一氧化碳、甲苯、正壬烷间断暴露对小鼠全血乙酰胆碱酯酶活性的影响

目的:探讨不同浓度一氧化碳、甲苯、正壬烷间断暴露对小鼠全血乙酰胆碱酯酶(AChE)活性的影响。方法:以20日龄雄性Wistar小鼠为实验对象,随机分组,每组12只。将每组小鼠暴露于预先设定好的一定浓度某种气体的密闭动物实验舱中(用色谱分析法检测舱室中气体浓度,保持浓度恒定)。暴露时间为每天4 h,持续暴露10 d。一氧化碳设置2个浓度,即57.25、114.50 mg/m3;甲苯设置3个浓度,即94、188、376 mg/m3;正壬烷设置3个浓度,即131、262、524 mg/m3。对照组气体为空气。第10天暴露完成后,将小鼠处死,取全血测AChE活性。AChE活性的测定采用硫代乙酰胆碱-硫代双硝基苯甲酸比色测定法[1]。结果:(1)不同浓度一氧化碳作用对小鼠全血AChE活性的影响:57.25 mg/m3组和114.50 mg/m3组与对照组相比差异均有统计学意义(P<0.01)。(2)不同浓度甲苯对小鼠全血AChE的影响:94 mg/m3组AChE活性低于对照组,但差异无统计学意义;188 mg/m3组和376 mg/m3组与对照组相比差异有统计学意义(P<0.01)。(3)不同浓度正壬烷对小鼠全血AChE活性的影响:3个浓度组AChE活性与对照组相比差异均无统计学意义。结论:一氧化碳、甲苯可降低小鼠全血AChE活性,对神经系统有一定的抑制作用,并显示有剂量效应关系趋势;本实验浓度的正壬烷对小鼠全血AChE活性影响不明显。     

诊断性超声对仔鼠学习记忆及海马组织乙酰胆碱酯酶活性的影响

目的研究一定功率的超声波对仔鼠学习记忆及海马组织乙酰胆碱酯酶活性的影响，探讨诊断超声的安全性。方法妊娠ICR小鼠40只，随机分为辐照0min组（对照组）、辐照10min组、辐照20min组、辐照30min组4组。妊娠第14天应用一定功率的连续超声波（3．5MHz，输出功率1W）对各组孕鼠进行辐照，待仔鼠生长至30d和90d时，从各组仔鼠中随机选出20只进行旷场行为实验，20只进行Y-迷宫分辨学习实验。实验完毕，立即处死仔鼠，取出不同组仔鼠海马组织，测其中的乙酰胆碱酯酶活性。结果与对照组相比，辐照20min组和30min组小鼠学习能力明显损伤（均P〈0．01）；辐照20min组和30min组小鼠脑内乙酰胆碱酯酶活性明显升高（均P〈0．01）。结论孕14d的母鼠接受一定剂量的超声辐照后对仔鼠的学习能力有损伤，这种损伤可能与脑内乙酰胆碱酯酶活性升高有一定的相关性。     

普洛托品对正常大鼠学习能力及海马、大脑皮层乙酰胆碱酯酶活性的影响

目的：观察普洛托品（protopine,Pro)对正常大鼠学习能力及海马、大脑皮层乙酰胆碱酯酶活性的影响。方法：大鼠每天Pro 0.5mg/kg灌胃，28d后三等分Y迷宫测定大鼠学习成绩，并测定海马及大脑皮层乙酰胆碱酯酶活性。结果：Pro组大鼠达到学会标准所需的训练次数明显减少，与对照组比较差异有极显著性（P＜0．01），Pro组大鼠海马及大脑皮层乙酰胆碱酯酶活性亦明显降低，与对照组比较差异有显著性（P＜0．01，P＜0．05），结论：Pro可提高正常大鼠学习能力，并降低海马及大脑皮层乙酰胆碱酯酶活性。     

