血友病A基因治疗的研究进展

血友病A是凝血因子VIII(FVIII)基因缺陷所致的X连锁隐性遗传性疾病,目前FVIII基因的结构已基本明确,已确认的基因突变种类繁多。基因治疗就是利用病毒载体,将正常的FVIII基因导入患者体内,并表达治疗水平的FVIII,从而实现彻底治愈血友病A。选择适合血友病A基因治疗的病毒载体,将关系到基因治疗的成功与否。该文对血友病A基因治疗中常用的病毒载体和靶细胞的研究进展作一简要综述。     

小儿肿瘤的基因治疗研究现状

小儿肿瘤的基因治疗研究现状毕允力综述高解春审校基因治疗是指应用正常或野生型基因校正或置换致病基因的一种治疗方法［１］。经历了动物细胞体外遗传修饰、动物直接基因转移、病毒载体的应用，尤其是重组ＤＮＡ技术的诞生，使基因治疗成为了肿瘤、遗传病及病毒性感染等...     

基因治疗应用于肿瘤的研究进展

基因治疗在基因异常性疾病的治疗中潜在作用很大，尤其是在肿瘤治疗中。目前，基因替代、基因剔除、肿瘤疫苗和反义核苷酸等方法正得到广泛的研究。虽然受到载体转染效率的影响，体内外研究的发展仍使许多基因治疗药物进入了Ⅰ期临床试验，甚至是Ⅱ期和Ⅲ期临床试验，其中又以反义核酸类药物居多，并有部分基因治疗药物已经进入临床应用。     

人类疾病的基因治疗

1　基因治疗概述1.1　基因治疗的定义基因治疗的传统含义是指单纯校正突变基因来对遗传性疾病进行治疗。目前认为所谓基因治疗是指将外源性目的基因通过基因转移的途径导入由于基因缺陷的患者体内靶细胞中并产生具有治疗功能的蛋白质。就是以正常的或野生型的基因替代或置换致病基因的一种治疗方法。常有 4大策略 :基因置换、基因修正、基因修饰、基因失活。1.2　基因治疗的适应证单基因遗传性疾病原则上为基因治疗的适应证 ,如地中海贫血、囊性纤维变性、血友病、腺苷酸脱氨酶缺陷的严重联合型免疫缺陷症等。只需导入一个正常基因即可达到…     

人凝血因子ⅨcDNA在C2C12细胞中的表达

目的探索一种新的血友病Ｂ基因治疗的靶细胞。方法用两种逆转录病毒载体Ｇ１ＮａＭＣⅨ和Ｇ１ＮａＣⅨ分别将人凝血因子ⅨｃＤＮＡ转入小鼠Ｃ２Ｃ１２成肌细胞中，观察凝血因子Ⅸ（ＦⅨ）ｃＤＮＡ表达及肌肉组织特异性增强子序列对表达的调控。结果带肌肉组织特异性增强子序列的逆转录病毒载体Ｇ１ＮａＭＣⅨ能使ＦⅨｃＤＮＡ在Ｃ２Ｃ１２中的最高表达量２４小时达６４０ｎｇ／１０６细胞，活性达９０％，明显高于无增强子序列的逆转录病毒载体Ｇ１ＮａＣⅨ的２４小时３８０ｎｇ／１０６细胞的表达量。结论成肌细胞具有合成、分泌活性ＦⅨ的功能，可作为血友病Ｂ基因治疗的一种理想靶细胞     

地中海贫血的基因治疗

地中海贫血的基因治疗是基于基因修正的自体造血干细胞移植。目前,临床前和临床研究已经证明了慢病毒载体基因治疗的安全性和有效性,但仍有许多因素限制其临床应用,如有效的干细胞数量和质量、基因转导效率、基因表达水平和移植前预处理方案的毒性。     

遗传性心肌疾病的基因缺陷及基因治疗进展

遗传性心肌病的发病与基因缺陷有关，近年来对基因缺陷的性质及作用机制的研究有了较大进展，并试图应用各种载体携带目的基因进行基因治疗。腺病毒是目前转染心肌的最常用、最有效的载体，本文综述了遗传性心肌病已知基因缺陷及腺病毒载体在心肌病基因治疗中的应用进展。     

