盐酸小檗碱对高糖、高脂联合诱导内皮细胞分泌TNF-α的干预作用

目的 观察盐酸小檗碱(黄连素)对高糖、高脂联合诱导下血管内皮细胞分泌肿瘤坏死因子(TNF-α)的干预作用及对内皮细胞的保护作用.方法 体外培养人脐静脉内皮细胞,建立Glu+ ox-LDL损伤HUVECs模型.实验分组:对照组:DMEM培养液+l0％胎牛血清;模型组:Glu40 mmol/L+ ox-LDL 100 mg/L;黄连素低组:Glu 40 mmol/L+ox-LDL 100 mg/L+黄连素1.25 μg/ml;黄连素中组:Glu 40 mmol/L+ ox-LDL 100 mg/L+黄连素2.5 μg/ml;黄连素高组:Glu 40 mmol/L+ ox-LDL 100 mg/L+黄连素5μg/ml.检测细胞培养液中的内皮素(ET-1)、一氧化氮(NO)和TNF-α水平.结果 细胞增殖率:Glu 40 mmol/L+ ox-LDL 100 mg/L(模型组)培养HUVECs 24 h,与对照组比较细胞存活率降低(P＜0.01),说明造模成功,同时应用1.25 ～5.0 μg/ml黄连素治疗,细胞存活率明显提高(P＜0.01).NO:模型组NO水平显著低于对照组(P＜0.01),黄连素处理组NO水平显著高于模型组,以5μg/ml剂量组作用最显著(P＜0.01).ET-1:模型组ET-1比对照组显著增高(P＜0.01),黄连素各治疗组比模型组明显降低(P＜0.01).TNF-α:对照组与模型组间内皮细胞培养液中TNF-α水平差别有统计学意义(P＜0.01),黄连素各治疗组比模型组内皮细胞培养液中TNF-α水平明显降低(P＜0.01),但仍高于对照组(P＜0.01).结论 黄连素通过调节内皮NO/ET-1平衡、抗炎作用,改善Glu、ox-LDL联合诱导的内皮细胞损伤.     

黄连素对人脐静脉内皮细胞分泌一氧化氮的影响

目的 探讨黄连素对高糖、高脂损伤人脐静脉内皮细胞(HUVECs)分泌一氧化氮的影响及其保护内皮细胞的作用机制.方法 体外培养HUVECs,采用MTT法检测细胞生长存活率,并建立Glu+ ox-LDL损伤HUVECs模型.实验分组如下:正常组:DMEM培养液+10％胎牛血清;模型组:Glu 40 mmol/L+ ox-LDL 100 mg/L;黄连素低组:Glu 40 mmol/L+ ox-LDL 100 mg/L+黄连素1.25 μg/ml;黄连素中组:Glu 40 mmol/L+ ox-LDL 100 mg/L+黄连素2.5μg/ml;黄连素高组:Glu 40 mmol/L+ ox-LDL 100 mg/L+黄连素5μg/ml.采用硝酸还原酶法检测培养HUVECs上清液中NO含量,比较各组细胞NO的分泌水平.结果 模型组NO水平显著低于正常对照组(P＜0.01),黄连素处理组NO水平显著高于模型组,以5 μg/ml剂量组作用最显著(P＜0.01).结论 高糖、高脂处理HUVECs,可以降低HUVECs存活率,减少NO释放;黄连素可以提高Glu、ox-LDL联合诱导的HUVECs损伤的活性,并提高增殖率;黄连素改善Glu、ox-LDL联合诱导的HUVECs损伤的作用机制与其促进NO释放有关.     

