AECOPD患者感染呼吸道病毒特征及呼吸道合胞病毒感染与血清IP-10的关系北大核心CSCD

目的研究慢性阻塞性肺疾病急性加重(AECOPD)患者感染呼吸道病毒特征,以及呼吸道合胞病毒感染与患者血清IP-10的关系。方法选择本院2019年1月-2020年10月收治的AECOPD患者125例,取咽试子标本,采用多重PCR的方法检查呼吸道病毒等的感染情况,采用肺功能检测仪检查患者的肺功能指标,ELISA的方法检测血清IP-10水平,比较不同肺功能分级AECOPD患者呼吸道合胞病毒检出情况以及IP-10水平。根据患者感染情况分为A组(仅感染呼吸道合胞病毒)、B组(呼吸道合胞病毒感染合并其他病毒感染)、C组(非呼吸道合胞病毒感染)、D组(未检测到病毒感染),比较4组患者血清炎性因子和IP-10水平及其与合胞病毒感染的关系。结果 125例AECOPD患者中67例(53.60%)检出呼吸道病毒感染,共检出病毒69株,主要为流感病毒A(占28.99%),呼吸道合胞病毒(占26.09%)和流感病毒B(占20.29%)。125例患者按肺功能分级,Ⅰ级21例,Ⅱ级42例,Ⅲ级51例,IV级11例。4组患者的呼吸道合胞病毒检出率、血清IP-10水平差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01),且随分级的增加呼吸道合胞病毒检出率和血清IP-10水平增高。Pearson相关分析显示,血清IP-10水平与FEV1值呈负相关性(r=-0.626,95%CI:-0.699~-0.539,P<0.01)。4组患者的血清炎性因子IL-1β、IL-8、IFN-γ、TNF-α和IP-10差异均有统计学意义(均P<0.01),其中A、B、C组血清炎性因子水平均显著高于D组,B组显著高于A、C组(均P<0.05)。呼吸道合胞病毒感染患者经治疗后血清IL-1β、IL-8、IFN-γ、TNF-α、IP-10水平均显著降低(均P<0.01)。结论 AECOPD患者感染的呼吸道病毒主要为流感病毒A、呼吸道合胞病毒和流感病毒B,其中呼吸道合胞病毒感染可通过诱导IP-10的表达加重疾病进展。     

小鼠哮喘模型中补体C5a对IL-17表达的调节作用

目的 探讨小鼠哮喘模型中补体C5a对IL-17表达的调节作用.方法 用卵清蛋白(OVA)致敏、激发的方法 建立Balb/C小鼠哮喘模型.用体内抗体中和试验,观察致敏前中和炎症介质补体C5a的功能是否影响小鼠肺泡灌洗液中IL-17细胞因子的表达水平,并探讨其机制.结果 病理结果 显示模型组小鼠的肺组织出现肺泡腔扩张、腔内大量炎性细胞的浸润.小鼠致敏前给予抗C5a抗体干预上调了肺部IL-17及IL-6 的表达,导致肺炎症明显加重.结论 小鼠哮喘模型中体内C5a分子对IL-17表达具有负调节作用.     

红景天多糖对老年小鼠免疫功能的影响

目的 探讨中药红景天多糖在免疫功能调节方面的作用机制.方法 应用流式细胞技术、放射免疫和ELISA方法检测老年小鼠免疫功能T淋巴细胞亚群,外周血白介素-2(IL-2)含量及免疫球蛋白G(IgG)的含量.结果 红景天多糖对老年小鼠T淋巴细胞亚群、外周血IL-2含量及抗体形成均有增强作用(P<0.05).结论 红景天多糖能够提高老年小鼠的免疫功能,是一种良好的免疫调节剂.     

