大黄素对实验性自身免疫性甲状腺炎模型小鼠T细胞亚群和IFN-γ、IL-4的影响

目的大黄素对实验性自身免疫性甲状腺炎模型小鼠T细胞亚群和IFN-γ、IL-4的影响。方法通过过量碘剂诱导NOD小鼠建立EAT动物模型,造模4周后各实验组摄入不同剂量的大黄素。造模8周后检测小鼠血浆TgAb水平及甲状腺炎症程度。流式细胞术检测小鼠外周血、脾脏T细胞亚群,分析大黄素对EAT小鼠外周血、脾脏淋巴细胞IFN-γ和IL-4分泌能力的影响。结果(1)甲状腺病理学观察,大黄素实验组较模型组甲状腺淋巴细胞浸润程度减轻;分级比较有显著性差异(P0.01);(2)造模后模型组小鼠血浆Tg Ab水平较对照组明显升高[(44.16±3.59)ng/mL比(11.24±1.52)ng/mL],大黄素实验组升高幅度低于模型组[(26.58±5.24)ng/mL、(19.18±5.73)ng/mL、(23.24±5.47)ng/mL比(44.16±3.59)ng/mL],各组间有统计学差异(P0.01);(3)大黄素实验组外周血单核细胞、脾脏淋巴细胞中CD3+CD4+、CD3+CD8+T淋巴细胞的频率较对照组明显升高,外周血单核细胞[(7.72±2.92)%比(4.13±1.45)%,(4.23±1.58)%比(2.76±1.69)%];脾脏淋巴细胞[(7.51±1.31)%比(1.82±1.35)%,(5.59±1.98)%比(0.033±0.034)%],但低于模型组外周血单核细胞[(7.72±2.92)比(17.46±3.71)%,(4.23±1.58)%比(8.92±2.62)%;脾脏淋巴细胞[(7.51±1.31)%比(16.74±4.79)%,(5.59±1.98)%比(11.97±2.21)%](P0.01);而CD3+CD4+FIN-γ+、CD3+CD4+IL-4+T细胞频率高于对照组但明显低于模型组(P0.01)。结论过量碘剂诱导NOD小鼠自身免疫性甲状腺炎造模是可行的;大黄素对造模小鼠甲状腺炎有一定保护作用。大黄素通过抑制CD4+、CD8+T淋巴细胞分化并且抑制IFN-γ和IL-4的分泌,从而抑制造模小鼠的自身免疫反应。     

腺病毒介导MHC Ⅱ类分子反式激活因子突变体基因治疗小鼠实验性自身免疫性甲状腺炎

目的：观察腺病毒介导MHC Ⅱ类分子（major histocompatibility complex class Ⅱ molecules）反式激活因子突变体（CⅡTAm）基因治疗小鼠实验性自身免疫性甲状腺炎(experimental autoimmune thyroiditis, EAT)的效果，并探讨其可能的作用机制。方法：31只健康雌性CBA/J小鼠随机分成EAT模型组(n=8)、CⅡTAm治疗组（n=9）、GFP对照组（n=9）和正常对照组（n=5）。除正常对照组不作特殊处理外，其余3组均以猪甲状腺球蛋白（porcine thyroglobulin, pTg)+弗氏佐剂（complete or incomplete Freund adjuvant, CFA/IFA)建立EAT小鼠模型，CⅡTAm治疗组和GFP对照组分别静脉注射重组腺病毒Ad-CMV-CⅡTAm及Ad-GFP进行治疗，EAT模型组注射等量生理盐水。首次免疫后第29日处死小鼠，进行H-E染色观察甲状腺病理形态；免疫组织化学染色测定甲状腺MHC Ⅱ类分子表达；分析pTg刺激下脾脏淋巴细胞的增殖及其上清液中IFN-γ的分泌水平；ELISA法检测血浆中抗-pTg自身抗体滴度；流式细胞术分析外周血和脾脏淋巴细胞中CD4+ T淋巴细胞上可诱导共刺激分子（inducible costimulator,ICOS）的表达水平。结果：H-E染色结果表明，CⅡTAm治疗组甲状腺淋巴细胞浸润指数（0.3±0.5）低于EAT模型组(1.4±0.4)和GFP对照组(1.5±0.2，P<0.01）。免疫组化结果显示，EAT模型组和GFP对照组甲状腺组织有弥漫性MHC Ⅱ类分子表达，而CⅡTAm治疗组未见明显表达，正常对照组表达呈阴性。80 μg/ml pTg刺激下，CⅡTAm治疗组小鼠淋巴细胞刺激指数（SI）明显低于EAT模型组或GFP对照组（P<0.05）；培养上清各组IFN-γ分泌水平与SI结果类似（P<0.01）。CⅡTAm治疗组血浆抗-pTg自身抗体滴度显著低于EAT模型组或GFP对照组（P<0.01）；CⅡTAm治疗组外周血和脾脏CD4+ T细胞ICOS分子阳性表达率亦显著低于EAT模型组或GFP对照组（P<0.01）。结论：重组腺病毒Ad-CMV-CⅡTAm能抑制EAT小鼠甲状腺组织MHC Ⅱ类分子表达，抑制自身反应性T细胞增殖，减轻甲状腺炎性细胞浸润，降低自身抗体滴度，对EAT有一定的治疗作用。     

