美国NCCLS 2002年版抗生素药敏试验操作标准更新内容

美国临床实验室标准化委员会 (ＮＣＣＬＳ)于 2 0 0 2年出版的抗生素药敏试验操作标准Ｍ1 0 0 Ｓ1 2文件[1 ] ,变更内容归纳如下。一、仅有“敏感”判定标准的细菌和抗生素的总评论迄今为止 ,一些细菌对某些抗生素尚未发现“中介度”和“耐药”菌株 ,因此在标准中只有“敏感”的判定折点 ,而未设定“中介度”和“耐药”的判定折点。如果临床遇到如下所列的细菌与相应抗生素药敏试验结果不敏感时 ,应当重复菌株的鉴定和药敏结果 ,同时将菌株送往参考实验室 ,用ＮＣＣＬＳ参考稀释法确认结果。仅有“敏感”判定标准的细菌和抗生素及判定折点…     

结核分枝杆菌快速检测仪检测非结核分枝杆菌

我们用结核分枝杆菌快速检测仪 (ＢＡＣＴＥＣ) ,对 2 0 1株抗酸杆菌做 ρ 硝基 α 乙酰氨基 β 羟基苯丙酮 (ＮＡＰ)试验 ,初选非结核分枝杆菌 (ＮＴＭ ) ,并以常规法对照。另用ＢＡＣＴＥＣ做 11株ＮＴＭ药敏试验 ,现报告如下。一、材料和方法1 标本来源 :2 0 1株抗酸杆菌获自我院 1996年 3月～2 0 0 1年 2月结核科、内科病人。2 试验材料 :(1)ＢＡＣＴＥＣ检测仪、12Ｂ培养瓶、ＮＡＰ培养瓶和药物纯品 [利福平 (ＲＦＰ)、链霉素 (ＳＭ )、乙胺丁醇(ＥＭＢ)、异烟肼 (ＩＮＨ) ]均购自美国Ｂ Ｄ公司。 (2 )改良罗氏培养基、对硝基苯甲酸…     

骨髓增生异常综合征造血干/祖细胞体外增殖、分化特征研究

我们对骨髓增生异常综合征 (ＭＤＳ)患者骨髓ＣＤ34 细胞进行检测和富集 ,并对富集后的骨髓细胞进行体外培养 ,以研究其增殖分化特征及对不同造血因子的反应。病例和方法1　病例来源　 1 993年 3月～ 1 997年 1 0月于我院住院的ＭＤＳ患者 2 9例 ,其中男性 2 0例 ,女性 9例 ;中位年龄 3 7岁(2 4～ 65岁 )。按ＦＡＢ诊断及分型标准[1]1 1例为低危组 (ＲＡ/ＲＡＳ) ,1 8例为高危组 (ＲＡＥＢ/ＲＡＥＢ ｔ)。2　试剂来源　所用单克隆抗体包括抗Ｔ细胞 (ＣＤ3、ＣＤ2 )、ＮＫ细胞 (ＣＤ5 6 )、Ｂ细胞 (ＣＤ2 0 )、粒细胞 (ＣＤ11ｂ)、红细胞 (…     

ABO血型主要不合的异基因外周血干细胞移植后纯红细胞再生障碍

报告 5例异基因外周血干细胞移植 (ａｌｌｏ ＰＢＳＣＴ)后纯红细胞再生障碍 (ＰＲＣＡ) ,并对临床特点 ,发病机制及治疗方法作一探讨。病例和方法1　病例　 1997年 6月～ 1999年 5月 ,我院施行ＨＬＡ相合的ａｌｌｏ ＰＢＳＣＴ 40例中 ,ＡＢＯ血型相合 2 0例 ,男 11例 ,女 9例 ,年龄 2 4～ 45岁 ,急性髓系白血病 (ＡＭＬ) 9例 ,慢性髓系白血病(ＣＭＬ) 7例 ,急性淋巴细胞白血病 (ＡＬＬ) 4例 ;ＡＢＯ血型主要不合 12例 (含主次不合 ) ,男 8例 ,女 4例 ,年龄 2 3～ 46岁 ,ＡＭＬ 3例 ,ＣＭＬ 9例 ;ＡＢＯ血型次要不合 8例 ,男 5例 ,女 3例 ,…     

