NADPH黄递酶阳性神经元在出生后大鼠视网膜内的发育

本实验用NADPH黄递酶（NDP）组化方法观察了不同年龄的SD大鼠视网膜内NDP阳性神经元的发育情况。研究结果显示NDP神经元最早出现于P5（出生后第5天），数量较少，着色浅，随着年龄增长，NDP神经元数量明显增加，胞体位于内核层，突起伸向内网层，至P13～P15时，NDP神经元数量及突起分枝均达峰值，P23时NDP神经元密度下降，以周边视网膜较为明显，神经元突起分枝减少，突起主干可见串珠样膨大。视网膜内NDP神经元的密度及突起分枝的变化，提示NDP可能在视网膜内网层的突触形成过程中有一定作用。     

成年及新生大鼠面神经结扎后NADPH-d阳性神经元的不同表达

目的: 研究新生及成年大鼠面神经结扎后,面神经核运动神经元(FMN)NADPH-d阳性细胞的动态变化. 方法: 于新生及成年大鼠茎乳孔处结扎面神经,于3, 7, 14, 21, 28, 56, 84 d采用NADPH-d组织化学方法观察NADPH-d阳性细胞在面神经核中的变化. 并观察NADPH-d阳性细胞与存活神经元之间的关系. 结果: 成年大鼠面神经结扎FMN受损后,3 d～12 wk NADPH-d阳性持续表达. 但是幼年大鼠面神经结扎FMN受损后1 wk,NADPH-d阳性方可在损伤侧观察到,至8 wk则几乎观察不到NADPH-d阳性FMN. 结论: 面神经损伤后,成年及新生大鼠损伤侧NADPH-d阳性FMN数目均有所增加,但是它们在表达时程上显示了不同的模式.     

大鼠脑缺血时血中脑细胞胞浆酶的变化

目的 研究大鼠脑缺血时脑细胞胞浆酶含量变化的影响。方法 采用全自动生化分析仪检测血清肌酸激酶（ＣＫ）、肌酸激酶脑型同工酶（ＣＫ－ＢＢ）、乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）以及天门冬氨酸氨基转换酶（ＡＳＴ）的含量。结果 大鼠脑缺血２０ｍｉｎ,血中ＣＫ,ＣＫ－ＢＢ和ＬＤＨ的含量明显高于假手术组（Ｐ〈０．０５或Ｐ〈０．０１）,脑缺血６０ｍｉｎ和１２０ｍｉｎ,血中ＣＫ、ＣＫ－ＢＢ,ＬＤＨ和ＡＳＴ的含量均明显高于假手术组     

大鼠前脑缺血神经元损伤

目的 :观察脑缺血再灌流后海马、纹状体、皮层细胞损伤情况。方法 :夹闭wister大鼠双侧颈总动脉制造脑缺血模型 ,应用TUNEL染色。结果 :短暂性脑缺血不同时间脑细胞发生坏死及凋亡 ,海马最明显 ,神经元坏死从第二天后不再增加。结论 :脑缺血可致神经元坏死和凋亡 ,不同神经元耐受缺氧能力差异很大。     

大鼠前脑缺血神经元损伤

目的：观察脑缺血再灌流后海马、纹状体、皮层细胞损伤情况。方法：夹闭wister大鼠双侧颈总动脉制造脑缺血模型，应用TUNEL染色。结果：短暂性脑缺血不同时间脑细胞发生坏死及凋亡，海马最明显，神经元坏死从第二天后不再增加。结论：脑缺血可致神经元坏死和凋亡，不同神经元耐受缺氧能力差异很大。     

电针对急性脑缺血大鼠血清NO、NOS、ET-1的影响

目的探讨电针对急性脑缺血的大鼠作用机制。方法将60只大鼠随机分为5组,即:空白组,假手术组,模型组,模型 电针人中、内关组(中内模型组),模型 电针曲池、足三里组(曲足组)。每组12只大鼠,随机分为甲、乙两小组。采用改良Longa线栓法制作大鼠急性脑缺血再灌注损伤模型。甲组大鼠在24 h时处死,乙组大鼠在48 h时间点处死。采颈动脉血检测血清中NO、NOS和ET-1的含量。结果与空白组比较,模型组、中内模型组、曲足组大鼠血清NO、NOS、ET-1升高,差异有统计学意义(P<0.05)。中内模型组血清中NO、NOS、ET-1的含量明显低于模型组,且差异具有统计学意义(P<0.05)。结论电针能抑制NO、NOS、ET-1的过度升高,可能是电针中内模型组对急性脑缺血大鼠的作用机制之一。     

