神经肽Y Y5受休反义寡核苷酸对肥胖大鼠血清胰岛素与C肽水平及脂肪组织TNFα基因mRNA表达的影响

目的：探讨神经肽YY5(NPY Y5)受体反义基因治疗对肥胖大鼠血清胰岛素与C肽水平及脂肪组织TNFα基因表达的影响，评价该疗法对肥胖大鼠高胰岛素血症的影响。方法：建立高营养饮食诱导的肥胖大鼠模型，侧脑室插管后注射NPYY5受体反义、错义寡核苷酸及生理盐水，称大鼠腹膜后脂肪组织湿重，采用放免法测定血清胰岛素与C肽水平，RT-PCR技术检测脂肪组织中TNFα基因的表达水平。结果：（1）肥胖对照组大鼠的血清胰岛素与C肽水平、腹膜后脂肪组织湿重及脂肪组织TNFα基因mRNA表达水平均显著于正常对照大鼠。NPY Y5受体反义寡核苷酸干预后，肥胖大鼠上述观察指标水平均明显低于肥胖对照组、肥胖盐水组、肥胖错义组，除腹膜后脂肪组织湿重与肥胖错义组差异无显著意义，其余指标与肥胖对照组、肥胖盐水组、肥胖错义组相比差异均有显著意义，肥胖反义组各指标水平均近于正常对照组，其余各观察指标差异均无显著意义。肥胖盐水组、肥胖错义组各指标水平均明显高于正常对照组，除腹膜后脂肪组织湿重与正常对照组相比差异无显著意义，其余指标差异均有显著意义；（2）肥胖大鼠脂肪组织TNFα基因mRNA表达水平与血清胰岛素水平、C肽水平存在低中度正相关关系。结论：侧脑室注射NPY Y5受体反义寡核苷酸可显著减少营养性肥胖大鼠的腹膜后脂肪，降低肥胖大鼠脂肪组织TNFα基因表达及血清胰岛素与C肽水平，改善高胰岛素血症。     

神经肽Y Y5受体反义寡核苷酸对肥胖大鼠血清胰岛素与C肽水平及脂肪组织TNFα基因mRNA表达的影响

目的探讨神经肽Y Y5(NPY Y5)受体反义基因治疗对肥胖大鼠血清胰岛素与C肽水平及脂肪组织TNFα基因表达的影响,评价该疗法对肥胖大鼠高胰岛素血症的影响.方法建立高营养饮食诱导的肥胖大鼠模型,侧脑室插管后注射NPY Y5受体反义、错义寡核苷酸及生理盐水,称大鼠腹膜后脂肪组织湿重,采用放免法测定血清胰岛素与C肽水平,RT-PCR技术检测脂肪组织中TNFα基因的表达水平.结果 (1)肥胖对照组大鼠的血清胰岛素与C肽水平、腹膜后脂肪组织湿重及脂肪组织TNFα基因mRNA表达水平均显著高于正常对照大鼠.NPY Y5受体反义寡核苷酸干预后,肥胖大鼠上述观察指标水平均明显低于肥胖对照组、肥胖盐水组、肥胖错义组,除腹膜后脂肪组织湿重与肥胖错义组差异无显著意义,其余指标与肥胖对照组、肥胖盐水组、肥胖错义组相比差异均有显著意义,肥胖反义组各指标水平均近于正常对照组.而肥胖对照组、肥胖盐水组、肥胖错义组之间,除肥胖错义组脂肪组织湿重低于肥胖对照组外,其余各观察指标差异均无显著意义.肥胖盐水组、肥胖错义组各指标水平均明显高于正常对照组,除腹膜后脂肪组织湿重与正常对照组相比差异无显著意义,其余指标差异均有显著意义;(2)肥胖大鼠脂肪组织TNFα基因mRNA表达水平与血清胰岛素水平、C肽水平存在低中度正相关关系.结论侧脑室注射NPY Y5受体反义寡核苷酸可显著减少营养性肥胖大鼠的腹膜后脂肪,降低肥胖大鼠脂肪组织TNFα基因表达及血清胰岛素与C肽水平,改善高胰岛素血症.     

