强直性脊柱炎患者附着端炎与外周血淋巴细胞趋化因子受体5及血浆白细胞介素1β的相关性

目的探讨强直性脊柱炎(ankylosing spondylitis,AS)患者附着端炎发生的可能机制。方法采用流式细胞仪检测36例AS患者外周血淋巴细胞趋化因子受体5(chemokine receptor 5,CCR5)的表达,同时用酶联免疫吸附法检测其血浆白细胞介素1β(interleukin-1β,IL-1β)的表达,对比附着端炎指数MASES﹥0患者与MASES=0患者的CCR5及IL-1β表达的差异。并对附着端炎指数与趋化因子受体CCR5及IL-1β表达的相关性进行分析。结果(1)MASES﹥0组C反应蛋白(C-reactive protein,CRP)为(42.54±42.59)mg/L,明显高于MASES=0组的(18.52±18.43)mg/L(P=0.026);MASES﹥0组CCR5为(24.70±9.39)%,高于MASES=0组的(16.57±13.32)%,但两组比较差异无显著性意义(P=0.119);MASES﹥0组白细胞介素1β(interleukin 1β,IL-1β)为(2.98±1.74)pg/ml,明显高于MASES=0组的(1.22±0.73)pg/ml(P0.05)。(2)附着端炎指数MASES与CCR5和IL-1β成正相关(分别r=0.684,P0.001;r=0.448,P0.05)。结论CCR5、IL-1β与AS附着端炎发生的分子免疫学机制有关。     

强直性脊柱炎患者外周血T细胞亚群的变化及意义

目的探讨强直性脊柱炎（AS）患者外周血中T细胞亚群的变化及其意义。方法采用流式细胞仪（FCM）检测外周血淋巴细胞表面CD3、CD4、CD8及其胞质内细胞因子IFN-γ和IL-4的表达。结果与正常对照组相比,As患者外周血Th细胞（CD;CD4＋）百分率无显著差异,Tc细胞（CD;CD;）明显升高（P〈0．05）;Th1细胞（CD3^＋CD4^＋IFN-γ^＋）百分率明显升高,Th2细胞（CD3^＋CD4^＋IL4^＋）无显著性差异;Te1细胞（CD3^＋CD8^＋IFN-γ^＋）百分率明显降低,T02细胞（CD3^＋CD8^＋IL4^＋）无显著性差异。结论AS患者外周血T细胞Th1／Th2、Tcl／Tc2亚群比例失衡,呈Th1、Tc2优势型。     

1型糖尿病患者及其一级亲属趋化因子受体CCR2和CCR5的基因多态性研究

目的　探讨趋化因子受体CCR2、CCR5基因多态性与 1型糖尿病 (T1DM)及其一级亲属之间的关系 ,并与T2DM及非DM对照进行比较。　方法　利用PCR方法检测 48例T1DM及其 5 7名一级亲属CCR5的基因多态性 ,利用BsaBI限制性内切酶的PCR RFLP方法检测T1DM及其一级亲属的CCR2基因多态性。　结果　T1DM组、T1DM一级亲属组、T2DM组分别与非DM对照组比较 ,CCR5Δ32突变的等位基因频率和基因型频率差异无显著意义。T1DM组CCR2 6 4I突变基因型及等位基因频率均高于非DM对照组 (P <0 .0 1) ;T2DM组CCR2 6 4I突变基因型及等位基因频率均低于T1DM组 (P <0 .0 1)。　结论　CCR5Δ32突变与T1DM无显著相关性。CCR2 6 4I突变与T1DM发病显著相关 ,CCR2基因可能是T1DM一个新的候选基因。     

系统性红斑狼疮患者外周血单个核细胞趋化因子受体4、5 mRNA的表达

目的探讨趋化因子受体CCR4及CCR5在系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血单个核细胞(PBMC)中的表达,与疾病的相关性.方法收集93例确诊的SLE患者和30名正常对照,通过外周血单个核细胞(PBMC),提取RNA.应用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测研究对象CCR4、CCR5 mRNA表达水平.结果趋化因子受体CCR4 mRNA在SLE患者PBMC中的表达水平,患者组(1.57±0.70)与正常对照组(0.19±0.18)比较,两者差异有显著性(t=3.012,P=0.003);活动期(2.03±1.04)非活动期(0.26±0.19)及对照组比较,两者差异有显著性;非活动期与对照组比较,差异无显著性(P＞0.05).趋化因子受体CCR5 mRNA在PBMC中表达水平,患者组(0.56±0.44)与对照组(0.37±0.14)比较,两者差异有显著性(t=3.262,P=0.002);活动期(0.53±0.51)与非活动期(0.59±0.34)比较,差异无显著性(P＞0.05);活动期与对照组比较(t=2.039,P=0.045)及非活动期与对照组比较(t=3.461,P=0.001),两者差异有显著性.SLE患者组CCR4及CCR5 mRNA水平与疾病活动度评分关系CCR4 mRNA水平与SLEDAI(r=0.376,t=3.851,P=0.000)呈正相关.CCR5 mRNA水平与疾病的活动性(SLEDAI)(r=0.062,t=-0,589,P=0.557)不相关.结论CCR4 mRNA表达水平在患者组比对照组表达增高,活动期比对照组表达水平增高,与疾病的活动性(SLEDAI)呈正相关.CCR5 mRNA表达在患者组比对照组增高,差异有显著性,与SLEDAI不相关.     

