白消一号方作用于黑素瘤细胞与角质形成细胞共培养模型中黑素小体转运的观察

目的体外建立黑素瘤细胞与角质形成细胞直接接触的培养模型,观察白消一号方对此模型中黑素小体转运的影响,探讨其治疗白癜风的药理作用。方法体外培养黑素瘤细胞和角质形成细胞,用二乙酰羧基荧光素-琥珀酰亚胺酯(CFDA-SE)标记黑素瘤细胞内的黑素小体,然后将标记的黑素瘤细胞与角质形成细胞共同培养。大鼠中药灌胃后取血清加入此模型中,在倒置显微镜下观察混合细胞模型生长及共聚焦显微镜下观察共培养模型中黑素小体由黑素瘤细胞向角质形成细胞的转运情况。结果含药血清可使黑素小体由黑素瘤细胞向角质形成细胞的转运增加。结论在共聚焦显微镜下观察到白消一号方可以促进黑素小体转运,此途径可能为白消一号方治疗白癜风的作用机制之一。     

血清药理学方法研究复方中药对B16黑素瘤细胞黑素合成的影响

目的运用血清药理学方法研究复方中药白斑一号对小鼠B16黑素瘤细胞黑素合成的影响.方法体外培养小鼠B16黑素瘤细胞,运用血清药理学、细胞学的方法,测定药物对B16黑素瘤细胞增殖情况,对酪氨酸酶活性调节作用及黑素含量的影响.结果复方中药白斑一号能促进黑素合成和激活酪氨酸酶,从而阐明了该方在白癜风治疗中的机制.     

复方中药白癜冲剂对B16黑素瘤细胞生物学特性影响的实验研究

目的：观察复方中药白癜冲剂对体外培养的B16黑素瘤细胞生物学特性的影响。方法：体外培养B16黑素瘤细胞,测定不同浓度白癜冲剂对B16黑素瘤细胞增殖、对酪氨酸酶活性和黑素含量的影响。结果：低浓度剂量组白癜冲剂对B16黑素瘤细胞较对照组有明显促增殖作用,黑素合成增多,酪氨酸酶活力增加,差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论：复方中药白癜冲剂能促进B16黑素瘤细胞的黑素合成,提高酪氨酸酶活力。     

积雪草甙对酪氨酸酶活性的抑制作用及对Cloudman S91黑素瘤细胞黑素合成的影响

目的探讨积雪草甙外用脱色素的作用机制.方法体外观察积雪草甙对蘑菇酪氨酸酶活性的作用并进行酶促反应动力学分析.进一步以系列浓度的积雪草甙作用于体外培养的Cloudman S91黑素瘤细胞,测定细胞酪氨酸酶活性、黑素含量和细胞增殖率.结果积雪草甙能剂量依赖性抑制蘑菇酪氨酸酶活性,酶促动力学分析提示积雪草甙为蘑菇酪氨酸酶混合型抑制剂.进一步研究发现,积雪草甙能抑制体外培养的Cloudman S91黑素瘤细胞酪氨酸酶活性和黑素合成,但对细胞增殖无明显影响.与氢醌相比,积雪草甙抑制酪氨酸酶活性低于相同浓度的氢醌.结论积雪草甙可直接作用于黑素细胞,抑制黑素合成,是一种无细胞毒性的皮肤脱色剂.     

芪白合剂对黑素细胞作用的研究

目的：研究芪白合剂对黑素细胞的影响，探讨其治疗白癜风的药理作用。方法：将兔含药血清加入传代培养的正常人黑素细胞，用MTT法、多巴氧化法及NaOH法测定含药血清对黑素细胞的增殖、酪氨酸酶的活性及黑素合成的影响。结果：未灭活组含药血清可以促进黑素细胞增殖，上调酪氨酸酶活性以及增加黑素合成，效果较灭活组显著。结论：芪白合剂直接作用于黑素细胞，促进黑素细胞增殖，上调酪氨酸酶的活性，增加黑素合成，可用于白癜风的治疗。     

复方木尼孜其颗粒对小鼠B16黑素瘤细胞酪氨酸酶活性及黑素合成的影响

目的 研究复方木尼孜其颗粒对小鼠B16黑素瘤细胞酪氨酸酶活性及黑素合成的影响.方法 培养小鼠B16黑素瘤细胞,采用MTT法测定不同浓度复方木尼孜其颗粒对细胞增殖的影响,采用L-DOPA氧化法测定其对细胞酪氨酸酶活性的影响,采用NaOH裂解法检测细胞黑素含量.结果 复方木尼孜其颗粒高剂量组能明显抑制小鼠B16黑素瘤细胞黑素的合成,但是对酪氨酸酶活性无影响.结论 复方木尼孜其颗粒能抑制小鼠B16黑素瘤细胞黑素的合成,在治疗色素性皮肤病中有一定前景.     