神经肽Y Y5受体反义基因对肥胖大鼠减肥、降脂作用的研究

目的探讨神经肽YY5(NPYY5)受体反义基因治疗对高营养饮食诱导的肥胖大鼠模型的减肥、降脂作用。方法建立高营养饮食诱导的肥胖大鼠模型,行侧脑室内插管,观察注射NPYY5受体反义、错义寡核苷酸及生理盐水后肥胖大鼠体重、进食量和血脂的变化。结果(1)注射NPYY5受体反义寡核苷酸的肥胖大鼠,体重和进食量减少,与注射前比较差异有显著性[体重(348±32)g降至(303±29)g,共减少(44±14)g,t=4.17、7.89,P＜0.01;进食量(37±7)g降至(24±5)g,共减少(13±5)g,t=5.58、6.15,P＜0.01];错义及生理盐水对照组体重和进食量未见明显下降(P＞0.05)。(2)肥胖未治疗组血清总胆固醇(TC)、甘油三脂(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)均高于正常对照组(P＜0.05);肥胖组经反义寡核苷酸治疗后,TC、TG、LDL均低于未治疗组[TC(1.71±0.27)mmol/L与(2.22±0.36)mmol/L,t=2.68;TG(0.43±0.06)mmol/L与(0.76±0.17)mmol/L,t=4.47;LDL(0.38±0.12)mmol/L与(0.86±0.20)mmol/L,t=4.97;P＜0.05],与正常对照组之间差异无显著性;而错义寡核苷酸及生理盐水治疗后TC、LDL无明显变化;高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)各组差异无显著性。结论侧脑室注射NPYY5受体反义寡核苷酸对营养性肥胖大鼠有明显的抑制进食、减轻体重、降低血脂的效应。     

脂联素受体1基因在大鼠脂肪组织中的表达及其与肥胖易感性的关系

目的 探讨高脂高能量饮食（HFHCD）诱导下肥胖易感（OP）大鼠与肥胖抗性（OR）大鼠腹膜后脂肪组织脂联素受体1（AdipoR1）基因mRNA表达的差异及其与肥胖易感性的关系。方法 雄性SD大鼠18只，以高脂高能量鼠料饲养2周后，按体质量增值大小分组，增重最多的6只为OP组，增重最少的6只为OR组。OP、OR大鼠继续饲以4周后，观察各大鼠体质量变化和腹膜后脂肪组织湿重，采用RT-PCR技术检测脂肪组织AdipoRl基因mRNA表达水平。结果 1．HFHCD诱导下，OP组大鼠体质量、腹膜后脂肪组织湿重均明显高于OR组（t＇=4．48P〈0．01）；2．OP组大鼠腹膜后脂肪组织中AdipoR1 mRNA表达水平低于OR组，但两者差异无统计学意义（t=2．23P〉0．05）；3．大鼠腹膜后脂肪组织湿重与AdipoR1 mRNA的表达水平存在显著负相关（r=0．735P〈0．05）。结论 AdipoR1表达于脂肪组织。相同饮食条件下，个体发生肥胖的易感性是影响AdipoR1水平的重要因素。     

双侧海马注射神经肽Y 3-36对大鼠学习记忆的影响

目的　探讨神经肽YY2 (NPYY2 )受体调节大鼠学习记忆的可能机制。方法　建立学习记忆障碍模型 ,双侧海马插管注射Y2特异性激动剂NPY 3 36 ,观察其对大鼠学习记忆的影响 ,并利用免疫组化方法 ,检测与学习记忆密切相关的即刻早期基因c -fos表达情况。结果　 1.注射NPY3 36组大鼠训练期的错误次数较对照组无显著性差别 (P >0 .0 5 ) ,而记忆测试期的潜伏期较对照组显著延长 ,错误次数显著减少 (P <0 .0 5 )。 2 .注射NPY 3 36组大鼠双侧背海马各区c -fos阳性细胞数与生理盐水组比较明显增加。结论　NPY通过Y2受体能促进大鼠的记忆能力 ,并可能通过促进c -fos基因上调参与大鼠的记忆形成过程     

