双氢青蒿素和吉非替尼联用对肺癌NCI-H1975细胞凋亡相关蛋白Bax与Bcl-2表达的影响

目的探讨双氢青蒿素(DHA)与吉非替尼联用对人肺腺癌NCI-H1975细胞增殖和凋亡的影响。方法通过CCK8方法确定DHA与吉非替尼联合用药剂量。利用TUNEL方法检测药物诱导NCI-H1975细胞出现凋亡情况,并通过荧光显微镜观察药物作用后细胞核的形态学改变;采用流式细胞术测定NCI-H1975细胞周期分布的变化;采用蛋白印迹技术检测NCI-H1975细胞凋亡相关蛋白的表达。结果 DHA(10.00μmol/L)与吉非替尼(10μmol/L)联合用药作用于NCI-H1975细胞存在协同作用(CI<1);与吉非替尼组比较,联合组能显著抑制NCI-H1975细胞增殖,增强吉非替尼诱导NCI-H1975细胞的凋亡作用;使NCI-H1975细胞G2/M期细胞比例显著增加,DHA与吉非替尼联用显著升高了Bax/Bcl-2比值。结论 DHA能增强NCI-H1975细胞对吉非替尼的敏感性,能增强吉非替尼诱导Bax、Bcl-2细胞产生凋亡,其作用机制可能与细胞凋亡路径调节有关。     

选择性COX-2抑制剂尼美舒利对肺癌放射治疗增敏作用及其机制研究

目的 观察选择性环氧化酶抑制剂与放射治疗联合应用对人肺腺癌A549裸鼠移植瘤生长的影响并进一步探讨其放疗增敏机制.方法 首先构建人肺腺癌A549裸鼠移植瘤模型,待裸鼠移植瘤长至最长径6.0 mm时随机分为4组:对照组、尼美舒利组、放疗组、尼美舒利联合放疗组.尼美舒利溶于0.5％羟甲基纤维素钠中,采用灌胃方式给药,剂量为60 mg·kg1·d-1,共28 d.移植瘤最大径长至6.0 mm时予以局部单次大剂量放疗10 Gy.观察各组移植瘤最长径由6 mm长至12 mm所需时间,以移植瘤体积绘制生长曲线,计算抑瘤率,用免疫组化方法检测增殖细胞核抗原(PCNA)、前凋亡蛋白Bax、凋亡抑制蛋白Bcl-2在组织中表达情况,应用流式细胞技术测定细胞周期分布及凋亡率.结果 尼美舒利联合放疗对肺腺癌裸鼠移植瘤生长有明显抑制作用.对照组移植瘤最长径由6 mm增长至12 mm所需时间为(7.12±0.72)d,放疗组为(8.34±0.71)d,尼美舒利组为(11.29±0.78)d,尼美舒利联合放疗组为(14.62±0.19)d.放疗组抑瘤率为21.2％,尼美舒利组为18.3％,尼美舒利联合放疗组为41.7％.应用免疫组化方法检测移植瘤中PCNA和Bcl-2表达的阳性面积百分比及灰度值:尼美舒利联合放疗组、放疗组、尼美舒利组均低于对照组(P值均＜0.05),且尼美舒利联合放疗组低于放疗组及尼美舒利组(P值均＜0.05);Bax表达阳性面积百分比及灰度值:尼美舒利联合放疗组、放疗组、尼美舒利组均高于对照组(P值均＜0.05),且尼美舒利联合放疗组高于放疗组及尼美舒利组(P值均＜0.05).流式细胞仪检测细胞凋亡率及细胞周期分布:尼美舒利联合放疗组、放疗组、尼美舒利组凋亡率均高于对照组(P值均＜0.05),且尼美舒利联合放疗组高于放疗组及尼美舒利组(P值均＜0.05);G0/G1期各组差异无统计学意义(F＝2.731,P＞0.05);S期尼美舒利联合放疗组、放疗组、尼美舒利组均低于对照组(P值均＜0.05),且尼美舒利联合放疗组低于放疗组及尼美舒利组(P值均＜0.05);G2/M期尼美舒利联合放疗组同其他各组相比增多(P值均＜0.05),对照组、放疗组、尼美舒利组差异无统计学意义(P＞0.05).结论 尼美舒利可抑制人肺腺癌A549裸鼠移植瘤的生长,尼美舒利增强人肺腺癌A549裸鼠移植瘤对放射治疗的敏感性.其机制可能同抑制PCNA表达,从而抑制肿瘤细胞的生长,并通过抑制Bcl-2表达、增强Bax表达,而诱导A549细胞凋亡有关;还可能与细胞周期分布中对放疗不敏感的S期细胞数减少而对放疗敏感的G2/M期细胞数增加有关.     