细菌鉴定仪出现“不能鉴定细菌”的处理

我们对现今应用较为普遍的ＶＩＴＥＫ ＡＭＳ鉴定系统中报告“不能鉴定细菌”(ＵＩＯ)菌株作了进一步分析 ,探讨其发生原因、处理方法 ,以期建立一套切实可行的仪器与手工方法相结合的细菌鉴定方法。一、材料与方法1 仪器与试剂 :ＶＩＴＥＫ ＡＭＳ 6 0型全自动细菌鉴定仪及其配套ＧＮＩ、ＧＰＩ、ＹＢＣ试验卡 (生物梅里埃公司产品 )。2 试验菌株 :10 2 5株本院 1999.10 .2 1 2 0 0 0 .3.3临床标本分离的菌株进行了Ｖｉｔｅｋ ＡＭＳ鉴定 ,其中应用ＧＮＩ卡 6 31例、ＧＰＩ卡 334例、ＹＢＣ卡 6 0例。3 ＶＩＴＥＫ ＡＭＳ鉴定法 :根据细菌…     

环孢菌素A体外对骨髓增生异常综合征患者因祖细胞的作用

近年来国内外相继报告了临床应用环孢菌素Ａ(ＣｓＡ)治疗再生障碍性贫血 (ＡＡ)取得较好疗效 ,ＣｓＡ用于骨髓增生异常综合征 (ＭＤＳ)亦有个别报道 ,为研究ＣｓＡ对ＭＤＳ的疗效 ,我们观察了ＣｓＡ在体外对 17例ＭＤＳ患者ＣＦＵ ＧＭ、ＣＦＵ Ｅ的作用。材料和方法1　骨髓来源　ＭＤＳ患者 17例采用ＦＡＢ诊断和分型标准 ,其中难治性贫血 (ＲＡ) 10例 ,环形铁粒幼细胞性难治性贫血(ＲＡＳ) 1例 ,ＲＡ伴有原始细胞增高 (ＲＡＥＢ) 5例 ,转变中的ＲＡＥＢ(ＲＡＥＢ ｔ) 1例。所有患者试验前均未接受过免疫抑制剂、细胞毒性药物及细胞因子的…     

66株阴沟肠杆菌超广谱β—内酰胺酶的检测

我们从 6 6株阴沟肠杆菌检出产超广谱 β 内酰胺酶 (ＥＳ ＢＬ) 8株 ,并对头孢噻肟、泰能等 8种抗生素作药敏试验 ,报告如下。1　材料与方法1.1　菌株　 6 6株阴沟肠杆菌从我院临床送检的 875份标本中分离得到 ,常规分离按《全国临床检验操作规程》 ,采用ＡＰＩ2 0Ｅ系统手工法鉴定。1.2　药敏纸片　头孢他啶 (ＣＡＺ) ,头孢他啶 /棒酸 ;头孢噻肟(ＣＴＸ) ,头孢噻肟 /棒酸 ,泰能安灭菌均为Ｏｘｏｉｄ产品。质控菌株ＡＴＣＣ 2 5 92 2大肠埃希菌及ＡＴＣＣ 70 0 6 0 3肺炎克雷伯菌。1.3　方法　药敏试验Ｋ Ｂ法。ＥＳＢＬ的检测程序为纸片扩…     

冠脉介入治疗的术后监护

1997年至 2 0 0 0年 8月 ,我们对5 4例冠脉介入患者术后进行了监护 ,从而提高了介入治疗的成功率 ,减少了并发症。现将其术后监护措施介绍如下。1　临床资料5 4例患者中男 43例 ,女 11例 ,30～ 83岁 ,单纯冠脉造影 (ＣＡＧ) 17例、ＣＡＧ 左室造影 11例、ＰＴＣＡ 8例、ＡＭＩ急诊ＰＴＣＡ 5例、ＰＴＣＡ ＣＳ8例 ,冠脉搭桥 (ＣＡＢＧ) 5例 ;临床诊断陈旧性心肌梗死 7例、ＡＭＩ 8例、冠心病 39例。术前均因心慌、胸闷或心绞痛反复发作而住院。结果 :急诊ＣＡＢＧ 3例、死亡 1例 ,余均成功。2　术后监护2 1　掌握操作过程、用药与术后并…     