大鼠一过性脑缺血后海马CA1区神经元动态变化

目的 观察大鼠脑缺血再灌注不同时期海马ＣＡ１区神经元动态变化，了解迟发性神经元坏死的产生过程及其规律，为治疗性实验性用药制定参考时间表。方法 采用Ｗｉｓｔａｒ大鼠四血管结扎模型，造成前脑缺血，于再灌流不同时间点上处死动物，取脑、石腊包埋、冠状切片、光镜观察。结果 海马ＣＡ１锥体细胞在再灌流２４ｈ时，主要表现为胞质着色变浅谈，核肿胀；再灌４８ｈ时：细胞严重变性，边界模糊、消失，有明显细胞缺失；６０ｈ     

针刺对脑缺血再灌注大鼠脑组织NOS及NO的影响

为探讨针刺对脑缺血再灌注损伤的治疗作用，我们采用闭塞大鼠四动脉的全脑缺血模型，观察脑缺血再灌注大鼠ＮＯ（一氧化氮）、ＮＯＳ（一氧化氮合成酶）的变化，以及针刺对其产生的影响。实验结果表明：在脑缺血及再灌注造成的脑损伤中，ＮＯＳ活性和ＮＯ含量显著升高，如缺血后再灌注３小时后电针针刺百会穴、曲池穴３０分钟，则ＮＯＳ活性和ＮＯ含量显著降低（Ｐ〈０．０５）。说明在缺血再灌注适当的时间段，针刺可抑制ＮＯＳ活性，减少ＮＯ的产生，从而降低缺血再灌性所造成的迟发性神经元损伤。     

角叉菜胶炎性痛诱导的大鼠脊髓后角一氧化氮合酶的变化

目的观察角叉菜胶炎性痛及痛过敏中脊髓后角一氧化氮合酶(nitric oxide synthase,NOS)的变化,尤其是其时间特征。方法采用右后掌足底注射角叉菜胶复制炎性痛模型;应用NADPH-黄递酶(NADPH-d)组化法测定脊髓NOS表达。结果与对照组相比,注射角叉菜胶后12,24及48小时组脊髓后角Ⅰ-Ⅱ板层内NADPH—d阳性细胞数目及染色深度均显著增加,但以24小时组增加最为明显。结论角叉菜胶炎性痛及痛过敏中,脊髓后角NOS活性增强,且这种增强有一定的时间变化特征。     

"手十二井穴"刺络放血对大鼠局灶性脑缺血后NO含量和NOS活性的影响

目的探讨"手十二井穴"刺络放血对大鼠局灶性脑缺血后NO含量和NOS活性变化的影响及机制.方法采用大脑中动脉栓塞(MCAO)模型.大鼠随机分为假手术组、缺血组、缺血+刺络放血组.每组分别在缺血30min、1h、2h、4h不同时间点取脑,测定NO含量和NOS活性.结果 MCAO后,与假手术组各时间点比较,脑组织NO含量及NOS活性明显升高(P<0.05、P<0.01、P<0.001)."手十二井穴"刺络放血,使缺血后NO含量、NOS活性降低(P<0.05、P<0.01).结论 "手十二井穴"刺络放血可抑制脑缺血后脑组织NO含量、NOS活性的升高,减轻自由基对脑组织损伤,从而对大鼠局灶性脑缺血有保护作用.     

万拉法新对大鼠局灶性脑缺血损伤后运动功能的作用

目的:研究万拉法新对局灶性脑缺血的作用. 方法:采用线栓大脑中动脉缺血大鼠模型,分为局灶性脑缺血对照组和局灶性脑缺血万拉法新组. 于缺血后1,3,7,14和28 d测试神经学功能. 结果:于缺血14 d和28 d,缺血万拉法新组的网屏握持时间分别为(56±13)s,(70±13) s,较缺血对照组(38±14) s,(52±7)s明显延长(P<0.05),而在各时间点下两组的胶布撕脱试验之间无明显差别(P>0.05). 结论:万拉法新可提高局灶性脑缺血后的肌力.     