T淋巴细胞亚群变化在预测急性胰腺炎严重程度中的意义

目的：探讨T淋巴细胞亚群变化在预测急性胰腺炎严重程度中的意义。方法：采集120例急性胰腺炎患者的外周血标本,将其分为轻症型急性胰腺炎（mild acute pancreatitis,MAP）组、中度急性胰腺炎（moderately severe acute pancreatitis,MSAP）和重度急性胰腺炎（severe acute pancreatitis,SAP）组。分别于治疗前、治疗后采用流式细胞仪检测各组患者外周血中CD4+、CD8+T淋巴细胞亚群百分比及两者比值,评估其与急性胰腺炎严重程度之间的关系。结果：治疗前,与MAP组相比,SAP组与MSAP组患者CD4+淋巴细胞亚群百分比［（22.87 ± 3.13）%、（34.74 ± 3.25）% vs.（42.45 ± 4.23）%］及CD4+/CD8+淋巴细胞比值（0.88 ± 0.21、1.38 ± 0.35 vs. 1.86 ± 0.37）均明显降低（P < 0.05）;与MSAP组相比,SAP组CD4+淋巴细胞亚群百分比［（22.87 ± 3.13）% vs. （34.74 ± 3.25）%］及CD4+/CD8+淋巴细胞比值（0.88 ± 0.21 vs.1.38 ± 0.35）均明显降低（P < 0.05）。治疗后,SAP组、MSAP组患者CD4+淋巴细胞亚群百分比［（42.87 ± 5.13）%、（44.74 ± 6.53）%］及CD4+/CD8+淋巴细胞比值（2.14 ± 0.56、2.20 ± 0.57）均较治疗前明显升高（P < 0.05）。结论：SAP、MSAP患者CD4+淋巴细胞亚群百分比及CD4+/CD8+比值明显下降,经治疗病情好转后,上述指标较治疗前明显升高,CD4+淋巴细胞亚群及CD4+/CD8+比值变化在判断急性胰腺炎的严重程度方面有一定价值。     

幼年特发性关节炎（少关节型）患儿外周血CD4+CD25+调节性T细胞的表达

目的　探讨幼年特发性关节炎（少关节型）（JIA）患儿外周血CD4+CD25+调节性T细胞的表达及其意义。方法　采用免疫荧光抗体标记法及流式细胞仪对23例JIA患儿和26例健康儿童外周血CD4+CD25+、CD4+淋巴细胞亚群的细胞比率进行检测。 结果　JIA（少关节型）患儿外周血CD4+CD25+细胞的百分率显著低于正常对照组[（6.44±1.27 ）比（8.23±1.33）,P<0. 05],且CD4+细胞的百分率明显低于正常对照组[（33.64±7.63 ）比（46.79±5.02）,P<0. 05]。结论　外周血CD4+CD25+细胞和CD4+细胞参与了JIA（少关节型）的发病。 【关键词】幼年特发性关节炎 CD4+CD25+T淋巴细胞 CD4+T淋巴细胞 儿童     

