寻常性银屑病患者血清中核因子κB受体活化因子配体、肿瘤坏死因子-α及骨保护素水平及意义

目的:探讨寻常性银屑病(PV)患者血清中核因子κB受体活化因子配体(RANKL)、肿瘤坏死因子(TNF)-α及骨保护素(OPG)水平及其对患者骨密度(BMD)的意义。方法:检测47例PV组和20例健康对照组血清中RANKL、TNF-α、OPG及BMD等指标,并对患者进行银屑病面积和严重程度指数(PASI)评分,分析患者RANKL、TNF-α、OPG水平与PASI评分及BMD的相关性。结果:PV组中RANKL及TNF-α水平均高于健康对照组,而OPG及BMD水平均低于健康对照组,差异均有统计学意义(P均0.05)。PASIⅠ级和Ⅲ级患者的RANKL、TNF-α及OPG水平差异均有统计学意义(P0.05)。PV组中RANKL及TNF-α水平与PASI评分存在正相关(r=0.674、0.646,P均0.05),OPG及BMD水平与PASI评分存在负相关(r=-0.669、-0.664,P均0.05);RANKL及TNF-α水平与BMD存在负相关(r=-0.614、-0.811,P均0.05);OPG水平与BMD存在正相关(r=0.647,P0.05)。结论:PV组中RANKL、TNF-α水平升高,而OPG水平降低,可作为PV患者骨质疏松严重性的评估指标。     

五加皮丸预防围绝经期妇女骨质疏松症的疗效分析

骨质疏松症是常见的代谢性骨病，多见于围绝经期妇女，近年来发病率呈上升和年轻化趋势。研究表明，围绝经期妇女雌激素减少，破骨细胞的抑制作用相对减弱，破骨细胞的破骨作用相对增强，破骨与成骨作用失衡，促进骨吸收增加，骨形成减少，导致骨质逐渐丢失。以激素替代疗法的方案愈来愈受到人们质疑，     

TAP1及其mRNA在尖锐湿疣皮损中的表达

目的：通过检测TAP1及其mRNA在尖锐湿疣皮损中的表达情况，进一步探讨尖锐湿疣免疫学发病机制。方法：采用免疫组织化学方法及逆转录一聚合酶链反应(RT-PCR)分别检测TAP1及其mRNA在尖锐湿疣皮损中的表达，并与正常包皮组织作对照。结果：尖锐湿疣皮损中TAP1及其mRNA表达水平与正常包皮组织相比均显著降低。结论：尖锐湿疣皮损中TAP1及其mRNA表达水平显著降低，以致MHC-1类抗原递呈途径存在缺陷，这可能成为人乳头瘤病毒逃逸宿主免疫监视的一条重要途径。     

5%咪喹莫特乳膏对小鼠皮肤3种细胞因子mRNA表达的影响

目的：研究5％咪喹莫特乳膏对BALB／c小鼠皮肤3种细胞因子的mRNA转录水平的影响。方法：以5％咪喹莫特乳膏刺激BALB／c小鼠皮肤,用逆转录（RT）-PCR法检测皮肤组织中α肿瘤坏死因子（TNF）-α、白介素（IL）-6及IL-1βmRNA的含量。结果：经62微球蛋白内参校正后,RT-PCR示涂药组2d和7d后TNF—α、IL-6、IL-1βmRNA表达均较空白组升高,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论：5％咪喹莫特乳膏可上调BALB／c小鼠皮肤细胞因子TNF—α、IL-6和IL-1βmRNA的表达水平。     

组氨酸三聚体核苷结合蛋白1 mRNA在良恶性黑素细胞肿瘤中的表达

目的探讨组氨酸三聚体核苷结合蛋白1(HINT1)mRNA在恶性黑素瘤和痣细胞痣中的表达.方法采用半定量RT-PCR方法检测了25例痣细胞痣和25例恶性黑素瘤中HINT1 mRNA的表达,包括新鲜标本和存档石蜡标本.结果相同标本经过10%甲醛固定、石蜡包埋后提取RNA进行半定量RT-PCR的结果与新鲜冻存组织提取RNA的结果高度一致,痣细胞痣组织中HINT1 mRNA的表达水平为0.49±0.04,恶性黑素瘤组织中HINT1 mRNA的表达水平下降为0.31±0.07,差异有统计学意义(P＜0.05).结论HINT1 mRNA表达下降可能与恶性黑素瘤发病有关.     