流式细胞术分析外周血辅助性T17细胞在强直性脊柱炎患者外周血的表达及其意义

目的 检测强直性脊柱炎(AS)患者外周血辅助性T17(Th17)细胞的表达,探讨其在AS发病机制中的作用.方法 用流式细胞术检测20例AS患者和15名健康对照者外周血Th17[白细胞介素(IL)-17]、Th1[干扰素(IFN)-γ]、Th2(IL-4)细胞及人类白细胞抗原(HLA)-B27,同时检测红细胞沉降率(ESR)、C反应蛋白(CRp)等,并分析Th17细胞与Th1、Th2、HLA-B27及AS活动性指标的相关性.采用t检验和Spearman相关分析.结果 AS患者外周血Th17细胞[(2.6±0.8)%]高于对照组[(1.1±0.4)%](P＜0.01);Th1(IFN-γ)细胞[(3.9±0.8)%]低于对照组[(5.1±1.3)%](P＜0.05);Th2(IL-4)细胞[(4.1±1.6)%]比对照组[(3.1±1.4)%]升高,但差异无统计学意义(P＞0.05);Th17细胞与HLA-B27百分数及与HLA-B27平均荧光强度、ESR、CRP无相关性(P＞0.05);但是,Th17细胞表达水平有随HLA-B27百分数及HLA-B27平均荧光强度增加升高的趋势.结论 AS患者外周血Th1细胞减少,而Th17细胞增加,AS患者体内存在Th细胞的失衡,Th17比例变化是反映AS整个复杂免疫反应异常的一个重要环节.

Abstract：

Objective To detect the expression of T helper 17 (Th17) cells in the peripheral blood of patient with ankylosing spondylitis (AS),and discuss its role in thc pathogenesis of AS.Methods Twenty AS patients and fifteen healthy controls were enrolled in the study.Th17 (IL-17),Th1 (IFN-γ),Th2 (IL-4)cells and HLA-B27 of their peripheral blood were analyzed by flow cytometry,at the same time,the levels of ESR and CRP were also measured in order to analyze thc relation of Th17 and HLA-B27,ESR as well as the CRP level.The statistical analysis was carried out with single-sample t-test and Speraman's correlation test.Results The level of Th17 cells was significantly higher in the perpipheral blood of AS patients[(2.6±0.8 )%] than those in healthy controls[ (1.1±0.4)% ] (P＜0.01).The level of Th 1 cells was significantly lower in the peripheral blood of AS patients[(3.9±0.8)%] than those in healthy controls[(5.1±1.3)%] (P＜0.01)and the level of Th2 cells was not different in the peripheral blood of AS patients[(4.1±1.6)%] when compared to healthy controls[ (3.1±1.4)% ] (P＞0.05).Th 17 cells was not significantly correlated with the percentage and mean fluorescent intensity of HLA-B27,ESR,CRP(P＞0.05); but there was a tendency that increased expression level of Th17 cells was associated with elevated percentage and mean fluorescent intensity of HLA-B27.Conclusion The level of Th1 cells is decreased,but Th17 is increased in the peripheral blood of AS patients.Th cells are imbalance in AS,patients.The change of Th17 cells may be an important part of the pathogenesis of AS.     