吉非替尼对神经胶质瘤细胞移植瘤生长的影响和机制研究

目的探究吉非替尼调控丝裂原激活的蛋白激酶(MEK)/细胞外调节蛋白激酶(ERK)通路对神经胶质瘤细胞移植瘤生长的影响及机制。方法通过皮下注射U87细胞的方法构建胶质瘤裸鼠模型,建模成功后将30只小鼠随机分为对照组、吉非替尼组和联合组(吉非替尼+MEK/ERK通路抑制剂PD98059),每组10只。建模28 d测量肿瘤体积和质量,通过检测Ki67、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)分析增殖水平,TUNEL染色检测凋亡。免疫组织化学染色检测CD34和血管内皮生长因子(VEGF)评估微血管密度和血管生成能力。并分析各组MEK和ERK mRNA和蛋白水平。结果吉非替尼组和联合组建模28 d肿瘤体积和质量明显低于对照组,且联合组建模28 d肿瘤体积和质量明显低于吉非替尼组(P0.05)。吉非替尼组和联合组凋亡指数明显高于对照组[(18.54±2.75)%、(28.82±3.91)%vs(4.64±0.75)%,P0.05],且联合组凋亡指数明显高于吉非替尼组(P0.05)。吉非替尼组和联合组Cyclin D1、Ki67、微血管密度、VEGF表达明显低于对照组,且联合组Cyclin D1、Ki67、微血管密度、VEGF表达明显低于吉非替尼组(P0.05)。吉非替尼组和联合组MEK、ERK mRNA和蛋白表达明显低于对照组,且联合组MEK、ERK mRNA和蛋白表达明显低于吉非替尼组(P0.05)。结论吉非替尼可能通过MEK/ERK通路抑制胶质瘤细胞的增殖和血管生成,并诱导凋亡,从而起到抑制胶质瘤的作用。     

下调S100A6基因对裸鼠肺腺癌移植瘤生长和凋亡的影响

目的探讨下调靶向基因S100A6对在体肺腺癌移植瘤生长和凋亡的影响。方法 18只健康Balb/c雄性裸鼠随机分为空载体对照组、阴性对照组及S100A6基因RNA干扰组三组,每组6只动物;分别应用不携带目的基因的空载质粒、未转染任何质粒以及含有S100A6基因RNA干扰慢病毒质粒的A549肺腺癌细胞接种于裸鼠皮下,构建移植瘤动物模型;观察不同组移植瘤组织生长情况;采用Real-Time PCR、免疫组织化学及Western-blot等技术检测S100A6 mRNA和蛋白的表达,TUNEL法检测细胞凋亡。结果成功构建了裸鼠肺腺癌皮下移植瘤模型;病理学特征显示,阴性对照组和空载体对照组可见到成巢的肿瘤细胞,癌细胞核大,而干扰组肿瘤细胞较稀疏,间质组织明显;接种细胞2周时,阴性对照组、空载体对照组和RNA干扰组肿瘤组织体积和质量差异具有统计学意义(P0.05);S100A6基因和蛋白表达在三组之间差异具有统计学意义(P0.05);各组裸鼠移植瘤凋亡细胞呈现不同程度的棕褐色肿瘤细胞核,三组肿瘤细胞凋亡率的差异具有统计学意义(P0.05)。结论下调肿瘤瘤组织S100A6蛋白表达,可抑制肿瘤生长,诱导细胞凋亡,为进一步开发肺腺癌分子靶点提供了新途径。     

