斑蝥素抑制人宫颈癌Hela细胞增殖的研究

目的:研究斑蝥素(CTD)对人宫颈癌Hela细胞增殖的抑制作用和机制。方法:采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测CTD对Hela细胞增殖的抑制作用;流式细胞仪分析Hela细胞周期及CTD对细胞周期的影响。结果:CTD对Hela细胞24、48和72h的IC50值分别为3.2、2.5和1.4μg/ml。CTD浓度为3.2μg/ml时,细胞周期滞留在G2期。结论:CTD对Hela细胞的增殖有抑制作用;流式细胞仪显示细胞周期出现明显的G2/M期阻滞。     

成骨细胞培养微环境对Hela细胞STAT_3的转录表达及细胞增殖的调控作用

目的:探讨成骨细胞微环境(OBM)对Hela细胞STAT3转录表达及细胞增殖的影响。方法:分离培养大鼠成骨细胞,取其培养液与DMEM血清培养基按照1:1比例混合,培养Hela细胞。分为对照组与实验组(添加成骨细胞培养液)。采用Real time PCR检测STAT3的mRNA水平,CCK-8法检测Hela细胞增殖。结果:成功分离成骨细胞,并取其培养液作用于宫颈癌Hela细胞。与对照组相比,在24 h、48 h、72 h,实验组STAT3mRNA水平分别升高约28.2%、37.5%、32.1%,实验组细胞增殖能力分别升高约11.7%、29.5%、24.6%。结论:OBM可上调宫颈癌Hela细胞中STAT3的转录表达并促进细胞增殖。     

复方益气消征方对离体人癌细胞株增殖作用影响

目的:观察中药复方益气消征方(YQXZF)与5-氟尿嘧啶(5-fu)对体外培养人胃癌(SGC-7901)细胞、人乳腺癌(Bcap-37)细胞、人宫颈癌(Hela)细胞、人前列腺癌(PC-3)细胞、人肺癌(A549)细胞增殖作用的影响。方法:采用MTT比色法测定各种细胞增殖作用的比较,取不同浓度益气消征方和5-氟尿嘧啶,分别体外作用于SGC-7901、Bcap-37、Hela、PC-3、A549细胞。结果:益气消征方对SGC-7901、Bcap-37、Hela、PC-3、A549细胞有不同程度的抑制作用,其抑制作用具有剂量效应关系。结论:中药复方益气消征方具有抑制体外SGC-7901、Bcap-37、Hela、PC-3和A549细胞增殖的作用。     

VEGF-C对宫颈癌细胞增殖和凋亡影响的研究

目的:探讨VEGF-C对宫颈癌Hela细胞增殖和凋亡的影响。方法:采用MTT比色法,检测不同浓度的VEGF-C对宫颈癌Hela细胞增殖的结果:及采用流式细胞仪检测VEGF-C联合顺铂(DDP)对宫颈癌Hela细胞凋亡的影响。结果:随着VEGF-C的浓度的逐渐升高,由50ng/ml、100ng/ml、150ng/ml、升至200ng/ml,Hela细胞的增殖率逐渐增加;不同浓度的VEGF-C预处理Hela细胞48h后,细胞的凋亡率依次下降。结论:VEGF-C能促进宫颈癌Hela细胞的增殖,抑制DDP诱导宫颈癌细胞Hela的凋亡。     

5-氮杂-2'-脱氧胞苷对Hela细胞增殖及CDH1、HPV18E6mRNA表达的影响

目的:探讨DNA去甲基化试剂5-氮杂-2'-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)对宫颈癌Hela细胞株增殖及抑癌基因CDH1和HPV18E6 mRNA的表达水平的影响。方法:不同浓度5-Aza-CdR干预Hela细胞株24h以后,四唑氮蓝法(MTT)检测其对Hela细胞增殖的影响,半定量RT-PCR检测CDH1及HPV18E6 mRNA表达的改变。结果:与对照组(DMSO)相比,5-Aza-CdR能显著抑制Hela细胞增值,且呈量-效性。5-Aza-CdR能显著抑制Hela细胞CDH1 mRNA的表达水平(P<0.05),而对HPV18E6 mRNA表达水平无明显影响(P>0.05)。结论:5-Aza-CdR能抑制Hela细胞增殖,其作用可能是通过上调宫颈癌抑癌基因CDH1的表达实现,有望为宫颈癌的治疗提供新的治疗思路。     

