绞股蓝总皂甙对离体大鼠肝脏脂质过氧化及膜流动性损伤的保护作用

在体外实验中绞股篮总皂甙(GP)能抑制大鼠肝微粒体自发的和由Fe_-~(2+)-半胱氨酸、Vit C-NADPH和CCl_4诱发的脂质过氧化,其作用强于人参总皂甙。Fe_-~(2+)-半胱氨酸导致大鼠肝微粒体、线粒体膜流动性降低,同时加入GP可防止膜流动性的下降。     

氧化低密度脂蛋白与动脉粥样硬化

血管内皮细胞损伤及功能失调是导致动脉粥样硬化的一个重要环节。近年来的研究表明,化学修饰的脂蛋白,尤其是氧化低密度脂蛋白(oxidatively modified LDL,ox-LDL)可通过内皮细胞内脂质过氧化损伤,加速泡沫细胞形成以及内皮源性舒张机制障碍等途径而在动脉粥样硬化的发生发展上起关键作用。本文就氧化低密度脂蛋白的致动脉粥样硬化作用作一简要综述。1 ox-LDL的生成过程理化过程和生物学特征低密度脂蛋白(low density lipoprotein,LDL)的升高及其发生氧化后形成ox-LDL是动脉粥样硬化(atherosclero-sis,AS)发生发展的关键步骤。已经证…     

氧化低密度脂蛋白的促动脉粥样硬化作用

目的 :研究氧化低密度脂蛋白ox LDL对血管内皮细胞VEC粘附分子 (ICAM 1,VCAM 1)和单核细胞趋化蛋白 1(MCP 1)表达 ,以及单核细胞(MC)跨膜迁移的影响 ,以阐明ox LDL促AS形成的作用。方法 :以含 2 0 0mg·L- 1ox LDL的M199培养液处理脐静脉内皮细胞 (HUVEC) ,收集细胞和培养上清液 ,以免疫组化卵白素生物素复合法 (ABC法 )、ELISA法测量细胞上ICAM 1和VCAM 1表达 ,以夹心ELISA法测定培养上清液中MCP 1蛋白浓度 ,采用逆转录 -聚合酶链反应RT PCR方法测定VEC中ICAM 1和MCP 1mRNA的表达 ,以微趋化小室测定ox LDL对MC的趋化作用。结果 :HUVEC暴露于ox LDL中 2 4h后 ,VEC上ICAM 1及其mRNA表达显著增加。MCP 1mRNA及MCP 1蛋白表达显著增加 ,同时可见细胞收缩变圆 ,细胞间隙加大 ,显示ox LDL对VEC有较强的细胞毒性 ,ox LDL可引起MC跨膜迁移增加。结论 :ox LDL可引起VEC介导MC粘附和趋化的物质表达显著增加及损伤 ,有利于MC和脂质向内皮下侵入 ,这些结果表明ox LDL在AS形成中起重要作用。     

同型半胱氨酸对大鼠主动脉内皮细胞脂质过氧化的影响

目的：探讨同型半胱氨酸（ＨＣＹ）对大鼠主动脉内皮细胞（ＥＣ）脂质过氧化的影响。方法：取体重１５０～２００ｇ健康雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠胸主动脉,以组织贴块法进行ＥＣ培养,第５代用于实验,各实验组及对照组均为６孔细胞,实验组加入５ｍｍｏｌ／ＬＨＣＹ或５ｍｍｏｌ／ＬＨＣＹ＋２５μｍｏｌ／ＬＣｕ＾２＋对照组不加ＨＣＹ。分别在不同时限观察细胞形态并测定丙二醛（ＭＤ）浓度,超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）活性和乳酸脱氢     

绞股蓝总皂甙对自由基损伤兔主动脉舒张功能的保护作用

用离体兔胸主动脉环实验．观察绞股蓝总皂甙（ＧＰｓ）对电解ｋｒｅｂｓ液、黄嘌呤－黄嘌呤氧化酶及美蓝降低血管舒张功能的影响．结果表明ＧＰｓ能保护血管内皮免受自由基损伤。     

