AG490联合顺铂对人宫颈癌HCEI细胞增殖凋亡的作用

目的研究酪氨酸激酶抑制剂AG490联合顺铂对人宫颈癌细胞株HCEI细胞增殖和凋亡的作用。方法(1)培养宫颈鳞癌细胞株HCEI,观察活细胞生长情况并摄片。(2)实验分组及检测:①终浓度为20、40、80μmol/L的AG490培养HCEI细胞;②终浓度为20、40、80μg/ml顺铂培养HCEI细胞;③AG490联合顺铂培养HCEI细胞,通过噻唑蓝(MTT)比色法检测培养24、48、72 h后细胞增殖活力,并计算细胞生长抑制率;流式细胞仪分别检测24、48、72 h不同时间点的细胞凋亡发生率,并分析细胞周期改变。(3)各实验中对照组除加入同等浓度的二甲基亚砜(DMSO)外,均不加任何干扰因素,统计学方法采用方差分析和χ~2检验。结果①JAK激酶抑制剂AG490处理后凋亡细胞明显增多,细胞缩小变圆,细胞膜出泡等。②AG490和顺铂以时间和剂量依赖性特点抑制宫颈癌细胞的增殖,AG490联合顺铂对人宫颈癌HCEI细胞的增殖抑制具有协同作用。③流式细胞仪细胞周期分析表明,AG490处理组G_1期细胞比例有所增加,S期细胞比例明显降低,顺铂处理组G。期细胞比例明显降低,S期细胞比例明显升高,AG490联合顺铂处理组G期细胞比例和S期细胞比例介于AG490处理组和顺铂处理组之间。④细胞凋亡分析表明,AG490处理组细胞凋亡率较对照组升高,呈时间和剂量依赖性;顺铂处理组细胞凋亡率较对照组也升高,呈时间和剂量依赖性;AG490联合顺铂处理组细胞凋亡率较单药处理组高。结论①AG490使凋亡细胞明显增多,并以时间和剂量依赖性抑制宫颈癌HCEI细胞的增殖,改变细胞周期分布、促进细胞凋亡。②AG490与顺铂联合对宫颈癌HCEI细胞的抑制作用明显增强,提示AG490与顺铂联合对宫颈癌HCEI细胞的增殖抑制有协同作用。     

米非司酮联合STAT3抑制药AG490对子宫内膜异位症细胞增殖、凋亡和细胞周期的影响

目的 研究米非司酮联合p38丝裂原活化蛋白激酶（STAT3）抑制药AG490对子宫内膜异位症细胞增殖、凋亡和细胞周期的影响。方法 收集本院2020年2月～9月收治的子宫内膜异位症患者活检时的子宫内膜组织,分离人子宫内膜异位症细胞。将细胞分成对照组（正常培养）、米非司酮组(0.01mmol·L^-1米非司酮处理)、AG490组（40μmol·L-1STAT3抑制剂AG490处理）、联合组(0.01 mmol·L^-1米非司酮+40μmol·L-1STAT3抑制剂AG490处理)。用噻唑蓝实验检测细胞增殖情况;用碘化丙啶（PI）单染法检测细胞周期;用蛋白质印迹法检测蛋白表达水平;用膜联蛋白V-FITC（Annexin V-FITC）/PI双染法检测细胞凋亡情况; Transwell小室检测细胞侵袭情况。结果 对照组、米非司酮组、AG490组、联合组的子宫内膜异位症细胞存活率分别为（100.00±11.00）%,（76.56±8.94）%,（83.12±6.69）%和（50.29±6.27）%;这4组G0/G1比例分别为（42.74±4.94）%,（5...     