黄芩茎叶总黄酮对Hela细胞增殖的影响

目的：探讨黄芩茎叶总黄酮对宫颈癌Hela细胞增殖的影响。方法：Hela细胞分为实验组和对照组,实验组细胞加入不同浓度的黄芩茎叶总黄酮(0.04、0.06、0.08、0.1、0.14、0.16mg/ml)。四甲基偶氮唑盐法(MTT法)检测细胞的增殖情况,倒置显微镜观察Hela细胞形态的变化。结果：黄芩茎叶总黄酮能显著抑制Hela细胞增殖(P＜0.01);且在一定范围内随着药物浓度的增加抑制率逐渐升高。形态学观察显示,实验组Hela细胞数量明显减少,形态发生改变,悬浮的细胞增多。结论：黄芩茎叶总黄酮对Hela细胞增殖具有明显的抑制作用。     

米非司酮对宫颈癌Hela细胞的增殖抑制作用

目的 :探讨米非司酮对人子宫颈癌Hela细胞增殖的影响。方法 :采用MTT测定 ,观察不同浓度米非司酮 (10 ,5 ,2 .5 μmol/L)对Hela细胞增殖的抑制作用 ;通过ABC免疫组化法 ,检测用药后Hela细胞Ki 6 7抗原表达的变化。结果 :3个浓度的米非司酮对Hela细胞增殖均有抑制作用 ,并呈剂量依赖性 ,其中以 10 μmol/L浓度抑制作用最强 ,抑制率达 5 7.6 9% ;2 .5 μmol/L米非司酮可使Ki 6 7抗原表达明显减少。 结论 :米非司酮体外对PR阳性的人宫颈癌细胞有明显的抑制作用 ,通过降低细胞Ki 6 7抗原的表达而抑制其增殖。     

苦参碱诱导宫颈癌Hela细胞的凋亡作用

目的:研究不同浓度的苦参碱(Mat)对宫颈癌Hela细胞株的体外增殖抑制作用。方法:采用体外细胞培养技术,以不同浓度的Mat作用于宫颈癌Hela细胞,相同条件下培养24h、48h、72h后,倒置显微镜观察细胞形态变化;MTT法测定Mat对Hela细胞的增殖抑制率;流式细胞仪(FCM)检测细胞凋亡率。结果:不同浓度Mat在体外均能不同程度抑制宫颈癌Hela细胞增殖,并且作用呈现时间-剂量依赖性;苦参碱诱导Hela细胞凋亡率增加。结论:Mat有抑制宫颈癌Hela细胞的增殖,诱导其凋亡作用。     

角质细胞生长因子及其受体在Hela细胞中的表达及其作用

目的 确定角质细胞生长因子(KGF)及其受体(KGFR)在Hela 细胞中的表达及KGF对Hela 细胞增殖的影响.方法 取对数增长期的Hela细胞,采用RT-PCR在基因水平确定KGF及KGFR在Hela细胞中的表达;Western blot及ELISA在蛋白水平确定KGF及KGFR 在Hela细胞中的表达;3H-TdR掺入试验测定KGF对Hela细胞增殖的影响.结果 ①从基因水平和蛋白水平证实KGF及KGFR在Hela细胞中有表达.②人重组KGF因子对Hela细胞有明显的增殖作用.③用KGF抗体中和Hela细胞自分泌的KGF后,Hela细胞的增殖与对照组相比减弱(P＜0.05).结论 Hela 细胞中有KGF和KGFR的表达;KGF对Hela细胞有明显的增殖作用.     