基质细胞衍生因子-1及受体CXCR4在阴道念珠菌病小鼠模型中的表达

目的 检测基质细胞衍生因子-1（SDF-1）及其受体CXCR4在阴道念珠菌病小鼠模型阴道组织及腰引流淋巴结中的表达情况。方法 采用雌激素化阴道念珠菌病小鼠模型，雌性昆明小鼠（80只）随机分四组，A组（雌激素处理感染组）、B组（雌激素处理未感染组）、C组（未用雌激素处理感染组）、正常对照组（5只）。前三组又再分为接种白念珠菌后第2、4、7、14和21天组（各5只）。接种后不同时间点随机取小鼠阴道组织及腰淋巴结，以RT-PCR及免疫组化SABC法检测SDF-1及CXCR4 mRNA及蛋白水平的表达。结果 （1）RT-PCR：与正常小鼠相比，雌激素（B组）对SDF-1及CXCR4 mRNA表达无影响。①小鼠阴道组织：与B组相比，A组小鼠接种后各时间点均见SDF-1 mRNA表达明显增加（F ＝ 114.87，P < 0.01），第14天CXCR4 mRNA明显增加（t = 15.61，P < 0.01）；与正常小鼠相比，C组小鼠接种后第2，4， 7天，SDF-1 mRNA明显增加；第4 ~ 21天CXCR4 mRNA均明显增加。②腰淋巴结：与B组相比，A组小鼠接种后第2天和7 ~ 21天SDF-1 mRNA明显增加（F ＝ 865.62，P < 0.01），CXCR4 mRNA于各时间点表达均增加（F ＝ 161.30，P < 0.01）；与正常小鼠相比，C组小鼠接种后SDF-1 mRNA表达无明显改变（P > 0.05）；CXCR4 mRNA于第7天和14天明显增加（P < 0.05）。（2）免疫组化：A组小鼠阴道黏膜中SDF-1及CXCR4表达在接种后第2天即开始增加，第7天时达高峰，第14天和21天开始下降，但均明显高于对照组（P < 0.05）。结论 感染组小鼠阴道黏膜及腰淋巴结中SDF-1及CXCR4的mRNA及蛋白水平均明显升高。     

雌激素对人皮肤成纤维细胞骨形态发生蛋白-2mRNA表达的影响

目的探讨雌激素对人正常皮肤成纤维细胞骨形态发生蛋白-2（BMP-2）表达的影响。方法采集正常人皮肤标本,分离培养真皮成纤维细胞。分别在培养细胞中加入PBS、雌激素、BMP-2刺激,应用流式细胞仪观察细胞周期变化情况,通过反转录一聚合酶链反应（RT-PCR）法观察BMP-2mRNA表达情况。结果雌激素和BMP．2处理组细胞增生指数与对照组比较差异具有统计学意义（P〈0．01）。雌激素处理组BMP-2mRNA表达显著高于对照组（P〈0．05）。结论雌激素可上调人正常皮肤成纤维细胞BMP-2mRNA的表达,促进成纤维细胞增生。     

尖锐湿疣皮损中p16基因启动子区高甲基化及其mRNA的表达

目的:明确尖锐湿疣组织中p16基因启动子区高甲基化与p16 mRNA表达的关系。方法:采用甲基化特异性PCR技术检测30例尖锐湿疣组织及20名正常对照组织p16基因启动子区CpG岛甲基化状态,用RT-PCR法检测p16 mRNA的表达。结果:尖锐湿疣组织p16基因启动子高甲基化率为26.67%(8/30),正常对照组高甲基化率为0,差异具有统计学意义(P<0.05)。高甲基化的尖锐湿疣组织p16 mRNA的表达高于未甲基化的尖锐湿疣组织p16 mRNA的表达和高于正常对照组织p16mRNA的表达。结论:尖锐湿疣组织皮损中p16基因启动子区甲基化不导致p16 mRNA表达的缺失。     