阿托伐他汀对氧化型低密度脂蛋白诱导的人脐静胁内皮细胞增殖及白细胞介素-18分泌的影响

目的:观察阿托伐他汀对氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)增殖及白细胞介素-18(IL-18)分泌的影响.方法:体外培养的HUVEC株,第3～9代用于实验.实验分3组:①空白对照组;②ox-LDL组(100 mg/L);③阿托伐他汀组:先将阿托伐他汀0.01、0.05、0.1、0.5、1.0μmol/L分别,作用于内皮细胞4 h,然后加ox-LDL(100 mg/L)作用细胞24 h.采用细胞酶联免疫吸附分析检测细胞培养上清液IL-18含量;采用四唑盐比色法检测各孔的吸收度(OD),以评价增殖效果.结果:与空白对照组比较,100 mg/L ox-LDL抑制内皮细胞增殖(P＜0.01),阿托伐他汀呈剂量依赖性地促进ox-LDL诱导的内皮细胞增殖(P＜0.05,P＜0.01).正常内皮细胞不分泌IL-18,而100 mg/L ox-LDL促进IL-18分泌.0.01/μmol/L阿托伐他汀对ox-LDL诱导的HUVEC分泌IL-18无影响(P＞0.05),0.05,0.1,0.5,1.0 μmol/L阿托伐他汀能明显抑制oxLDL诱导的HUVEC分泌IL-18(P＜0.05,P＜0.01),抑制效应呈浓度依赖性.结论:阿托伐他汀呈剂量依赖性地抑制ox-LDL诱导的人HUVECs分泌IL-18,促进内皮细胞增殖,保护内皮功能,从而发挥他汀类药物调脂外抗动脉粥样硬化作用.     

大黄酸对肿瘤坏死因子-α诱导的脐静脉内皮细胞黏附作用影响的观察

目的 观察不同剂量的大黄酸(Rhein)对TNF-α诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)黏附作用的影响. 方法 将HUVECs分为单纯HUVECs组、单纯TNF-α 40 ng/ml(TNF-α)组、Rhein100 μg/ml+TNF-α 40 ng/ml(Rhein100)组、Rhein 50 μg/ml+TNF-α 40 ng/ml(Rhein50)组、Rhein 10 μg/ml+TNF-α 40 ng/ml (Rhein10)组.采用Western blot和RT-PCR检测HUVECs细胞间黏附因子-1(ICAM-1)的蛋白和mRNA的水平.采用人单核细胞株(THP-1)和HUVECs的黏附性实验检测内皮细胞的黏附功能. 结果 与TNF-α组比较,Rhein100、Rhein50、Rhein10组ICAM-1蛋白相对表达量下降[(2.88±0.04)vs(1.27±0.32),(1.28±0.17),(1.32±0.25),P＜0.05或P＜ 0.01];Rhein100和Rhein50组ICAM-1 mRNA的水平下降[(2.12±0.24)vs(1.19±0.17),(1.26±0.23),P＜0.05或P＜0.01];在黏附性实验中,Rhein100组HUVECs所黏附的单核细胞数目下降[(1.28±0.07)vs(1.07±0.14),P＜0.01]. 结论 Rhein能抑制TNF-α所诱导的HUVECs的ICAM-1的过度表达,可能是Rhein对HUVECs的保护机制之一.     

波动性高糖对人脐静脉血管内皮细胞的损伤及其机制的研究

目的 观察波动性高糖在体外诱导人脐静脉血管内皮细胞(human umbilical vein endothelial cell,HUVEC)的损伤作用,并探讨其机制.方法 以HUVEC为研究对象,体外培养至第三代,实验分为:A组为正常组(正常培养的细胞),B组给予恒定加入5.5mmol/L 葡萄糖(Glu),C组给予恒定加入7.8mmol/L Glu,D组给予每24h轮换加入5.5mmol/L/7.8mmol/L Glu,E组给予恒定加入14.5mmol/L Glu,F组给予每24h轮换加入5.5mmol/L/14.5mmol/L Glu,G组给予恒定加入20mmol/L Glu,H组给予每24h轮换加入5.5mmol/L/20mmol/L Glu各组分别与HUVEC孵育5d,测定各组细胞液中的细胞活力(MTT)指标.测定正常对照组、恒定性高糖组(E组和G组)及波动性高糖组(F组和H组)细胞上清液中丙二醛(MDA)的含量、超氧化物歧化酶活力(SOD)、一氧化氮(NO)的含量、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)含量及细胞凋亡率,并在显微镜下观察细胞形态变化.结果 培养液中SOD、NO的含量在波动性高糖组与恒定性高糖组均与对照组比较,差异有统计学意义(P＜0.05);培养液中MDA及ICAM-1的含量在波动性高糖组与恒定性高糖组均与对照组比较,差异有统计学意义(P＜0.05).波动性高糖与恒定性高糖均可导致HUVECs出现凋亡的形态学变化,波动性高糖组的凋亡率与恒定性高糖组比较,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 (1)波动性高糖和恒定性高糖对人脐静脉血管内皮细胞均有损伤,且波动性高糖对其损伤更大.(2)波动性高糖体外诱导人脐静脉血管内皮细胞损伤的机制可能与其氧化应激水平更高,炎症反应加重及细胞凋亡率增加有关.     