RNA干扰K-ras基因对肺腺癌H441细胞EGFR-TKI耐药性的影响

目的探讨RNA干扰K-ras基因对肺腺癌H441细胞株细胞EGFR-TKI耐药性的影响。方法构建靶向K-ras基因的表达载体并转染肺腺癌H441细胞,分别检测转染后细胞中K-ras蛋白及基因表达以及对吉非替尼敏感性的改变。结果实验组中K-ras基因及蛋白的表达量明显低于对照组(P0.05);实验组中细胞凋亡率及细胞增殖抑制率均显著升高(P0.05)。结论靶向突变K-ras基因的si RNA可以诱导肺腺癌H441细胞凋亡,减弱对吉非替尼的耐药性,为肺癌的基因治疗提供了新的思路和方法。     

塞来昔布联合 NK 细胞对裸鼠人肝癌皮下移植瘤生长的影响

目的：观察塞来昔布联合NK细胞对裸鼠人肝癌细胞SMMC-7721皮下移植瘤生长的影响,并探讨其可能的作用机制。方法选择裸鼠40只,制备人肝癌细胞SMMC-7721移植瘤模型,随机分为对照组、NK细胞组、塞来昔布组及联合干预组各10只。 NK细胞组瘤内注射NK细胞悬液0．6 mL,每7 d注射1次,共注射5次;塞来昔布组从接种后第3天起给予塞来昔布100 mg/kg灌胃,每天1次,连续35 d;联合干预组同时给予塞来昔布和NK细胞,给药剂量及途径与单用组相同;对照组灌胃和瘤内注射等量生理盐水。35 d后切取移植瘤组织计算体积,称取瘤质量,并计算抑瘤率;TUNEL法评价肿瘤细胞凋亡情况,免疫组化法检测肿瘤内VEGF、Bax、Bcl-2、caspase-3、Ki-67、NF-κB的阳性表达。结果联合干预组移植瘤体积、肿瘤质量均明显低于单用组（ P均＜0．05）,抑瘤率、凋亡指数明显高于单用组（ P均＜0．05）。联合干预组移植瘤中VEGF、Bcl-2、NF-κB、Ki-67表达明显低于单用组（ P均＜0．05）,Bax、caspase-3表达明显高于单用组（P均＜0．05）。结论塞来昔布联合NK细胞可明显抑制裸鼠人肝癌细胞SMMC-7721皮下移植瘤的生长;其作用机制可能是通过促进凋亡级联通路上Bax、caspase-3的表达,抑制VEGF、Bcl-2、NF-κB、Ki-67的表达而实现。     

藤梨根提取物抗肺癌作用的体内实验研究

目的研究藤梨根乙酸乙酯提取物对肺癌A549细胞裸鼠移植瘤的生长抑制及凋亡诱导作用,探讨其可能机制。方法用肺癌A549细胞建立肺癌裸鼠移植瘤模型,随机分为对照组、治疗组（高剂量组、低剂量组）。根据瘤体积变化绘制移植瘤生长曲线,根据终末瘤质量比较计算抑制率,移植瘤细胞凋亡指数检测采用TUNEL法,移植瘤细胞Bcl-2、Bax蛋白、Ki-67抗原表达检测采用免疫组化SP法,RT-PCR检测移植瘤Bcl-2、Bax mRNA表达。结果各治疗组经藤梨根乙酸乙酯提取物治疗后移植瘤生长缓慢,治疗结束时治疗组移植瘤质量及瘤体积明显低于对照组（P均〈0.01）,高、低剂量组的瘤质量抑制率分别为69.00%和45.09%。治疗组移植瘤细胞透射电镜下均可见不同阶段典型的凋亡细胞形态学变化。各治疗组移植瘤组织凋亡指数明显高于对照组,而增殖指数明显减低,Bcl-2 mR-NA及蛋白表达较对照组亦明显减少,Bax蛋白及mRNA表达较对照组明显增加,高剂量组尤其明显（P均〈0.01）。结论藤梨根乙酸乙酯提取物对肺癌A549细胞裸鼠移植瘤生长有抑制作用,其机制与抑制移植瘤细胞的增殖活性和诱导癌细胞凋亡有关,而降低Bcl-2基因表达、上调Bax基因表达可能是其诱导细胞凋亡机制之一。     