米非司酮联合STAT3抑制药AG490对子宫内膜异位症细胞增殖、凋亡和细胞周期的影响

目的 研究米非司酮联合p38丝裂原活化蛋白激酶（STAT3）抑制药AG490对子宫内膜异位症细胞增殖、凋亡和细胞周期的影响。方法 收集本院2020年2月～9月收治的子宫内膜异位症患者活检时的子宫内膜组织,分离人子宫内膜异位症细胞。将细胞分成对照组（正常培养）、米非司酮组(0.01mmol·L^-1米非司酮处理)、AG490组（40μmol·L-1STAT3抑制剂AG490处理）、联合组(0.01 mmol·L^-1米非司酮+40μmol·L-1STAT3抑制剂AG490处理)。用噻唑蓝实验检测细胞增殖情况;用碘化丙啶（PI）单染法检测细胞周期;用蛋白质印迹法检测蛋白表达水平;用膜联蛋白V-FITC（Annexin V-FITC）/PI双染法检测细胞凋亡情况; Transwell小室检测细胞侵袭情况。结果 对照组、米非司酮组、AG490组、联合组的子宫内膜异位症细胞存活率分别为（100.00±11.00）%,（76.56±8.94）%,（83.12±6.69）%和（50.29±6.27）%;这4组G0/G1比例分别为（42.74±4.94）%,（5...     

IL-37 对宫颈癌HeLa 细胞增殖和凋亡的影响

目的　探讨炎症抑制因子IL-37 对宫颈癌HeLa 细胞株增殖和凋亡的影响。方法　将携带有目的基因IL-37 的过表达载体转染入体外培养的HeLa 细胞，用MTT 法检测细胞的增殖情况，流式细胞仪测定细胞周期及凋亡率，以野生型HeLa 细胞以及转染空载体的HeLa 细胞作为阴性对照和空载体对照。结果　荧光显微镜观察结果显示IL-37 质粒成功转染HeLa 细胞。MTT 检测结果显示，转染后12 h 至96 h，转染组OD 值明显低于空载体对照组（P<0.01），而空载体对照组和阴性对照组的OD 值无明显差异；流式细胞仪检测测结果显示，转染组细胞早期凋亡率较空载体对照组显著升高（P<0.05），而空载体对照组和阴性对照组的早期凋亡率无显著性差异。结论　过表达IL-37 的HeLa 细胞株构建成功。IL-37 可抑制宫颈癌HeLa 的增殖并诱导其凋亡。     

miR-9对宫颈癌HeLa细胞增殖和凋亡的影响

目的 探讨miR-9对宫颈癌Hela细胞增殖和凋亡的影响.方法 通过构建miR-9低表达及过表达Hela细胞,并设置空白对照,以MTT法检测细胞数量、蛋白质印迹法检测PDCD4的表达以及流式细胞术检测细胞周期.结果 ①细胞数量:pre-miR-9转染的细胞培养48 h、72 h、96 h细胞的相对增殖活性均较空白对照组...     

AG490对肾小管上皮细胞转分化影响的实验研究

目的探讨炎症介质的特异性阻断剂AG490在白介素-1β(interleukin-1βIL-1β)诱导的高糖培养的人肾小管上皮细胞转分化中的作用。方法体外培养人肾近曲小管上皮细胞株(HKCs),随机分为高糖对照组(30mmol·L-1);高糖(30mmol·L-1)+IL-1β(5μg·L-1)组;高糖(30mmol·L-1)+IL-1β(5μg·L-1)+AG490(10μmol·L-1)组。分别于处理后24、48、72h收集细胞,采用免疫细胞化学染色和蛋白Western blot法检测细胞角蛋白-18(cytokeratin-18,CK-18)、α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)水平。结果IL-1β能使高糖培养的人肾小管上皮细胞α-SMA蛋白的合成增加,而肾小管上皮细胞的标志物CK-18的表达逐渐减少;IL-1β刺激的同时加入AG490干预能减弱IL-1β对肾小管上皮细胞α-SMA蛋白的诱导作用,并使CK-18的表达回升。结论炎症因子IL-1β能促进高糖培养的HKC发生表型转化,而炎症特异性阻断剂AG490能部分阻断IL-1β的该作用。     

黄秋葵多糖调控p73反义RNA 1T对宫颈癌细胞增殖和凋亡的影响

目的 探讨黄秋葵多糖调控p73反义RNA 1T(TP73-AS1)对宫颈癌细胞增殖和凋亡的影响,及其作用机制.方法 实验分为对照组(正常DMEM培养基),低、中、高剂量实验组(分别用含0.6,1.2,1.8 mg·mL-1黄秋葵多糖的DMEM培养基)、si-NC组(转染TP73-AS1阴性对照质粒)、si-TP73-A...     

