血浆中美托洛尔的快速手性分离

本文建立了血浆中美托洛尔(Ⅰ)的直接手性分离方法。色谱条件采用Chiralcel OD分析柱(250×4.6 mm,id),RCSS硅胶预柱,流动相为异丙醇-正己烧-二乙胺(25:75:0.05,v/v),流速1.0 ml/min,荧光检测225 nm/295 nm。样品制备于每份0.5～1.0 ml血浆中加入100μl 1mol/L NaOH,涡旋10s,加正己烧3ml,振摇10min,离心(2000g,10min),水层于CO_2和甲醇混合液中冷冻,有机层于60℃挥去溶剂,残渣用50μl外标(S-烯丙洛尔)溶液(2μg/ml;溶剂为正己烷-异丙醇,5:1,v/v) 溶解,涡旋15s,进样     

反相离子对HPLC法测定人血浆中的氟喹诺酮类药物

本文建立了用反相离子对 HPLC 法测定血浆中三种氟喹诺酮类广谱抗生素药物——诺氟沙星(Ⅰ)、阿米氟沙星(amifloxacin,Ⅱ)和依诺沙星(Ⅲ)的方法。样品制备取血浆样品1ml,加50μl 内标液(吡哌酸,50μg/ml),稍加涡旋后,再加50μl 高氯酸(60％,w/v),并同时涡旋30s,离心(10000×g)10min,取上清液20μl 注入色谱柱中进行测定。色谱条件不锈钢柱(100×2mm,id)匀浆填充5μm 的 ODS Hypersil 作为固定相;流动相为乙腈/水(25:75),其中含10mmol/L Na_2HPO_4、10mmol/L 十二烷基硫酸钠和5mmol/L 溴化四丁基铵,以磷酸调 pH 值至2.0;流速0.5ml/min;荧光检测280nm/418nm。     

正交试验优选黄芩苷血药浓度测定中大鼠血浆的处理条件

目的:优选黄芩苷血药浓度测定中大鼠血浆的处理条件。方法:采集大鼠空白血浆,加入黄芩苷,采用高效液相色谱法测定黄芩苷血药浓度。以黄芩苷萃取回收率为指标,以磷酸量、甲醇量、超声萃取时间、两次离心转速、两次离心时间为因素,通过L1(837)正交试验对含黄芩苷大鼠血浆处理条件进行优选并验证。结果:最优提取条件为加入磷酸50μl、甲醇2ml,涡旋混合2min,超声萃取10 min,以离心半径为4 cm、3 000 r/min离心10 min,取上清液氮气流下吹干,取200μl流动相复溶,涡旋混合1 min,以离心半径为3 cm、14 000 r/min离心5 min。验证试验得出平均萃取回收率为91.8%,RSD为2.6%。结论:本试验优化了含黄芩苷血浆的处理条件,阐明了各因素水平对黄芩苷萃取回收率的影响,优选的处理条件稳定可行。     

同时测定丁哌卡因、依替卡因、利多卡因、度冷丁、甲哌卡因和美沙酮

本文报道用GLC 法同时测定血清中最常用的局部麻醉和麻醉药。实验前,先进行试样的提取,即在1ml 血清试样中加入5mg/L 的内标——丙胺卡因(Prilocaine)标准溶液100μl,5ml 乙醚和1N NaOH 100μl,涡旋混合,离心分离醚层,加1N HCl 500ml 旋混,离心,弃去醚层;     

用改进的HPLC法同时测定人体血清中的卤泛曲林和去丁基卤泛曲林

曾有报道用 HPLC 同时测定人血清中的卤泛曲林(HAL)和去丁基卤泛曲林(BHAL),但分析时间长,内源性物质与BHAL 几乎同时出峰,对测定有干扰。本文报道的方法迅速、分辨率更高。实验采用 757 可变波长 UV-VIS 检测器。Ultrasphere C_8 柱(5μm,25cm×4.6mm)。内标为2,4-二氯-9-(2-二氯基-1-羟基)乙基-6-三氟甲基菲盐酸盐。流动相为乙腈∶水(75∶25,v/v)与0.2%(w/v)十二烷基硫酸钠和0.2%(v/v)冰醋酸。在含0.5ml 血清的试管中,加入内标50μl(游离碱4μg/ml),乙腈1ml,沉淀出蛋白质,涡流混合20s,1200g 离心10min,将上清液移至 C_8-键合洗脱柱,用真空仪抽入柱体,脂乙腈洗柱后,药物被1.0ml 混合液[1.0mol/L 盐酸∶乙腈,1∶9(v/v)]洗脱下。用硅试管收集洗脱液,洗脱液中加入NH_4OH 1.0ml,CH_2Cl_2 6.0ml,旋转器上旋转25min,1000g 离心5min,分出有机相,在40℃通氮下挥发至干,践留物用150μl 流动相溶解,取25μl 注入 HPLC 柱。     