基因治疗应用于肿瘤的研究进展

基因治疗在基因异常性疾病的治疗中潜在作用很大 ,尤其是在肿瘤治疗中。目前 ,基因替代、基因剔除、肿瘤疫苗和反义核苷酸等方法正得到广泛的研究。虽然受到载体转染效率的影响 ,体内外研究的发展仍使许多基因治疗药物进入了I期临床试验 ,甚至是Ⅱ期和Ⅲ期临床试验 ,其中又以反义核酸类药物居多 ,并有部分基因治疗药物已经进入临床应用。     

遗传性心肌疾病的基因缺陷及基因治疗进展

遗传性心肌病的发病与基因缺陷有关，近年来对基因缺陷的性质及作用机制的有了较大进展，并试图应用各种载体携带目的基因治疗。腺病毒是目前转染心肌的最常用、最有效的载体，本文综述了遗传性心肌病已知基因缺陷及腺病毒载体在心肌病基因治疗中的应用进展。     

1型糖尿病胰岛素基因治疗的新策略

基因治疗1型糖尿病是近几年的研究热点。将分泌胰岛素的装置导入患者自身的非β细胞，使之分泌胰岛素，又不受自身免疫系统的攻击。转基因治疗必须具备以下几个方面：有效的胰岛素基因转载系统；准确调节胰岛素分泌的系统；胰岛素的加工装置及合适的宿主细胞。其中，重组腺相关病毒是最常用的载体，K细胞是最理想的宿主细胞。胰岛素基因治疗的主要问题是非β细胞中缺乏一个能根据血糖水平准确调节胰岛素合成及分泌的系统。随着人们在胰岛素基因治疗方面取得的进展，根治糖尿病将成为可能。     

基因治疗遗传性疾病临床试验的研究进展

基因治疗的目的是纠正引起病理改变的突变基因,这一概念十分引人注目,对未来遗传性疾病的治疗将产生重大影响。本文就临床基因治疗X连锁严重联合免疫缺陷病、腺苷脱氨酶缺乏严重联合免疫缺陷病、血友病A、B、慢性肉芽肿病的临床试验的研究进展进行综述。     

高滴度的含有目的基因IL-RA的逆转录病毒的包装和浓缩

目的：构建具有高效转染率且含有标记基因的携带白介素4受体拮抗剂（IL-4RA）基因的重组逆转录病毒载体pLNC-IL-4RA。方法：将IL-4RA基因插入pLNC-Laz逆转录病毒载体获得重组的逆转录病毒表达载体pLNC-IL-4RA,重组的逆转录病毒表达载体pLNC-IL-4RA通过质脂体转染PA317细胞进行包装,PA317抗性克隆经过G418的抗性筛选产生并扩增,将含有病毒的PA317细胞培养液上清收集后转染NIH3T3细胞进行病毒滴度的测定。结果：扩增后的G418抗性克隆经过检测和滴度测定结果显示含有目的基因的逆转录病毒最高的病毒滴度为1×104CFU/mL。选择含有最高病毒滴度的PA317细胞抗性克隆进行基因组的提取和鉴定,结果显示目的基因IL-4RA成功地整合到了宿主的基因组中。结论：含有目的基因IL-4RA的逆转录病毒载体经过PA317细胞包装后获得了较高的病毒滴度,为下一步哮喘模型的基因治疗打下了基础。［中国当代儿科杂志,2009,11（9）：761-764］     

STR遗传标记在广西地区血友病A携带者诊断中的应用

目的：建立理想的STR遗传标记体系，对广西地区血友病A携带者进行快速简便的基因诊断。方法：选取广西地区10个血友病A家系作为研究对象，运用荧光PCR联合毛细管电泳的方法，对家系成员中FⅧ基因内外具有高度遗传性的3个STR位点F8Int13、DXS1073、DXS9901进行等位基因分型，评估该体系用于家系中血友病A携带者的诊断效率，并对待检者进行携带者诊查。结果：10个血友病A家系中，11例肯定女性携带者均含有与相应先证者完全一致的3个STR等位基因（F8Int13、DXS1073、DXS9901）片段长度；在待检的8例女性中，5例检出3个STR等位基因片段与相应家系中先证者完全相同，被诊断为血友病A携带者。结论：联合应用3个STR位点F8Int13、DXS1073、DXS9901进行遗传分析能够快速检出血友病A携带者，给血友病A产前诊断提供可靠的依据。     