针刺对血管性痴呆大鼠海马组织乙酰胆碱酯酶活性的影响

目的：探讨李氏调神行气通督醒脑针法对血管性痴呆大鼠海马组织乙酰胆碱酯酶(AchE)活性的影响。方法：采用2血管阻断法(2-VO)，本法是指永久性结扎大鼠的双侧颈总动脉，造成一种慢性脑低灌注状态，使脑组织产生缺血缺氧性损害，尤其易损害海马、皮层等与认智功能有关的组织，从而形成血管性痴呆模型；处死大鼠测量海马组织乙酰胆碱酯酶(AchE)活性．     

乙酰胆碱酯酶活性中心的抗原性

以酶联免疫吸附试验及免疫亲和层析方法对ＡＣｈＥ活性中心的抗原性进行了研究。结果显示，ＡＣｈＥ活性中心的阴离子部位参与构象型决定簇的构成，而活性中心酯解部位丝氨酸在完整ＡＣｈＥ可能不参与构成捩的决定簇。     

不同时程的脑缺血对大鼠学习记忆功能及脑皮层乙酰胆碱酯酶活性的影响

目的研究不同时程的脑缺血对大鼠学习记忆能力及脑皮层乙酰胆碱酯酶活性的影响。方法永久性结扎大鼠双侧颈总动脉，分别于术后4h、24h、3d、7d、2周、4周和8周取脑皮层检测乙酰胆碱酯酶（AchE）活性，在2、4、8周时，用通道式水迷宫和避暗试验测试大鼠逃避潜伏期和错误次数。结果术后2周起，模型大鼠潜伏期和错误次数均大于对照组，8周时仍不能恢复。4h起，模型大鼠皮层AchE活性显著升高，持续到2周，8周时趋近恢复。结论经双侧颈总动脉永久结扎后形成的脑缺血状态可引起脑部乙酰胆碱酯酶活性升高和学习记忆功能减退。     

单克隆抗体2E6对乙酰胆碱酯酶活性的影响

以超速离心制备的电鳐乙酰胆碱酯酶（ＡＣｈＥ）及蛋白Ａ亲和层析纯化的单克隆抗体２Ｅ６为材料，以酶抑制法观察了２Ｅ６对ＡＣｈＥ活性的影响，结果显示，随着２Ｅ６量的增大，对ＡＣｈＥ的抑制作用逐渐增强，表明２Ｅ６是ＡＣｈＥ的抑制性单克隆抗体。     

长时间声音暴露对小鼠学习记忆行为及海马组织的影响

目的:观察长时间声音暴露对小鼠学习记忆行为及海马组织的影响。方法:将30只小鼠随机分为噪声组、乐音组、对照组,噪声组、乐音组分别每天在100 dB噪声和40 dB乐音下暴露24 h并持续10 d,对照组不做任何处理;用Y型迷宫测试小鼠的学习记忆行为,HE染色观察小鼠海马神经元细胞数目及形态,免疫组织化学方法检测神经元中乙酰胆碱酯酶(AChE)含量的变化。结果:经噪声及乐音暴露后,小鼠反应和学习行为迟钝,海马神经细胞数目减少并出现异型,AChE含量增加,噪声组与正常组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:长时间的声音暴露,无论是噪声还是乐音,对小鼠学习记忆行为均有抑制作用,高强度的噪声还能使海马神经元数目结构出现明显异常,AChE含量升高,导致ACh水平进一步降低,加重学习记忆功能的缺损。     

松花粉对痴呆模型小鼠记忆障碍及脑组织单胺氧化酶、乙酰胆碱酯酶活性改变的影响

[目的]探讨松花粉对老年性痴呆模型小鼠学习记忆障碍及脑组织单胺氧化酶(MAO)及乙酰胆碱酯酶(AchE)活性改变的影响.[方法]将实验小鼠随机分为正常对照组、模型对照组、松花粉小、大剂量组、脑复康组.腹腔连续注射给予小鼠D-氨基半乳糖(100mg/kg)50d,制作痴呆模型,灌胃给予175,350mg/kg松花粉,采用跳台实验和生物化学检测方法观察各组小鼠潜伏期、错误次数和脑组织MAO,AchE活性.[结果]与模型对照组比较,松花粉大剂量组小鼠跳台实验潜伏期明显延长,错误次数明显减少(P<0.01),脑组织MAO活性明显降低,松花粉小、大剂量组AchE活性明显降低,相比较差异均具有统计学意义(P<0.05,P<0.01).[结论]松花粉通过抑制MAO和AchE活性,改善痴呆模型小鼠的学习记忆障碍及脑组织生物化学指标改变,对痴呆模型小鼠记忆障碍有一定的改善和保护作用.     