吉非替尼在H3255突变细胞株凋亡中的作用及对BIM表达的影响

目的探讨吉非替尼在肺癌突变细胞株凋亡中的作用及可能机制。方法将H3255肺腺癌细胞株培养至对数生长期,将其随机分为5组,吉非替尼组加入1μmol/L吉非替尼培养48 h;DMSO对照组仅加入0.1%DMSO培养48 h;转染组以促凋亡蛋白(BIM)重组腺病毒转染,阴性对照组以不带BIM的空载体转染,空白对照组不转染,继续培养48 h。采用Annexin PI单染法检测各组细胞凋亡率;Western blot法检测各组BIM蛋白表达。结果吉非替尼组细胞凋亡率及BIM蛋白表达明显高于DMSO对照组(P均<0.01),与阴性对照组、空白对照组比较,转染组细胞凋亡率及BIM蛋白表达显著增高(P均<0.01),吉非替尼组与转染组细胞凋亡率无明显差异。结论吉非替尼对存在EGFR突变的H3255肺腺癌细胞株有明显促凋亡作用,且促凋亡作用与BIM重组腺病毒转染效果相当,其机制可能与增强BIM表达有关。     

双靶点阻滞对肺腺癌细胞的协同抑制作用及其可能机制

目的探讨联合阻断表皮生长因子受体(EGFR)和环氧合酶-2(COX-2)对肺腺癌A549细胞株的协同抑制作用及其可能机制。方法采用不同药物干预肺癌A549细胞株,分为4组:正常对照组、单药吉非替尼组、单药塞来昔布组、联合用药组。药物干预细胞48 h后台盼蓝(trypan blue)染色法检测药物对细胞生长的影响;以Hoechst33258染色法和流式细胞术观察用药前后细胞凋亡和细胞周期的变化。采用Western blot检测EGFR和COX-2蛋白的表达情况。结果随着时间和剂量增加,单药吉非替尼与塞来昔布对A549细胞的抑制作用增强,加药48 h,联合用药组抑制率明显高于单药组(P0.01)。联合用药组细胞凋亡率明显高于单独用药组(32.40%vs7.12%和8.43%;P0.01)。联合用药组S期细胞比例为(3.2±0.9)%,较单药吉非替尼组[(37.4±1.6)%]和单药塞来昔布组[(21.0±3.1)%]明显减少(P0.01);联合用药组G0/G1期细胞比例为(87.2±6.4)%,较单药吉非替尼组[(61.4±5.2)%]和单药塞来昔布组[(51.8±4.7)%]明显增加(P0.01)。与单独用药组比较,联合用药组EGFR和COX-2蛋白的表达明显减弱(P0.05)。结论联合用药通过EGFR和COX-2双靶点阻滞发挥作用,有望为肺癌的化学预防和治疗提供新的策略。     

苯丁酸钠联合吉非替尼对NB4细胞生物学活性的影响

目的探讨联合应用苯丁酸钠(SPB)与吉非替尼对NB4细胞的抑制效果。方法将NB4细胞随机分成4组,即对照组,SPB组、吉非替尼组、和SPB组 吉非替尼组,细胞生长7d后应用MTT法检测药物对细胞的抑制率,并应用流式细胞仪检测细胞的凋亡情况,应用Westernblot的方法检测p21WAF1、CDK4、野生型p53蛋白的表达,并记录细胞的生长曲线。结果联合用药组肿瘤细胞受到明显抑制,凋亡率增加,p53及p21WAF1表达增加,CDK表达下降。与对照组,SPB组、吉非替尼组相比,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论联合用药效果要比单纯用药效果明显,可以使肿瘤细胞受到明显抑制,凋亡率增加,其机制是通过p53依赖的p21WAF1的激活进而抑制周期素-周期素依赖激酶(cyclinD1-CDK4)复合物,从而阻滞了肿瘤细胞的增殖周期进行的。     

