中药白及抑制酪氨酸酶及清除DPPH自由基的有效部位筛选及其制备工艺考察

目的:对白及不同提取物的抗氧化活性和对酪氨酸酶的抑制作用进行考察,筛选具有抗氧化及美白作用的功效部位,为白及的综合利用开发提供依据。方法:采用水、70%乙醇、70%乙醇提取后水提等提取方式分别对白及进行回流提取,酪氨酸酶抑制法及DPPH自由基清除试验对各提取部位进行相关活性比较。以酪氨酸酶抑制率及DPPH自由基的清除率为指标,对醇提浓度及具体制备工艺进行考察。结果:白及水提物具有促进酪氨酸酶活性作用(-96.78%),其作用随反应时间延长而减弱,白及醇提物对酪氨酸酶具有良好的抑制率(68.36%),而醇提后水提物对酪氨酸酶呈现出先抑制后促进的作用,而后促进作用减弱;白及醇提物与水提物具有一定的清除DPPH自由基能力,其中醇提物抗氧化能力较高,为37.13%,而醇提水提物有增强自由基活性作用(为-43.73%)。综上结果得出,白及醇提物对酪氨酸酶具有良好的抑制作用,对DPPH自由基具有一定的清除作用。因此对醇提部位进行提取浓度、用量及提取时间、次数的考察,结果以95%乙醇,用量为100倍,提取时间为2 h,共提取1次,所得提取物的酪氨酸酶抑制率及DPPH自由基清除率较高。结论:白及具有一定的抗氧化及美白功效,其中具体活性成分尚需进一步研究。     

基于DPPH自由基清除能力的姜黄提取物抗氧化活性评价

目的 建立高通量检测DPPH自由基清除能力的实验方法,对姜黄提取物抗氧化活性进行初步评价。方法 通过测定抗坏血酸（维生素C）的DPPH自由基清除率曲线,以IC₅₀值作为评价试样清除DPPH自由基能力的指标,并将此应用于测定姜黄醇提物和水提物清除DPPH自由基的能力。结果 测定波长515 nm,抗坏血酸DPPH自由基清除能力在62.5～750.0 μg/mL线性良好,方法可靠。姜黄醇提物的DPPH自由基清除能力（IC₅₀ 7.78 mg/mL）明显强于水提物（IC₅₀ 14.84 mg/mL）。结论 建立的DPPH自由基清除测定方法可靠、简便、灵敏,其高通量的快速检测方法可为抗氧化药物筛选提供参考。     

DPPH·法测定红柳醇提物各组分清除自由基的能力

目的通过11,二苯基-2-苦肼基自由基(DPPH.)法测定红柳醇提物各组分清除自由基的能力。方法将红柳醇提物依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇进行萃取,各组分都配置成相当于原药材50mg.mL-1的溶液,通过DPPH.法测定各组分的清除自由基的能力,并计算各组分的清除50%自由基时样品浓度(IC50)。结果正丁醇层清除自由基的能力最强I,C50为0.55mg.mL-1,其次是萃后水层(IC50为1.47mg.mL-1),乙酸乙酯层(IC50为3.96mg.mL-1)和石油醚层(IC50为4.78mg.mL-1)。结论红柳醇提物各组分对DPPH.均具有一定清除作用,具有体外抗氧化性,可作为有效的天然自由基清除剂,具有很大的开发利用前景。     

DPPH·法测定红柳醇提物各组分清除自由基的能力

目的通过11,二苯基-2-苦肼基自由基（DPPH.）法测定红柳醇提物各组分清除自由基的能力。方法将红柳醇提物依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇进行萃取,各组分都配置成相当于原药材50mg.mL-1的溶液,通过DPPH·法测定各组分的清除自由基的能力,并计算各组分的清除50%自由基时样品浓度（IC50）。结果正丁醇层清除自由基的能力最强I,C50为0.55mg.mL-1,其次是萃后水层（IC50为1.47mg.mL-1）,乙酸乙酯层（IC50为3.96mg.mL-1）和石油醚层（IC50为4.78mg.mL-1）。结论红柳醇提物各组分对DPPH·均具有一定清除作用,具有体外抗氧化性,可作为有效的天然自由基清除剂,具有很大的开发利用前景。     