黄芪多糖、香菇多糖增强弓形虫wx2b4a表位疫苗免疫小鼠的保护作用

目的探讨黄芪多糖(Astragalan)、香菇多糖(Lentinan)增强弓形虫wx2b4a表位疫苗刺激机体产生免疫应答和保护免疫的效果。方法将黄芪多糖、香菇多糖分别与弓形虫wx2b4a表位疫苗混合肌注免疫小鼠,ELISA法检测小鼠血清中IgG抗体水平,pcDNA3-W2b4a刺激下培养各组小鼠脾脏淋巴细胞,ELISA法检测IL-2、IFN-γ分泌水平,CCK-8法检测免疫鼠脾细胞增殖活性,并观察其受到弓形虫攻击感染后的生存时间。结果各免疫组小鼠血清IgG抗体水平显著高于对照组(P<0.05),且pcDNA3-W2b4a+黄芪多糖组要高于pcDNA3-W2b4a+香菇多糖组(P<0.05);pcDNA3-W2b4a+黄芪多糖组、pcDNA3-W2b4a+香菇多糖组小鼠脾细胞IL-2、IFN-γ水平高于pcDNA3-W2b4a组(P<0.05);各免疫组T细胞增殖活性与对照组比较明显增强(P<0.05),且pcDNA3-W2b4a+香菇多糖组要高于pcDNA3-W2b4a+黄芪多糖组;小鼠攻击试验表明,pcDNA3-W2b4a+黄芪多糖组、pcDNA3-W2b4a+香菇多糖组小鼠存活时间明显长于对照组和pcDNA3-W2b4a组(P<0.05)。结论黄芪多糖、香菇多糖可增强弓形虫wx2b4a表位疫苗产生免疫应答,并显示较好的免疫保护效应。     

白细胞介素-23/-17轴在小鼠急性实验性结肠炎中的表达及作用

目的 研究白细胞介素(IL)-23/IL-17轴在小鼠实验性结肠炎结肠组织中的表达和作用.方法 将64只小鼠分为对照组24只、模型组24只、抗体组8只、正常血清组8只.除对照组外,其余各组建立小鼠急性实验性结肠炎模型.对照组和模型组小鼠分别于造模后24 h、48 h、7 d处死.抗体组和正常血清组小鼠分别于造模前2 h腹腔内注射多克隆大鼠抗小鼠IL-17中和抗体和正常大鼠血清,于造模48 h后处死.检测各组小鼠组织学损伤评分、肠组织髓过氧化物酶(MPO)活性;酶联免疫吸附试验检测结肠组织IL-23p19、IL-17含量;免疫组化染色检测核因子(NF)-κB p65在结肠组织中的表达;实时荧光定量(RT)PCR检测IL-23p19、IL-17、IL-12p35的mRNA表达水平.结果 模型组24 h、48 h、7 d时IL-23p19蛋白表达水平和mRNA表达水平[分别为(15.53±3.32)、(31.16±4.98)、(14.03±3.56)ng/mg蛋白和4.09±0.34、3.39±0.46、6.54±1.82]、IL-17的蛋白表达水平和mRNA表达水平[分别为(0.35±0.06)、(0.38±0.08)、(0.26±0.05)ng/mg蛋白和4.21±2.61、2.65±0.91、5.63±1.43]均显著高于正常对照组(P值均＜0.05),48 h时达高峰.IL-23与IL-17蛋白表达水平和mRNA表达水平呈正相关(r值分别为0.745和0.793,P＜0.05).抗体组IL-23p19和IL-12p35高水平表达,但NF-κB p65阳性细胞率、组织学评分及MPO活性[分别为1.86%±0.36%、0.63±0.52、(0.40±0.03)U/g]明显低于48 h模型组[分别为4.35%±0.37%、5.13±0.64、(2.29±0.40)U/g],说明中和IL-17后能明显减轻结肠炎症,抑制NF-κB活性.结论 IL-23/IL-17轴在急性实验性结肠炎早期阶段起关键作用.IL-17有望成为炎症性肠病治疗的新靶标.     