大鼠局灶性脑缺血再灌注时神经细胞凋亡的动态变化

目的:观察大鼠脑缺血再灌注后神经细胞凋亡的动态变化.方法:采用健康雄性大鼠大脑中动脉阻断(MCAO)模型,阻断大脑中动脉(MCA)血流2h后再灌注,在0.5h,6h,12h,24h和48h不同时间点断头取脑,连续取脑进行TuNEL染色。结果:①假手术组、缺血再灌注组非缺血侧大脑半球未见阳性的凋亡细胞。②脑缺血再灌注早期部分神经细胞发生了凋亡。随着再灌注时间的延长,凋亡细胞数目逐渐增多,12h～24h达到高峰。③凋亡细胞主要分布在梗死灶的边缘区,梗塞灶中心区和正常区无凋亡细胞。结论:神经细胞凋亡在脑缺血再灌注损伤时起着重要作用。     

The Expression of Cyclins in Neurons of Rats after Focal Cerebral Ischemia

The change of the expression of Cyclins in neurons of rats after focal cerebral ischemia was investigated. Ischemia was induced by temporary middle cerebral artery occlusion （MCAO）. The experimental rats induced by MCAO were sacrificed on 7th and 14th day after reperfusion. The brain was taken out at 7th and 14th day after injury, and the expression of Cyclin D1, E, A and B1 in neurons of cerebral cortex or hippocampal CA1 region was detected by immunofluorescence and confocal microscope. The results showed that after MCAO, in the ipsilateral CA1 subfield of hippocampus the expression of Cyclin D1, E, A and B1 in neurons was significantly gradually up-regulated at 7th and 14th day after reperfusion （P〈0.05） as compared with that in control group. In the ipsilateral cerebral cortex the expression of Cyclin D1 and B1 in neurons was notably gradually down-regulated at 7th and 14th day, and that of Cyclin E and A was significantly up-regulated at 14th day after reperfusion as compared with that in control group （all P〈0.05）. It was concluded that there was a differential sensitivity among neurons from different brain regions to ischemic injury. But all of them re-enter into cell cycle after MCAO.     

栓线法制作局灶性大鼠脑缺血再灌注模型的改进及效果

目的　建立一种较理想的实验性局灶性脑缺血模型。方法　参照Longa和Koizumi腔内线栓法制作大鼠局灶性可逆性大鼠中动脉缺血 (MCAO)模型 ,对栓线的制备、手术操作进行改进 ,通过病理学观察栓线直径、插入深度以及大鼠体重对缺血模型有效性的影响。结果　大鼠体重 2 50～ 2 80g ,插线头端浸蜡 ,直径 0 .2 6mm ,由颈内动脉插入大脑中动脉 ,插入深度 (18± 1)mm ,可获得较成功的局灶性脑缺血模型。结论　改进的模型操作简单 ,成功率高 ,稳定性强 ,是较理想的实验性局灶性脑缺血模型     

香烟烟雾吸入对大鼠局灶性脑缺血后梗死灶的影响

目的 观察香烟烟雾吸入对大鼠局灶性脑缺血后梗死灶的影响，探讨其机制。方法 建立吸烟大鼠模型。用TTC染色法测定梗死灶体积，检测大鼠局灶性脑缺血后神经功能缺陷评分及梗死灶体积占同侧半球百分比。结果 除戒烟组外各吸烟组大鼠神经功能缺陷评分及梗死灶体积与对照组相比显著增加，吸烟4周、8周及12周依次增加。戒烟组神经功能评分及梗死体积明显低于吸烟4周组，与对照组无显著差别。结论 吸烟可加重大鼠局灶性脑缺血后脑组织损害，且随着吸烟时间增加而加重，戒烟可使这种脑损害得到一定程度的恢复。     

降纤酶对局灶性脑缺血再灌注大鼠脑细胞凋亡的影响

目的:观察降纤酶对大鼠脑缺血再灌注后脑细胞凋亡的影响。方法:96只雄性SD大鼠,随机分为降纤酶治疗1,2组和对照组1,2组,制造大鼠脑中动脉栓塞模型,降纤酶治疗1,2组于缺血3h经腹腔注射降纤酶治疗,对照1,2组在相同时间点给予等量生理盐水。降纤酶治疗和对照1组利用流式细胞仪检测缺血3h再灌注3h、6h、24h、72h后脑组织中凋亡细胞百分率。降纤酶治疗和对照2组利用Tunel方法检测神经元凋亡数目及利用免疫组化方法检测Bcl-2和Bax蛋白表达。结果:降纤酶治疗和对照1组凋亡细胞率、降纤酶治疗和对照2组凋亡细胞数均随再灌注时间延长而渐增多,于24h达高峰,以后逐渐减少,2组6h、24h和72h差异均有统计学意义(P<0.05)。降纤酶治疗和对照2组bcl-2蛋白表达于24h明显减低,bax蛋白表达于24h升至最高,Bcl-2和Bax蛋白表达时相与神经细胞凋亡高峰基本一致,降纤酶治疗2组24hBcl-2和Bax蛋白表达较对照2组明显减少(P<0.05)。结论:降纤酶有降低大鼠脑缺血再灌注后脑细胞凋亡的作用,对脑组织有保护作用。     