~(125)Ⅰ粒子植入联合内皮抑素对A549肺腺癌裸鼠移植瘤生长抑制作用

目的研究放射性125I粒子植入联合重组人血管内皮抑素(Endostatin,ES)对A549肺腺癌移植瘤生长的抑制作用。方法建立移植瘤模型,24只裸鼠随机分成治疗组:单纯粒子内照射组,单纯内皮抑素组,内照射+内皮抑素联合组和空白对照组。治疗结束,免疫组化检测微血管内皮CD31及血管内皮生长因子(VEGF)的表达,蛋白免疫印迹方法测定VEGF的表达,TUNEL法检测肿瘤细胞凋亡。结果治疗15天后,内皮抑素组、125Ⅰ粒子组及联合治疗组瘤体积抑制率依次为69.65%、92.64%、116.4%;联合治疗组MVD较粒子组下降明显(P0.05);联合治疗组的细胞凋亡明显增多;内皮抑素对VEGF表达的影响无显著差异(P0.05)。结论 125Ⅰ粒子植入近距离放疗联合内皮抑素能较早抑制A549移植瘤的生长,通过减少放射治疗后肿瘤血管的再生及增加细胞的凋亡起到抑瘤作用。     

阿帕替尼联合放疗对CNE-2鼻咽癌裸鼠的实验研究

目的探讨阿帕替尼联合放疗对CNE-2鼻咽癌裸鼠移植瘤的作用及可能机制。方法建立CNE-2裸鼠移植瘤模型并随机分为四组:空白对照组、单阿帕替尼组、单放疗组和阿帕替尼联合放疗组,每组8只,观察各组肿瘤体积变化,并计算抑瘤率和联合效应Q值,PET/CT扫描检测T/M值,免疫组化检测CD31的表达。结果阿帕替尼联合放疗组抑瘤率明显高于其他组,差异有统计学意义(P0.05);联合效应Q值为1.156,提示阿帕替尼与放疗有协同效应;阿帕替尼联合放疗组T/M值、CD31表达最低,差异均有统计学意义(P0.05)。结论阿帕替尼联合放疗对鼻咽癌裸鼠移植瘤具有协同抗肿瘤效应。     

三氧化二砷联合维生素C对耐药性肺腺癌裸鼠移植瘤Caspase-3、Survivin活性的影响

目的 探索三氧化二砷( AS2O3)联合维生素C( Vit C)对人耐药性肺腺癌裸鼠移植瘤抑制作用及其可能机制.方法 建立裸鼠人耐药性肺腺癌移植瘤模型,随机分为对照组,VitC组(250 mg/kg),1.5 mg/kg AS2O3,3 mg/kg AS2O3,AS2O3+ Vit C组(AS2O3 1.5 mg/kg+ Vit C250 mg/ks),腹腔注射药物2 w并观察记录各组裸鼠移植瘤的生长情况及肿瘤体积和裸鼠体重的变化,计算肿瘤生长抑制率.2w后,取瘤组织进行免疫组织化学染色检测Caspase-3、Survivin蛋白的阳性率.用逆转录聚合酶链反应(RT- PCR)及Western印迹检测移植瘤内Caspase-3、Survivin的表达情况.结果 与对照组相比,AS2 O3各组、AS2O3+ Vit C组治疗后肿瘤体积减少,瘤质量减轻,差异均有显著性(P＜0.01);与AS2 O3单独用药组比较,联合用药组肿瘤体积,瘤质量明显减少(P＜0.01),抑瘤率明显增高;而Vit C组治疗后肿瘤体积及瘤质量没有明显减少.免疫组化显示Caspase-3蛋白阳性率增加,Survivin蛋白阳性率减低.RT-PCR及Western印迹结果显示:联合组与AS2O3组、Vit C组比较Survivin表达强度显著减小,Caspase-3表达强度显著增强.结论 AS2O3+ Vit C联合用药比AS2O3单独应用抑制耐顺铂肺癌移植瘤生长的作用更强,二者具有协同抗癌作用,其机制可能与下调Survivin及上调Caspase-3的表达有关.两者联用有望成为低毒高效的化疗组合.     