HBV转基因小鼠体内淋巴细胞表型特点及干扰素α对其的影响

目的探讨乙型肝炎病毒（HBV）转基因小鼠体内淋巴细胞表型特点及干扰素α对其病毒学指标和免疫细胞表型的影响。 方法选取HBV 转基因小鼠和野生型（WT）小鼠,采用ELISA检测HBV转基因小鼠血清HBsAg和HBcAb水平及两组小鼠血 清IL-21及IL-6水平,分离肝、脾以及外周血淋巴细胞,流式细胞术检测CD4+T和CD19+B细胞频数;给予9只HBV转基因小鼠 重组鼠源性干扰素α（rmIFN-α）皮下注射,同时9只HBV转基因小鼠相应注射PBS,观察其血清HBsAg、HBV DNA、IL-6、IL-21 水平的变化以及外周血CD4+T和CD19+B细胞频数变化。结果HBV转基因小鼠的血清HBsAg水平较高并能检测到HBcAb, 其血清IL-21及IL-6水平较WT小鼠显著升高（P<0.05）;HBV转基因小鼠外周血、肝脏以及脾脏淋巴细胞中CD4+T细胞频数较 WT小鼠均明显低下（P<0.05）,但其肝脏CD19+B细胞频数明显高于WT小鼠（P<0.05）;HBV转基因小鼠肝内CD4+T细胞频数 与血清HBsAg水平呈负相关,而肝内CD19+B细胞频数与血清HBcAb水平呈正相关;rmIFN-α处理可显著提高HBV 转基因小 鼠外周血CD4+T和CD19+B细胞频数以及血清IL-6水平（P<0.05）。结论HBV转基因小鼠体内淋巴细胞亚群频数异常,外源性 干扰素α可通过调节淋巴细胞亚群频数发挥免疫调节作用。     

大黄素调控NLRP3/Caspase-1信号通路对实验性自身免疫性甲状腺炎大鼠的免疫调节作用

目的 分析大黄素调控含有pyrin结构域的蛋白3（NLRP3）/半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1（Caspase-1）信号通路对实验性自身免疫性甲状腺炎（EAT）大鼠的免疫调节作用。方法 选取SPF级6～8周龄SD大鼠60只,12只作为对照组,其余48只建立EAT模型,建模成功后剔除死亡大鼠,将剩余40只大鼠随机分为模型组、大黄素低剂量组、大黄素中剂量组、大黄素高剂量组各10只。建模成功后开始灌胃,对照组、模型组给予5 mg/kg生理盐水,大黄素低剂量组给予生理盐水+15 mg/kg大黄素,大黄素中剂量组给予生理盐水+75 mg/kg大黄素,大黄素高剂量组给予生理盐水+150 mg/kg大黄素。观察每组甲状腺球蛋白抗体（TgAb）、白细胞介素-4（IL-4）、γ干扰素（IFN-γ）、CD3⁺CD4⁺、CD3⁺CD8⁺、NLRP3/Caspase-1信号通路蛋白表达量。结果 与对照组相比,其他4组TgAb、IL-4、IFN-γ、CD3⁺CD4⁺、CD3^+<...     

人子宫颈癌异常表达程序性死亡配体-1并促CD4+ T和CD8+ T细胞凋亡

目的：探讨程序性死亡配体－１（Programmed death ligand-1,PD-L1）在人子宫颈癌的表达及其与肿瘤内CD4+ T和CD8+ T细胞浸润的相关性,体外实验观察重组人PD-L1蛋白对宫颈癌患者外周血T细胞凋亡的影响。方法：采用免疫组化SP法检测PD-L1在10例正常人宫颈组织和67例宫颈癌组织中的表达以及死亡受体-1（Programmed death receptor-1,PD-1）在宫颈癌内浸润淋巴细胞的表达;TUNEL法检测肿瘤内浸润的淋巴细胞凋亡;免疫荧光分析宫颈癌内浸润的CD4+ T和CD8+ T淋巴细胞数量;流式细胞术分析PD-L1促进宫颈癌患者外周血活化CD4+ T和CD8+ T细胞凋亡情况。结果：正常子宫颈上皮不表达PD-L1;宫颈癌PD-L1的表达率为70%（47/67）。部分宫颈癌内浸润的淋巴细胞表达PD-1,且淋巴细胞存在凋亡现象。PD-L1阳性宫颈癌肿瘤内浸润的CD8+ T细胞数量明显减少（P＜0.05）。体外实验发现PD-L1与健康人或宫颈癌患者外周血活化T细胞混合培养48 h后,T细胞凋亡率明显高于空白组,２组平均凋亡率分别为（32.8±1.4）%、（38.3±1.5）%（P＜0.05）和（27.7±1.3）%、（30.9±1.9）%（P＜0.05）;抗PD-1抗体使PD-L1诱导的T细胞凋亡率下降,分别为（29.8±1.6）%和（31.6±1.4）%（P >0.05）。PD-L1对人外周血活化CD4+ T和CD8+ T细胞均有促凋亡作用。结论：人子宫颈癌异常表达PD-L1与肿瘤内浸润的淋巴细胞凋亡及CD8+ T细胞数量减少有关。PD-L1经PD-1促进活化的CD4+ T和CD8+ T细胞凋亡。     