用四种培养基分离检测腹泻病原菌的研究

为了提高腹泻致病菌的检出率 ,我院于 1998年 2月开始采用粪便常规细菌培养同时接种ＳＳ琼脂、山梨醇 麦康凯琼脂 (ＳＭＡＣ)、ＴＣＢＳ琼脂、血琼脂来分离致病菌 ,现报告如下。一、材料与方法1 标本来源 :1998年 2月～ 2 0 0 0年 1月我院临床送检腹泻患者粪便标本 872份。2 试剂 :ＳＳ琼脂、ＳＭＡＣ琼脂、ＴＣＢＳ琼脂 ,来自浙江省军区卫生检疫所 ,诊断血清来自兰州生物制品研究所 ,血琼脂自配。3 方法 :先将粪便分别接种在ＳＳ、ＳＭＡＣ、ＴＣＢＳ平板上 ,然后再取粪便黄豆大小于 2ｍｌ无菌生理盐水中 ,用力混匀 ,待粪渣自然沉淀后用…     

红细胞CR1分子在免疫相关性疾病表达的探讨

本文对类风湿性关节炎 (ＲＡ)、风湿性心脏病(ＲＣ)、系统性红斑狠疮 (ＳＬＥ)等患者进行红细胞ＣＲ1分子的测定 ,以探讨该病种的红细胞ＣＲ1分子数量表达和变化的相关性 ,现报告如下 :1　材料和方法1 1　免疫试剂　鼠抗人ＣＲ1单抗 (ＩｇＧ1、Ｅ11克隆 ) ,鼠抗人ＣＤ2单抗 (无关单抗 ) ,碱性磷酸酶标志的羊抗鼠ＩｇＧ。1 2　底物　现配现用。1 3　Ｂｕｆｆｅｒ液　常规使用的ＰＢＳ(等ｐＨ 7.2的磷酸缓冲盐液 )。其它缓冲液有Ｓ/ＢＳＡ :0 15ｍｏｌ/ＬＮ Ｓ+ 2ｇ/Ｌ小牛血清 + 1ｇ/Ｌ叠氮钠 ;ＰＢＳ/ＢＳＡ :含有 2 0ｇ/Ｌ的ＢＳＡ + 1ｇ/…     

318株呼吸道真菌感染分析

近年来 ,深部真菌感染日益严重 ,特别是呼吸道真菌感染尤为突出。本文对一年来 ,西南医院检验科细菌室的呼吸道培养标本进行回顾分析 ,现将结果报告如下。1　材料和方法1 1　标本　为 2 0 0 0年 7月至 2 0 0 1年 7月的呼吸道痰合格标本[1] 、咽拭子、口腔分泌物。1 2　试剂　ＡＰＩ 2 0ＣＡＵＸ生化鉴定板和ＡＴＢＦＵＮＧＵＳ药敏板 ,由法国梅里埃公司出品。药敏板含有 6种抗真菌药即 5 氟胞嘧啶 (5 ＦＣ)、两性霉素Ｂ(ＡＭＢ)、制霉菌素 (ＮＹＳ)、咪康唑(ＭＩＺ)、益康唑 (ＥＣ0 )、酮康唑 (ＫＥＴ)。1 3　方法　取合格标本 ,按 [全国…     

高压氧对一氧化碳中毒昏迷大鼠大脑组织超氧化物歧化酶等的影响

本实验采用动物模型 ,测定ＣＯ中毒致昏迷大鼠高压氧 (ＨＢＯ )治疗前后大脑组织中超氧化物歧化酶 (ＳＯＤ)和丙二醛 (ＭＤＡ)含量 ,探讨ＣＯ中毒昏迷时大脑组织ＳＯＤ及ＭＤＡ的变化及ＨＢＯ对二者的影响。材料和方法　　健康雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠 80只 ,体重 2 80～ 32 0 ｇ由中国医科大学实验动物部提供 ,随机分成 5组 ,每组 16只 ,正常对照组 (Ｃ组 ) ,ＣＯ染毒组 (ＣＯ组 ) ,ＣＯ染毒ＨＢＯ治疗 1次组 (ＨＢＯ1组 ) ,ＣＯ染毒ＨＢＯ治疗 3次组 (ＨＢＯ3 组 ) ,ＣＯ染毒常压氧治疗1次组 (ＮＢＯ1组 )。ＣＯ中毒模型建立 :参照Ｉｓｃｈｉ…     