胰升血糖素对MIN6细胞增殖活力及胰岛素分泌影响的研究

目的讨论不同浓度胰升血糖素(Glg)及葡萄糖(Glu)对MIN6胰岛β细胞株胰岛素分泌和细胞增殖活力的影响。方法采用不同浓度的Glu(2.8、16.7mmol/L)及Glg(100、500、1000ng/L)处理MIN6细胞,ELISA测定细胞上清液中胰岛素的含量,MTT法测定各组细胞增殖活力,收集整理实验数据并进行统计分析。结果 (1)胰岛素含量:单纯Glu处理后,16.7mmol/L组高于2.8mmol/L组(P0.001);单纯Glg处理后,1000ng/L组高于100ng/L组和500ng/L组(P0.01或P0.001);2.8mmol/L Glu加不同浓度Glg处理后,2.8mmol/L Glu+1000ng/L Glg组高于2.8mmol/L Glu+100ng/L Glg组和2.8mmol/L Glu+500ng/L Glg组(P0.001),2.8mmol/L Glu+500ng/L Glg组高于2.8mmol/L Glu+100ng/L Glg组(P0.001);16.7mmol/L Glu加不同浓度Glg处理后,16.7mmol/L Glu+1000ng/L Glg组高于16.7mmol/L Glu+100ng/L Glg组和16.7mmol/L Glu+500ng/L Glg组(P0.001),16.7mmol/L Glu+500ng/L Glg组高于16.7mmol/L Glu+100ng/L Glg组(P0.001);(2)细胞增殖活力:2.8mmol/L Glu加不同浓度Glg处理后,各组细胞活力变化比较,差异无统计学意义(P0.05);生理浓度Glu(5.6 mmol/L)加不同浓度Glg处理后,与无Glg组比较,其他Glg组增高[(0.36±0.06)vs(0.50±0.06),(0.59±0.10),(0.54±0.03)ng/L,P0.05或P0.01];16.7mmol/L Glu加不同浓度Glg处理后,与16.7mmol/L Glu+1000ng/L Glg组比较,16.7mmol/L Glu+100ng/L Glg、16.7mmol/L Glu+500ng/L Glg及无Glg组降低[(0.94±0.15)vs(0.66±0.06),(0.68±0.14),(0.68±0.03)ng/L,P0.01]。结论 Glg可能通过葡萄糖依赖的方式促进MIN6胰岛β细胞株胰岛素分泌,并增加细胞的增殖活力。     

吡格列酮对人脐静脉内皮细胞血凝素样氧化低密度脂蛋白受体1表达的影响

目的探讨氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)作用下,吡格列酮对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)血凝素样氧化低密度脂蛋白受体1(LOX-1)表达的影响。方法将培养的第4代HUVECs分5组:空白组(无干预);ox-LDL组(80 mg/L ox-LDL);低浓度组(1μmol/L吡格列酮+80 mg/L ox-LDL);高浓度组(10μmol/L吡格列酮+80 mg/Lox-LDL);对照组(10μmol/L吡格列酮),各组培养24 h后,采用流式细胞仪检测LOX-1的表达,采用RT-PCR检测LOX-1 mRNA的表达。结果与空白组比较,对照组LOX-1及LOX-1 mRNA表达均无明显改变(P0.05),ox-LDL组、低浓度组和高浓度组LOX-1及LOX-1 mRNA表达明显增多(P0.01);与ox-LDL组比较,低浓度组和高浓度组LOX-1及LOX-1 mRNA表达明显降低(P0.01);高浓度组较低浓度组降低更明显(P0.05)。结论吡格列酮能降低ox-LDL刺激下的HUVECs LOX-1及LOX-1 mRNA的表达,提示吡格列酮可能通过干预ox-LDL的病理生理过程起到抗动脉硬化的作用。     

