腹膜透析滤出液外泌体miR-200a在不同腹膜转运特性患者中的表达差异及其生物学功能预测

目的·提取和鉴定腹膜透析滤出液(peritoneal dialysis effluent,PDE)外泌体,比较不同腹膜转运特性患者PDE外泌体miR-200a的表达水平,预测其潜在靶基因及参与的生物学过程.方法·将20例腹膜透析(peritoneal dialysis,PD)患者按照腹膜平衡实验(peritoneal ...     

外泌体蛋白质组学分析在肾脏疾病诊断中的研究进展

外泌体是由B细胞、T细胞等细胞释放并存在不同体液中的外囊泡,其携带的蛋白质可以在细胞间转运,参与细胞的通信、物质转运以及生化组成,是目前精准医学的研究热点.外泌体蛋白质在多种人类疾病诊疗中占有重要地位,而肾脏疾病具有发病机制复杂、诊断难等特点,所以肾脏穿刺仍是诊断肾脏疾病的金标准,但因为属于侵入性操作故不作为诊断的首选...     

新生与成年大鼠心脏成纤维细胞来源外泌体蛋白质组学差异分析

目的 幼体心脏具有再生修复功能,通过分析新生大鼠与成年大鼠心脏成纤维细胞来源外泌体的差异蛋白,从分子水平上探讨心肌受损后可能的治疗靶点。方法 分别从新生和成年大鼠心脏成纤维细胞中分离出外泌体,并提取蛋白质进行高效液相色谱法（high performance liquid chromatography,HPLC）和液相色谱串联质谱法（liquid chromatography coupled to tandem mass spectrometry,LC-MS/MS）分析,鉴定差异表达的蛋白质。使用DAVID数据库对差异表达蛋白基因进行基因本体论（Gene Ontology,GO）和京都基因与基因组百科全书（kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG）通路分析。并进一步使用STRING数据库和Cytoscape软件进行蛋白质相互作用网络（protein-protein interaction,PPI）分析,以筛选出关键基因。结果 在新生大鼠中共发现241个差异表达蛋白,其中上调表达的蛋白有117个,下调表达的蛋白有124个。GO分析显示上调表达...     

胰腺癌不同进展期血清外泌体蛋白质组学分析

目的 筛选健康对照与不同进展期胰腺癌患者的血清外泌体差异蛋白质,绘制差异蛋白质表达图谱,并分析差异蛋白质参与的生物学过程。方法 采用非标记定量蛋白质组学进行外泌体蛋白质检测,筛选差异蛋白质并进行生物信息学分析;利用蛋白免疫印迹对与胰腺癌进展相关的蛋白质进行血清学验证。结果 在对照组、胰腺癌未转移组和转移组样品中共检测到2 242个蛋白质。通过不同分组差异蛋白质分析,共鉴定出664个差异具有统计学意义的蛋白质,主要参与囊泡介导转运、局灶黏附、细胞外基质(ECM)受体相互作用等信号通路。此外,鉴定到在3组间差异均有统计学意义的蛋白质5个,验证发现富亮氨酸α2糖蛋白1(LRG1)在胰腺癌转移组外泌体中表达量较高。结论 对照组、胰腺癌未转移组和转移组间蛋白质表达存在差异,差异蛋白质主要富集于局灶黏附、细胞外基质受体相互作用等信号通路,且在3组间表达均有差异的外泌体蛋白质LRG1可能成为监测胰腺癌进展的血清学标志物。     

基于DIA LC-MS对Ⅲ期食管鳞癌和食管良性疾病患者外周血外泌体差异蛋白的研究

目的 研究Ⅲ期食管鳞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)患者与食管良性疾病患者外周血外泌体蛋白组学的差异.方法 基于数据非依赖性采集高分辨率色谱-质谱技术(data independent acquisition liquid chromatography-mass sp...     

腹膜透析患者体质量指数与腹膜透析充分性的关系

目的 探讨腹膜透析患者体质量指数(BMI)与腹膜透析充分性的关系。方法 回顾性分析2016年1月—2020年5月在苏州大学附属第一医院肾内科行腹膜透析并规律随访的282例患者。按BMI分为低体质量组(BMI<18.5 kg/m²)、正常体质量组(18.5～23.9 kg/m²)、超体质量组(24～27.9 kg/m²)和肥胖组(BMI≥28 kg/m²),连续观察12个月,收集临床资料并进行统计学分析。结果 4组患者的BMI、糖尿病、增加透析剂量、增加腹膜透析液浓度、腹膜炎发生率比较,差异有统计学意义(P <0.05)。低体质量组、正常体质量组、超体质量组、肥胖组患者腹膜透析开始后1个月、6个月及12个月Kt/V、D/Pcr比较,采用重复测量设计的方差分析,结果：(1)不同时间点Kt/V、D/Pcr有差异(F=2.115和2.384,P=0.144和0.589);(2)4组患者的Kt/V、D/Pcr有差异(F=4.151和0.286,P=0.033和0.834);(3)4组患者的Kt/V...     