外周血CD_(34)~ 细胞的纯化及其移植后造血重建

欧洲应用临床级的磁性活化细胞分选系统ＣｌｉｎｉＭＡＣＳ(ＭｉｌｔｅｎｙｉＢｉｏｔｅｃ /ＡｍＣｅｌｌ)纯化ＣＤ3 4 细胞 ,并用于临床移植 ,已获得初步的成功[1] ;从 1998年底至今 ,我们对 2 2例患者和5名正常供者动员后经ＣＳ 30 0 0ｐｌｕｓ血细胞分离机分离的 30份外周血干 /祖细胞 (ＰＢＳＰＣ)采集物 ,以ＣｌｉｎｉＭＡＣＳ系统进行ＣＤ3 4 细胞的纯化 ,并完成了 2 4例患者的移植 ,对 2 3例造血重建情况可初步进行评价。对象和方法1　供者及移植患者　 2 7名供者 ,男 18名 ,女 9名 ,年龄 (39.5± 11.6 )岁 (12～ 5 8岁 )。包括正…     

两种HBsAg金标试纸条的使用比较

ＨＢｓＡｇ金标试纸条以方便、快速的特点用作流动采血及现场采血中作ＨＢｓＡｇ的初筛 ,但不同厂家生产的ＨＢｓＡｇ试纸条 ,其实用性存在差异。笔者对 2厂家试纸条检测结果作比较 ,同时以ＥＬＩＳＡ试剂作为对照 ,现报告如下。1　材料与方法1 1　材料　金标试纸条 :分别购自Ａ、Ｂ两厂家 ,批批检合格 ;ＥＬＩＳＡ试剂 :科华公司 ,批号 2 0 0 10 4 0 5。1.2　仪器　ＭＫ 2酶标仪 (芬兰 ) ;Ｗａｓｈ4洗板机 ;ＴＥＣＡＮＲＳＰ15 0全自动加样仪 (瑞士 ) ;ＨＢｓＡｇ 1ｎｇ/Ｌ、5ｎｇ/Ｌ质控血清 (卫生部临床检验中心 ,批号 0 10 7)。1.3　操…     

应用原位PCR、原位杂交技术对比检测尖锐湿疣组织中人乳头状瘤病毒DNA

为探讨原位ＰＣＲ(ＩＳＰＣＲ)的敏感性 ,对原位杂交 (ＩＳＨ)检测阴性或弱阳性的尖锐湿疣组织 (ＣＡ)进行ＩＳＰＣＲ检测 ,为其推广应用提供依据。1　材料与方法1.1　材料　标本来自我院和西京医院 ,从 80例光镜诊断为ＣＡ或可疑ＣＡ中选择 2 7例ＨＰＶ6 11ＤＮＡ弱阳性 (ＩＳＨ)和 18例ＨＰＶ6 11阴性的标本行ＩＳＰＣＲ对比检测。标本经 10 %福尔马林固定 ,石蜡切片 4μｍ厚。ＨＰＶ6 11ＤＮＡ探针为第四军医大学病理教研室制备 ,试剂盒购自德国ＢｏｃｈｒｉｎｇｅｒＭａｎｎｈｅｉｍ公司。ＨＣ 2 0 0型多功能ＰＣＲ仪为西安飞机工业…     

DCC基因在白血病及骨髓增生异常综合征患者中的表达

ＤＣＣ基因位于人类染色体 1 8ｑ2 1 .3 ,在 88%结肠癌、直肠癌患者中 ,ＤＣＣ基因的表达明显减少或缺失。为了评价ＤＣＣ基因在白血病发病及骨髓增生异常综合征 (ＭＤＳ)转化为白血病的作用 ,我们检测了 3 1例白血病患者和 8例ＭＤＳ患者的ＤＣＣ基因表达情况。病例和方法1　病例　所有病例均来自本院儿科、血液内科。白血病患者 3 1例 ,年龄为 6个月至 73岁 ,其中 6个月～ 1 4岁 1 0例 ,1 5～ 73岁 2 1例 ;急性髓系白血病 (ＡＭＬ) 1 4例 ,急性淋巴细胞白血病 (ＡＬＬ) 1 0例 ,慢性髓细胞白血病 (ＣＭＬ) 7例。ＭＤＳ 8例 ,均按ＦＡＢ诊断…     