过氧化物酶体增殖物激活受体α诱导内源性成纤维细胞生长因子21表达水平变化对氧化修饰的低密度脂蛋白引起的鼠内皮细胞凋亡的影响

目的 通过观察氧化修饰的低密度脂蛋白(ox-LDL)引起心脏血管内皮细胞损伤时,内源性成纤维细胞生长因子21(FGF21)基因表达及蛋白分泌水平的变化,以及过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPARα)刺激内源性FGF21生成增加时,对ox-LDL诱导细胞凋亡的影响,探讨内源性FGF21对动脉粥样硬化早期内皮功能的保护作用.方法 分离并培养成年Wistar大鼠心脏微血管内皮细胞,给予ox-LDL溶液,建立心脏血管内皮细胞损伤模型,以实时(real time)PCR及ELlSA法分析FGF21基因及蛋白水平变化,并给予PPARα配基苯扎贝特(分为50、100及200μmol/L组),诱导FGF21高表达,ELISA法观察细胞凋亡情况.结果 10、50及100μg/ml ox-LDL溶液组,FGF21基因表达及蛋白分泌越来越高.50及100 μg/ml ox-LDL组FGF21 mRNA表达水平,100 μg/ml ox-LDL组FGF21蛋白分泌水平,200 μmol/L苯扎贝特组诱导FGF21水平均显著高于溶剂对照组(P均＜0.05).200 μmol/L苯扎贝特+100μg/ml ox-LDL组细胞凋亡水平显著低于100 μg/ml ox-LDL组(P＜O.05).结论 ox-LDL诱导心血管内皮细胞损伤时FGF21分泌水平可反应性增高,且呈剂量依赖性.PPARα配基苯扎贝特可引起FGF21表达水平增高,对ox-LDL诱导的内皮细胞凋亡起到一定的抑制作用,提示FGF21可能作为一种心血管内源性保护因子,拮抗动脉粥样硬化早期心血管内皮功能障碍.     

非诺贝特对过氧化物酶体增殖物激活受体α和单核细胞趋化蛋白-1的影响

目的观察非诺贝特对氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)增殖、单核细胞过氧化物酶体增殖物激活受体(PPARα)和单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)的影响。方法体外培养HUVEC株,第3~5代用于实验。实验分3组:1空白对照组;2ox-LDL组(100 mg/L);3非诺贝特组:先将非诺贝特10、50、100μmol/L分别作用于内皮细胞24 h,然后加ox-LDL(100 mg/L)作用于细胞24 h。采用细胞酶联免疫吸附法分析检测细胞培养上清液PPARα、MCP-1含量;采用四唑盐比色法检测各孔的吸收度(OD),以评价增殖效果。结果与空白对照组比较,100 mg/L ox-LDL促进内皮细胞增殖(PO.01),非诺贝特呈剂量依赖性地抑制ox-LDL诱导的内皮细胞增殖(P0.01)。100 mg/L ox-LDL促进MCP-1分泌。10、50、100μmol/L非诺贝特能明显促进ox-LDL诱导的HUVEC分泌PPARα(P0.01),促进效应呈浓度依赖性。10、50、100μmol/L非诺贝特能明显抑制ox-LDL诱导的HUVEC分泌MCP-1(P0.01),抑制效应呈浓度依赖性。结论非诺贝特呈剂量依赖性促进ox-LDL诱导的人HUVEC分泌PPARα,抑制人HUVEC分泌MCP-1,抑制内皮细胞增殖,保护内皮功能,从而发挥贝特类调脂外抗动脉粥样硬化作用。     