趋化因子受体CCR7与类风湿关节炎

根据基因及蛋白质结构，趋化因子分为4型(CXC，CC．CX3C及C型),趋化因子受体也分为4型，它们表达于不同的细胞，在炎症的发生、发展过程中起着重要作用。类风湿关节炎(rheumatoid arthritis，RA)是一种慢性自身免疫性炎症，炎症关节局部有大量淋巴细胞和树突状细胞(DC)浸润。研究表明多种趋化因子及其受体参与此过程。CCR7是一种表达于天然和活化T细胞上的G蛋白耦联受体．     

应用趋化因子受体标记对系统性红斑狼疮患者Th细胸亚群改变及其意义的初步研究

目的探讨系统性红斑狼疮(SLE)活动期患者Th红胞亚群平衡的改变及其意义.方法以趋化因子受体CCR5和CCR3为Th红胞亚群表面标记,利用三色流式细胞分析法对SLE患者外周血单个核细胞(PBMCs)中CD4+T细胞亚群平衡变化进行分析.结果活动期SLE患者外周血CC4+CCR5+CCR3-细胞百分比与正常人比较差异无显著性(P>0.05).CD4+CCR5-CCR3+和(或)CD4+CCR5+CCR3-细胞百分比异常升高者出现组织脏器损伤的概率较高.肾上腺糖皮质激素治疗可使异常升高的CD4+CCR5-CCR3+和(或)CD4+CCR5+CCR3-细胞百分比有所降低.结论多数活动期SLE患者体内存在Th2细胞优势,Th2和(或)Th1细胞的改变与组织脏器损伤有一定的相关性.     

趋化因子受体CCR7在结直肠癌中的异常表达

目的: 检测趋化因子受体CCR7在结直肠癌中的表达状态,探讨CCR7在结直肠癌发病中的作用.方法:采用免疫组化检测标本中CCR7蛋白表达,逆转录PCR(RT-PCR)检测CCR7mRNA表达,Western blotting检测结肠癌细胞CCR7蛋白表达.结果:45例结直肠癌组织标本检出CCR7 mRNA表达,而其相应的癌旁组织中12例检出(x2=34.44,P<0.01).34例结直肠癌组织标本检出CCR7蛋白表达,其相应的癌旁组织中,则有6例检出(x2=28.51,P<0.01).结肠癌细胞SW-480中CCR7mRNA和蛋白表达显著,而在HT-29中表达较弱.结论:CCR7参与结直肠癌的发病过程,其表达与结直肠癌转移有关.     

强直性脊柱炎患者外周血Th1／Th2淋巴细胞类型

目的 通过检测强直性脊柱炎患者外周血中ＣＤ４＾＋和ＣＤ８＾＋Ｔ淋巴细胞分泌细胞因子的情况,探讨Ｔ淋巴细胞亚群与强直性脊柱炎发病的关系。方法 建立三色流式细胞分析法对强直性脊柱炎患者和健康志愿者外周血中淋巴细胞的胞内细胞因子（ＩＦＮγ、ＩＬ－４）和表面抗原（ＣＤ４、ＣＤ８）进行分析。同时采用夹心酶联免疫吸附法测定血清中ＩＦＮγ和ＩＬ－４的水平。结果 无论是ＣＤ４＾＋还是ＣＤ８＾＋ＡＴ淋巴细胞,分泌Ｉ     

强直性脊柱炎患者外周血Th1/Th2淋巴细胞类型

目的　通过检测强直性脊柱炎患者外周血中CD4+ 和CD8+ T淋巴细胞分泌细胞因子的情况 ,探讨T淋巴细胞亚群与强直性脊柱炎发病的关系。方法　建立三色流式细胞分析法对强直性脊柱炎患者和健康志愿者外周血中淋巴细胞的胞内细胞因子 (IFNγ、IL 4)和表面抗原 (CD4、CD8)进行分析。同时采用夹心酶联免疫吸附法测定血清中IFNγ和IL 4的水平。结果　无论是CD4+ 还是CD8+ T淋巴细胞 ,分泌IFNγ的细胞群要比分泌IL 4的细胞群多 ;IL 4主要由Th2细胞产生 ,而Th1分泌的IFNγ要比Th2多 ;患者的Th1或Th2型细胞数与炎症活动指标呈负相关。与对照组相比 ,强直性脊柱炎患者外周血中Th1和Th2细胞在受刺激后并未增多。患者外周血中IFNγ水平明显升高 ,而IL 4水平无显著变化 ;IFNγ水平与炎症活动指标无明显相关性。结论　在强直性脊柱炎患者的外周血淋巴细胞中 ,以Th1型细胞为主。但Th1细胞在受刺激后分泌细胞因子的能力比Th2细胞低。     