持续非卧床腹膜透析对尿毒症患者微量元素的影响

目的 探讨持续非卧床腹膜透析（CAPD）对尿毒症患者微量元素的影响。方法 用火焰及无火焰原子吸收法检测30例尿毒症患者行持续非卧床腹膜透析前及透析1月后血清铜、锌、铁的含量及腹膜透析透出液中铜、锌、铁、钙、镁、磷、钾元素的含量，分析腹膜透析前后尿毒症患者血清及透出液中微量元素的变化。结果 尿毒症患者透析后血清铁及锌的浓度均明显高于透析前（P〈0．05），而血清铜透析前后无明显差异（P〉0．05）。腹膜透析透出液中铜、锌、镁、钾、钙、磷含量透析前后有显著性差异（P〈0．05），而腹膜透析透出液中铁浓度透析前后无明显差异（P〉0．05）。结论 经CAPD治疗后尿毒症患者铜、锌、铁、磷、钾的异常代谢可得到部分纠正。     

非小细胞肺癌外泌体的研究进展

外泌体是具有脂质双层膜结构的纳米囊泡,含有大量生物活性物质。非小细胞肺癌(NSCLC)的外泌体,通过与肿瘤微环境中的其他细胞相互作用,具有调节肿瘤病理进程、血管生成、转移和免疫逃逸等生物学功能。NSCLC外泌体中的特异性蛋白质和微RNA(miRNA)存在差异性表达,可作为诊断和预后的生物标志物,具有较大的潜在临床应用价值。目前,NSCLC外泌体中对肺癌发生、发展起关键作用的成分仍待明确,外泌体的应用标准化等问题是临床应用亟待解决的问题。     

肝癌细胞外泌体的摄取与作用研究

目的 目前不同类型细胞对同一种外泌体摄取差异性比较的报道尚不多见,为进一步明确肝癌细胞外泌体的信息转运机制和生物学功能,文中旨在通过研究不同类型细胞对肝癌外泌体摄取的差异,探讨肝癌外泌体对不同肿瘤细胞增殖的影响和对肝细胞的影响.方法 用超高速离心法提取肝癌外泌体并通过透射电镜、BCA、Western blot验证;利用...     

主动脉夹层患者尿液来源外泌体不同分离方法的比较

目的 探讨分离主动脉夹层患者尿液来源外泌体的适宜方案。方法 收集主动脉夹层患者尿液,采用超速离心法、透析超滤法和沉淀试剂盒法分离提纯尿液中的外泌体。在生物透射电子显微镜下观察尿液外泌体的形态,用纳米颗粒跟踪分析仪检测其粒径大小、颗粒分布与浓度。结果 经过表征,3种方法获得的尿液外泌体特征如下：（1）超速离心法获得的尿液外泌体具有半杯托状或凹陷的半球形结构;粒径较大,分布较均匀;粒径范围较宽,为（236.4±46.5）nm;浓度较低,为（2.82±0.21）×10¹²个/mL;（2）透析超滤法获得的尿液外泌体形态较好,且数量多;粒径较小,分布较集中;粒径范围较窄,为（128.7±6.3）nm;浓度较大,为（2.16±0.15）×10¹⁴个/mL;（3）沉淀试剂盒法获得的产物在生物透射电子显微镜下未见明显的外泌体结构。结论 主动脉夹层患者采用透析超滤法分离获得的尿液外泌体浓度较高,在对外泌体的纯度要求不是特别高的情况下比较适宜。     

腹膜转运特性对非糖尿病腹膜透析患者营养状态的影响

目的探讨尿毒症腹膜转运特性对非糖尿病腹膜透析患者营养的影响。方法根据腹膜平衡试验（PET）,将31例腹膜透析患者腹膜分为低转运（L）、低平均转运（LA）、高平均转运（HA）、高转运（n）4种类型,比较4种转运特性腹膜透析患者腹透6个月后血清白蛋白（ALB）、血清转铁蛋白（TF）、血红蛋白（Hb）、主观综合性营养评倘法（SGA）。结果高转运腹膜组与低转运、低平均转运、高平均转运组比较,ALB、TF、Hb、SGA均显著降低（P〈0．05）;高转运腹膜组与低转运组比较,ALB、TF、、SGA均显著降低（P〈0．05）。结论在溶质清除相同的条件下,腹膜转运性高的腹透患者营养状况明显差于腹膜转运低的腹透患者。     