黑素细胞与角质形成细胞混合培养模型的构建

目的体外构建黑素细胞与角质形成细胞直接接触的混合培养模型。方法以包皮组织作为细胞来源,分别培养角质形成细胞、黑素细胞;体外构建黑素细胞与角质形成细胞直接接触的混合培养模型。结果黑素细胞与角质形成细胞混合培养5天后出现浅灰色,继续培养,颜色逐渐加深,细胞生长良好。结论成功构建了黑素细胞与角质形成细胞直接接触的混合培养模型,为进一步研究色素问题奠定了基础。     

两味中药单体对人黑素细胞酪氨酸酶活性及黑素合成的影响

目的: 探讨蛇床子素、黄芩苷对体外培养人黑素细胞及其与角质形成细胞共培养体系中酪氨酸酶活性及黑素合成的影响.方法: 培养人表皮黑素细胞及黑素细胞与角质形成细胞共培养体系,利用MTT法、多巴氧化法及NaOH法测定蛇床子素、黄芩苷对黑素细胞的增殖、酪氨酸酶活性及黑素合成的影响.以补骨脂素作为对照.结果: 蛇床子素、黄芩苷均可促进酪氨酸酶活性及增加黑素合成,但对共培养体系中黑素细胞的作用强于体外纯黑素细胞的作用(P<0.05);在对酪氨酸酶活性的影响中,黄芩苷的作用强于蛇床子素,其差异具有显著性(P<0.05);在对黑素合成的作用上,蛇床子素强于黄芩苷(P<0.05).结论:蛇床子素、黄芩苷对人黑素细胞酪氨酸酶活性及黑素合成均有较强的促进作用,且对共培养体系的作用强于对纯黑素细胞的作用.     

皮质类固醇对培养Cloudman S91黑素瘤细胞株黑素合成的影响

目的：观察皮质类固醇对体外培养的Cloudman S91黑素瘤细胞黑素合成和酪氨酸酶活性的影响，探讨外用皮质类固醇治疗白癜风的作用机制。方法：体外培养的Cloudman S91黑素瘤细胞分别以系列浓度的氢化可的松、醋酸曲安奈德和倍他米松作用72h，测定细胞酪氨酸酶活性，黑素含量和细胞增殖率。结果：3种药物均能促进酪氨酸酶活性、提高黑素含量，且呈浓度依赖性。作用强度顺序为倍他米松＞醋酸曲安奈德＞氢化可的松。结论：提示皮质类固醇在体外能刺激Cloudman S91黑素瘤细胞黑素合成，且与皮质类固醇的效价强度成正相关。外用皮质类固醇诱导白癜风复色可能与该作用有关。     

消银解毒饮及拆方对角质形成细胞COLO-16增殖的调控作用

探讨消银解毒饮是否对角质形成细胞的增殖具有直接作用;以及消银解毒饮中凉血、解毒、祛风除湿等三组主要成分在治疗银屑病中所起的作用.本研究以角质形成细胞株COLO-16为研究对象;用四唑盐比色法观察了消银解毒饮及拆方后各组药物血清对COLO-16细胞增殖的影响.结果表明消银解毒组和凉血方组体外培养COLO-16细胞的存活率明显降低,而且存活率与含药血清浓度呈负相关.     

ERK在黑素瘤细胞和人正常黑色素细胞中的表达

目的:研究ERK1/2和P-ERK1/2在人正常黑色素细胞和黑素瘤细胞A375中表达强度的差异,并分析其意义。方法:从健康青年人阴茎包皮中分离并培养原代黑色素细胞;传代培养黑素瘤细胞A375;Western-blot检测两种细胞中ERK1/2和P-ERK1/2的表达强度,并进行统计比较。结果:ERK1/2、P-ERK1/2在黑素瘤细胞A375的表达强度均明显高于人正常黑色素细胞,差异均具有统计学意义(t值分别为17.75、104.39,P值均<0.01)。结论:黑素瘤的发生、发展可能与MAPK/ERK通路有关。