神经肽Y与学习记忆的研究进展

神经肽Y（NPY）是中枢神经系统中含量最丰富的多肽之一，近年的研究表明，NPY能够明显促进记忆的巩固和再再。NPY主要通过其受体发挥生物学作用，在已知的6型受体中，以Y2受体在学习记忆的关键部位海马中表达最为丰富，行为学研究证实其可能为介导NPY促进学习记忆的重要受体，目前该受体调节学习记忆的具体机制尚不清楚，有关研究认为，Y2受体可能是通过长时程传递增强机制实现其对学习与记忆的调节作用。     

高脂饮食诱导下肥胖易感大鼠与肥胖抗性大鼠间部分生理学指标差异的研究

目的：探讨高脂饮食诱导下肥胖易感（OP）大鼠与肥胖抗性（OR）大鼠在体重、食量、Lee′s指数、脂肪湿重、血脂及脂肪组织蛋白脂酶（LPL）基因表达等方面的生理学差异。方法：48只大鼠，以高脂饲料饲养1周后，按体重增殖从大到小百分排序，取第75百分位以上 OP组，第25百分位以下为OR组，继续高脂饲养4周；观察各大鼠体重变化、摄食量、Lee′s指数、脂肪湿重、血脂等，采用Northern Blot分析脂肪组织中LPL基因的mRNA表达水平。结果：1.OP大鼠的体重增殖、热能摄入、Lee′s指数及腹腔脂肪湿重均显著高于OR大鼠，但血脂水平两组间无差异；2.高脂饲养1周、5周时OP大鼠体重增值分别是OP大鼠的6.54、4.25倍，热能摄入仅为OR大鼠的1.13、1.15倍；3.OP大鼠脂肪组织中LPL基因的mRNA表达水平显著高于OR大鼠。结论：OP与OR大鼠间存在生理学差异，其原因除OP大鼠热能摄入较多因素外，OP大鼠体内较高的能量效能是其肥胖易感性较高的重要因素，而能量效能与脂肪组织LPL基因的表达水平可能存在密切关系。     

P2Y1受体基因在先天性巨结肠中的表达及其意义

目的 探讨嘌呤P2Y1受体与先天性巨结肠(HD)发病的关系.方法 选取郑州大学第三附属医院小儿外科20例HD患儿手术切除结肠的狭窄段和扩张段全层组织.20例HD患儿均根据临床症状、体征、钡灌肠、术中所见及病理检查证实为HD.男13例,女7例;手术年龄为10 d～2岁,平均4个月.常见型13例,长段型5例,短段型2例.另取20例直肠黏膜脱垂切除的正常结肠组织作为对照.采用反转录(RT)-PCR检测P2Y1受体基因在所取标本中的表达.结果 P2Y1受体基因在HD狭窄段肠管全层无表达(表达阳性率为0),其在HD扩张段表达减少(阳性率为45%),在正常肠管组织正常表达(阳性率为86.5%).P2Y1受体基因在狭窄段表达水平与其在扩张段和正常结肠组织的表达水平差异均有统计学意义(Pa=0.000);P2Y1受体基因在HD扩张段肠管表达水平与其在正常肠管表达水平比较差异无统计学意义(P=0.914).结论 P2Y1受体基因在结肠中表达缺乏可能是HD发病的重要原因之一,同时也是肠动力障碍的一个重要原因.     

肥胖症的分子遗传学研究

目前已发现至少有6种单基因突变可引起鼠肥胖表型发生，这些基因已被成功克隆，其表达产物的功能亦相继明确；同时与鼠肥胖相关的数量性状位点被识别。人类亦存在这些基因和位点的同源替代基因，并有少数突变病例。另外，目前发现线粒体偶联蛋白及β3-肾上腺素能受体（β3－AR）基因多肽性与人类肥胖有关，属易感基因。     