甘木通醇提物通过miR-142-3p对ox-LDL诱导HUVECs损伤及SOD、MDA、CAT的影响

目的 探讨甘木通醇提物对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的人脐静脉血管内皮细胞(HUVECs)损伤和氧化应激的影响及潜在机制。方法 利用100 mg/L ox-LDL损伤HUVECs,同时给予不同浓度的甘木通醇提物。细胞计数试剂盒(CCK)-8法检测HUVECs增殖，流式细胞术评估细胞凋亡，Western印迹分析细胞核相关抗原(Ki-67)、天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶(Caspase)3蛋白表达，荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)测定微小RNA(miRNA)-142-3p表达，比色法检测超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、过氧化氢酶(CAT)水平。在HUVECs中转染anti-miR-142-3p并利用100 mg/L ox-LDL诱导细胞损伤，或转染anti-miR-142-3p并给予100 ng/ml浓度的甘木通醇提物和100 mg/L ox-LDL,观察细胞的增殖、凋亡和SOD、MDA、CAT变化。结论 ox-LDL诱导HUVECs损伤后，细胞的存活率、Ki67蛋白表达量、SOD、CAT活性明显降低，凋亡率、Caspase3蛋白表达量、miR-142-3p表达量...     

清利活血汤配合三黄生肌纱条对糖尿病溃疡大鼠肉芽组织中白介素1、内皮素1及碱性成纤维细胞生长因子含量的影响

目的 观察清利活血汤配合三黄生肌纱条对糖尿病足溃疡大鼠肉芽组织中内皮素-1(ET-1)、白介素-1(IL-1)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)含量的影响,探讨其促进溃疡愈合的作用机制.方法 32只雄性Wistar大鼠随机分为模型组、正常组、治疗组、对照组4组,除正常组外,余组均用高脂饲料喂养4w后,禁食16 h状态下腹腔注射STZ 30 mg/kg制作2型糖尿病模型,成功后4组动物在空腹8h以10％水合氯醛1 ml/100 g体重腹腔注射麻醉下用打孔器于大鼠背部脊柱左侧相同部位制作直径2 cm溃疡,止血后以无菌纱布包扎,分笼饲养.各组从术后第1天开始灌胃给药及溃疡换药,分别为:治疗组:清利活血汤14.5 g·kg-1·d-1,三黄生肌纱条换药1次/d;对照组:盐酸二甲双胍片72.4 mg· kg-1·d-1,凡士林纱条换药1次/d;模型组、正常组:生理盐水2 ml/d;生理盐水纱条换药1次/d,用药15 d后处死大鼠,放射免疫法测定IL-1、ET-1含量,免疫组化法测定bFGF含量.结果 与正常组比较,模型组大鼠IL-1 、ET-1含量均明显升高(P＜0.01),bFGF含量明显降低(P＜0.01);与模型组比较,治疗组鼠IL-1 、ET-1含量均明显降低(P＜0.01),bFGF含量明显升高(P＜0.01);与对照组比较,治疗组鼠IL-1 、ET-1含量均明显降低(P＜0.01),bFGF含量明显升高(P＜0.01).结论 清利活血汤配合三黄生肌纱条可下调糖尿病足溃疡大鼠肉芽组织ET-1、IL-1含量,上调bFGF含量,从而加速溃疡愈合,其疗效优于二甲双胍+凡士林.     

银杏素通过激活Nrf2/SLC7A11/GPX4信号通路抑制ox-LDL诱导的血管内皮细胞铁死亡

[目的]探讨银杏素调节核因子E2相关因子2(Nrf2)/溶质载体家族7成员11(SLC7A11)/谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)信号通路对氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的血管内皮细胞铁死亡的影响。[方法]将人脐静脉内皮细胞EA.hy926分为正常对照组(正常培养)、ox-LDL组(50 mg/L ox-LDL)、银杏素低剂量组(50 mg/L ox-LDL+10μmol/L银杏素)、银杏素中剂量组(50 mg/L ox-LDL+20μmol/L银杏素)、银杏素高剂量组(50 mg/L ox-LDL+40μmol/L银杏素)、ML385组(50 mg/L ox-LDL+40μmol/L银杏素+1μmol/L的Nrf2抑制剂ML385)、Erastin组(50 mg/L ox-LDL+40μmol/L银杏素+5μmol/L的SLC7A11抑制剂Erastin)、RSL3组(50 mg/L ox-LDL+40μmol/L银杏素+0.5μmol/L的GPX4抑制剂RSL3);MTT法检测细胞存活率;试剂盒检测细胞超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、还原型谷胱甘肽(GSH)水平...     