不同鸢尾属植物DPPH·药理活性作用比较

目的：研究和比较鸢尾属不同植物射干、日本鸢尾、德鸢尾清除DPPH·药理活性。方法：采用高效液相色谱法测定DPPH·含量,色谱柱：Kromasil C18（5μm,250 mm×4.6 mm）;流动相：甲醇-0.1%磷酸水（80：20）检测波长517 nm。比较各样品对DPPH·自由基清除作用。结果：射干、日本鸢尾、德鸢尾清除DPPH·的IC50值分别为0.020、0.004、0.018。三者对DPPH·自由基清除作用强弱顺序为：日本鸢尾〉德鸢尾≥射干。结论：不同鸢尾属植物对DPPH·自由基的清除作用有较大差别,提示除射干之外的其它鸢尾属植物也有较强的抗氧化作用。     

何首乌3种组分的提取及其清除DPPH自由基作用的研究

目的分离何首乌二苯乙烯苷、蒽醌、多糖3种组分,比较它们清除DPPH自由基的能力,揭示何首乌抗氧化可能的物质基础。方法采用溶剂萃取和柱层析分离提取何首乌二苯乙烯苷、蒽醌、多糖3种组分,并通过DPPH自由基清除试验,比较各组分清除自由基的能力。结果何首乌二苯乙烯苷组分清除DPPH自由基的IC50为1.42 mg/mL（以生药计,下同）;何首乌蒽醌组分清除DPPH自由基的IC50为2.67 mg/mL,何首乌多糖组分清除DPPH自由基的IC50为360 mg/mL。结论二苯乙烯苷和蒽醌是何首乌清除DPPH自由基的主要组分;何首乌多糖体外清除DPPH自由基的作用较弱。     

姜味草精油与提取物清除DPPH自由基活性研究

目的：对姜味草精油与提取物清除自由基活性进行研究。方法：选择1,1-二苯基-2-苦基肼自由基（DPPH）体外清除活性模型,采用分光光度法,测定其DPPH清除率曲线,以EC50值评价其清除DPPH活性。结果：姜味草精油DPPH清除活性EC50值为0.21%;其甲醇和乙醇提取物清除DPPH的EC50分别为0.052mg·mL^-1和0.554mg·mL^-1。结论：姜味草精油及其提取物具有较强的清除DPPH活性。     

查尔酮类似物清除DPPH自由基和保护H2O2诱导的PC12细胞损伤的抗氧化活性

目的：探究合成的查尔酮类似物清除DPPH自由基和保护H2O2 诱导PC12 细胞损伤的抗氧化活性。方法：将PC12 细胞分为对照组（DMSO组）、损伤组（H2O2组）、查尔酮类似物+H2O2组和阳性对照组（槲皮素+H2O2组）。设计合成16个查尔酮类似物,通过DPPH自由基清除实验检测自由基清除活性;MTT法检测细胞活性;MDA试剂盒检测脂质过氧化;Hoechst染色检测细胞凋亡;Western blot法检测cleaved-caspase-3、Bcl-2 和Bax蛋白表达。结果：筛选得到活性佳、毒性小的抗氧化剂13。与DMSO组比较,H2O2组的细胞存活率、Bcl-2蛋白表达显著下降,而cleaved-caspase-3和Bax蛋白表达、MDA含量显著增加（P ＜0.05）;与H2O2组比较,化合物13组呈剂量依赖性提高细胞存活率,增加Bcl-2蛋白的表达,减少cleaved-caspase-3和Bax蛋白的表达,降低MDA水平（P ＜0.05）。结论：新型查尔酮类似物13抑制H2O2诱导PC12的细胞凋亡,具有良好的抗氧化活性。     

西青果丙酮及水提取物体外抗氧化活性初步研究

目的 探讨西青果丙酮提取物和水提取物在3种评价体系下的体外抗氧化活性.方法 采用福林酚比色法测定西青果丙酮提取物和水提取物的总酚含量;利用清除1,1-二.苯基-2-苦肼基自由基(DPPH·)、2,2-联氮基-双-(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二铵盐自由基(ABTS+·)评价法、还原法测定西青果两种溶剂提取物的抗氧化活性.结果 西青果丙酮提取物和水提取物总酚含量分别为(622.19±1.35)mg/g和(457.43±0.96) mg/g;两种溶剂提取物均表现出良好的抗氧化活性,对DPPH、ABTS自由基清除率的IC50值分别为8.427、19.575 μg/mL和20.273、33.064 μg/mL;对Fe3+均有一定的还原能力,其结果与浓度呈良好的量效关系,丙酮提取物还原效果最为明显.结论 西青果丙酮提取物和水提取物具有较强的抗氧化活性.     