西红花苷对氧化性低密度脂蛋白致内皮细胞损伤的保护作用

目的:探讨西红花苷对氧化性低密度脂蛋白(Ox-LDL)致内皮细胞损伤的保护作用.方法:在体外培养牛主动脉内皮细胞中,加入不同剂量的西红花苷培养12h后,再加入50μg·mL-1的Ox-LDL继续培养24h,测定培养液中乳酸脱氢酶(LDH)活性和一氧化氮(NO)的含量,测定细胞中一氧化氮合酶(NOS)的活性;利用流式细胞仪观察其对Ox-LDL诱导的内皮细胞凋亡的影响.结果:西红花苷(10,10-7,10-6mol·L-1)可剂量依赖性地抑制LDH活性及外漏(P＜0 01),提高细胞内NOS的活性(P＜0.01),使细胞分泌的NO含量升高(P＜0.01);西红花苷对Ox-LDL诱导的内皮细胞凋亡有抑制作用.结论:西红花苷对Ox-LDL致内皮细胞损伤有保护作用.     

绞股蓝总皂甙对内毒素损伤兔左室功能作用的实验研究

绞股蓝总皂甙对内毒素损伤兔左室功能作用的实验研究胡弼，唐朝克，廖端芳，余麟，雷建华（衡阳医学院生理教研室，药理教研室，湖南４２１００１）中国图书分类号Ｒ２８２．７１；Ｒ２８４．１；Ｒ９７２绞股蓝［ＧｙｎｏｓｔｅｍｍａＰｅｎｔａｐｈｙｌｌｕｍ（Ｔｈｕｎ...     

氧化修饰低密度脂蛋白对大鼠肝细胞脂蛋白受体mRNA表达影响的实验研究

目的：探讨氧化修饰低密度脂蛋白（OX-LDL）引起动脉粥样硬化的机理。方法：采用加OX-LDL的培养基培养大鼠肝细胞，原位杂交方法检测大鼠肝细胞中脂蛋白受体mRNA的表达。结果：OX-LDL培养的肝细胞低密度脂蛋白（LDL）受体mRNA表达下降，而高密度脂蛋白（HDL）受体表达活性上调。结论：OX-LDL可通过阻遏或诱导肝细胞LDL和HDL受体mRNA的表达，促进动脉粥样硬化的形成。     

3种中药成分对氧化型低密度脂蛋白诱导人主动脉内皮细胞损伤的影响

目的 探讨3种中药成分（姜黄素、连翘苷、白藜芦醇）对氧化型低密度脂蛋白（Ox-LDL）诱导的人主动脉内皮细胞（HAEC）损伤的影响。方法 实验设空白对照组（等体积基础培养液）,溶剂对照组[等体积含二甲基亚砜（DMSO）的基础培养液],Ox-LDL组（20μg/mL Ox-LDL）,姜黄素(1)(2)(3)(4)组（20μg/mL Ox-LDL+2.5μmol/L、5μmol/L、10μmol/L、20μmol/L姜黄素）,连翘苷(1)(2)(3)(4)组（20μg/mL Ox-LDL+10μmol/L、20μmol/L、40μmol/L、80μmol/L连翘苷）,白藜芦醇(1)(2)(3)组（20μg/mL OxLDL+20μmol/L、40μmol/L、80μmol/L白藜芦醇）,采用四甲基偶氮噻唑盐（MTT）法检测细胞活性,并计算细胞增殖率;采用实时荧光定量聚合酶链式反应（qPCR）法检测细胞微管相关蛋白1轻链3(LC3)和环氧合酶2(COX-2)mRNA的表达水平。结果 与Ox-LDL组比较,姜黄素、白藜芦醇各剂量组,连翘苷(4)组细胞增殖率均显著降低（P <0.01或P ...     