皮肤鳞状细胞癌组织中Notch1和NF-κB p65的表达及意义

目的探讨皮肤鳞状细胞癌(鳞癌)组织中Notch1,NF-κB p65mRNA和蛋白的表达及其与临床病理参数的关系。方法应用RT-PCR和免疫组化SP法分别检测58例皮肤鳞癌组织及58例正常皮肤组织中Notch1及NF-κBp65mRNA和蛋白的表达。结果皮肤鳞癌组织中Notch1mRNA相对含量(0.451±0.072)低于其在正常皮肤组织中的表达(0.715±0.085),组间比较差异有统计学意义(P<0.05);NF-κBp65mRNA相对含量(0.646±0.062)高于其在正常皮肤组织中的表达(0.445±0.063),组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。皮肤鳞癌组织中Notch1蛋白阳性表达率31.03%(18/58)低于正常皮肤组织77.59%(45/58),组间比较差异有统计学意义(P<0.05);而NF-κBp65蛋白阳性表达率81.03%(47/58)高于正常皮肤组织34.48%(20/58),组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论 Notch1的低表达和NF-κBp65的过表达可能与皮肤鳞癌的发生发展密切相关。     

皮肤基底细胞癌组织中血管内皮细胞生长因子受体-2的表达

目的 研究血管内皮生长因子受体-2(VEGFR-2)在皮肤基底细胞癌(BCC)组织中的表达情况.方法 提取BCC组织的mRNA,以RT-PCR法检测标本中VEGFR-2mRNA的表达.同时应用蛋白质印迹法检测VEGFR-2蛋白的表达,免疫荧光法检测VEGFR-2在BCC组织中的定位.结果 BCC组织标本mRNA和蛋白水平中均可以检测到VEGFR-2的表达,并较正常人对照有显著增加.VEGFR-2在BCC细胞主要表现为膜性分布.结论 皮肤BCC组织细胞能够高异常表达VEGFR-2,可能是导致BCC细胞肿瘤性增殖的原因之一.     

尖锐湿疣皮损中人β防御素(HDB)-2,3及LL-37的表达

目的:检测尖锐湿疣患者皮损中抗菌肽HBD-2、HBD-3及LL-37 mRNA的表达。方法:应用逆转录(RT-PCR)方法检测56例尖锐湿疣患者皮损和30名正常人皮肤组织中HBD-2、HBD-3及LL-37 mRNA的表达。结果:与正常人皮肤组织相比,尖锐湿疣患者皮损中HBD-2、HBD-3及LL-37 mRNA的表达水平明显升高(P0.05)。结论:尖锐湿疣患者皮损中HBD-2、HBD-3及LL-37mRNA表达水平的上调可能与尖锐湿疣患者局部产生免疫防御有关。     

结缔组织生长因子mRNA在硬皮病模型小鼠真皮中的表达

目的 探讨博来霉素诱导硬皮病样改变.方法 24只BALB/c小鼠随机分为模型组和对照组,每日分别于背部皮下注射0.1mL博来霉素(300μg/mL)和0.1mL生理盐水,共4周.然后取背部皮肤行组织病理检查及真皮厚度测量,比色法测定羟脯氨酸含量,原位杂交法检测结缔组织生长因子(CTGF)mRNA表达细胞及RT-PCR法测定α1前胶原(pro-COL1A1)和CTGF mRNA表达量.结果 模型组小鼠皮肤表现出典型的硬皮病改变,其真皮较对照组显著增厚(P<0.01),羟脯氨酸含量显著升高(P<0.01);CTGF mRNA阳性杂交信号主要分布于真皮成纤维细胞胞浆中,模型组CTGF和pro-COL1A1 mRNA表达均较对照组显著增强(P分别<0.05和0.01);模型组皮肤羟脯氨酸含量与pro-COL1A1 mRNA表达量呈正相关(P<0.05),而pro-COL1A1 mRNA又与CTGF mRNA表达量呈正相关(P<0.01).结论 博来霉素可能通过上调成纤维细胞CTGF mRNA表达而增强pro-COL1A1 mRNA表达,最终导致皮肤胶原含量增多.     

环氧合酶-2和血管内皮生长因子mRNA在皮肤鳞状细胞癌组织中的表达

目的 探讨环氧合酶-2(COX-2)、血管内皮生长因子(VEGF)mRNA在皮肤鳞状细胞癌(SCC)和正常人皮肤组织中的表达以及它们之间相互关系。方法 应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法,检测24例SCC和10例正常人皮肤组织中COX-2和VEGF mRNA的表达。结果 RT-PCR结果显示,在正常人皮肤组织中COX-2和VEGF mRNA呈较弱表达或无表达,吸光度平均值分别为(0.01±0.01)和(0.02±0.02);有79.2%(19/24)SCC组织中COX-2 mRNA表达水平增高,平均值为(0.56±0.48),与正常皮肤组织比较差异有统计学意义(P<0.05);VEGF mRNA在SCC组织中全部高表达(24/ 24,100%),平均值为(0.66±0.35),与正常人皮肤组织比较差异有统计学意义(P<0.05)。经相关性分析两者之间的表达呈明显正相关(r=0.86)。结论 COX-2可能与SCC血管形成有关,且其作用可能通过上调VEGF通道来发挥作用。     