Phytochemical screening and free radical scavenging activity of Citrullus colocynthis seeds extracts

Objective

To study the phytochemical screening of different extracts from Citrullus colocynthis (C. colocynthis ) seeds extracts and to assess their antioxidant activity on the DPPH free radical scavenging.

Methods

Phytochemical screening, total content of polyphenols and flavonoids of C. colocynthis seeds extracts, including a crude aqueous extract (E1), a defatted aqueous extract (E2), a hydromethanolic extract (HM), an ethyl acetate extract (EA) and a n-butanol extract (n-B) was carried out according to the standard methods and to assess their corresponding effect on the antioxidant activity of this plant.

Results

None of these extracts contained detectable amount of alkaloid, quinone, antraquinone, or reducing sugar. Catechic tannins and flavonoids were abundant in E1, HM and EA, whilst terpenoids were abundantly present in E1 and n-B but only weekly in HM. Coumarins were found in E2, EA and n-B. Polyphenols, expressed as gallic acid equivalent, amounted, per 100 g plant matter, to 329, 1002 and 150 mg in EA, HM an E1 respectively. Flavonoids, expressed as catechin equivalent, amounted, per 100 g plant matter to 620, 241 and 94 mg in EA, HM and E1 respectively. Comparable values were found in n-B and E1, with lower values in E2. Quercetin, myricetin and gallic acid were found in the EA and HM extracts by thin layer chromatography, The antioxidative effect of these extracts yielded, when tested at a concentration of 2 000 µg/mL in a 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl assay, a reducing percentage of 88.8% with EA, 74.5% with HM and 66.2% with E1, and corresponding IC₅₀ of 350, 580 and 500 µg/mL as compared to 1.1 µg/mL for ascorbic acid.

Conclusions

These qualitative and quantitative analytical data document the presence in C. colocynthis extracts of such chemical compounds as flavonoids responsible for the antioxidant activity, as well as other biological activities of this plant.     

益母草总黄酮的提取及其对羟自由基的清除作用

目的为充分利用益母草植物资源,避免浪费,探讨益母草总黄酮的提取、鉴别及对羟(.OH)自由基的清除作用。方法采用超声波乙醇浸提法从益母草中提取黄酮类物质,对所提取的黄酮类物质进行验证,并用分光光度法测定含量,用益母草总黄酮对羟自由基清除作用进行试验。结果测得样品中总黄酮的含量X=0.4099mg/ml,回收率为101.6%,其纯度和产率均较高。结论该方法采用全物理过程,无任何污染,是提取益母草黄酮类物质的有效途径。益母草总黄酮提取液对Fenton体系产生的.OH自由基有很好的清除作用。     

依达拉奉对糖尿病神经传导功能及氧自由基清除能力的影响

目的:探讨依达拉奉对糖尿病周围神经病变患者神经传导功能及氧自由基清除能力的影响。方法:选取2010年9月～2012年4月治疗的70例糖尿病周围神经病变患者为研究对象,将其随机分为对照组(常规治疗组)和观察组(常规治疗加用依达拉奉组)每组各35例,后将两组患者的治疗总有效率、治疗前及治疗后1周、2周的神经传导功能及氧自由基清除能力进行比较。结果:观察组的治疗总有效率高于对照组,治疗后1周、2周神经传导功能及氧自由基清除能力指标改善幅度均大于对照组(P均<0.05)。结论:依达拉奉在糖尿病周围神经病变中具有较佳的效果,同时显著改善了患者的神经传导功能及氧自由基清除能力。     

二苯乙烯苷对SAMP8鼠学习记忆和自由基清除的影响

目的观察二苯乙烯苷（TSG）对老年性痴呆模型SAMP8鼠学习记忆能力和自由基清除的影响。方法选用6月龄SAMP8鼠50只,随机均分为5组,每组10只：SAMP8对照组、阳性药石杉碱甲对照组、TSG低、中、高剂量组,另选用6月龄SAMR1鼠10只作正常对照组。各组分别灌胃相应药物50d后,应用Morris水迷宫检测各组小白鼠学习记忆能力的变化和采用分光光度法测定各组小白鼠脑组织SOD、GSH-Px活性和MDA含量。结果与SAMR1对照组比较,SAMP8鼠在隐蔽平台试验中表现出明显的学习记忆障碍,逃避潜伏期显著延长（P〈0．05）,TSG组从第3天起逃避潜伏期较SAMP8对照组显著缩短（P〈0．05）;探索试验中二苯乙烯苷组原平台象限的停留时间和穿越原平台次数明显多于SAMP8对照组。SAMP8组脑组织SOD、GSH—Px活性明显降低,MDA含量明显升高,而TSG组能明显提高脑组织SOD、GSH．Px活性,降低MDA含量（P〈0．05）。结论二苯乙烯苷能改善SAMP8鼠的学习记忆能力及有效清除脑组织自由基。     