吉非替尼对肺腺癌细胞增殖和表皮生长因子受体表达的影响

目的 探讨表皮生长因子受体(EGFR)抑制剂吉非替尼对肺腺癌A549细胞株增殖和EGFR表达的影响.方法 不同浓度吉非替尼干预肺癌A549细胞24、48、72 h后,倒置相差显微镜观察药物干预后细胞形态学变化;四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法测定细胞抑制率;钙依赖性磷脂结合蛋白(AnnexinⅤ)/碘化丙啶(PI)法和HoechsT_33258染色法检测细胞凋亡;流式细胞仪检测药物作用周期;免疫荧光检测EGFR蛋白表达情况;实时荧光定量PCR检测EGFR mRNA的表达情况.结果 各干预组细胞出现空泡和颗粒,细胞碎片增多,且随吉非替尼剂量增加和干预时间的延长日益明显.吉非替尼明显抑制了A549细胞的生长,呈时间、剂量依赖性.吉非替尼组细胞凋亡率明显高于正常对照组(P<0.01),S期细胞比例明显减少(P<0.01),G0/G1期细胞比例明显增加(P<0.01),EGFR mRNA和蛋白表达明显减弱(P<0.01).结论 吉非替尼显著抑制A549细胞生长,可能机制是促进凋亡、增强G0~G1期阻滞和进一步下调活化的EGFR mRNA和蛋白的表达.     

肺抑瘤膏对EGFR野生型Lewis肺癌小鼠肿瘤生长及VEGF表达的影响

目的建立Lewis肺腺癌小鼠移植瘤模型,取移植瘤进行表皮生长因子受体(EGFR)基因测序,观察肺抑瘤膏对移植瘤的干预作用。方法使用C57BL/6小鼠,接种Lewis肺腺癌细胞,造模成功后,随机分两组,对照组予生理盐水,干预组予肺抑瘤膏,观察瘤体体积、瘤重,并进行血管内皮生长因子(VEGF)检测及EGFR基因测序。结果两组移植瘤体积、瘤重、肿瘤抑制率、移植瘤生长指数、VEGF表达差异均有统计学意义(均P0. 05)。EGFR基因测序示非突变型。结论肺抑瘤膏能够明显抑制EGFR非基因突变型肺腺癌移植瘤的生长,且可能通过抑制VEGF表达而起到治疗作用。     

HBV X基因转染对HepG2肝癌细胞凋亡的影响及其机制

目的:研究HBV X基因转染对HepG2肝癌细胞凋亡及凋亡相关因子表达的影响.方法:用脂质体转染法将HBx真核表达载体pcDNA3/HBx瞬时转入HepG2细胞,以未转染的HepG2细胞及转染空载体pcDNA3的细胞为对照.RT-PCR法检测HBx基因的表达;MTT法检测各组细胞的增殖活性;TUNEL法检测各组的凋亡情况.β-actin为内参,半定量RT-PCR法检测凋亡相关基因Bax、Bcl-xL、c-myc的表达量变化.结果:pcDNA3-X转染HepG2细胞后,RT-PCR扩增出HBV X片段,空质粒组及正常对照组均未扩增出相应片段.HepG2细胞转染HBx基因后,相对于对照组细胞增殖能力明显下降,凋亡增多,差异有显著性意义(P＜0.01);转染HBx的细胞Bax、Bcl-xL、c-myc mRNA相对表达量较转染空质粒组和未转染质粒组明显增高,差异有显著性意义(P＜0.05).结论:成功将HBx基因转染入HepG2细胞,并在细胞中表达,转染HBx基因可同时上调Bax、Bcl-xL、c-myc mRNA表达,促进HepG2细胞凋亡,抑制增殖.     

吲哚美辛与埃罗替尼对胰腺癌细胞生长的协同抑制作用

背景：目前胰腺癌药物化疗疗效不佳。既往研究提示环氧合酶（COX）-2和表皮生长因子受体（EGFR）信号途径均参与了胰腺癌的发生、发展，COX-2抑制剂和EGFR抑制剂联用对胰腺癌的生长可能具有协同抑制作用。目的：观察COX-2抑制剂吲哚美辛与EGFR酪氨酸激酶抑制剂埃罗替尼对胰腺癌细胞生长的协同抑制作用。方法：以甲基噻唑基四唑（MTT）比色法检测胰腺癌细胞株BxPC-3的增殖情况，以流式细胞分析和原位末端标记（TUNEL）法观察用药前后细胞凋亡和细胞周期的变化，以逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）观察用药前后细胞中COX-2、EGFR以及凋亡相关基因Bcl-2、Bax、Bcl-xL、Bak mRNA表达的变化。结果：BxPC-3细胞中可观察到COX-2和EGFRmRNA表达．吲哚美辛和埃罗替尼单用均可下调COX-2和EGFRmRNA的表达，两者联用时下调作用更明显。吲哚美辛和埃罗替尼单用均可抑制BxPC-3细胞增殖，促进细胞凋亡，诱导细胞周期阻滞于G0／G1期，减少抗凋亡基因Bcl-2、Bcl-xL的表达，轻微上调促凋亡基因Bax的表达，两者联用对细胞生长的抑制作用增强。结论：吲哚美辛和埃罗替尼均可抑制COX-2和EGFR的表达，下调Bcl-2／Bax比值，两者联用对胰腺癌细胞生长具有协同抑制作用。     