慢性染铅对小鼠血铅、脑铅含量及海马超微结构变化的影响

目的:研究脑发育早期低水平铅暴露通过母体对仔鼠血铅、脑铅含量及海马超微结构变化的影响.方法:石墨炉原子吸收仪测定不同浓度低水平铅暴露后的小鼠子代的血铅、脑铅含量,电镜观察海马超微结构.结果:各组仔鼠随着铅暴露水平的增加,血铅、脑铅含量也都相应增加,均高于对照组(P＜0.05).海马超微结构发生改变.结论:低水平铅暴露对脑的功能产生损伤,改变海马超微结构,并可持续至成年阶段.提示孕母及婴儿是铅暴露的高危人群,铅可由母体传递给子代.     

在体铅暴露对发育脑海马mGluR基因表达的影响

代谢性谷氨酸受体(mGluR)至少有8种亚型,以序列的同源性、受体的药理学特性及细胞间信号传导路径为依据,分为三组：第Ⅰ组mGluR1和mGluR5,第Ⅱ组mGluR2和mGluR3,第Ⅲ组mGluR4、mGluR6和mGluR7,后两组mGluR有自身受体的功能,调节神经递质的释放,在形成不依赖N-甲基-D-天门冬氨酸受体的长时程增强(LTP)中有重要作用。     

细胞外信号调节激酶及蛋白激酶Cγ亚型在慢性染铅小鼠脑海马中的异常表达

目的:观察和探讨铅对小鼠脑海马蛋白激酶Cγ(PKC-γ)及细胞外信号调节激酶(ERK)蛋白表达的影响。方法:小鼠出生1d,染铅组母鼠开始通过饮水饲以不同浓度醋酸铅2.4,4.8,9.6mmol/L。幼鼠出生后,先通过哺乳接触铅,断乳后则自行饮用与母鼠饮用浓度相同的含铅水。分别在14,21,28,35d处死小鼠,用蛋白免疫印迹法观察各组小鼠海马区PKC-γ蛋白表达状况;分别在7,14,21,28d处死小鼠,用蛋白免疫印迹法观察各组小鼠海马区ERK蛋白表达状况。结果:慢性铅暴露对小鼠脑海马PKC-γ蛋白表达总体上呈现下降趋势,各染铅组中,PKC-γ蛋白表达与相应期对照组相比差异均有统计学意义(P<0.05)。低浓度铅2.4mmol/L使ERK表达升高,但此后随铅浓度升高ERK表达量逐渐降低,铅浓度升高至9.6mmol/L时随着铅浓度升高ERK表达量不再降低相反有所回升。结论:铅扰乱小鼠脑海马中PKC-γ及ERK蛋白正常表达。     

孕期酒精暴露对子鼠海马神经元凋亡的影响

目的:研究孕期酒精暴露对子鼠海马神经元凋亡的影响.方法:采用健康C57BL/6J小鼠,用胃饲酒精法建立孕期酒精暴露模型.90只孕鼠随机分为3组: 对照组、低剂量酒精组和高剂量酒精组.低、高剂量酒精组分别按2.0 g/kg与4.0 g/kg的剂量给予体积分数为25%的乙醇,1次/d,直至子鼠出生,对照组自由饮食.3组取新生鼠、生后7 d与生后14 d的小鼠各10只,取海马组织进行caspase-3免疫组化染色,以观察海马神经元的凋亡.结果:低剂量酒精组和高剂量酒精组各年龄子鼠海马神经元caspase-3阳性率明显高于对照组(P＜0.01);高剂量酒精组海马神经元caspase-3阳性率明显高于低剂量酒精组(P＜0.01).结论:孕期酒精暴露可激活发育期海马神经元caspase-3,诱发神经元凋亡,可能与出生子鼠智力障碍密切相关.     