尾加压素Ⅱ对ox-LDL诱导的EVC-304细胞凋亡的影响

目的探讨尾加压素Ⅱ(UⅡ)对ox-LDL诱导的EVC-304细胞凋亡的影响,并探讨其可能机制。方法体外培养人脐静脉内皮细胞系ECV304,将不同浓度UⅡ及ox-LDL与内皮细胞共同孵育24 h后,应用倒置显微镜观察细胞形态变化,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测内皮细胞活性,TUNEL、流式细胞仪检测内皮细胞凋亡,免疫组化法检测内皮细胞凋亡基因bcl-2,bax,caspase-3蛋白表达水平。结果 ox-LDL(20μg/ml)处理24 h后,可诱导内皮细胞凋亡;同时给予不同浓度的UⅡ(20μg/ml ox-LDL+10-10mol/L UⅡ,20μg/ml ox-LDL+10-9mol/L UⅡ,20μg/ml ox-LDL+10-8mol/L UⅡ,20μg/ml ox-LDL+10-7mol/L UⅡ)处理24 h后,可显著增强ox-LDL诱导内皮细胞凋亡作用,并呈浓度依赖性。ox-LDL处理内皮细胞24 h后,bcl-2蛋白阳性表达率降低,而bax、caspase-3阳性表达率升高。同时给予UⅡ可增强促凋亡作用,与ox-LDL组比较,ox-LDL+UⅡ组的bcl-2蛋白阳性表达率显著降低(P0.05),而bax、caspase-3阳性表达率显著升高(P0.05)。结论 UⅡ可增强ox-LDL诱导的内皮细胞凋亡,并呈浓度依赖性,其作用可能与bcl-2、bax、caspase-3调节有关。     

和厚朴酚对ox-LDL诱导的血管内皮细胞损伤的保护作用及其机制研究

目的探讨和厚朴酚对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)所诱导的人脐静脉血管内皮细胞(HUVECs)损伤的保护作用及其机制。方法体外培养HUVECs,采用细胞增殖-毒性检测(CCK8试剂盒法)检测不同浓度(0.1、1、10、50、100μmol/L)和厚朴酚对正常HUVECs的毒性作用;采用100 mg/L ox-LDL诱导24 h建立HUVECs损伤细胞模型,同时给予不同浓度和厚朴酚,CCK8法检测细胞增殖,流式细胞仪检测活性氧(ROS)水平,比色法测定细胞上清液中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、过氧化氢酶(CAT)以及谷胱甘肽(GSH)的水平;采用流式细胞仪检测凋亡水平;免疫印迹法检测凋亡相关蛋白和内质网应激(ERS)相应的信号通路改变。结果低浓度(0.1、1、10μmol/L)和厚朴酚对HUVECs细胞无毒性作用,高浓度(50、100μmol/L)和厚朴酚干预下细胞增殖能力减弱。与对照组比较,ox-LDL组细胞增殖受到明显抑制(P0.05);而不同浓度和厚朴酚(0.1、1、10μmol/L)处理后,细胞增殖能力逐渐恢复(P0.05)。Ox-LDL组较对照组ROS水平明显增加(P0.05);而ROS水平随着厚朴酚浓度增加不断减少(P0.05)。同时,与ox-LDL组比较,和厚朴酚处理后细胞上清中SOD、CAT和GSH水平增加,MDA水平降低(P均0.05)。与ox-LDL组比较,和厚朴酚处理组HUVECs凋亡水平明显下降(P0.05),Bcl-2/Bax比率增加,cleaved caspase3表达下降(P均0.05)。而且与对照组比较,ox-LDL组内质网应激相关蛋白p-elF2α、p-PERK、ATF4和CHOP的表达增加,而和厚朴酚处理后上述蛋白表达均显著下降(P均0.05)。结论和厚朴酚可能通过抑制氧化应激和内质网应激保护ox-LDL诱导的内皮细胞损伤。     