小白菊内酯对宫颈癌细胞增殖、凋亡及PTEN/AKT通路的影响

目的研究小白菊内酯对宫颈癌细胞增殖、凋亡及磷酸酶及张力蛋白同系物/蛋白激酶(PTEN/AKT)通路的影响。方法体外培养宫颈癌Hela细胞,分别用不同浓度(10、50、60 mg/L)小白菊内酯(Par)处理对数期生长的Hela细胞为实验组,未经处理的Hela细胞为阴性对照组,2.5 mg/L顺铂处理为阳性对照组。采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测各组宫颈癌Hela细胞增殖情况;采用平板克隆试验法检测宫颈Hela细胞增殖能力;采用AnnexinVFITC/碘化丙锭(PI)双染法体外检测宫颈癌Hela细胞凋亡;采用免疫印迹法(WB)检测宫颈癌Hela细胞中PTEN/AKT通路相关蛋白及凋亡相关蛋白表达。结果与阴性对照组比较,顺铂组、5、10、20、40、50 mg/L Par组对Hela细胞增殖抑制率均显著升高,差异有统计学意义(P均0.05),且呈浓度依赖性和时间依赖性,其中50 mg/L Par作用48 h时,对Hela细胞抑制率达51.04%。与阴性对照组比较,顺铂组、10、50、60 mg/L Par组Hela细胞克隆形成率及B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、p-AKT蛋白水平降低,细胞凋亡率及B淋巴细胞瘤2相关X蛋白(Bax)、cleavedCaspase8、cleaved-Caspase3、PTEN蛋白水平升高,差异有统计学意义(P0.05)。其中50、60 mg/L Par组与顺铂组Hela细胞克隆形成率、凋亡率及Bcl-2、p-AKT、Bax、cleaved-Caspase8、cleaved-Caspase3、PTEN蛋白水平比较,差异均无统计学意义(P0.05)。结论小白菊内酯可能通过抑制PTEN/AKT通路,从而抑制宫颈癌Hela细胞增殖,促进其凋亡。     

甲胎蛋白新功能:调节HeLa细胞生长的信号转导机制

目的:观察甲胎蛋白(alpha-fetoprotein,AFP)调节HeLa细胞生长的细胞内信号转导机制。方法:用从人脐带血中提取的AFP作用于体外培养的HeLa细胞,通过MTT计数、3H-TdR参入法、流式细胞仪等研究细胞增殖;放射免疫结合法检测在AFP作用下,HeLa细胞第二信使物质环磷酸腺苷(cAMP)和蛋白激酶A(PKA)活性的改变;用共聚焦显微镜观测细胞内Ca2+浓度的变化;用Westernblotting分析法分析P21ras表达。结果:①表明AFP(浓度大于10mg/L)对HeLa细胞增殖有明显的促进作用。②在AFP(20mg/L)作用下,PKA活性升高达122.6%,而Ca2+浓度升高达125.71%;P21ras蛋白表达在作用24h时增高112.6%。③抗甲胎蛋白单克隆抗体能有效地阻断AFP对HeLa细胞信号转导的影响。结论:①AFP能促HeLa细胞生长;②AFP可能通过cAMP-PKA和Ca2+途径调节HeLa细胞生长。     

刺参黏多糖对Hela细胞增殖分化的影响

目的 了解刺参酸性黏多糖(SJAMP)对Hela细胞增殖、分化的影响及其机制.方法 体外培养Hela细胞,通过MTT法观察SJAMP对Hela细胞增殖的作用,电镜观察SJAMP作用下Hela细胞超微结构的变化,RT-PCR法检测Hela细胞CyclinD1、CDK4、C-myc的mRNA的表达.结果 SJAMP能够有效抑制Hela细胞的增殖,并且具有剂量和时间依赖关系.透射电镜观察显示,SJAMP可诱导细胞向成熟细胞分化;SJAMP可以明显降低CyclinD1、CDK4、C-myc的mRNA表达.结论 SJAMP可能是通过抑制细胞周期因子CyclinD1和CDK4的表达而抑制细胞增殖,通过抑制癌基因C-myc的表达来诱导Hela细胞分化.     

甲胎蛋白促人肝癌Bel7402细胞增殖的机制研究

目的:观察甲胎蛋白促肿瘤细胞增殖的信号转导方式。方法:用从人脐带血清中提取的甲胎蛋白,作用于体外培养的人肝癌Bel7402细胞,运用MTT染色计数法,流式细胞仪测定细胞周期和3H-脱氧胸腺嘧啶核苷(3H-TdR)参入法等指标检测细胞增殖状况;放射受体分析细胞膜上甲胎蛋白受体存在和数目;免疫结合法检测细胞内cAMP浓度;Westernblot分析P21ras蛋白的表达。结果:甲胎蛋白(10～80mg·L-1)作用24h后,人肝癌Bel7402细胞有不同程度的促增殖作用;在人肝癌Bel7402细胞膜上存在2种不同的解离平衡常数(Kd)的甲胎蛋白受体,Kd分别为Kd1=1.3×10-9mol·L-1(89400位点/细胞)和Kd2=9.9×10-8mol·L-1(582000位点/细胞)。AFP能显著提高Bel7402细胞内的cAMP浓度,对P21ras的表达也有明显的促进作用。甲胎蛋白的单克隆抗体能阻断这种作用。结论:甲胎蛋白具有促人肝癌Bel7402细胞增殖的作用,这种作用是由受体介导的cAMP信号转导途径实现的。     