急性铅染毒对发育期小鼠行为影响及与脂质过氧化水平的关系

目的 了解急性铅染毒对发育期小鼠行为及脂质过氧化水平的影响,并探讨两者关系.方法 48只2月龄ICR小鼠随机分为4组,低、中、高铅组小鼠分别予以醋酸铅2mg/kg、10mg/kg及50mg/kgip染毒,隔日1次,连续3次.对照组予以等量的生理盐水.染毒后作自发活动、Morris水迷宫测试,实验结束时测定血浆、脑匀浆丙二醛(MDA)和总超氧化物歧化酶(T-SOD).结果 铅染毒小鼠易激惹、多动,逃避潜伏期显著延长(P＜0.01).血浆MDA[中铅组(9.10±2.90)nmol/ml,高铅组(11.32±2.78)nmol/ml,对照组(5.69±1.47)nmol/ml]、T-SOD[中铅组(131.8±9.3)Nu/ml,高铅组(135.8±11.67)Nu/ml,对照组(101.2±18.7)Nu/ml]和脑匀浆MDA明显增高(P＜0.01),并与染铅剂量呈正线性相关(P＜0.01).但小鼠行为改变与脂质过氧化水平之间关系不明显.结论 急性铅染毒能够影响小鼠的行为,呈现激惹、多动及学习记忆能力减退;急性铅染毒能提高小鼠脂质过氧化水平,并可代偿性提高机体T-SOD活性.     

人参皂苷Rb1对染铅小鼠骨铅含量及行为记忆的影响

目的：研究人参皂苷Rb1对染铅小鼠骨铅含量、学习记忆功能的影响及其对脑内超氧化物歧化酶(SOD)活性和一氧化氮合酶（NOS）活性的影响。方法：以醋酸铅饮水制备染铅小鼠模型,分为空白对照组、模型组、人参皂苷Rb1（100、50和25 mg·kg^-1）组,采用避暗实验及Morris水迷宫实验评价人参皂苷Rb1对学习记忆的影响,并测定小鼠的骨铅含量、脑组织中SOD活性和NOS活性。结果：与空白对照组比较,模型组小鼠避暗实验潜伏期缩短（P<0.01）、错误次数增加（P<0.05）;水迷宫实验,与空白组比较,模型组搜索路程及潜伏期均延长（P<0.05）; SOD活性降低,NOS活性升高,骨铅含量升高（P<0.01）。与模型组比较,人参皂苷Rb1组小鼠避暗实验潜伏期延长、错误次数减少;水迷宫实验与模型组比较搜索路程及潜伏期均缩短（P<0.05或P<0.01）;SOD活性升高（P<0.05或P<0.01）;NOS活性降低（P<0.05或P<0.01）,骨铅含量降低（P<0.01）,以上作用均呈现剂量依赖性。其中,25 mg·kg^-1剂量组与100和50 mg·kg^-1剂量组之间存在显著性差异（P<0.05）。结论：人参皂苷Rb1可减少铅在骨组织中的沉积,对染铅小鼠的学习记忆障碍有改善作用,可提高染铅小鼠体内的抗氧化系统活力。     

维生素C对慢性铅暴露小鼠海马NMDAR表达的影响

目的探讨维生素C对慢性铅暴露小鼠海马N-甲基D-天冬氨酸受体(NMDAR)表达的影响。方法将健康昆明系小鼠随机分为染铅组(从出生第l天起饲以醋酸铅水溶液9.6mmol/L)、维生素C给药组(从出生第l天起饲以醋酸铅9.6mmol/L及维生素C 7.5mL/kg水溶液)及对照组(饲以不含铅的饮用水),每组9只。小鼠于出生21d后断颈处死,采静脉血检测血铅浓度,并同时采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测其海马中NMDAR亚单位的表达水平。结果维生素C给药组小鼠的血铅浓度显著低于铅染组,但仍然高于对照组(P<0.01),维生素C给药组小鼠海马细胞的NMDAR亚单位ε1mRNA表达水平较染铅组明显提高(P<0.01),而ε2mRNA表达水平基本不变(P>0.05)。结论维生素C可降低染铅小鼠的血铅浓度,并可以影响小鼠海马NMDAR的表达水平,对海马细胞具有一定保护作用。     