对阿霉素磁性白蛋白微球给药系统的评价

本文对阿霉素磁性白蛋白微球在大鼠体内分布的情况进行研究,结果表明,在外加磁场的条件下,药物能浓集在特定的靶组织中,并相应地降低药物在其它组织中的分布。磁性微球剂的制备:取牛血清白蛋白水溶液(400mg/ml)250μl,磁铁矿100mg 和盐酸阿霉素水溶液(50mg/ml)200μl 混合后,加入30ml 棉籽油,于4℃用超声波(125W)匀化2min,然后将磁性乳液以100滴/min 的速度加至100ml 预热的棉籽油(120±5℃)中,搅拌(1500r/min)10min 后冰浴冷至20℃,用60ml 无水乙醚洗4次,每次离心(3000×g)15min,将制成的微球乙醚混悬液移置带有条     

分溶亲和配基试验(PALA):狄戈辛的新放射免疫测定法

由于狄戈辛的治疗浓度和中毒浓度很接近,需要快速检出血药浓度以指导用药。常用的放射免疫(RIA)方法分离和洗涤程序繁琐,临床应用不方便。作者根据待分离分子表面性质的差异,利用不溶混性的水-聚合物二相系统直接分离生物分子,从而大大简化了分离步骤。此法称为分溶亲和配基试验(Partition AffinityLigand Assay,简称PALA)。测定方法:将50μl血清与50μl~(125)I标记的狄戈辛混合,加入100μl抗狄戈辛抗体(游离或与葡聚糖结合),3～5分钟后加入预先混合好的聚合物系统[1ml 30%(W/W)聚乙二醇(PEG4000)和3ml30%(W/W)MgSO_4·7H_2O]并振摇,几分钟后二相分开,吸取上层PEG疏水相500μl进行计数,从标准曲线即可求得血清狄戈辛含量。整个试验不到10分种。     

检测甲型肝炎病毒抗体的敏感试验

作者应用改良的Abbott HAVAB试剂盒可检出甲型肝炎灭活疫苗免疫后2～3周的抗HAV IgG和/或IgM,其敏感度是原试剂盒的5～20倍。 改良的总抗体（IgG和IgM）测定法是将Abbott的HAVAB法中的10μl待检血清与200μl~(125)Ⅰ抗-HAV混合改为100μl待检血清与100μl~(125)Ⅰ抗-HAV混合。改良的抗HAV-IgM测定法（HAVAB-M）系将原方法的1:200稀释的待检血清改为直接加入10μl未稀释血清后再加200μl标本稀释液。其余均按原方法进行。 作者用改良的总抗体测定法测定不同稀释度的世界卫生组织（WHO）阳性标准品,最低可测到10mIU/ml,比原方法敏感20倍。为了确证该法的敏感性,作者用统计学方法计算了改良法17次检测免疫前的抗体滴度,平均为5.4mIU/ml,用50％抑制水平表示的敏感性为11.1。用8次试验确定改良法的变异性,结果显示出一个很宽的范围（5～     

生物试样中5-FU及其代谢产物的高效液相色谱定量法

本文报道了用高效液相色谱法同时测定多种生物试样中的5-FU及其代谢产物FUR和FUdR。样品溶液的制备:当血清或胆汁中含有上述三种成份时,取样100μl,加0.5M磷酸盐缓冲溶液(pH 8.0)25μl和乙酸乙酯6.0ml振摇5分钟后离心分离,取有机相进行蒸发,残渣加流动相(HPLC)-n-C_5H_(14)(3:2)混合溶剂1ml,溶解后即可取样分析。当样品为组织时,取其200mg,加冷藏后的乙腈3ml和硅胶(60～80目)100mg,并拌匀,用乙     