槲皮素锗对多种肿瘤细胞增殖的抑制作用

目的:观察槲皮素锗对多种肿瘤细胞增殖的抑制作用。方法:槲皮素与氧化锗反应生成槲皮素锗,经结构鉴定为目标产物后,分别用0、10、100μmol/L槲皮素锗处理人子宫颈癌Hela细胞、肺癌SPC-A-1细胞、人食管癌EC9706细胞和人前列腺癌PC-3细胞72h,采用MTT法检测细胞增殖抑制率。结果:槲皮素锗体外对上述4种细胞增殖均有抑制作用,以高浓度组作用更为明显(P<0.05)。结论:槲皮素锗具有抑制多种肿瘤细胞增殖的作用。     

5,7-二甲氧基白杨素对体外培养宫颈癌HeLa细胞生长的影响

目的:观察5,7-二甲氧基白杨素(dMChR)对体外培养宫颈癌HeLa细胞增殖和凋亡的影响。方法:检测5,7-二甲氧基白杨素对HeLa细胞增殖活性的影响采用MTT法;观察HeLa细胞凋亡形态运用丫啶橙/溴化乙啶(AO/EB)荧光双染色法;检测HeLa细胞凋亡率采用流式细胞术。结果:5,7-二甲氧基白杨素对HeLa细胞增殖具有抑制作用,呈剂量依赖性;5,7-二甲氧基白杨素能有效地诱导HeLa细胞凋亡,呈剂量依赖性。结论:5,7-二甲氧基白杨素具有抑制人宫颈癌HeLa细胞增殖和诱导细胞凋亡作用。     

螺旋藻多糖对人宫颈癌Hela细胞体外生长的影响

目的：探讨螺旋藻多糖（PSP）对体外培养的Hela细胞生长的影响。方法：采用MTT法测定 PSP的抗肿瘤活性，并观察其对Hela细胞形态学的影响。结果：随PSP浓度的升高，Hela细胞存活率逐渐降低，抑制率逐渐增加；光镜下观察显示，PSP作用24-48h后，细胞出现明显的形态学改变。结论：PSP能抑制Hela细胞增殖。     

甲胎蛋白对NIH3T3细胞和人肝癌Bel7402细胞增殖的促进作用

目的:观察甲胎蛋白对细胞增殖的影响。方法:用从人脐带血清中提取的甲胎蛋白,作用于体外培养的NIH3T3细胞和人肝癌Bel7402细胞,运用MTT染色计数法,细胞周期时相测定和3H脱氧胸腺嘧啶核苷(3H-TdR)参入法等指标检测细胞增殖状况。结果:甲胎蛋白(10～80mg·L-1)作用24h后,对NIH3T3细胞、人肝癌Bel7402细胞均有不同程度的促增殖作用,甲胎蛋白的单克隆抗体能阻断这种作用。结论:甲胎蛋白是促进某些新生细胞或肿瘤细胞增殖的内源性物质。     

丹参酮Ⅱ A联合顺铂对Hela细胞生长及p53蛋白表达水平的影响

目的:研究丹参酮Ⅱ A联合顺铂在体外对宫颈癌Hela细胞生长的影响及细胞中p53蛋白表达水平的变化。方法:采用MTT法测定丹参酮Ⅱ A联合顺铂对Hela细胞增殖的影响;HE染色法观察细胞的形态学变化;流式细胞仪检测药物作用后的细胞凋亡情况;Western Blot测定p53蛋白水平的表达。结果:丹参酮ⅡA联合顺铂用药组比同等剂量的两药单用组及对照组对Hela细胞的增殖抑制率高(P<0.05);对照组细胞未见凋亡,而两药单用组及联合组均可见细胞凋亡;药物处理组均可检测到细胞亚G1峰,两药联合组细胞亚G1峰与单药组差异显著;在只含溶媒组、丹参酮Ⅱ A组、顺铂组及丹参酮Ⅱ A联合顺铂组中p53蛋白水平表达逐步升高。结论:丹参酮Ⅱ A联合顺铂比两药单用能显著抑制Hela细胞的生长;二者通过增加p53蛋白的表达,促进细胞凋亡。