病变侧亚低温对大鼠局灶脑缺血MAP2表达的影响

目的观察局部亚低温对大鼠局灶脑缺血再灌注损伤的保护作用及对微管相关蛋白2(MAP2)表达的影响,探讨亚低温对脑缺血保护作用的机制.方法用线栓法制作大鼠大脑中动脉闭塞(MCAO)局灶脑缺血再灌注模型,随机分为假手术组、常温缺血组和亚低温缺血组, 分别于栓塞2h、6h、12h均再灌注4h后处死,其中亚低温组于栓塞后30min实施病灶侧脑亚低温并持续至再灌注期.处死前进行神经功能缺陷评分;HE染色观察病理形态学改变;免疫组织化学法检测MAP2的表达,并进行定性和定量分析.结果亚低温组大鼠神经功能缺陷评分明显低于常温组(P<0.05或P<0.01);亚低温组神经元损伤明显减轻;亚低温组半影区MAP2表达水平较常温组显著增高(P<0.01).结论局灶脑缺血后30min应用局部亚低温并持续至再灌注期能够减轻脑组织病理形态损伤程度,促进脑缺血后神经功能恢复;这种保护作用的产生与亚低温促进梗死灶周围半影区MAP2表达增强有关.     

葛根素对大鼠缺血性脑损伤的保护作用

［摘要］目的: 观察葛根素对大鼠全脑缺血/再灌注后神经元的保护作用,并探讨其可能的机制。方法： 采用四动脉结扎法建立大鼠全脑缺血模型, 缺血15 min后再灌注。将50只大鼠随机分为假手术组、缺血/再灌注组、给药组(细分为高、低剂量组)和对照组。给药方式为静脉注射。使用蛋白质印迹、焦油紫染色法及TUNEL法检测神经型一氧化氮合酶（neuronal NO synthase, nNOS)表达、nNOS活化水平及神经元细胞的存活情况。结果： 给药组大鼠海马CA1区细胞的存活数量较缺血/再灌注组明显增加(P<0.05),TUNEL法检测结果与其一致;给药组nNOS(Ser847)磷酸化水平较缺血/再灌注组明显增强(P<0.05),而其表达量没有明显变化。结论： 葛根素通过负向调节nNOS催化活性,减少NO生成,降低其神经毒性,对大鼠缺血性脑损伤有保护作用。     

肾上腺髓质素对大鼠局灶性脑缺血再灌注后脑组织的保护作用

目的探讨肾上腺髓质素与脑缺血再灌注损伤的关系。方法采用栓线法制成大鼠大脑中动脉缺血再灌注模型，阻断血流2h后进行再灌注。应用免痘组织化学染色法拴测不同时间段大鼠局灶性脑缺血再灌注后肾上腺髓质素的表达情况，并进行动态观察。结果正常大鼠脑内即有肾上腺髓质表达，假手术后肾上腺髓质素表达略有增加，但与正常对照组相比无明显差异，P〉0．05；大鼠脑缺血再灌注后肾上腺髓质素免疫阳性细胞增多，与正常对照组及假手术组相比差异显著，均P＜0．05；大鼠脑缺血再灌注后缺血侧既缺血对侧肾上腺髓质素免疫阳性知胞均增多，但以缺血侧区域增多最为明显，P〈0．05。动态观察发现，脑缺血再灌注2h后，肾上腺髓质素免痘阳性细胞即增多，缺血再灌注6h迭高峰，至1周左右仍明显增多。结论脑缺血再灌注后肾上腺髓质表达增强。     

大鼠脑缺血再灌注损伤后死亡相关蛋白激酶的表达及意义

目的 探讨大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤时死亡相关蛋白激酶(Death associated related protein kinase,DAPK)的表达变化及其与脑缺血再灌注损伤的关系。方法 线拴法建立局灶性脑缺血再灌注模型,SD大鼠随机分为正常对照组、假手术组和缺血再灌注组,缺血组于栓塞3h后分别再灌注12h、24h、3d、7d。HE染色观察组织病理变化;免疫组化法检测DAPK的表达;原位杂交法检测DAPK mRNA的表达。结果 缺血组DAPK免疫阳性反应于再灌注后24h开始增强并于3d时达高峰,随后下降;DAPK mRNA的表达于再灌注3d时达高峰,随后下降。结论 脑缺血再灌注损伤诱导DAPK表达增强;DAPK在缺血性脑损伤中起重要作用。