五味子酚对氧化低密度脂蛋白引起的血管内皮细胞及神经细胞损伤的保护作用

目的：氧化低密度脂蛋白（ox-LDL）对血管内皮细胞及神经细胞均有毒性作用，与动脉粥样硬化，神经退行性疾病的发展密切相关。本文探讨了具有很强抗氧化作用的五味子有效成分五味子酚（Sal）对ox-LDI。引起的牛主动脉内皮细胞及神经细胞NGl08-15的损伤和凋亡的保护作用及其初步的机制。方法：以细胞形态，MTT法，LDH释放检测ox-LDL对细胞的损伤及Sal的作用；DNA电泳，核染色质荧光染色观察细胞的凋亡，流式细胞术检测凋亡细胞的百分率；自由基（ROS）荧光探针DCF检测细胞内ROS变化，Western-blot法检测线粒体细胞色素C的释放。结果：ox-LDL可引起内皮细胞和NGl08-15细胞的损伤、凋亡，细胞形态发生明显变化，存活率降低，胞内LDH泄漏增加，出现核染色质聚集、DNA梯状条带，流式细胞术检测出现G1亚峰，凋亡细胞百分率显著增加，并可刺激细胞内ROS产生，促进NGl08-15细胞线粒体细胞色素C的释放增加。提前加入Sal对上述细胞损伤具有明显的保护作用，并能显著抑制细胞的凋亡，减少细胞内ROS产生，降低细胞色素C的表达。结论：Sal能抑制ox-LDL引起的血管内皮细胞及神经细胞的毒性损伤、凋亡，其机制可能与减少胞内自由基、抑制线粒体细胞色素C的释放有关。     

脂联素对氧化低密度脂蛋白损伤内皮祖细胞的影响及作用机制

目的观察脂联素对氧化低密度脂蛋白（ox-LDL）损伤人外周血内皮祖细胞（EPCs）的影响,并探讨其作用机制。方法密度梯度离心法获取外周血单个核细胞,通过流式细胞仪鉴定EPCs。培养7d后,收集贴壁细胞并随机分为正常对照组,ox-LDL组（10 mg·L~（-1））及脂联素干预组（ox-LDL 10mg·L~（-1）加脂联素,浓度分别为1.25、2.5和5mg·L~（-1））。干预24h后采用细胞活力噻唑蓝（MTT）法测定细胞活力,黏附能力测定实验测定其黏附能力,并测定各组细胞上清液中白介素-6（IL-6）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）含量。结果 ox-LDL与EPCs作用后,各组细胞的细胞活力、黏附能力均显著下降,IL-6、TNF-α含量均显著升高;脂联素干预24h后,明显提高了EPCs的黏附能力、细胞活力,降低了IL-6、TNF-a含量。结论脂联素对EPCs具有保护作用,其机制可能与抑制炎症反应有关。     

去甲基雏菊叶龙胆酮对Ox-LDL诱导内皮细胞衰老的影响

目的研究[口山]酮化合物去甲基雏菊叶龙胆酮（DMB）对氧化型低密度脂蛋白（Ox-LDL）致内皮细胞衰老的影响。方法培养人脐静脉内皮细胞（HUVECs），Ox-LDL（100μg·mL^-1）处理48h后，检测β-半乳糖苷酶活性（染色法）和端粒酶活性（TRAP-银染法）评价细胞衰老状态；使用荧光染料H2DCF检测细胞内氧自由基生成。结果Ox-LDL（100μg·mL^-1）处理48h后，β-半乳糖苷酶染色阳性细胞数显著增加，而端粒酶活性显著降低。预先1h给予不同浓度的DMB（1、3和10μmol·L^-1）并孵育48h可显著抑制Ox-LDL诱导的内皮细胞β-半乳糖苷酶染色阳性细胞数增加和端粒酶活性降低。Ox-LDL（100μg·mL^-1）孵育HUVECs 48h，可明显增强细胞内活性氧族（ROS）水平，其效果能被预处理DMB所逆转。结论DMB抑制Ox-LDL诱导的内皮细胞衰老，其作用可能与抑制氧化应激有关。     

金雀异黄素对低密度脂蛋白诱导的内皮细胞c-myc mRNA表达的影响(英文)

