌进行分子分型并进行毒力基因检测,为食源性疾病溯源及分子流行病学研究提供科学依据。