RNA干扰沉默survivin基因对结直肠癌裸鼠移植瘤的影响

目的利用RNA干扰(RNAi)技术抑制survivin基因的体内表达,探讨survivin沉默对结直肠癌裸鼠移植瘤生长的抑制作用。方法将survivin-siRNA重组腺病毒载体pBAsi-survivin导入裸鼠皮下的移植瘤内,观察不同时间点对肿瘤生长的抑制作用以及肿瘤的抑制率。同时用RT-PCR方法检测干预组(成功转染质粒组),对照组(空载体对照组)和空白对照组(生理盐水)中survivin mRNA表达情况。Western印迹检测survivin蛋白的表达。结果与对照组相比,survivin-siRNA重组载体导入裸鼠皮下移植瘤后,肿瘤体积增长缓慢,随着时间的延长,肿瘤生长抑制作用明显,survivin mRNA表达明显降低,survivin蛋白表达下降。结论 survivin-siRNA重组载体能显著抑制结直肠癌裸鼠移植瘤的增殖,Survivin mRNA和蛋白表达明显降低,不同时间点肿瘤抑制率不同,且随时间呈正相关。     

阿魏菇多糖对小鼠U14宫颈癌抑制作用的研究

目的观察阿魏菇多糖（PFP）对小鼠宫颈癌细胞株U14移植瘤的抑制作用及其与顺铂（DDP）联合用药的效果,并初步探讨PEP的抗肿瘤作用机制。方法建立昆明小鼠U14宫颈癌模型,并随机分为模型对照组、DDP组、PFP组、PFP＋DDP组,分别给予不同药物干预10d后检测各组小鼠的瘤质量和抑瘤率,采用免疫组化法检测各组肿瘤组织中Bcl-2和Bax蛋白的表达水平,TUNEL法检测各组瘤组织细胞凋亡指数（AI）。结果模型对照组小鼠体内瘤质量明显高于各干预组（P〈0．01）,PFP＋DDP组小鼠体内瘤质量低于DDP组;各实验组瘤组织细胞AI均高于模型对照组,且PFP＋DDP组的Aj最高。PFP、DDP、PFP＋DDP均可降低宫颈癌U14组织内Bel-2蛋白的表达水平,并升高Bax蛋白表达水平,且PFP＋DDP组的作用优于单药组。结论PEP对小鼠宫颈癌U14细胞株移植瘤具有明显抑制作用,且与DDP联合用药效果更显著,其机制可能与下调Bcl-2蛋白及上调Bax蛋白的表达有关。     

厄洛替尼联合RNAi对人肺腺癌A549细胞凋亡及survivin表达的影响

目的探讨厄洛替尼联合survivin siRNA转染对人肺腺癌A549细胞凋亡的影响及对survivin基因的抑制作用。方法选用survivin siRNA转染和厄洛替尼二者单独或联合作用于人肺腺癌A549细胞,作用48 h后采用流式细胞技术检测其对各组细胞凋亡的影响,Western blot法检测其对survivin蛋白表达的影响。结果 survivinsiRNA转染和厄洛替尼二者单独或联合作用于人肺腺癌A549细胞48 h后细胞凋亡均明显增加（P〈0.05）,并且均能明显降低细胞内survivin蛋白的表达水平,联合应用较单独应用促进细胞凋亡作用更显著（P〈0.05）,对sur-vivin蛋白表达的抑制作用更强（P〈0.05）。结论应用siRNA沉默survivin表达可以提高肺腺癌细胞对厄洛替尼的敏感性。