托吡酯对戊四氮致癫癎大鼠体质量及血清瘦素和弓状核神经肽Y表达的影响

目的 探讨托吡酯（TPM）对癫痫大鼠血清瘦索水甲和下丘脑弓状核神经肽Y（NPY）表达的影响及两者与体质量变化的关系。方法 115只大鼠随机分成分别为空白组、TPM对照组、模型组和TPM治疗组。称重1次／3d，分别于2、4、6周末用放射免疫法测血清瘦素水平，用免疫组织化学染色法测下丘脑弓状核NPY表达。结果：TPM对照组和TPM治疗组实验第4周出现体质量下降（P〈0．05），同时在第2、4周末两组血清瘦素较空白组、模型组明显升高（P〈0.05），且随时间下降。TPM治疗组与TPM对照组大鼠NPY神经元表达较空白组和模型组升高（P〈0．05），且随时间渐上升。结论 TPM能提高大鼠血清瘦索水平，从而降低体质量，但瘦素升高使体质量下降与NPY无关。     

托吡酯对戊四氮致癫大鼠体质量及血清瘦素和弓状核神经肽Y表达的影响

目的探讨托吡酯(TPM)对癫大鼠血清瘦素水平和下丘脑弓状核神经肽Y(NPY)表达的影响及两者与体质量变化的关系。方法115只大鼠随机分成分别为空白组、TPM对照组、模型组和TPM治疗组。称重1次/3d,分别于2、4、6周末用放射免疫法测血清瘦素水平,用免疫组织化学染色法测下丘脑弓状核NPY表达。结果TPM对照组和TPM治疗组实验第4周出现体质量下降(P<0.05),同时在第2、4周末两组血清瘦素较空白组、模型组明显升高(P<0.05),且随时间下降。TPM治疗组与TPM对照组大鼠NPY神经元表达较空白组和模型组升高(P<0.05),且随时间渐上升。结论TPM能提高大鼠血清瘦素水平,从而降低体质量,但瘦素升高使体质量下降与NPY无关。     

高脂高能量饮食对幼鼠脂肪组织Sirt1/FOXO1表达的影响

目的 了解儿童肥胖发生机制,观察高脂高能量饮食对幼鼠脂肪组织易感基因酵母染色质沉默因子1/叉头转录因子O1(Sirt1/ FOXO1)表达的影响.方法 选取30只4～5周龄雄性Wistar大鼠,按体质量随机分为高脂组(20只)和对照组(10只).高脂组予高脂高能量饲料喂养4周,将体质量位于上游前1/3(7只)大鼠判定为肥胖倾向(OP)大鼠,体质量位于下游的后1/3(7只)大鼠判定肥胖抵抗(OR)大鼠,采用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)法测定其皮下和内脏(附睾周、肾周)白色脂肪组织中Sirt1和FOXO1基因的mRNA表达水平,采用SPSS 13.0软件比较各组间差异.结果 高脂高能量饲料喂养大鼠体质量分化,喂养28 d时各组间体质量均值表现为OP组＞对照组＞OR组,差异有统计学意义(P＜0.05);OP与OR组大鼠皮下与内脏各处白色脂肪组织中Sirt1 mRNA和FOXO1 mRNA表达水平差异不显著(P＞0.05),且均显著低于对照组(Pa＜0.05).结论 高脂高能量饮食对大鼠脂肪组织Sirt1和FOXO1的表达均有抑制作用,这可能是高脂饮食导致肥胖及其内分泌紊乱的内在原因之一,调节Sirt1/ FOXO1通路可能是纠正与肥胖有关的脂肪细胞功能紊乱的潜在治疗靶点.     