IL-33/ST2轴在呼吸道病毒感染免疫中的作用

IL-33是 IL-1家族的新成员,它能通过结合 IL-1受体家族中的孤儿受体 ST2发挥其生物学效应。很多研究证实呼吸道病毒感染可刺激机体多种细胞显著表达及分泌 IL-33,IL-33作用于靶细胞表面 ST2受体,从而启动 T 辅助细胞(T helper,Th)2型免疫反应,介导呼吸道病毒感染相关疾病。抗 IL-33抗体或抗 ST2抗体阻断 IL-33/ST2轴及上述免疫反应,从而有可能为治疗呼吸道病毒感染相关疾病提供新靶点。     

窑归多糖对小鼠急性肝损伤的保护作用

目的探讨窑归多糖对小鼠急性肝损伤的保护作用及其机制。方法复制四氯化碳(CCl4)急性肝损伤小鼠模型,将昆明种小鼠50只随机分为5组(n=10),即正常对照组、模型组、联苯双酯组、窑归多糖低剂量组和高剂量组。窑归多糖低剂量组和高剂量组行窑归多糖灌胃21 d,除正常对照组,其余各组腹腔注射CCl4,24 h后测定小鼠血清中乳酸脱氢酶(LDH)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)及肝脏指数,测定肝组织中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性和丙二醛(MDA)含量。测定小鼠血清中肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-2、IL-10的含量。结果与正常对照组比较,模型组小鼠LDH、AST、ALT及肝脏指数明显升高,SOD和GSH-Px的活性降低,MDA含量明显增加,TNF-α和IL-2明显升高、IL-10明显降低(P0.01);与模型组比较,窑归多糖低剂量组和高剂量组小鼠LDH、AST、ALT及肝脏指数明显降低,SOD和GSH-Px的活性增强,MDA含量明显减少,TNF-α和IL-2明显降低、IL-10明显升高(P0.05,P0.01)。结论窑归多糖对小鼠急性肝损伤有明显的保护作用。     

天南星多糖对荷瘤小鼠的抗肿瘤活性

目的探讨天南星多糖的抗肿瘤作用及对免疫功能的影响。方法灌胃给予S180荷瘤小鼠模型、高、中、低剂量(2 g·kg-1·d-1、1 g·kg-1·d-1和0.5 g·kg-1·d-1)的天南星多糖,考察其对小鼠移植瘤的抑制效果,采用酶联免疫吸附(ELISA)法检测天南星多糖对荷瘤小鼠血清中肿瘤坏死因子(TNF-α)和白细胞介素(IL-2)含量的影响。结果各给药组均可抑制小鼠S180移植瘤的生长,其中高剂量组抑瘤率为33.3%;同时,天南星多糖可提高荷瘤小鼠血清中TNF-α和IL-2水平。结论天南星多糖具有抗肿瘤作用,其机制可能与增强机体免疫力有关。     

中和白细胞介素-23抑制血管紧张素Ⅱ诱导的动脉粥样硬化进程

目的:探讨中和白细胞介素(IL)-23是否影响血管紧张素Ⅱ诱导的动脉粥样硬化进程及可能机制。方法:10周龄雄性ApoE-/-小鼠随机分为两组,给予8周西方高脂饮食的同时皮下植入血管紧张素Ⅱ微泵,分别经腹腔注射抗IL-23p19中和抗体和同型对照抗体。8周后处死小鼠,检测血压、心率、斑块面积、Th1和Th17比例、组织和循环炎性因子的表达。结果:抗IL-23p19中和抗体不影响小鼠血压和心率;抗IL-23p19中和抗体处理显著减少斑块面积,降低Th1和Th17比例,下调组织和循环促炎因子干扰素-γ、IL-6、IL-17、肿瘤坏死因子-α水平。结论:中和IL-23通过抑制炎症反应延缓血管紧张素Ⅱ诱导的动脉粥样硬化进程。     