趋化因子受体CCR5、CCR3在1型糖尿病患者中的表达

目的　研究Th1和Th2 细胞表面特征性的趋化因子受体CCR5、CCR3在 1型糖尿病发病机制中的作用。方法　对 15例新诊断的 1型糖尿病患者、10例 2型糖尿病患者以及 10例非糖尿病患者分离外周血单个核细胞 (PBMC)在体外培养 ,用流式细胞仪检测CD 4CCR5 及CD 4CCR3 淋巴细胞 ,并用酶联免疫吸附技术检测细胞培养上清中细胞因子IL 4、IFN γ的水平。结果　 1型糖尿病患者外周血中CD 4CCR5 淋巴细胞数显著高于 2型糖尿病患者和对照组 ,CD 4CCR3 显著低于其它两组 (均P <0 .0 5 )。 1型糖尿病患者和 2型糖尿病患者PBMC细胞上清液中的IFN γ水平高于对照组 (均P <0 .0 5 ) ,1型糖尿病患者IL 4水平低于其它两组 (P <0 .0 1)。结论　检测PBMC的CCR5、CCR3表达可以作为反映人类 1型糖尿病免疫活动的标志 ,从而为 1型DM的早期诊断和预防提供线索     

强直性脊柱炎患者外周血CD8+CD28-T细胞的表达及意义

目的 探讨外周血CD8+CD28- T细胞在强直性脊柱炎(AS)发病中的作用.方法 应用流式细胞术检测50例AS患者和21名正常人外周血CD3+CD8+ T细胞表面CD28分子的表达,同时用免疫散射比浊法检测相应血清中的C反应蛋白(CRP).结果 AS患者外周血中的CD8+CD28- T细胞的表达明显高于正常人[(18±6)%对(14±5)%,P=0.020],患者外周血CD3+、CD8+CD28+ T细胞的表达明显低于正常人[(65±9)%对(69±8)%,P=0.039];[(15±5)%对(18±4)%,P=0.038],CD8+ T细胞的表达与正常人相比差异无统计学意义(P＞0.05).结论 AS患者外周血中的CD8+CD28- T细胞的表达增加,可能参与了AS的疾病过程.     

93例传染性非典型肺炎患者外周血T淋巴细胞亚群变化及临床意义

目的　了解传染性非典型肺炎 (世界卫生组织又称严重急性呼吸综合征 ,SARS)患者外周血T淋巴细胞亚群的变化。方法　采用流式细胞仪对 93例临床确诊的SARS患者、5 0例获得性免疫缺陷综合征 (AIDS)患者及 6 4例健康体检者外周血T淋巴细胞亚群进行检测。 93例患者中 ,男4 0例、女 5 3例 ;年龄 17～ 88岁 ,平均 4 4岁 ;重型 35例、普通型 5 8例。结果　健康体检者外周血CD+ 3 、CD+ 4 、CD+ 8分别为 (15 2 7± 4 70 )、(787± 2 5 7)、(6 33± 2 80 )个 / μl;93例急性期SARS患者分别为(72 2± 5 33)、(438± 35 3)、(30 7± 2 17)个 / μl,均有不同程度的下降 (P值均 <0 .0 1) ,重症病例下降尤其明显 ,5例死亡患者外周血CD+ 4 均低于 2 0 0个 / μl;SARS患者恢复期CD+ 3 、CD+ 4 、CD+ 8多数恢复正常。而AIDS患者以CD+ 4 降低为主 ,为 (2 96± 2 98)个 / μl;且CD+ 8升高 ,为 (818± 5 6 6 )个 / μl。 结论SARS患者有明显的细胞免疫损伤。     

强直性脊柱炎患者外周血辅助性T细胞亚群变化及药物干预

强直性脊柱炎(ankylosing spondylitis,AS)是一种慢性进行性自身免疫性疾病,发病早、病程长、致残率高,且好发于青少年。因此AS早期诊断和治疗至关重要。近年来,研究表明AS发病可能与辅助性T细胞(T help cell,Th)亚群有关。Th细胞亚群分泌促炎抑炎细胞因子失衡,机体免疫功能受损,致AS发病。当前一些针对Th细胞亚群的药物运用于临床,虽取得一定疗效,但未取得预期理想效果,因此进一步深化Th细胞亚群的研究将为揭示AS发病机制并制定相应的免疫治疗策略提供新的理论依据和思路。     

新生儿单个核细胞表达CCR5受体及C-C趋化因子能力的观察

研究影响新生儿对HIV-1感染的免疫特点对减少儿童人类免疫缺陷病毒／艾滋病(HIV／AIDS)，阻断HIV-1母婴传播有着重要意义。对于大多数亚型的HIV-1，在病程早期主要利用CCR5趋化因子受体入侵靶细胞，而单个核细胞(包括淋巴细胞和单核细胞)分泌的3种C-C趋化因子：受激活调节的正常T细胞表达和分泌因子(RAN-TES)、巨噬细胞炎性蛋白1α(MIP-1α)和MIP-1β，     