凋亡抑制蛋白生存素在乳腺癌中的表达及其意义：临床标本47例分析

目的探讨凋亡抑制蛋白生存素在乳腺癌中的表达及其临床意义。方法采用逆转录聚合酶链反应方法检测47例病理证实的乳腺癌组织和26例正常乳腺组织中生存素的mRNA表达。结果生存素在正常乳腺组织中无mRNA表达，而在61．7％的乳腺癌组织中（29／47）mRNA表达阳性。生存素基因mRNA表达率在病理分级为Ⅰ级、Ⅱ级和Ⅲ级的乳腺癌中分别为36．4％、65％和75％，表现出随分级的升高而升高的趋势（P=0．048）。在浸润型的乳腺癌中，生存素基因的mRNA表达率为71．4％，显著高于非浸润型者（33．3％，P=0．019）。生存素基因的mRNA表达率与年龄无关（P=0．563）。结论生存素的异常表达引起细胞凋亡抑制，对乳腺癌的发生、发展起重要作用，生存素的异常表达提示乳腺癌预后不良。     

特应性皮炎患者外周血和皮损miR-155的表达及其与Th17细胞相关性研究

【摘要】 目的 探讨特应性皮炎（AD）患者外周血与皮损组织中miR-155、Th17细胞、Th17细胞特异性转录因子RORγt及效应性细胞因子IL-17的表达及其相关性。 方法 用实时荧光定量RT-PCR检测37例AD患者外周血单一核细胞（PBMC）中miR-155、RORγt及IL-17的mRNA表达水平,流式细胞仪检测Th17细胞比例,酶联免疫吸附试验（ELISA）检测血浆中IL-17的含量;并以33例性别、年龄匹配的健康儿童做对照。检测5例重度AD患者皮损与皮损周围组织中miR-155、RORγt及IL-17 mRNA的表达水平,并以5例正常皮肤组织标本为对照。 结果 AD患者PBMC中miR-155、RORγt及IL-17的mRNA表达水平均明显高于健康对照（分别为5.78 ± 1.78比1.82 ± 0.46,6.08 ± 1.04比1.64 ± 0.52,7.09 ± 1.75比1.71 ± 0.46,均P <0.01）;AD患者PBMC中Th17细胞比例及IL-17血浆含量均明显高于健康对照,分别为（1.78 ± 0.52）%比（0.47 ± 0.15）%,（32.51 ± 6.15） pg/ml比（11.80 ± 2.24） pg/ml,均P < 0.01。AD患者皮损、皮损周围组织及正常皮肤组织中miR-155、RORγt及IL-17 mRNA表达水平间比较,差异均具有统计学意义;皮损 > 皮损周围组织 > 正常皮肤组织,F值分别为41.803、17.040和37.064,均P < 0.01。AD患者PBMC中miR-155 mRNA表达水平与疾病严重程度评分、Th17细胞比例、RORγt mRNA表达水平、IL-17 mRNA表达水平及IL-17血浆含量呈正相关,r值分别为0.405、0.426、0.402、0.410、0.408,均P < 0.05;皮损及皮损周围组织中miR-155 mRNA表达水平与RORγt、IL-17的mRNA表达水平呈正相关,r值分别为0.428和0.435,均P < 0.05。 结论 AD患者miR-155、Th17细胞及其效应性细胞因子高表达可能与AD发病有关。     

甲下外生骨疣和内生软骨瘤3例

报告3例甲下外生骨疣和内生软骨瘤，临床表现为拇趾远端单发降起性硬结节，其中2例发病前有局部外伤中。放射学检查示单侧拇趾的末节趾骨远端突起一骨组织团块。组织病理学检查显示肿瘤由成熟的骨组织和纤维软骨成分组成。治疗可选择局部切除术。由于本病误诊率高，对于趾（指）远端的增生性肿物，尤其是疣样皮损，应考虑此病的可能。     