六例微分化急性髓系白血病患者细胞化学特点分析

关于微分化型急性髓系白血病 (ＡＭＬ Ｍ0 )细胞化学染色中的髓过氧化物酶 (ＭＰＯ)和苏丹黑Ｂ(ＳＢＢ)反应报道较多 ,并有明确标准 ,其它染色反应则报道很少。现将我所 6例Ｍ0患者细胞化学染色特点报告如下。病例和方法1　病例　为 1991～ 2 0 0 0年在我院住院的初诊患者 ,均按ＡＭＬ Ｍ0 诊断标准[1,2 ] 作免疫表型、电镜组化、ＴＰＡ诱导分化试验及染色体核型等检查而确诊。同时还以Ｍ114例 ,Ｍ5ａ6例 ,Ｍ5ｂ10例 ,Ｍ73例 ,Ｂ 急性淋巴细胞白血病 (Ｂ ＡＬＬ) 2 6例 ,Ｔ ＡＬＬ 5例作对照观察。2　细胞化学染色方法　ＭＰＯ染色采用二氨…     

微量显色酵母菌药敏试验方法初步应用

临床酵母菌目前已成为医院感染的主要菌群之一 ,体外药敏试验对于合理筛选抗真菌药物 ,发现耐药菌株等有重要意义[1] 。为此 ,我们参照文献 [2 ]介绍一种“ＹｅａｓｔＯｎｅ微量稀释显色法酵母菌药敏试验”方法 ,并以美国临床实验室标准化委员会 (ＮＣＣＬＳ)推荐的“Ｍ2 7 Ａ”方法为参考 ,对其方法学特点作初步评价。一、材料和方法1 菌株来源 :2 0 0 0年 5月～ 2 0 0 1年 5月间从各类临床标本中分离到的酵母菌共 130株 ,按常规方法和ＡＰＩ 2 0ＣＡＵＸ ,或用ＹＢＣ卡经ＶＩＴＥＫ仪器 (生物梅里埃公司 )鉴定 ,其中包括白念珠菌、热带念…     

骨髓单个核细胞抗人球蛋白分型试验

我们应用经典的直接抗人球蛋白试验 (Ｃｏｏｍｂｓ试验 )的原理和方法[1,2 ] ,以骨髓单个核细胞 (ＢＭＭＮＣ)悬液取代红细胞悬液作Ｃｏｏｍｂｓ分型试验 (ＢＭＭＮＣ Ｃｏｏｍｂｓ) ,结果发现 ,一部分经典Ｃｏｏｍｂｓ分型试验阴性的血细胞减少症患者ＢＭＭＮＣ Ｃｏｏｍｂｓ分型试验阳性。现将方法及结果报告如下。对象和方法1　检测对象1.1　阳性对照组 :5例 ,男 2例 ,女 3例 ,中位年龄 42岁 (35～ 72岁 ) ,均为Ｃｏｏｍｂｓ试验阳性的自身免疫性溶血性贫血(ＡＩＨＡ)患者。1.2　阴性对照组 :47例 ,男 2 2例 ,女 2 5例 ,中位年龄 31岁(7…     

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌感染患者的护理措施

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(ＭＲＳＡ)是目前引起医院内感染的主要病原菌之一 ,对多种抗生素耐药 ,且引起的感染和病死率有逐年增加的趋势。由于ＭＲＳＡ具有高度的耐药性并可导致感染的暴发流行 ,已受到全球的关注[1] 。现将ＭＲＳＡ感染患者的护理体会报告如下。1　临床资料1997年至 2 0 0 0年笔者在科威特国Ａｄａｎ医院工作期间 ,护理了ＭＲＳＡ感染 7例 ,10～ 70岁 ,平均 3 0岁。肺癌2例曾用化疗药物治疗 ,肺气肿、肺心病 1例曾用激素加抗生素治疗 ,糖尿病伤口感染 1例 ,严重创伤、伤口感染 2例 ,狼疮肾尿毒症 1例用过抗生素加免疫抑制…