AG490 对重症急性胰腺炎大鼠胰腺腺泡细胞凋亡的影响

摘要： 目的 探讨 AG490 对重症急性胰腺炎(SAP)大鼠胰腺腺泡细胞凋亡及凋亡基因 FasL 和 Bcl-2 表达的影响。方法 健康 Wistar 大鼠 72 只, 按随机数字表法分为对照组(24 只)、 SAP 模型组(24 只)和 AG490 治疗组(24 只)。后 2 组采用 5%牛磺胆酸钠胆胰管内逆行注入诱导 SAP 大鼠模型, 3 组大鼠均于术后 6 h、 12 h、 24 h 心脏采血, 检测血清淀粉酶。剖腹取胰腺组织, 光镜下观察胰腺组织病理改变并进行病理学评分, TUNEL 法检测胰腺腺泡细胞凋亡指数, RT-PCR 检测胰腺组织 FasL、 Bcl-2 mRNA 的表达。结果 与对照组比较, SAP 模型组大鼠胰腺病理损伤加重, 病理评分增高, 血清淀粉酶明显升高, 胰腺腺泡细胞凋亡指数升高, FasL mRNA 表达明显升高, Bcl-2 mRNA 表达明显降低(P＜0.05 或 P＜0.01)。与 SAP 模型组相比较, AG490 治疗组大鼠胰腺病理损伤明显改善, 病理评分降低,血清淀粉酶明显降低, 胰腺腺泡细胞凋亡指数升高, FasL mRNA 表达明显升高, Bcl-2 mRNA 表达明显降低(P＜0.05 或 P＜0.01)。结论 抑制 JAK/STAT3 信号通路可能通过调节凋亡相关基因, 增加胰腺腺泡细胞凋亡, 从而减轻胰腺炎症反应及病理损害。     

人参皂苷Compound K对宫颈癌细胞增殖和凋亡的影响

目的观察人参皂苷Compound K(CK)对宫颈癌细胞增殖、凋亡的影响及与细胞外信号调节激酶(ERK)信号通路的关系。方法体外培养宫颈癌细胞株HeLa细胞,低、中、高剂量实验组及对照组分别以2.5,5,10μmol·L^-1的人参皂苷CK和等量生理盐水处理,各组分别干预24,48,72 h。用活细胞计数(CCK-8)法检测宫颈癌HeLa细胞增殖情况;用Hoechst 33258染色法观察宫颈癌HeLa细胞核形态变化及凋亡情况;用蛋白质印迹(WB)法检测宫颈癌HeLa细胞磷酸化细胞外信号调节激酶1/2(p-ERK1/2)、p-c-Fos和p-c-Jun蛋白表达水平。结果干预72 h时,低、中、高剂量实验组宫颈癌HeLa细胞增殖抑制率分别为(39.73±3.22)%,(53.16±3.93)%和(71.42±4.37)%;干预72 h时,对照组和低、中、高剂量实验组宫颈癌HeLa细胞凋亡率分别为(11.24±3.56)%,(32.37±2.85)%,(56.42±3.12)%,(87.23±4.74)%;宫颈癌HeLa细胞ERK1/2蛋白相对表达量分别为0.86±0....     

黄芪多糖对前列腺癌PC3细胞增殖和凋亡的影响

目的探讨黄芪多糖对前列腺癌细胞株PC3细胞增殖和凋亡的影响。方法分别用浓度为0.5、1、2.5、5、10 mg/ml的黄芪多糖(APS)干预PC3细胞12、24、36 h后,用甲基噻唑基四唑法检测不同浓度APS对PC3细胞增殖的量效和时效关系;台盼蓝染色法测定细胞生长曲线;APS干预24 h后流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果 APS能抑制PC3细胞的增殖,呈时间与浓度依赖性,不同浓度APS组之间与不同作用时间组之间的差异均有统计学意义(P<0.05)。APS干预PC3细胞24 h后,对照组细胞凋亡率为5.01%,1 mg/ml和5 mg/ml的APS培养24 h细胞凋亡率分别为14.46%和27.71%,较对照组明显增加,且差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论APS能够抑制前列腺癌细胞株PC3细胞的增殖,并诱导其凋亡。     