再生障碍性贫血的基因疗法

基因治疗（ｇｅｎｅｔｈｅｒａｐｙ）是近２０年来分子生物学和重组脱氧核糖核酸技术迅速发展的结果。理论上通过基因治疗可以将缺陷的基因进行原位的修补而使其成为疾病的一种根治方法。目前，基因治疗正处于研究阶段。而基因增补的方法在遗传性疾病、恶性肿瘤及病毒性感染的治疗中已取得可喜的成果。其中细胞因子基因治疗的设想在造血系统疾病，包括再生障碍性贫血的治疗中已日益受到重视。     

再生障碍性贫血的基因疗法

基因治疗（ｇｅｎｅｔｈｅｒａｐｙ）是近２０年来分子生物学和重组脱氧核糖核酸技术迅速发展的结果。理论上通过基因治疗可以将缺陷的基因进行原位的修补而使其成为疾病的一种根治方法。目前，基因治疗正处于研究阶段。而基因增补的方法在遗传性疾病、恶性肿瘤及病毒性感染的治疗中已取得可喜的成果。其中细胞因子基因治疗的设想在造血系统疾病，包括再生障碍性贫血的治疗中已日益受到重视。     

β地中海贫血的基因调控治疗

β地中海贫血是一种常见的单基因遗传病，理论上，本病是基因治疗的最理想模型。广义基因治疗可分为基因矫正治疗和基因调控治疗。前一种方法临床应用存在种种困难。后者是从基因水平调控细胞中某些原已静止或有缺陷的基因表达，以达到改善临床症状的目的，目前处于研究阶段的基因调控治疗主要有；药物基因治疗，反义核酸基因治疗，其中工程产品基因治疗三方面，本文就β地中海贫血的基因调控治疗作一综述。     

血友病的基因治疗研究进展

血友病是一种X染色体连锁遗传病 ,由于编码凝血因子的基因先天性异常而导致的机体出血性紊乱。目前临床上主要采用蛋白替代疗法治疗血友病 ,即给患者反复输注从血浆中纯化的凝血因子Ⅷ或IX因子浓缩制品 ,也有采用基因重组凝血因子Ⅷ或IX因子制品。替代疗法虽然取得了较好的疗效 ,但患者不仅要承受沉重的经济负担 ,而且还面临血液制品无法完全杜绝艾滋病、乙肝等病毒污染的威胁 ,约 2 0 %的严重血友病A或 3%血友病B患者由于反复输注凝血因子制品而产生抑制性抗体 ,这也是一个棘手的问题。且不能达到治愈的目的。由于凝血因子的表达水平决…     

血友病A携带者检测与产前诊断的研究进展

血友病A是最常见的遗传性出血性疾病，由于目前尚无有效的治疗措施，所以携带者的检测及早期产前诊断显得更加重要。直接检测基因突变位点的方法是最理想、最准确和最可靠的诊断方法，然而凝血因子VIII基因突变的异型性和复杂性使得直接法在血友病A的诊断中变得困难，因此作为间接法的连锁分析仍是目前广泛采用的方法，本文拟简要阐述近年来血友病A携带者的基因检测与产前诊断的研究进展。     

1型糖尿病胰岛素基因治疗的新策略

基因治疗 1型糖尿病是近几年的研究热点。将分泌胰岛素的装置导入患者自身的非β细胞 ,使之分泌胰岛素 ,又不受自身免疫系统的攻击。转基因治疗必须具备以下几个方面 :有效的胰岛素基因转载系统 ;准确调节胰岛素分泌的系统 ;胰岛素的加工装置及合适的宿主细胞。其中 ,重组腺相关病毒是最常用的载体 ,K细胞是最理想的宿主细胞。胰岛素基因治疗的主要问题是非 β细胞中缺乏一个能根据血糖水平准确调节胰岛素合成及分泌的系统。随着人们在胰岛素基因治疗方面取得的进展 ,根治糖尿病将成为可能。     

腺相关病毒介导的基因疗法在溶酶体贮积症中的应用

溶酶体贮积症(lysosomal storage disorders,LSDs)是一组由溶酶体酶或功能相关蛋白缺陷所致的单基因遗传代谢性疾病。临床治疗以酶替代疗法为主,但该疗法对有神经系统症状的LSDs患者疗效较差。随着多组学、测序技术和生物工程学的快速发展,基因治疗已在LSDs患者中开展。腺相关病毒(adeno-associated virus,AAV)作为基因治疗的载体之一,在治疗遗传代谢性等疾病中具有较好的前景。越来越多的研究表明,AAV介导的基因治疗在LSDs中有效。该文就其在LSDs中的应用作一综述。[中国当代儿科杂志,2022,24 (11):1281-1287]