目的 :研究金雀异黄素对氧化型低密度脂蛋白诱导的人血管内皮细胞c mycmRNA表达的影响。方法 :低密度脂蛋白采用密度梯度超速离心法从健康人血浆中提取 ,经铜离子氧化制备成氧化型低密度脂蛋白。培养的人血管内皮细胞给予氧化型低密度脂蛋白 2 0 0mg·L- 1或同时给予金雀异黄素 10 0 μmol·L- 1诱导不同时间 (1,2 ,4h) ,提取细胞总RNA进行Northernblot杂交。结果 :2 0 0mg·L- 1氧化型低密度脂蛋白刺激内皮细胞c mycmR NA在 1h增加为对照水平的 3倍 ,2h增加为对照水平的 3.3倍 ,4h降到对照水平以下 ;给予氧化型低密度脂蛋白诱导的同时给予金雀异黄素 10 0 μmol·L- 1其c mycmRNA表达量在 1h为单独给予氧化型低密度脂蛋白诱导的 80 % ,2h为 6 0 %。结论 :金雀异黄素能有效抑制氧化型低密度脂蛋白诱导的人血管内皮细胞c mycmRNA表达增高     

卡维地洛对氧化低密度脂蛋白诱导血管内皮细胞ADMA-DDAH系统的影响

目的 观察卡维地洛对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)二甲基精氨酸-二甲基赖氨酸水解酶(DDAH)活性及表达的影响,以探讨卡维地洛对内源性一氧化氮合酶抑制物不对称二甲精氨酸(ADMA)代谢机制的影响.方法 采用改良的Jaffe法培养原代人脐静脉内皮细胞(HUVECs),取生长良好的3～6代HUVECs用于实验,分为(1)空白对照组:加DMEM培养液;(2)ox-LDL组:加入ox-LDL(100 mg/L,150 mg/L);(3)ox-LDL 卡维地洛组:同时加入150 mg/L ox-LDL及卡维地洛(10 μmol/L)共孵24h后,检测上清液中NO、NOS活性、ADMA含量、L-胍氨酸(L-cit)浓度,采用Western blotting测定细胞裂解液中二甲基精氨酸-二甲基赖氨酸水解酶(DDAH)的蛋白表达.结果 ox-LDL条件培养下,内皮细胞的代谢产物ADMA、ET的量均较空白对照组高,而NO的量及NOS的活性减少;反应DDAH酶活性的L-cit浓度显著降低,且有浓度依赖性,而DDAH的表达无明显变化.卡维地洛干预后,ADMA、ET的量较ox-LDL组降低,NOS活性及NO增加,L-cit浓度明显升高.结论 ox-LDL诱导下,内皮损伤ADMA的增加与DDAH的活性减弱有关,而与DDAH的表达无关.卡维地洛通过增加DDAH活性促进ADMA代谢,使NOS活性增高,抑制ox-LDL对内皮功能的损伤.     

肝硬化患者血中NO、ox-LDL及ET-1的水平

目的　探讨NO、ox LDL及ET 1在肝硬化时的变化及其与肝功能的关系。方法　采用分光光度法和酶联免疫吸附法以及放射免疫分析法分别测定了 5 4例肝硬化患者血中的NO、ox LDL和ET 1水平 ,并与 6 8名正常人进行了对比分析。结果　表明肝硬化组NO、ox LDL、ET 1分别为 (1.34±0 .2 5 ) μmol/L、(0 .48± 0 .0 8)mg/L、(17.5 1± 3.5 6 )ng/L均显著高于正常人组的 (0 .6 6± 0 .18) μmol/L、(0 .32± 0 .0 7)mg/L、(6 .0 7± 1.45 )ng/L(P <0 .0 5 )。且NO、ox LDL及ET 1的含量与肝功能分级相平行。结论　提示NO、ox LDL和ET 1水平的变化可作为评估肝硬化患者病情轻重的指标。     