氧化型低密度脂蛋白对胎盘生长因子及抑制剂的影响

目的探讨氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)对胎盘生长因子1(PLGF-1)作用人脐静脉内皮细胞(ECV-304)释放炎性因子和内皮细胞黏附分子的影响,及PLGF-1拮抗剂2’-氨基-3’-甲氧黄酮(PD98059)对其抑制程度。方法应用不同浓度的PLGF-1(20、40、80μg/L)孵育ECV-304,分为对照组和PLGF-1干预组(20、40、80 μg/L)。再应用PD98059(100μmol/L)和PLGF 1(80 μg/L)刺激ECV 304,分为空白对照组、ox-LDL组、PLGF-1+ox-LDL组和PLGF-1+ox-LDL+PD98059(拮抗组)。应用ELISA法检测炎性因子和内皮细胞黏附分子的表达。结果 (1)PLGF-1诱导炎性因子和内皮细胞黏附分子的表达呈时间依赖关系,6 h达最理想的分泌量。随着PLGF-1浓度的加大呈上升趋势。(2)与空白对照组比较,ox-LDL组、PLGF-1+ox-LDL组和拮抗组白细胞介素6、基质金属蛋白酶2、可溶性细胞间黏附分子1、可溶性血管细胞黏附分子1的表达显著增加(P<0.01),拮抗组较PLGF-1+ox-LDL组的表达显著减少(P<0.01)。结论 PLGF-1可促使内皮细胞产生大量炎性因子,参与诱导内皮活化;抑制PLGF-1的生物活性可控制炎性的反应。     

LOX-1/NF-κB信号途径对ox-LDL刺激的人脐静脉内皮细胞炎症因子表达的影响及氟伐他汀的干预作用

目的：探讨血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体-1（LOX-1）/核因子（NF）-κB信号途径对氧化低密度脂蛋白（ox-LDL）刺激的人脐静脉内皮细胞（HUVECs）炎症因子表达的影响及氟伐他汀的干预作用。方法：设立不同浓度的ox-LDL刺激组,LOX-1中和抗体干预组,NF-κB抑制剂吡咯烷二硫代氢基甲酸盐（PDTC）干预组,氟伐他汀干预组及空白对照组;检测细胞上清液中肿瘤坏死因子（TNF）-α,白细胞介素（IL）-6的浓度。结果：25mg/L、50mg/L、100mg/L浓度的ox-LDL刺激组24h后上清液TNF-α浓度分别为：（32.34±2.46）pg/ml、（96.43±8.36）pg/ml、（62.79±4.64）pg/ml,IL-6浓度分别为：（264.71±15.06）pg/ml、（630.70±17.77）pg/ml、（378.62±16.33）pg/ml,均较空白对照组TNF-а（22.99±3.55）pg/ml、IL-6（80.37±8.29）pg/ml水平显著升高（P〈0.05~0.01）;NF-кB抑制剂PDTC和LOX-1中和抗体干预后上清液TNF-α浓度较50mg/L ox-LDL刺激组显著下降（P〈0.01）。不同浓度氟伐他汀（0.01μmol/L、0.1μmol/L、1μmol/L）干预HUVECs 24h后上清液TNF-α浓度分别为（73.84±6.50）pg/ml、（42.59±6.45）pg/ml、（23.55±4.27）pg/ml;IL-6浓度分别为（549.0±20.23）pg/ml、（434.56±22.4）pg/ml、（302.42±21.30）pg/ml,较50mg/L ox-LDL刺激组显著下降（P〈0.05~0.01）。结论：氧化低密度脂蛋白可刺激人脐静脉内皮细胞上清液中炎症因子TNF-α和IL-6的表达,在25~50mg/L剂量范围内呈显著的剂量-效应关系。氟伐他汀可浓度依赖性抑制人脐静脉内皮细胞上清液中炎症因子TNF-α和IL-6的表达。     