雷帕霉素对哮喘小鼠CD4+CD25+调节性T细胞的作用

目的：建立哮喘小鼠动物模型并给予吸入雷帕霉素治疗,观察雷帕霉素治疗哮喘的效果及其对CD4+CD25+调节性T细胞（regulatory T cells,Treg）比例及扩增能力的影响,探讨雷帕霉素治疗哮喘的相关机制。方法：采用随机数字表法将30只雌性BALB/c 小鼠分成3组,每组10只,分别为：对照组、模型组和雷帕霉素治疗组。采用Underwood方法对小鼠肺组织进行评分;采用流式细胞术观察小鼠外周血和肺组织中CD4+CD25+Treg细胞比例;不同浓度（50、100 nmol/L）雷帕霉素处理小鼠CD4+ T细胞后,采用流式细胞术和RT-PCR方法分别检测CD4+CD25+Treg细胞形成比例和Foxp3 mRNA表达情况,观察雷帕霉素对小鼠的影响。结果：与模型组相比,雷帕霉素治疗能够显著改善小鼠肺组织病理评分情况;雷帕霉素治疗后,与模型组相比,外周血单个核细胞和肺组织中CD4+CD25+Treg均显著升高（P<0.01）;50、100 mol/L雷帕霉素处理小鼠CD4+T细胞后,CD4+CD25+Treg细胞比例分别为（7.47±1.84）%和（10.93±2.74）%,与对照组［（4.84±0.76）%］相比,雷帕霉素处理可显著促进CD4+CD25+Treg细胞增殖（P<0.01）;RT-PCR结果与流式细胞结果一致,雷帕霉素处理可显著促进CD4+T细胞中Foxp3的表达（P<0.01）。结论：雷帕霉素可能通过促进CD4+CD25+Treg细胞增殖,增加哮喘小鼠外周血和肺组织中CD4+CD25+Treg细胞比例,进而对小鼠哮喘发挥治疗作用。     

Notch1信号通路通过调控Th17细胞参与实验性自身免疫性甲状腺炎的发生和发展

目的 探讨Notch1信号通路是否通过调控辅助性T细胞17 (Th17)参与实验性自身免疫性甲状腺炎（EAT）的发生和发展。方法 将24只小鼠随机平均分为NC组、EAT-A组（给予猪甲状腺免疫球蛋白多点皮下注射）、EAT-B组（猪甲状腺免疫球蛋白多点皮下注射前给予γ分泌酶抑制剂腹腔注射）。HE染色观察甲状腺内淋巴细胞浸润程度;流式细胞术检测小鼠脾脏单核细胞（SMC）悬液中Th17细胞比例;ELISA法检测血清甲状腺球蛋白（TgAb）滴度和SMC培养上清白细胞介素-17A (IL-17A)浓度;实时PCR分析脾细胞中Notch1、Hes1、RORγt和IL-17A mRNA表达水平;Western blotting检测脾脏组织中IL-17A蛋白表达水平。结果EAT-A组和EAT-B组小鼠甲状腺中有不同程度淋巴细胞浸润,与NC组相比血清TgAb滴度显著升高（P <0.01）。EAT-A组和EAT-B组小鼠Notch1、Hes1、RORγt和IL-17A mRNA表达,以及SMC中Th17细胞比例、IL-17A浓度、IL-17A蛋白表达水平均高于NC组（均P <0.01）。EAT...     