NYGGF4小鼠同源基因mRNA在遗传性ob／ob肥胖小鼠体内的表达

目的观察NYGGF4小鼠同源基因在遗传性ob/ob肥胖小鼠(以下简称ob/ob小鼠)与正常C57/BL6J小鼠脂肪组织中的差异表达,分析NYGGF4小鼠同源基因在ob/ob小鼠体内的多组织表达特征,探讨NYGGF4小鼠同源基因与肥胖之间的关系。方法雄性10周龄ob/ob小鼠、正常小鼠(对照组)各12只,以乌拉坦(0.4g/kg)深度麻醉后取腹膜后脂肪、肝、脑、骨骼肌、心肌、结肠、肾、小肠、肺、胸腺、脾等组织,采用RT-PCR技术检测NYGGF4小鼠同源基因的mRNA表达水平,比较NYGGF4小鼠同源基因在ob/ob小鼠与正常对照小鼠腹膜后脂肪组织中的差异表达及在ob/ob小鼠各组织中的表达。结果1.ob/ob小鼠体质量[(38.94±1.97)g]显著高于对照组小鼠[(18.47±0.66)g](P<0.001);2.NYGGF4小鼠同源基因在ob/ob小鼠腹膜后脂肪组织中的表达水平[(89.18±8.31)%]显著高于对照组小鼠[(56.84±9.54)%](P<0.001);3.NYGGF4小鼠同源基因在肝脏、脑、腹膜后脂肪、骨骼肌、心肌、结肠、肾脏等组织中均有表达,从高至低依次为肝脏>脑>腹膜后脂肪>骨骼肌>心肌>结肠>肾脏,虽在小肠、肺、胸腺、脾等组织中未检测到阳性信号,但总体上呈现多组织表达特征。结论NYGGF4小鼠同源基因可能参与肥胖发生的病理生理机制,并在肝脏、脑、腹膜后脂肪、骨骼肌等胰岛素作用的靶组织中表达水平相对较高。     

肝细胞生长因子在哮喘大鼠气道内的表达及血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂对其表达的影响

目的探讨哮喘大鼠发病过程中,肝细胞生长因子(HGF)在其气道内表达的变化及血管紧张素II受体AT1拮抗剂对其表达的影响。方法清洁级SD大鼠48只,随机分为正常对照组、卵蛋白(OVA)激发3 d组、OVA激发2周组、OVA激发4周组、OVA激发4周后使用AT1受体拮抗剂组、OVA激发4周后使用盐水对照组。观察OVA激发的不同时间、药物干预后哮喘大鼠气道的病理改变;免疫组化方法观察HGF、血管紧张素II(AngII)、转化生长因子(TGF)-β1表达的变化。结果HGF在OVA激发3 d即明显高于正常对照组(P<0.05),OVA激发2周HGF在气道中的表达水平最高,OVA激发4周时下降;AngII、TGF-β1表达水平随OVA激发时间的延长而持续上升;使用AT1受体拮抗剂后,气道HGF表达水平有所上升,而AngII、TGF-β1均下降,同时哮喘大鼠的气道重塑有所改善。结论HGF在哮喘发病过程中起保护作用,AngII、TGF-β1对HGF具有负向调节作用,AT1受体拮抗剂在一定程度上可提升内源性HGF表达,改善哮喘大鼠的气道重塑。     

肥胖症的分子遗传学研究

目前已发现至少有６种单基因突变可引起鼠肥胖表型发生，这些基因已被成功克隆，其表达产生的功能亦相继明确；同时与鼠肥胖相关的数量性状位点被识别，人类亦存在在这些和位点的同源替代基因，并有少数突变病例。另外，目前发现线粒体偶联蛋白及β３－肾上腺素能受体基因多肽性与人类肥胖有关，属易感基因。     

脂肪酸合成酶在高脂饮食诱导的肥胖易感和肥胖抗性大鼠白色脂肪组织中的表达差异

目的 探讨高脂饮食诱导下肥胖易感（obesity-prone,OP）与肥胖抗性（obesity-resistant,OR）大鼠白色脂肪组织（white adipose tissue,WAT）中脂肪酸合成酶（fatty acid synthase,FAS）的表达差异。方法 72只SD大鼠．随机选取12只为标准对照组。基础饲料饲养7周,余60只基础饲料饲养1周后,按体重增值分为0P组、OR组和高脂组．分组后改用高脂饲料继续饲养6周。观察各大鼠体重变化、Lee’B指数、脂肪湿重等;用RT-PCR技术分析WAT中FAS基因mRNA表达水平,Western blolting检测WAT中FAS的蛋白表达差异。结果 OP组体重增值、Lee’B指数及脂肪湿重均高于OR组（P〈0．05）;OP组FAS基因mRNA表达水平高于0R组（P〈0．05）;Op组FAS蛋白表达显著高于0R组（P〈0．001）。结论 OP与OR大鼠的白色脂肪组织中存在FAS基因表达差异。其差异与大鼠发生肥胖的局感程度有关。     