SLE患者血清外泌体环状RNA的差异表达分析

目的 采用测序技术分析系统性红斑狼疮(SLE)患者血清外泌体中差异表达的环状RNA(circRNA),为进一步探索SLE发病机制以及环状RNA作为SLE诊断生物标志物奠定基础.方法 选取10例SLE患者(SLE组)及10例正常对照者(NC组)为研究对象,收集外周静脉血并分离血清,提取外泌体,然后提取外泌体中的circR...     

持续性非卧床腹膜透析并发血性透出液——附6例报告

29例持续性非卧床腹膜透析(CAPD)病人161个透析月中,有6例共发生18次自发肉眼性血性透出液,其诱因分别为月经5例次、腹膜炎1例次、月经伴腹膜炎1例次、体力活动过多6例次和原因不明5例次。18次血性透出液预后良好。本文资料表明血性透出液并非CAPD少见并发症,单纯性腹膜炎也可成为血性透出液的诱因。     

外泌体在非小细胞肺癌中的研究现状及进展

外泌体是一种由脂膜包被的、由大多数活细胞分泌的囊泡小体,携带有大量的miRNA和其他的核酸、蛋白等物质。外泌体中的内含物能够用于肺癌的诊断,且与肺癌细胞的生物学功能有关。在肺癌的发生发展过程中,癌细胞来源的外泌体既能够直接影响癌细胞的生物学功能,也能够通过影响巨噬细胞、成纤维细胞、内皮细胞等其他细胞,进而间接促进肿瘤生长。了解外泌体与肺癌细胞的分子机制能够为肺癌的早期诊断与精准治疗提供新的契机,有望使其成为肺癌诊断的有效标志物和治疗的潜在靶点。本文就目前外泌体在肺癌中的相关研究进程展开综述。     

连续性非卧床腹膜透析患者腹膜转运类型与营养状况的关系

目的 探讨连续性非卧床腹膜透析(CAPD)患者腹膜转运类型与营养状况之间的关系.方法 选取106例CAPD患者为研究对象,根据腹膜转运功能分为高转运组(H组)和低转运组(L组),再根据总的尿素清除率(Kt/V)和总肌酐清除率(Ccr)分为透析充分组(HA组、LA组)和透析不充分组(HI组、LI组),根据蛋白质呈现率(nPNA)、清蛋白、主观综合评价法(SGA)对患者的营养状况进行评估.结果 H组和L组患者的营养不良发生率间差异有统计学意义(P＜0.01);Kt/V与血清蛋白、nPNA均呈正相关(P＜0.05);H组与L组的总Kt/V、总肌酐清除率、血清蛋白、透析液清蛋白间差异均有统计学意义(P＜0.05),而nPNA间差异无统计学意义(P＞0.05).结论 腹膜透析高转运类型者较低转运者营养状况差,但高转运者中Kt/V达标者的营养状态较未达标者明显改善.     

细胞外泌体蛋白AGR2表达差异与上皮性卵巢癌获得性耐药关系及机制研究

目的:探讨细胞外泌体蛋白AGR2表达差异与上皮性卵巢癌获得性耐药的关系。方法:用不同浓度顺铂(6、12、18、24μg/mL)处理细胞,筛选出大鼠卵巢癌耐药细胞株,MTT法检测细胞存活率。用超速差速离心法获得外泌体蛋白,纳米流式检测外泌体蛋白的粒径大小及颗粒浓度。通过qRT-PCR技术比较两组细胞系AGR2相关mRNA的转录情况,并通过Western blot实验对外泌体中AGR2蛋白表达水平进行比较,分析细胞外泌体中蛋白AGR2表达差异与上皮性卵巢癌获得性耐药的关系。结果:NUTU-19肿瘤细胞生存率与化疗药浓度呈负相关;药物浓度的升高与耐药细胞株(NUTU-19R)死亡率相关性不明显。NUTU-19R细胞株AGR2相关mRNA表达水平高于NUTU-19细胞株,差异有统计学意义(P<0.05);NUTU-19R细胞株AGR2蛋白表达高于NUTU-19细胞株,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:细胞外泌体蛋白AGR2高表达促进了上皮性卵巢癌获得性耐药的形成。