Lewis肺癌小鼠脾脏CD4~+ CD25~+调节性T细胞和TGF-β1与肺癌的相关性

目的:探讨Lewis肺癌模型小鼠脾脏组织中CD4+CD25+调节性T细胞和TGF-β1的表达水平与肺癌发生的关系。方法:采用流式细胞仪检测CD4+CD25+调节性T细胞的比例,ELISA法检测TGF-β1的表达水平。结果:荷瘤小鼠CD4+CD25+调节性T细胞表达水平为(21.91±12.34)%,高于对照组的(14.39±4.51)%(P<0.05),荷瘤小鼠TGF-β1表达水平(3.39±1.62)μg/L,高于对照组的(2.47±0.35)μg/L(P<0.05)。结论:荷瘤小鼠CD4+CD25+调节性T细胞比例和TGF-β1表达水平增高,提示二者可能参与Lewis肺癌的发生。     

人免疫重建NOD/SCID小鼠模型的建立

目的探讨NOD/SCID（nonobese diabetic/severe combined immunodeficien）t小鼠人免疫重建模型的建立方法和免疫特性.方法 16只NOD/SCID小鼠随机分成实验组和对照组,每组8只.Ficoll密度梯度离心法分离人外周血单个核细胞（peripheral blood mononuclear cell,PBMC）,通过腹腔注射移植给实验组小鼠,空白对照组小鼠每只腹腔注射无菌PBS,第4、8和12周时,流式细胞术检测小鼠外周血中人的CD3＋T、CD19＋B淋巴细胞,ELISA法测定小鼠血清中人IgG含量,免疫组织化学染色检测小鼠脾脏和肝脏中人CD3＋T、CD19＋B淋巴细胞浸润情况.结果移植PBMC 4周后,实验组NOD/SCID小鼠外周血中人CD3＋T、CD19＋B的细胞分别为85.6%、76.7%,并且在小鼠脾脏组织中也可以检测到人CD3 T、CD19 B淋巴细胞.移植4、8及12周后小鼠血清中人IgG含量分别达到（863±12.5）μg/mL、（1217±16.7）μg/mL、（958±13.1）μg/mL.结论用人外周血PBMC经腹腔注射可以成功建立人免疫重建NOD/SCID小鼠模型,方法简便可靠.     

大黄素对盲肠结扎穿孔小鼠CD4+、CD8+T细胞的影响

目的 观察大黄素对盲肠结扎穿孔小鼠细胞CD4⁺、CD8⁺ T细胞比率的影响。方法 雌性小鼠共48只，按随机数字表法分为正常组、假手术组、盲肠结扎组、大黄素组。各组在造模前72h,灌胃大黄素溶液或0.9%氯化钠溶液，术后6h、12h检测小鼠外周血中性粒细胞计数、淋巴细胞计数、CD4⁺、CD8⁺ T细胞比率。结果 不同组小鼠与正常组比较：假手术组小鼠术后6h、12h中性粒细胞计数、淋巴细胞计数、中性粒细胞与淋巴细胞比值(neutrolphil to lymphocyte ratio, NLR)、CD4⁺ T细胞比率、CD8⁺ T细胞比率、CD4⁺/CD8⁺比值差异均无统计学意义(P>0.05);盲肠结扎组小鼠术后6h中性粒细胞计数(P=0.008)、NLR(P=0.002)、CD8⁺ T细胞比率(P=0.014)显著升高，淋巴细胞计数(P<0.001)、CD4⁺...     

急性心肌梗死患者外周血粘附分子表达及T淋巴细胞亚群变化

目的:观察急性心肌梗死患者外周血粘附分子CD11b和CD54及T淋巴细胞亚群CD4、CD8及CD4/CD8的变化。方法:流式细胞仪技术。结果:急性心肌梗死患者外周血CD11b+、CD54+细胞明显高于对照组。对照组CD11b+细胞(45.6±9.2)％;CD54+细胞(4.5±2.3)％。实验组CD11b+细胞(81.51±11.65)％;CD54+细胞(17.88±5.32)％,P<0.01。CD4+、CD8+细胞及CD4+/CD8+比值明显低于对照组。对照组CD4+细胞(49.3±1.1)％;CD8+细胞(24.2±1.95)％;CD4+/CD8+为(2.4±0.2)。实验组:CD4+细胞(31.5±6.2)％;CD8+细胞(22.62±5.7)％;CD4+/CD8+为(1.37±0.55),P<0.01。结论:急性心肌梗死患者存在某种程度的细胞免疫功能紊乱,表现为粘附分子表达增多,而T淋巴细胞亚群中CD4+、CD8+表达降低,CD4+、CD8+比值下降。     