具有缓慢释放特性的多聚血清白蛋白珠在疫苗中的应用

本文报告了用病毒颗粒和病毒亚单位(核壳蛋白)与兔血清白蛋白(RSA)微珠共聚制成实验性疫苗免疫家兔以研究RSA作为佐剂的可能性。试验用疫苗:(1)实验性微珠疫苗:用Newman等方法提纯野田村病毒及酚水法提取核壳蛋白。将100μg纯化病毒或80μg核壳蛋白加入200mg RSA(溶于0.8ml含1%十二烷基硫酸钠、pH7.5的1mM磷酸缓冲液)中,然后加入0.2ml适当稀释的戊二醛(GA),立即在涡旋混匀器中分散,10秒后用注射器迅速注入100ml葵花子油和石油醚(1∶4体积)     

炔诺酮存在时炔雌醇的微量测定法

本文介绍含有炔诺酮的炔雌醇片,采用萤光分光法测定炔雌醇的含量,最低检出量为10μg/ml,最佳测定范围为17.5～280μg/ml,一般片剂的赋形药以及炔诺酮含量即使高达2000μg/ml对本测定也无干扰,可应用于片剂释放度试验中释放量的测定。测定方法标准曲线:取标准溶液(炔雌醇氯仿溶液3.5μg/ml)0、0.125、0.25、0.5、1.0和2.0ml,分别置于具螺帽的试管中,用氮驱去氯仿,残留物中加入4%氢氧化钠-乙醇溶液(氢氧化钠4g溶于10%乙醇100ml中)0.5ml,然后加入80%硫酸2ml,混和,放置30分     

人血浆中吡格列酮的固相萃取高效液相色谱法测定

以吡格列酮的同系物 PIOGA为内标 ,采用 C2 固相萃取紫外检测的 HPL C分析法测定人血浆中吡格列酮的浓度。 C1 8分析柱 (15 0× 4.6 mm,5 μm) ,流动相 :水 -乙腈 -冰醋酸 (5 40∶ 46 0∶ 1.2 ,用氨试液调至 p H6 .0 ) ,流速 :1.0 ml/ min,检测波长 2 6 9nm。取血样 0 .5 m l,加入内标经 C2 固相萃取后进样 40μl。最低定量限 (L OQ)为10 ng/ ml,线性范围为 10～ 16 0 0 ng/ ml     

P-HPLC法测定小鼠血清及脏器中拉米夫定的浓度

目的 :建立RP -HPLC法快速测定小鼠血清及部分脏器匀浆中拉米夫定 (LAM )的浓度。方法 :取0 1ml血清或组织匀浆 ,加入0 5ml甲醇 ,漩涡混合30s ,15000r/min离心10min ,上清液直接进样。选用KromasilC18(150mm×4 6mm ,5μm)为分析柱 ,pH6 8的磷酸盐缓冲液 -甲醇 (91∶9)为流动相 ,检测波长为270nm。结果 :各工作曲线线性范围为0 25～50μg/ml ,最低检测浓度为60ng/ml(S/N=3)。各样品平均绝对回收率大于88 % ,方法回收率在97 %～100 %之间 ,日内和日间精密度的RSD均小于10 %。结论 :此方法经济、可靠、简单、快速 ,可用于LAM血药浓度分析及动物体内分布研究     

高效液相色谱法测定人血清中异环磷酰胺的血药浓度

目的建立人血清中异环磷酰胺的HPLC测定法.方法取血清1.0 ml,以环磷酰胺为内标,用氯仿提取,在60 ℃水浴条件下氮气挥干,残渣用100 μl流动相复溶,进样25 μl.在Hypersil-C4色谱柱 (4.6 mm×250 mm,5 μm),以乙腈-水 ( 35∶65,v/v) 为流动相,流速为1.0 ml/min;检测波长200 nm.结果本方法在10～200 μg/ml 范围内线性良好,相关系数r=0.999 4 ( n=5).检测限为5 μg/ml .高、中、低三种浓度的绝对和相对回收率分别为 84.32%～88.14% , 95.00%～98.10%,日内和日间RSD分别为0.74%～2.21%, 1.60%～2.40%.结论 本方法灵敏、特异、简便,可用于临床异环磷酰胺血药浓度检测.     