氧化低密度脂蛋白与动脉粥样硬化的研究

氧化低密度脂蛋白(oxidized low density lipoprotein,ox-LDL)在动脉粥样硬化(atherosclerosis AS)发病过程中的作用逐渐受到人们的重视。ox-LDL通过损伤内皮细胞、参与泡沫细胞形成、调控血管平滑肌的增殖等多个方面影响动脉粥样硬化的发生和发展。抗氧化剂的应用是治疗动脉粥样硬化的一个重要手段。     

Modification of low density lipoprotein potentiates its inhibitory effect on catecholamine secretion in cultured bovine adrenal medullary cells

Low density lipoprotein (LDL) and lipoprotein(a) suppress catecholamine secretion in cultured adrenal medullary cells. Modification of LDL by oxidation or acetylation potentiates various atherogenic actions of LDL. In the present study, we investigated whether the modification of LDL influences catecholamine secretion in cultured bovine adrenal medullary cells. The exposure of LDL to CuSO₄ caused a time-dependent oxidation of LDL. Maximal oxidation of LDL was observed after exposure to CuSO₄ for 24 h. Native LDL inhibited catecholamine secretion induced by carbachol to 68.5% of control. Oxidized LDL caused further inhibition of carbachol-evoked secretion to 37.6% of control. Acetylated LDL inhibited it to 41.0% of control. There was a good correlation between the extent of LDL oxidation and the inhibition of catecholamine secretion. These results suggest that oxidation or acetylation of LDL augments its inhibitory effect on the secretion of catecholamines. Since catecholamines are a risk factor of atherosclerosis, the inhibitory effect by such modified LDL may be a mechanism inhibiting atherosclerotic progression. Received: 29 January 1999 / Accepted: 19 April 1999 / Published online: 22 June 1999     

羟乙基葛根素对过氧化氢致牛脑微血管内皮细胞损伤的保护作用

目的研究牛脑微血管内皮细胞(BCMEC)过氧化损伤机制并探讨羟乙基葛根素对牛脑微血管内皮细胞损伤的保护作用。方法用MTT法和LDH活性检测测定BCMEC的损伤；倒置相差显微镜下一般形态学观察、透射电子显微镜超微结构观察及流式细胞术测定BCMEC凋亡变化。结果H₂O₂ (200 μmol·L^-1)损伤BCMEC后，细胞存活率下降，LDH释放增加，羟乙基葛根素和edaravone可减轻此损伤。H₂O₂ (100 μmol·L^-1)可诱导BCMEC凋亡，羟乙基葛根素 和edaravone对此有保护作用。结论羟乙基葛根素和edaravone对H₂O₂导致的BCMEC坏死和凋亡有保护作用，该作用与其抗氧化作用有关。     

糖化低密度脂蛋白介导的人脐静脉血管内皮细胞增殖及Toll样受体4表达变化与白藜芦醇干预后的影响

目的研究糖化低密度脂蛋白(glycated low density lipoprotein,Gly-LDL)对人脐静脉血管内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)增殖及Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)表达的影响和白藜芦醇干预后的变化。方法通过细胞技术试剂盒(cell counting kit-8,CCK-8)测定不同浓度Gly-LDL处理12、24及48 h后HUVEC增殖能力;实时定量聚合酶链式反应(quantitative real-time polymerase chain reaction,QRT-PCR)检测TLR4的表达量。分别采用CCK-8和QRT-PCR检测Gly-LDL加白藜芦醇干预24 h后HUVEC增殖能力及TLR4水平变化。结果不同浓度Gly-LDL干预12 h后高浓度组HUVEC细胞增殖较正常组下降,组内比较干预24 h、48 h后各浓度Gly-LDL组细胞增值率均较正常组下降,组间比较两者无统计学差异。与普通LDL组比较,TLR4信使 RNA表达水平随着干预时间和Gly-LDL浓度增加。不同浓度白藜芦醇干预24 h后,均能明显提高细胞增殖率,抑制Gly-LDL上调的TLR4信使RNA表达。结论 Gly-LDL可抑制内皮细胞增殖能力,并引起TLR4信号的激活。白藜芦醇能有效改善Gly-LDL介导的HUVEC增殖能力下降和TLR4信号水平的上调,减轻Gly-LDL对内皮细胞的损伤。