hu-PBL-SCID人鼠嵌合体细胞免疫的建立及其免疫功能检测

目的：探讨腹腔注射人外周血CD4＋T淋巴细胞后,SCID小鼠能否重建人的细胞免疫系统,并观察重建后免疫系统的特点与功能。方法：从人外周血分离得到CD4+T淋巴细胞,腹腔注射至SCID小鼠体内,并予以rIL-2刺激。注射细胞6周后,分批处死动物,用PCR和免疫组织化学法分别观察SCID小鼠是否表达人的淋巴细胞DNA 及其T,B淋巴细胞表型;移植异种移植物后测定血浆中人IL-2,TNF-α,INF-γ含量。结果：腹腔注射人外周血CD4+T淋巴细胞后, SCID小鼠脾脏体积增大;外周血PCR扩增可见人淋巴细胞HLA-II恒定区DNA片段;肝、脾免疫组织化学染色可见到大量的人CD4+T淋巴细胞,而没有CD8＋,CD19＋T淋巴细胞;移植后重建SCID小鼠血清中可检测到人IL-2,INF-γ。结论：腹腔注射人外周血CD4+T淋巴细胞可选择性重建SCID小鼠人细胞免疫系统;方法简单、迅速、供体来源广。     

牡蛎肽对免疫抑制小鼠免疫功能的影响

目的：探讨牡蛎肽对免疫抑制小鼠的免疫调节作用及可能机制。方法：以环磷酰胺（cyclophosphamide,CTX）致免疫低下雌性ICR小鼠为动物模型,观察不同剂量牡蛎肽（0.5 g/kg低剂量组、1.0 g/kg中剂量组、2.0 g/kg高剂量组）干预15 d后对小鼠体重、免疫器官相对重量、免疫器官显微结构、外周血白细胞数目、T淋巴细胞亚群百分比、血清中的细胞因子浓度以及骨髓有核细胞数和DNA含量的影响。结果：腹腔注射CTX模型组小鼠与对照组相比,胸腺和脾脏萎缩,显微结构紊乱,外周血白细胞数目降低（P=0.04）,外周血CD3+T淋巴细胞百分比下降（P=0.003）,CD8+T淋巴细胞百分比下降（P=0.002）,外周血中IL-5浓度显著升高（P<0.01）,小鼠骨髓有核细胞浓度及骨髓DNA含量降低（P=0.04,P<0.01）。牡蛎肽灌胃组小鼠的胸腺和脾脏显微结构恢复正常,高剂量牡蛎肽灌胃组小鼠的外周血白细胞数目与模型组相比升高（P=0.003）,中剂量（P=0.04）和高剂量（P=0.02）的牡蛎肽灌胃组小鼠外周血CD3+T淋巴细胞百分比与模型组相比升高,高剂量的牡蛎肽灌胃组小鼠外周血CD8+T淋巴细胞百分比与模型组相比升高（P=0.002）,各剂量牡蛎肽灌胃组的小鼠外周血中IL-5浓度与模型组小鼠相比显著降低（P值均<0.01）,高剂量牡蛎肽灌胃组的小鼠外周血中IL-17浓度与对照组相比明显降低（P=0.03）,各剂量牡蛎肽灌胃组的小鼠骨髓有核细胞浓度与模型组相比均明显升高（低剂量组vs. 模型组,P=0.04;中剂量组vs. 模型组,P=0.02;高剂量组vs. 模型组,P=0.01）,小鼠骨髓DNA含量与模型组相比也均明显升高（P值均<0.01）。结论：牡蛎肽可改善CTX所致免疫低下小鼠紊乱的免疫器官结构,恢复CTX造成的小鼠T淋巴细胞比例失调及细胞因子紊乱,升高骨髓有核细胞数及骨髓DNA含量,从而增强机体免疫功能。     

脾脏CD4^＋T、CDl9^＋B淋巴细胞凋亡在狼疮性BXSB小鼠发病机制中的意义

目的对♀、♂狼疮性BXSB小鼠外周血T、B淋巴细胞分布及脾脏T、B淋巴细胞凋亡进行比较探讨脾脏CD4^＋T、CDl9^＋B淋巴细胞凋亡在狼疮性BXSB小鼠发病机制中的意义。方法运用流式细胞术、免疫双荧光染色法检测外周血CD4^＋T、CD8^＋T、CDl9^＋B细胞分布及脾脏CD4^＋T、CDl9^＋B细胞凋亡;直接免疫荧光法观察♀、♂狼疮性BXSB小鼠肾脏免疫组化。结果与早BXSB小鼠比较,6BXSB小鼠外周血CD4^＋T、CD8^＋T细胞分布明显降低（P〈0．01）,外周血CDl9^＋B细胞分布及脾脏CD4^＋T、CDl9^＋B凋亡率明显升高（P〈0．01）;6BXSB小鼠绝大多数肾小球毛细血管襻上可见大量IgG呈片状沉积,而早BXSB小鼠肾脏几乎无IgG沉积。结论6BXSB小鼠发病较早BXSB小鼠重,细胞凋亡在BXSB小鼠发病机制中具有重要意义。     