山茱萸多糖对胃癌细胞增殖和凋亡的机制

目的探讨山茱萸多糖对胃癌AGS细胞增殖和凋亡的影响及分子机制。方法用不同剂量山茱萸多糖灌胃接种AGS细胞的裸鼠,检测裸鼠体内肿瘤体积;TUNEL法检测细胞凋亡指数;胃癌细胞AGS分为对照组、山茱萸多糖低、中、高剂量组、si-NC组、si-ELF3-AS1组、山茱萸多糖+pcDNA组、山茱萸多糖+pcDNA-ELF3-AS1组。MTT检测细胞增殖抑制率;流式细胞术检测细胞凋亡;RT-qPCR检测lncRNA ELF3-AS1表达水平。结果山茱萸多糖处理的裸鼠体内移植瘤体积减少,细胞凋亡指数升高(P<0.05)。山茱萸多糖处理胃癌细胞AGS后,细胞增殖抑制率升高,凋亡率升高,ELF3-AS1表达水平降低,且呈剂量依赖性(P<0.05)。胃癌细胞AGS中ELF3-AS1表达水平升高(P<0.05)。抑制ELF3-AS1表达后,细胞增殖抑制率升高,凋亡率升高(P<0.05)。ELF3-AS1过表达逆转了山茱萸多糖对胃癌AGS细胞增殖和凋亡的作用。结论山茱萸多糖可能通过下调ELF3-AS1抑制胃癌AGS细胞增殖,促进AGS细胞凋亡。     

吲哚美辛对宫颈癌Hela细胞增殖和凋亡作用的影响

目的:研究吲哚美辛对宫颈癌Hela细胞增殖、凋亡的影响。方法:以体外培养的Hela细胞为试验对象,分别用0(空白对照)、200、400、600、800、1 000μmol/L吲哚美辛作用24、48、72 h后,采用MTT法检测吲哚美辛对Hela细胞的增殖抑制率;用0(空白对照)、400、600、800μmol/L吲哚美辛作用24 h后,采用倒置显微镜观察细胞形态的改变,并用流式细胞仪检测细胞周期分布和细胞凋亡情况。结果:600、800、1 000μmol/L吲哚美辛可抑制Hela细胞的增殖,增殖抑制率与药物浓度和作用时间呈正相关。与空白对照比较,吲哚美辛可使Hela细胞形态由多角形逐渐向圆形转变且细胞呈现凋亡和坏死状态;其中细胞G0/G1期比例增加、S期比例减少,细胞凋亡率增加。结论:吲哚美辛可抑制Hela细胞增殖,诱导其凋亡,主要阻滞细胞于G0/G1期。     

蜂斗菜素对宫颈癌细胞增殖、细胞周期和凋亡的影响

目的 研究蜂斗菜素对宫颈癌细胞增殖、细胞周期和凋亡的影响及潜在机制.方法 以蜂斗菜素0μmol/L为对照,用5、15、45μmol/L的蜂斗菜素处理宫颈癌SiHa细胞,四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)检测细胞在24、48和72 h的增殖活性,蛋白质印迹法(Western blotting)检测SiHa细胞中细胞周期蛋白D...     

甘露糖抑制宫颈癌HeLa细胞增殖和诱导凋亡的影响

目的 研究甘露糖抑制宫颈癌HeLa细胞增殖和诱导凋亡及其对Wnt/β-catenin通路的影响。方法 体外培养宫颈癌HeLa细胞,分为对照组(未经任何处理)和低、中、高剂量实验组(用甘露糖浓度为5、10、25 mmol·L^-1处理细胞)。以细胞计数试剂盒8(CCK-8)和流式细胞术检测细胞增殖和凋亡情况,以蛋白质印迹法检测B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、p21、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、Wnt/β-catenin通路相关蛋白的表达。结果 对照组和低、中、高剂量实验组的细胞抑制率分别为(0.00±0.13)%、(11.25±3.42)%、(23.78±3.41)%和(35.98±4.52)%,凋亡率分别为(4.59±0.35)%、(11.45±1.32)%、(18.47±2.01)%和(25.69±2.43)%, p21蛋白相对表达水平分别为0.21±0.03、 0.34±0.04、 0.51±0.06和0.69±0.05, Bcl-2蛋白相对表达水平分别为0.89±0.06、 0.67±0.04、 0.52±0.05和0.35±0.06, Bax蛋白相对表达...     