胡颓子多糖对小肠辐射损伤的保护作用

目的:观察长叶胡颓子多糖对小肠辐射损伤的的保护作用及其机制.方法:昆明小鼠60只随机分为:正常组、辐射组、不同剂量(100,300,500 mg/kg)胡颓子多糖给药组.采用~(60)Coγ射线一次性全身均匀照射建立小肠辐射损伤模型,相应灌胃用药2 wk后,测定小鼠肠段的肠腺存活率百分比和二胺氧化酶(DAO)含量,检测肠黏膜蛋白质和DNA含量(mg/cm),肠组织中SOD活性和MDA含量,血清中TNF、IL-4、IL-6水平.结果:不同剂量长叶胡颓子多糖灌胃均不同程度提高十二指肠、空肠和回肠段肠腺存活率(P<0.05),促进肠黏膜蛋白质、DNA合成(P<0.05或P<0.01),降低血液中TNF水平(6.89±1.33,6.74±1.24,5.87±1.13 vs 8.53±1.08;P<0.05或P<0.01)和MDA含量,提高IL-4(9.79±2.23,10.83±2.34,11.36±2.51 vs 7.40±2.08;P<0.05或P<0.01)、IL-6水平(49.36±9.65,55.26±11.32,59.68±13.65 vs 43.74±12.91;P<0.05或P<0.01)和SOD活性,且与用药剂量呈量效关系.结论:长叶胡颓子多糖通过促进肠黏膜蛋白质和DNA合成、增强抗氧化能力、调节细胞因子异常和损伤修复作用维护肠黏膜的完整性、增强屏障作用,有效减轻小肠辐射损伤.     

病毒感染与肺部急性炎症关系的初步研究

目的观察肺部急性炎症与病毒感染的关系。方法采用间接酶联免疫吸附试验(ELISA)方法检测血清流感病毒A(FluA)、流感病毒B(FluB)、呼吸道合胞病毒(RSV)、腺病毒(ADV)和副流感病毒(PIV)的IgM抗体。结果217例肺部急性炎症患者中病毒IgM抗体阳性的患者86例,为39.63%,其中慢性阻塞性肺疾病急性加重患者病毒抗体阳性75例;在所有病毒抗体阳性标本中,共有144例次抗体阳性,其中FluB54例,占37.5%,FluA30例,占20.83%,副流感病毒25例,占17.36%,腺病毒22例,占15.28%,呼吸道合胞病毒13例,占9.03%。结论病毒感染是造成肺部急性炎症的重要原因之一。     

九种中药多糖含药血清对小鼠腹腔巨噬细胞释放细胞因子的影响

目的 研究黄芪等中药多糖干预小鼠免疫功能的部分机制.方法 常规提取黄芪、防风、当归、柴胡、枸杞、地黄、板蓝根、蒲公英、香菇等9味中药多糖组分,分别按大、中、小剂量灌胃给药,制备小鼠含药血清;选择浓度为20％的含药血清干预体外培养的小鼠腹腔巨噬细胞(Mφ),并用酶联免疫吸附法(ELISA)检测Mφ释放白细胞介素(IL)-1β、IL-6、IL-8、肿瘤坏死因子(TNF)-α等细胞因子(CK)的水平.结果 除柴胡多糖外,其余8种中药多糖含药血清对IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α中一个或多个CK水平具有明显升高或降低作用(P＜0.05或P＜0.01),且具有浓度差异性(P ＜0.05或P＜0.01).结论 黄芪等8味中药调节机体免疫功能的机制,可能与这些中药的多糖组分在体内干预巨噬细胞释放IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α等CK有关.     

人源抗狂犬病毒G蛋白单链抗体的生物学鉴定及其小鼠体内中和活性测定

目的对从噬菌体抗体库中筛选的人源抗狂犬病毒单链抗体A12进行生物学活性鉴定及小鼠体内中和活性检测。方法用免疫荧光法检测其结合感染狂犬病毒CVS的鼠脑组织的能力,用小鼠中和实验测定A12表达产物的体内中和活性。结果免疫荧光试验显示A12表达产物与感染CVS的鼠脑细胞有强的荧光反应。小鼠中和试验结果表明,A12ScFv样品组小鼠有9只存活,而对照组小鼠全部死亡。A12在729倍稀释时能100%保护小鼠抵抗致死量狂犬病毒的脑内攻击。结论A12对狂犬病毒具有一定的中和活性,有可能被用于暴露后狂犬病的预防。     