CD4+CD25+调节性T细胞对直肠癌过继免疫治疗效应细胞的影响和作用

目的 探讨CD4+CD25+调节性T细胞（Treg）在直肠癌过继免疫治疗中对免疫杀伤细胞的负性调节作用。方法 利用流式细胞仪分别检测15例直肠癌患者和健康志愿者外周血中CD4+CD25+调节性T细胞的含量;分离提取直肠癌患者外周血CD4+T细胞,免疫磁珠法去除 CD4+CD25+调节性T细胞,同灭活的LOVO直肠癌细胞珠共培养并扩增为肿瘤抗原特异性CTL,以LOVO细胞为靶细胞行肿瘤杀伤实验,观察各实验组CTL对肿瘤细胞的杀伤效应。结果 直肠癌患者外周血中CD4+CD25+调节性T细胞占CD4+T细胞总数的（11.12±0.57）%,显著高于健康对照组（8.77±0.66）%（t=2.687,P＝0.012）;去除Treg细胞后诱导产生的抗原特异性CTL对靶细胞的杀伤效率为（33.74±4.42）%,显著高于未去除Treg细胞的对照组CTL的杀伤效率[(17.39±2.54)%; t=3.206, P=0.0034]。结论　直肠癌患者外周血中调节性T细胞含量明显增高,并且对肿瘤抗原诱导的CTL的免疫杀伤功能具有明显抑制作用。     

淋巴细胞检查在慢性阻塞性肺疾病(COPD)中的临床应用

目的:探讨慢性阻塞性肺疾病慢(COPD)患者T淋巴细胞亚群的变化及其临床意义。方法:将100例COPD患者及30例门诊体检健康者进行T细胞亚群检测。T淋巴细胞亚群(CD3+、CD4+、CD8+细胞)比例采用直接免疫荧光标记的流式细胞分析测定。结果:100例COPD患者组外周血中,CD3+细胞比例(68.23±7.32),与30例对照组CD3+细胞比例(67.57±4.85)差异无统计学意义(P>0.05)。CD4+细胞比例(35.77±4.71)及CD4+/CD8+比值(1.25±0.36)都有降低,与30例对照组比较CD4+细胞比例(40.85±3.58),CD4+/CD8+比值(2.09±0.45)差异有统计学意义(P<0.001)。而CD8+细胞比例(25.32±6.15)提高,和对照组(20.28±3.20)比较,差异有统计学意义(P<0.001)。结论:COPD患者存在细胞免疫功能异常,CD4+T淋巴细胞比及CD4+/CD8+比值下降,而CD8+T淋巴细胞免疫反应加强,是COPD发病机制之一。     

系统性红斑狼疮患者外周血调节性T细胞与IL-10及TGF-β_1的检测

目的:研究系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞(regulation T cells,Tr细胞)及相关细胞因子的变化,分析它们在SLE发病机制中的作用。方法:收集SLE患者及健康对照组外周抗凝静脉血,分离纯化T淋巴细胞。PE标记的抗CD4单抗,FITC标记的抗CD25单抗,作双色流式细胞术,分析SLE患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞百分率,ELISA法检测调节性T细胞相关细胞因子的表达。结果:SLE患者外周血Tr细胞的数量明显低于正常对照组[(2.83±1.05)%vs(5.07±0.59)%,P<0.05];患者血清中IL-10、TGF-β1的含量均低于正常对照组,差异有显著性[IL-10:(29.48±13.69)pg/mlvs(43.10±14.95)pg/ml,P<0.05;TGF-β1:(170.04±91.58)pg/mlvs(254.75±130.41)pg/ml,P<0.05]。患者外周血Tr细胞的比例与血清中IL-10、TGF-β1的含量呈正相关(r1=0.53,r2=0.64,P<0.05)。结论:SLE患者外周血存在细胞免疫功能失调,CD4+CD25+调节性T细胞数量与功能状态发生改变,T淋巴细胞耐受机制的破坏可能与SLE的免疫学发病机制有关。