枸杞多糖诱导T细胞增殖和对肝癌细胞的抑制作用

目的观察枸杞多糖对效应细胞的增殖和杀瘤活性的作用。方法通过密度梯度离心法分离人外周血单核细胞并培养其为树突状细胞,用冻融法制备肝癌细胞的全抗原并致敏树突状细胞 通过混合淋巴细胞实验,获取树突状细胞激活的特异性效应T细胞。用MTT法测定效应T细胞对肝癌细胞的杀伤率。观察枸杞多糖在树突状细胞的成熟及T细胞的激活、增殖和杀瘤过程中的作用。结果枸杞多糖单独对T细胞无明显的增殖能力,但能促进树突状细胞的成熟并且能增强效应T细胞的增殖能力和杀瘤活性。结论枸杞多糖能促进树突状细胞成熟和增强效应T细胞的增殖和杀伤肿瘤的活性。     

白花蛇舌草对裸鼠宫颈癌细胞增殖和凋亡的实验研究

目的：探究白花蛇舌草对宫颈癌的抑制作用及可能的分子生物学机制。方法：建立裸鼠人宫颈癌细胞移植模型及采用胃内灌药。当肿瘤生长至直径10mm时,将荷瘤鼠随机分组,比较给药组与对照组在抑瘤率、生存时间、HeLa细胞Ki-67抗原蛋白的表达率以及肿瘤组织凋亡上的差异。结果：白花蛇舌草对HeLa细胞移植瘤生长有明显抑制作用,并可诱导HeLa细胞凋亡,Ki-67蛋白的表达下降（P〈0.05）,并明显延长荷瘤小鼠的平均生存时间（P〈0.05）。结论：白花蛇舌草通过直接抑瘤增殖和诱导、促进肿瘤细胞凋亡,实现了其清热解毒、软坚散结的作用。     

枸杞多糖对人前列腺癌PC-3细胞凋亡的影响

目的研究枸杞多糖(LBP)对人前列腺癌PC-3细胞凋亡的影响。方法体外培养的人前列腺癌PC-3细胞经枸(LBP)处理后,采用MTT法测定细胞的增殖情况,流式细胞仪分析LBP对PC-3细胞周期和凋亡的影响,TUNEL法观察PC-3细胞凋亡的变化,用免疫组化法检测其Bcl-2和Bax蛋白的表达。结果LBP可明显抑制人前列腺癌PC-3细胞的生长,并能诱导PC-3细胞凋亡,凋亡率分别为8.5%、17.5%、29.5%、37.5%和41.5%,与对照组比较,差异有非常显著性(P<0.01);同时PC-3细胞Bcl-2/Bax蛋白比值显著下降,呈明显的剂量-效应关系。结论LBP对人前列腺癌PC-3细胞DNA具有损伤作用,能诱导PC-3细胞的凋亡,调节其相关基因的表达。     

过表达蛋白LATS1对宫颈癌细胞增殖和凋亡能力的影响

目的：观察过表达蛋白LATSl（Large tumorsuppressor l）对宫颈癌HeLa细胞增殖和凋亡的影响。方法购买已包装好的LATS1病毒上清和空载病毒上清,分别感染宫颈癌HeLa细胞并用Western blot检测LATS1的表达,建立稳定表达LATS1的HeLa细胞,然后通过MTT法检测过表达LATS1对增殖能力的变化;凋亡实验检测过表达LATS1对宫颈癌细胞凋亡的影响;Western blot检测过表达LATS1对与细胞增殖和凋亡相关蛋白的影响。结果成功建立稳定表达宫颈癌细胞,West－ern blot检测结果表明,与空质粒对照相比,处理组细胞LATSl蛋白明显表达升高, MTT实验结果表明过表达蛋白LATSl明显抑制宫颈癌HeLa细胞增殖,凋亡实验结果表明过表达LATSl后凋亡比率为（5.12±0.36）%,空白组为（1.34±0.51）%,两组差异有统计学意义（P＜0.05）,Western blot实验表明p-Akt、Bcl-2蛋白明显下调,Bax蛋白明显上调。结论过表达蛋白LATSl可明显抑制宫颈癌HeLa细胞增殖和促进凋亡。