树舌多糖GF注射液对化疗药物的增效减毒作用及其机制研究

目的探讨树舌多糖GF注射液对化疗药物(CTX)的增效减毒作用及其作用机制。方法采用移植性H22肝癌小鼠，随机分为阴性对照组、CTX组和联合用药组。连续给药10d后，测定其抑瘤率、WBC数、吞噬指数和IL-2活性。结果树舌多糖GF注射液能提高CTX的抑瘤率，能减轻CTX的毒副作用，并能提高单核吞噬细胞功能和IL-2活性。结论树舌多糖GF注射液对化疗药物CTX具有明显的增效减毒作用，可能是通过增强机体的免疫功能实现的。     

小鼠β防御素4体外对人呼吸道合胞病毒抑制作用研究

目的观察小鼠β防御素4体外对人呼吸道合胞病毒的抑制作用。方法将小鼠β防御素4基因克隆到pET32a载体中并导入大肠埃希菌表达,获得的小鼠β防御素4融合蛋白,通过镍亲和层析法纯化和离子交换层析法复性,分别以半数组织感染剂量法和荧光定量PCR法分别测定小鼠β防御素4和阳性对照利巴韦林对人呼吸道合胞病毒的半数抑制浓度,以噻唑蓝比色法检测小鼠β防御素4和利巴韦林对细胞的半数毒性浓度,依据半数毒性浓度与半数抑制浓度的比值计算小鼠β防御素4和利巴韦林对人呼吸道合胞病毒的治疗指数(TI)。同时检测不同浓度小鼠β防御素4对人呼吸道合胞病毒感染细胞的保护程度。结果成功构建pET32a-Trx-His-β-D-4重组质粒,转化BL21后诱导表达融合小鼠β防御素4蛋白。以半数组织感染剂量法和荧光定量PCR法分别测定纯化的小鼠β防御素4对人呼吸道合胞病毒的TI值分别为189和152,而利巴韦林的TI值分别为87和85,且小鼠β防御素4对人呼吸道合胞病毒的抑制作用呈量效关系。结论体外实验表明,融合小鼠β防御素4能高效抑制人呼吸道合胞病毒感染,其效果优于利巴韦林。     

肉苁蓉多糖对D-半乳糖致衰小鼠脑神经细胞的保护作用及机制

目的探讨肉苁蓉多糖对D-半乳糖致衰老小鼠脑神经细胞的保护作用及其机制。方法建立D-半乳糖致衰小鼠模型,观察肉苁蓉多糖对脑组织超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力、神经细胞凋亡及DNA损伤和凋亡相关基因Bcl-2的表达情况。结果衰老小鼠脑神经细胞MDA含量、DNA损伤率和细胞凋亡率明显增加(P0. 01),SOD活性、GSH-Px活力及Bcl-2基因表达明显降低(P0. 05)。灌服肉苁蓉多糖可提高SOD活性、GSH-Px活力,降低MDA含量,增强神经细胞DNA损伤的修复能力,减少凋亡细胞数,增加Bcl-2基因表达。结论肉苁蓉多糖对D-半乳糖致衰小鼠脑神经细胞具有保护作用。     

白介素-17在自身免疫性肝炎中的作用及其机制研究

目的：探讨IL（白细胞介素）-17在自身免疫性肝炎（autoimmune hepatitis,AIH）患者和AIH小鼠中的作用及其机制。方法：选取AIH患者和健康者各12例,分离其外周血单个核细胞（PBMC）,实时定量PCR方法检测PBMC中IL-17的表达。将S-100肝抗原与弗氏完全佐剂经腹腔注入到C57BL／6小鼠体内而建立AIH小鼠模型,通过尾静脉注入IL-17中和抗体,观察小鼠肝功能变化和肝脏病理组织学变化。结果：与健康者相比,AIH患者PBMC中IL-17的表达明显增高。AIH小鼠模型中,IL-17中和抗体明显地降低了血清中ALT水平,并且减轻了小鼠肝脏炎症反应。结论：IL-17在AIH患者血清中明显升高。采用IL-17中和抗体干预后,其AIH小鼠的肝功能及肝脏损伤明显好转。证实了IL-17在AIH的发病过程中起了极其重要的作用。     

马齿苋多糖对D-半乳糖衰老小鼠SOD和MDA的影响

目的 观察马齿苋多糖对D-半乳糖致衰老模型小鼠超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)的影响,及其对衰老模型小鼠氧自由基的作用.方法 用D-半乳糖致衰老模型小鼠,以不同浓度的马齿苋多糖灌胃,30 d后分别测定小鼠血清、肝和脑中SOD活性和MDA含量.结果 马齿苋多糖能够明显提高血清及肝、脑等器官中SOD的活性,可以有效抑制D-半乳糖所致的血清及肝、脑中SOD活力的下降.同时,马齿苋多糖能显著降低衰老模型小鼠体内MDA的含量.结论 马齿苋多糖具有明显的抗衰老作用.     