细胞趋化因子受体CXCR3及CCR5在乙型肝炎患者肝组织中的表达

通过测定急性和慢性乙型肝炎患者肝内细胞趋化因子受体(CCR5)和CXCR3水平,结合患者血中乙型肝炎病毒(HBV)含量,探讨趋化因子受体在乙型肝炎发病及其转归中的作用。1.材料与方法:(1)试剂:链霉素抗生物素蛋白过氧化酶免疫染色超敏试剂盒,兔抗CCR5和CXCR3单克隆抗体,抗体效价1:500.均购自深圳华氏试剂公司,按试剂盒说明书进行操作。(2)病例:大连市第六人民医院2002年1月至2003年     

趋化因子受体CCR4在活动期类风湿关节炎患者外周血CD4+T细胞表达的研究

目的 探讨活动期类风湿关节炎(aRA)患者趋化因子受体CCR4在外周血CD4+T细胞的表达及其意义,并对该表达与血清重要细胞因子水平的相关性进行研究.方法流式细胞计数方法对12例aRA患者和10名健康对照者外周血CD4+T细胞表面CCR4的表达情况进行检测;酶联免疫吸附试验(ELISA)方法检测患者血清肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-10及干扰素(IFN)-γ的水平并记录患者相关临床及实验室资料.分析及评价aRA患者外周血淋巴细胞中CD4+CCR4+T细胞百分数(CD4+CCR4+T%)与TNF-α、IL-10、IFN-γ的血清水平及临床指标的相关性.结果 aRA组外周血CD4+CCR4+T%明显高于健康对照组(P＜0.01).aRA组血清TNF-α(P＜0.01)、IL-10(P＜0.01)及IFN-γ(P＜0.01)水平明显高于健康对照组.在检测的细胞因子中,aRA患者血清IL-10水平与CD4+CCR4+T%呈明显正相关关系(r＝0.66,P＜0.05).在临床指标中,CD4+CCR4+T%与aRA患者Lunsbury关节指数、血沉、C反应蛋白及血小板计数呈明显正相关关系(P＜0.05).结论 CCR4在CD4+T细胞趋化至病变关节过程中可能发挥重要作用;外周血CD4+CCR4+T%与血清IL-10水平密切相关;该百分数可以作为临床评价RA活动性的一个敏感指标.     

趋化因子CCR5、CCR2和SDF1基因多态性与HBV感染相关性初步研究

HBV引起的肝损伤和机体的免疫应答状态有关,由基因决定的免疫应答能力可以影响感染的持续性、临床症状和结局。趋化因子是低分子量的趋化性细胞因子。它募集白细胞到炎症部位,调节T细胞发育和细胞因子产生,如INF-γ。因此,趋化因子在炎症和感染中起重要作用。近年来发现,CCR5-△32、CCR2b-64I和SDFl-3’A趋化因子多态性除了作为HIV-1的协同受体影响HIV-1感染和致病进程外,还与分枝杆菌结核(Mycobacterium     

趋化因子受体在子宫颈癌中的表达及临床意义

目的检测子宫颈癌中趋化因子受体(CCR7)蛋白表达。方法采用免疫组化技术检测79例子宫颈癌中CCR7蛋白表达,并且根据染色阳性细胞比例和染色强度评分。结果 CCR7在子宫颈癌中呈阳性表达,且阳性率为64.6%。CCR7阳性表达与子宫颈癌病理分化程度、临床分期和盆腔淋巴结转移密切相关(P0.05),而与患者病理分型、年龄无关。结论 CCR7可作为检测子宫颈癌恶性程度的可靠指标之一。     

强直性脊柱炎患者外周血Th17细胞比率及其相关细胞因子的表达

目的研究强直性脊柱炎（AS）不同疾病状态外周血Th17细胞比率及其相关细胞因子表达情况,探讨其与AS炎症活动的关系。方法41例AS患者按Bath强直性脊柱炎活动性分为活动组（n=22）和稳定组（n=19）,14例健康人作为对照。采用流式细胞术检测外周血11h17细胞比率,EMSA法检测血浆中的IL-17、IL-1β、IL-6、IL-23及肿瘤坏死因子-α（TNF-α）蛋白水平。结果活动组外周血Th17细胞比率明显高于稳定组及对照组（P〈0．05或〈0．01）。活动组血浆中IL-17平均浓度以及IL-1β、IL-6、IL-23、TNF-α等表达水平均明显高于稳定组及对照组（P均〈0．01）;IL-17、IL-1β、IL-6、IL-23、TNF-α之间呈显著相关（P〈0．05或〈0．01）。结论Th17及相关细胞因子可能与AS炎症高度活动相关。