金葡菌肠毒素A和B诱导BALB/c鼠皮肤炎症的实验研究

目的：探讨金葡菌肠毒素A（SEA）和金葡菌肠毒素B（SEB）在特应性皮炎发病机制中的作用。方法：使用100μg／mL浓度的SEA或SEB溶液分别斑贴致敏BALB／c鼠，以生理盐水为阴性对照，ELISA测定血清总IgE水平，观察和比较各组小鼠皮肤组织病理改变，半定量RT-PCR法测定致敏局部皮肤中自介素-4（IL-4）、白介素-5（IL-5），干扰素-γ（IFN-γ）mRNA表达水平。结果：SEA组及SEB组小鼠组织病理未见明显炎症性变化，各组小鼠间血清IgE水平无明显差异，IL-4、IL-5、IFN-γ mRNA表达水平无统计学差异（P〉0．05）。结论：100μg／L的SEA或SEB用斑贴致敏的方法不能在BALB／c鼠诱发具有特应性皮炎特征的皮损。     

HO-1在银屑病患者皮损及外周血单一核细胞中的表达

目的：检测寻常型银屑病(PV)患者皮损及外周血单一核细胞(PBMC)中血红素氧合酶-1(HO-1)mRNA和蛋白的表达。方法：逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法和免疫组化方法检测20例PV患者和10例正常人皮肤及PBMC中HO-1 mRNA 和蛋白的表达。结果： PV患者及正常对照组皮肤中HO-1mRNA表达相对含量分别为1.32±0.29和0.46±0.10，HO-1的免疫组化评分分别为10.25±2.36和2.65±1.03；患者及对照组PBMC中HO-1mRNA相对含量分别为0.25±0.14和0.22±0.16，HO-1染色阳性细胞的百分比为11.7％±3.44％和10.5％±4.06％，PV皮损中HO-1的mRNA和蛋白表达明显高于正常对照组(P<0.05)，而PV患者外周血PBMC中HO-1 mRNA和蛋白的表达水平与正常对照组差异无显著性(P>0.05)。结论： HO-1可能参与了银屑病皮损的发病过程。     

NF-κB、E-selection和PLGF在妊娠期高血压大鼠血清及胎盘中的表达水平及意义

目的分析核因子-κB(NF-κB)、E-选择素(E-selection)和胎盘生长因子(PLGF)在妊娠期高血压疾病(HDCP)大鼠血清及胎盘中的表达水平及意义。方法将20只受孕SD大鼠于妊娠第12天随机分为HDCP组(HDCP建模)和Normal组(正常妊娠)。采用酶联免疫吸附试验法检测大鼠血清中NF-κB、E-selection和PLGF水平;采用免疫组化染色法检测大鼠胎盘组织中E-selection和PLGF表达水平;采用实时荧光定量PCR检测NF-κB的mRNA在大鼠胎盘组织中的表达情况;采用Western Blot检测大鼠胎盘组织中NF-κB、E-selection和PLGF蛋白水平。结果 HDCP组大鼠血清中NF-κB和E-selection表达显著升高,PLGF的表达显著下降(P0.05);免疫组化染色结果显示,HDCP组大鼠胎盘组织中E-selection呈现强阳性表达,PLGF呈弱阴性表达(P0.05);HDCP组大鼠胎盘组织中NF-κB的mRNA及蛋白水平显著升高(P0.05);Western Blot结果表明,HDCP组大鼠NF-κB及E-selection的表达显著上升,PLGF表达显著下降(P0.05)。结论 NF-κB、E-selection的高表达及PLGF的低表达可能与HDCP大鼠的发病密切相关。     

板样皮肤骨瘤1例及临床特征分析

目的:探讨原发性皮肤骨瘤(plate-like osteoma cutis,PLOC)的临床表现、组织病理特点及诊断要点。方法:回顾性分析1例板样PLOC的临床及组织病理资料。患儿男,3岁。出生后3个月发现腹部、肩胛部、下肢皮肤多发性大小不等的板状皮损,质硬如骨。没有特殊个人史或家族史,也没有钙磷代谢异常及甲状旁腺激素或甲状腺功能异常。皮损自患儿6个月后至今已3年,病情无进展。结果:皮损组织病理检查示表皮正常,真皮及皮下脂肪组织内局灶性分布板层状骨组织,骨组织中见骨细胞,部分骨小梁周围可见成骨细胞,诊断为皮肤骨瘤。结论:PLOC是罕见的原发性皮肤骨瘤,是非渐进性的异位骨化;其与进行性骨发育异常(progressive osseus heteroplasia,POH)和Albright遗传性骨营养不良(Albright hereditary osteodystrophythe,A HO)均属于GNAS基因相关性骨化障碍性疾病。