维药罗勒提取物中总黄酮含量及其抗氧化活性研究

目的探讨维药罗勒乙酸乙酯提取物和正丁醇提取物中总黄酮的含量及其体外抗氧化活性。方法采用紫外分光光度法,在357nm波长处测定维药罗勒乙酸乙酯提取物和正丁醇提取物中总黄酮的含量,并进行比较;检测2种提取物对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH·)的清除作用,评价其体外抗氧化活性。结果维药罗勒乙酸乙酯提取物中总黄酮含量为21.023 3μg/mL(RSD 0.19%,n=5),正丁醇提取物中总黄酮含量为4.782 9μg/mL(RSD 0.58%,n=5)。0.5mg/mL乙酸乙酯提取物和正丁醇提取物在体外对DPPH.的清除率分别为88.8%和72.2%。结论维药罗勒有效提取物中所含的黄酮可能是其发挥抗炎作用的有效化学成分之一,且其体外抗氧化活性也在一定程度上体现其体外抗炎活性。     

体外受精周期中血清和卵泡液活性氧及总抗氧化能力的研究

目的探讨体外受精(IVF)周期中血清和卵泡液活性氧(ROS)及总抗氧化能力(TAC)的变化特征。方法选择进行IVF助孕的患者共245个周期,分别收集卵泡刺激前基础状态血清和取卵日血清及排卵期卵泡液,检测ROS和TAC,并分析其与相关临床特征之间的相关性。结果基础状态血清ROS值平均为(59.8±54.6)cps,取卵日血清ROS值平均为(77.5±62.3)cps,差异具有统计学意义(P<0.05);但TAC差异无统计学意义(P>0.05)。卵泡液ROS与取卵日血清ROS、卵泡液TAC与基础状态血清TAC及取卵日TAC均呈正相关(P<0.05)。卵泡液ROS和TAC水平与患者年龄、雌二醇(E2)峰值、获卵数、峰值E2/获卵数及受精率等均无相关性,仅ROS与患者体质量指数(BMI)呈正相关(r=0.29,P=0.04)。BMI<19 kg/m2组与BMI为23～25 kg/m2组及BMI>25 kg/m2组的患者相比,卵泡液ROS显著降低(P<0.05)。结论排卵期血清ROS较早卵泡期升高,卵泡液ROS与BMI呈正相关。     

三种不同麻醉方法对乙状结肠癌根治手术患者C反应蛋白及补体变化的影响

目的 探讨不同麻醉方法对乙状结肠癌根治手术患者C反应蛋白及补体变化的影响.方法 选择2011年5月～2012年12月河池市第一人民医院择期行乙状结肠癌手术的患者60例,ASA Ⅰ～Ⅱ级,随机分为三组,每组各20例,A组为单纯硬膜外麻醉组,B组为静吸复合麻醉组,C组为静吸复合麻醉+硬膜外麻醉组.分别在麻醉诱导前(T1)、手术结束时(T2)、术后24 h(T3)及术后72 h(T4)抽取血样,测定C反应蛋白(CRP)及补体C3、C4水平.结果 与同组内T1时段比较,三组患者C反应蛋白在T3、T4均有不同程度增高(P＜ 0.05),但B、C组增高浓度在正常范围之内;同时段组间比较,A组CRP在T3及T4时较B、C组增高,差异均有统计学意义(P＜0.05).与同组内T1时段比较,三组C3在T2有所降低(P＜0.05),但在T3均能升至麻醉前水平;与其他两组比较,C组C3、C4在T3及T4增高差异有统计学意义(P＜0.05).结论 硬膜外阻滞麻醉+静吸复合麻醉用于乙状结肠癌根治手术患者可明显减轻术中及术后应激反应,有利于补体系统的稳定.