氯洁霉素脂质体治疗痤疮

脂质体制备方法按照1965年Bangham首次发表的方法,取10ml豆磷脂的氯仿溶液(10mg/ml)及2ml胆固醇的氯仿溶液(5mg/ml)于旋转蒸发器40℃蒸发至干,加入盐酸氯洁霉素溶液20ml(1或5％),在温和搅拌下即形成MLV脂质体。临床用三种洗剂制备 1.氯洁霉素标准洗剂药物溶解于10％丙二醇及70％乙醇的混合液中。2.氯洁霉素洗剂-乳剂由2％Hostaphatkw 340N,2%Hostacerin,88％蒸馏水及防腐剂制成乳剂,药物溶液(5％)以1:4加入乳剂。3.氯洁霉素脂质体洗剂5％的药物混悬剂以1:4加入乳剂,使     

HPLC法同时测定血清中苯巴比妥、乙胺嗪和苯妥英

作者用快速、准确、灵敏的HPLC法对血清中苯巴比妥、乙胺嗪、苯妥英及其代谢产物5-(4-羟基苯) -5-苯妥英(HPPH)进行了同时测定.仪器:112型溶剂交换泵.160型UV检测器(检测波长214nm).层析预柱用十八烷基硅烷(ODS)填充(45×4.6mm,id),层析柱用5μm的球形ODS填充(250×4.6mm,id).方法:取50μl含0.5μg 5-(4-甲苯基)-5-苯妥英(内标)的乙腈液加到50μl的血清或血浆中,搅拌10s,然后离心2min,将上清液转入另一试管中,再离心30s,使沉淀颗粒分离完全.取5～10μl的上清液注入     

HPLC测定氯霉素滴眼液的含量

目的 用HPLC测定氯霉素滴眼液的含量。方法 采用ZORBAX.SIL(250 mm ×46 mm 5μm)为色谱柱。流动相为正 己烷-氯仿-甲醇,比例为(50:40:10),流速1 ml／min,检测波长278 nm,柱温25℃进样量5μl。结果氯霉素与辅料及杂质可 完全分离,线性范围为10-100μg/ml,回归方程为y=1.08×10-1x-3.02×10-1r=0.9996(n-6),平均回收率为99.23％, RSD=0.85％,结论 此法简单快速,实用省时,结果准确可靠,能满足质量控制要求。     

紫外检测HPLC法测定尿中氢可的松和可的松

取Sep-Pak 样品制备柱(5μmC_(18)键合硅胶柱;5μm-ODS 预柱,依次通过CH_3OH 2ml、H_2O5ml 和含4μg 内标6α-甲基泼尼龙(Ⅲ)的尿样晶20ml,以0.1mol/l(NH_4)_2CO_3溶液5ml 洗涤。再以含10mmol/l(NH_4)_2CO_3的CH_3CN-H_2O(18:82,v/v,流     

棕榈酸泼尼松脂质体

泼尼松240mg(0.66mmol)在21℃溶解于吡啶5ml中,加入棕榈酰氯0.4ml(1.32mmol)在21℃搅拌20小时,真空40℃除去溶剂,加入二氯甲烷20ml及0.9M氯化钠溶液20ml,剧烈振摇3次,分去水层,有机相以硫酸镁干燥并蒸发至干。干燥残渣溶于氯仿1.5ml置硅胶柱(1.2×25cm),用氯仿:乙腈(5:2)作流动相。收集含产品的组份,用TLC鉴别,蒸发后得纯的白色的棕榈酸泼尼松,用HPLC鉴别及检测纯度,用红外测定其化学结构,取磷脂12mg和激素5mg溶于氯仿1.5ml中,于20℃在氨气流下旋转蒸     

同时测定4’-去氧阿霉素及其代谢产物的反相液相色谱法

与阿霉素(DX)相比,4’-去氧阿霉素(4’-DODX)具有高效、广谱,心脏毒性低等优点。本文报道测定4'-DODX 及其代谢产物体内浓度的反相HPLC 法。分析方法:取样品血浆1～3ml,使通过预先经10ml 甲醇和5ml 水依次处理过的1ml C_(18)样品制备柱(Cartridge),再用5ml 水洗涤,然后,用250μl0.25M甲醇-HCl 液洗脱药物,吸取洗提液100μl 进样。HPLC柱为10μmμ-Bondapak C_(18)(30cm×3.9mm~*内径),