凋亡大肠癌CT26细胞对小鼠血清免疫因子水平以及免疫细胞增殖、活性的影响

目的 探讨凋亡大肠癌CT26细胞对小鼠血清免疫因子水平以及免疫细胞增殖、活性的影响.方法 取对数生长期大肠癌CT26细胞制备凋亡、坏死肿瘤细胞.取Balb/c小鼠20只,分离T淋巴细胞亚群及自然杀伤(NK)细胞、获取巨噬细胞,并制备细胞毒性T淋巴细胞(CTL).将小鼠CTL、NK细胞、巨噬细胞分别经相应肿瘤细胞处理后,均分为凋亡肿瘤细胞组、坏死肿瘤细胞组、肿瘤细胞对照组,应用51 Cr释放实验测定各组CTL、NK细胞、巨噬细胞的活性,细胞计数(CCK-8)法检测各组CTL、NK细胞和巨噬细胞的增殖情况.另选取Balb/c小鼠分为凋亡肿瘤细胞组、坏死肿瘤细胞组、肿瘤细胞对照组各10只,分别将凋亡、坏死、对数生长期CT26细胞按通过皮下及静脉输注小鼠,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各组小鼠血清可溶性Fas(sFas)、γ干扰素(IFN-γ)、白细胞介素(IL)4、IL-10、IL-12、转化生长因子-β(TGF-β)的表达水平.结果 与坏死肿瘤细胞组及肿瘤细胞对照组比较,凋亡肿瘤细胞组中不同效靶比的CTL、NK细胞及巨噬细胞活性均降低(P＜0.05).CCK-8法检测结果显示,凋亡肿瘤细胞组的CTL、NK细胞及巨噬细胞的A450值均低于坏死肿瘤细胞组、肿瘤细胞对照组(P＜0.05).ELISA检测显示凋亡肿瘤细胞组sFas相对表达量低于坏死肿瘤细胞组和肿瘤细胞对照组(P＜0.05).凋亡肿瘤细胞组IL-4表达水平高于肿瘤细胞对照组(P＜0.05),IL-10、TGF-β表达水平则高于其他两组(P＜0.05),IL-12表达水平低于其他两组(P＜0.05).结论 凋亡大肠癌CT26细胞能够抑制小鼠特异性CTL、NK细胞、巨噬细胞增殖及其活性,影响大肠癌小鼠正常免疫功能.     

围产期双酚A暴露对子代海马组织APP､Tau表达的影响

目的:观察F0代孕鼠围产期不同时期双酚A(bisphenol A,BPA)暴露对子代小鼠海马中淀粉样蛋白前体(amyloid precursor protein,APP)?微管相关蛋白(microtubule-associated protein,Tau)?磷酸化的Tau蛋白(p-Tau)的影响,探讨雌雄小鼠胎儿发育阶段BPA暴露的敏感期?方法:利用C57BL/6J胎鼠原代培养的海马神经元共孵BPA;F0代小鼠围产期皮下注射建立BPA暴露小鼠模型,根据不同暴露期分为4组,即对照组?胎儿期(P6-PND0)?哺乳期(PND0-PND21)?胎儿期和哺乳期联合暴露(P6-PND21),取其成年子代海马组织(8月龄)通过Western blot方法检测APP?Tau及p-Tau的表达量?结果:海马神经元细胞与不同浓度BPA共孵后,APP?Tau及p-Tau的表达均上调,呈剂量依赖性?BPA连续暴露后的子代小鼠中,雌性小鼠PND0-PND21组?P6-PND21组海马组织中APP?Tau及p-Tau表达增加,而雄性小鼠仅P6-PND21组3种蛋白的表达上调?结论:围产期BPA连续暴露可引起子代小鼠海马APP?Tau及p-Tau表达改变,从而可能引起神经损伤,而雌性小鼠相较于雄性小鼠可能对BPA引起的神经损伤更敏感?