Th17细胞亚群在小鼠呼吸道合胞病毒感染后宿主免疫机制中的作用

目的探讨辅助性T淋巴细胞(Th)17在呼吸道合胞病毒(RSV)感染小鼠肺部炎症中的变化及其在RSV感染后宿主免疫机制中的作用。方法 30只5周龄雌性BALB/c小鼠随机分为实验组和对照组各15只。对照组小鼠鼻腔滴入0.1 ml DMEM维持液(含有2.5%灭活的鸡血清),实验组小鼠鼻腔滴入0.1 ml病毒液(TCID50为107.5/ml)。在处理后的第1、3、7天分别处死小鼠,取其外周血并留取小鼠脾脏和肺脏组织。采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测小鼠外周血中白细胞介素(IL)-17A和IL-23p19的浓度。通过苏木素-伊红(HE)染色观察RSV感染后肺组织病理变化。通过流式细胞术检测小鼠脾脏淋巴细胞中Th17细胞亚群的含量变化。结果实验组小鼠在RSV病毒感染后1、3、7 d,血清IL-17A浓度较对照组明显升高(P<0.05)。在RSV病毒感染的第3天和第7天,实验组小鼠血清中IL-23p19的浓度较对照组明显升高(P<0.05);在RSV病毒感染后第1、3、7天,实验组小鼠脾淋巴细胞Th17亚群比例显著高于对照组(P<0.05),且RSV病毒感染后第7天明显高于第1、3天(P<0.05);在RSV感染后第3天小鼠肺组织出现典型间质性肺炎表现,第7天炎性细胞明显减少。实验组第3、7天小鼠肺组织病理改变评分高于对照组(P<0.05)。结论在RSV感染小鼠导致的肺部炎症反应过程中,脾淋巴细胞Th17细胞亚群水平升高并且外周血血清中IL-17A的表达增加,推测Th17细胞可能参与宿主的抗病毒免疫过程。     

日本脑炎病毒DNA疫苗和基因工程亚单位颗粒疫苗的动物保护实验研究

目的　评价 3种日本脑炎病毒 (JEV)新型疫苗 ,即E蛋白病毒样颗粒 (VLPs)、DNA疫苗 (pV/JE)以及E蛋白颗粒 (Eps)的动物免疫效果。方法　BALB/c小鼠经 2次接种疫苗后 ,测定其病毒特异性的CTL活性、结合抗体、中和抗体 ,并以10LD5 0JEV攻击免疫小鼠 ,观察其保护效果。结果　各新型疫苗组的CTL活性为 33%～ 5 6 % ,灭活疫苗组为 2 2 % ,而载体和PBS对照组的CTL活性分别为 17%和 18%。一次免疫后 ,实验组小鼠血清结合抗体阳转率为 90 %。除DNA疫苗组外 ,各组小鼠的二次免疫血清抗体效价高于一次免疫的抗体效价 (P <0 0 5 ) ,且以VLPs加佐剂组小鼠血清抗体效价最高 ,Eps加佐剂组次之 ,均高于 pV/JE组和灭活疫苗组 (P <0 0 5 )。三种疫苗可诱发小鼠产生中和抗体。各实验组小鼠能够抵抗JEV的攻击 ,而对照组小鼠的死亡率为 37 5 %。结论　三种新型疫苗可以正确表达JEV的E蛋白表位 ,可诱发免疫小鼠产生抗JEV的中和抗体并有保护性作用 ,免疫效果优于灭活疫苗 ,有可能成为候选的JEV新型疫苗。