心脏β-AR信号转导系统的变化及其在SIRS时的临床意义

本文从分子水平上探讨全身炎症反应综合征时心脏舒缩功能障碍，心肌细胞膜β肾上腺素能受体及其信号转导系统中β受体、Ｇ蛋白、腺苷酸环化酶的变化及其可能机制，提出全身炎症反应综合征时保护该系统、防止β受体下调、从基因水平上调控Ｇ蛋白及其开发作用于Ｇ蛋白的药物防治心肌受损的可能性。     

纳络酮对缺氧缺血性脑病新生儿血浆神经肽Y和β-内啡肽的影响

目的探讨新生儿缺氧缺血性脑病(HIE)血浆神经肽Y(NPY)、β-内啡肽(β-EP)的变化及纳络酮治疗后对其的影响。方法将34例中、重度HIE患儿随机分成常规治疗组(18例),纳络酮治疗组(16例),以14例正常新生儿为对照组,纳络酮治疗组入院后在常规治疗的基础上给予纳络酮治疗,连用3天。HIE患儿组治疗前、治疗3d后各采血收集标本一次,采用放射免疫法测定NPY、β-EP。结果①HIE患儿血浆NPY、β-EP水平为(174.23±18.31)ng／L、(123.36±16.42)ng／L均显著高于正常对照组(87.19±12.95)ng／L、(63.27±12.65)ng／L(P<0.01)。HIE急性期NPY与β-EP呈正相关(r=0.347,P<0.05)。②HIE常规组、纳络酮组治疗3d后血浆NPY、β-EP水平均较治疗前显著降低(P<0.01)。治疗后HIE纳络酮组NPY、β-EP水平均显著低于常规组(P<0.01)。结论NPY、β-EP共同参与了HIE的病理生理过程,在HIE发病机制中可能起重要作用;纳络酮能显著降低NPY、β-EP水平,减轻脑损伤。     

脓毒症大鼠心肌β1、β2、β3肾上腺素能受体mRNA表达水平的研究

目的 通过研究脓毒症大鼠心肌β1、β2、β3肾上腺素能受体(AR)基因表达的变化,初步探讨其在脓毒症时心功能障碍中的作用.方法 根据处理不同将Wistar大鼠随机分为对照组、脓毒症组,两组根据时间点不同又分为6、18、24、36 h四个亚组.采用逆转录-聚合酶链反应法检测β1、β2、β3-AR mRNA的变化.结果 对照组β1-AR与β-肌动蛋白(β-actin)mRNA比值为最高(1.07±0.13),脓毒症36 h亚组表达最低(0.59±0.13),组间差异有显著性(P＜0.05);对照组β2-AR与β-actin的mRNA比值为0.40±0.01,脓毒症各亚组均有下降趋势,36 h亚组为0.34±0.01,但与对照组差异无显著性(P＞0.05);脓毒症36 h亚组β3-AR与β-actin mRNA比值表达最高,与对照组比较差异有显著性(P＜0.05).结论 脓毒症时可能通过下调β-AR基因及上调β3-AR基因的表达导致心功能障碍.     

Survivin反义寡核苷酸对k562细胞周期及c-myc的影响

目的 探讨凋亡抑制基因survivin的反义寡核苷酸对白血病细胞k562细胞周期及c-myc的影响。方法 实验分反义组、无义组、脂质体组、空白组，转染后24、48小时流式细胞仪检测细胞周期；免疫组织化学方法检测survivin、c-myc蛋白水平。结果 反义寡核苷酸作用后，k562细胞被阻滞在G0／G1期，G0／G1期细胞明显增多，S期及G1／M期细胞明显减少，细胞周期进程受到明显阻滞，而无义组、脂质体组、空白组细胞周期进程无明显变化（P〈0．05）；反义寡核苷酸作用24小时后细胞内survivin及c-myc的表达水平下降，但与无义组、脂质体组、空白组比较无显著性差异（P〉0．05），而48小时后survivin及c-myc表达水平进一步降低，与各对照组比较有显著性差异（P〈0.05）。结论 survivin反义寡核苷酸能阻滞K562细胞于G0／G1期、并下调c-myc蛋白的表达。