Protective effect of osteoprotegerin in vascular endothelial cells cultured with high glucose and its possible mechanism

目的 探讨护骨素对高糖诱导的血管内皮细胞保护作用及机制.方法 人脐静脉内皮细胞分别在正糖(5 mmol/L葡萄糖)、高糖(25 mmol/L葡萄糖)、高糖+护骨素(25 mmol/L葡萄糖+2 μg/ml护骨素)、高渗(5mmol/L葡萄糖+20 mmol/L甘露醇)环境下培养72小时.以流式细胞术测定各组细胞的凋亡;Western blot法分析各组细胞磷酸化核转录因子(NF-κB)抑制蛋白激酶β (p-IκKβ)、NF-κB抑制蛋白激酶β(IκKβ)、NF-κB抑制蛋白α(IκBα)、bcl-2及bax表达水平.结果 (1)与正糖组相比,高糖组内皮细胞凋亡率显著增加(P＜0.01);高糖+护骨素组细胞凋亡明显低于高糖组,而又高于正糖组(P＜0.05);(2)与正糖组相比,高糖组p-IκKβ表达显著增高(P＜0.01),IκBo和bcl-2表达显著降低(P＜0.01);高糖+护骨素组p-IκKβ明显低于高糖组,而又高于正糖组(P＜0.05),IκBα和Bcl-2表达水平明显高于高糖组,而又低于正糖组(P＜0.05).结论 高糖通过激活IκKβ/NF-κB信号通路引起血管内皮细胞凋亡;护骨素具有抗高糖诱导的IκKβ/NF-κB活性作用,从而降低内皮细胞凋亡,保护内皮细胞.     

利维爱对绝经后妇女氧化低密度脂蛋白及内皮功能的影响

目的 观察利维爱治疗对绝经后妇女血清氧化型低蜜度脂蛋白(ox-LDL)、一氧化氮(NO)、内皮素-1(ET-1)水平的影响.方法选择有更年期症状的绝经后妇女138例,随机分为利维爱组(利维爱2.5 mg/d)和对照组.利维爱组治疗前及治疗2年后检测血清ox-LDL、NO、ET-1水平.结果 129例完成观察和治疗.利维爱治疗2年后血ox-LDL(P＜0.01),ET(P＜0.05)显著降低,NO显著升高(P＜0.05).结论利维爱对动脉内皮细胞有保护作用,对预防动脉粥样硬化有效.     

高压氧对急性脑梗死患者的疗效及其对神经功能、血氧饱和度及M-CSF、ox-LDL、sICAM-1水平的影响

目的:探究早期高压氧治疗对急性脑梗死(ACI)患者的疗效及其对神经功能、血氧饱和度及血清巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)、氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)、可溶性细胞间黏附分子(sICAM)-1水平的影响。方法:2017年3月至12月来我院就诊的ACI者100例被随机均分为常规治疗组和高压氧组(在常规治疗基础上接受早期高压氧治疗),疗程14 d。观察比较两组治疗前后美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分、血糖、血氧饱和度、血清乳酸、M-CSF、ox-LDL和sICAM-1水平。结果:随时间推移,两组NIHSS评分均显著降低(P0.05或0.01)。治疗后7d、14d、21d,高压氧组NIHSS评分均显著低于常规治疗组,P0.05或0.01。与常规治疗组比较,高压氧组治疗后血氧饱和度[(83.54±13.87)%比(99.29±14.62)%]显著升高,血糖[(5.89±2.36)mmol/L比(4.75±2.84)mmol/L]、血清乳酸[(5.53±2.63)mmol/L比(3.75±2.38)mmol/L]、M-CSF[(764.57±210.39)μg/L比(634.56±189.54)μg/L]、ox-LDL[(346.65±78.63)μg/L比(249.53±74.32)μg/L]和sICAM-1[(683.87±168.76)μg/L比(543.76±147.84)μg/L]水平均显著降低,P0.05或0.01。结论:早期高压氧治疗,可显著改善ACI患者的神经功能及血氧饱和度,降低血清中M-CSF、ox-LDL、sICAM-1水平。