脑缺血预处理对脑缺血再灌注大鼠血脑屏障通透性和基质金属蛋白酶-9表达的影响

目的 探讨脑缺血预处理(ischemic preconditioning,IP)对脑缺血再灌注大鼠血脑屏障通透性和基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)表达的影响.方法 154只Wistar大鼠随机分为假手术组(14只)、非缺血预处理(non-ischemic preconditioning,NIP)组(70只)和IP组(70只),后两组再随机分为5个亚组,每组14只.线栓法建立大脑中动脉闭塞模型,缺血预处理10 min,分别在IP后1、3、7、14和21 d进行再次缺血2 h再灌注22 h.采用2,3,5-氯化三苯基四氮唑(2,3,5-triphenyltetrazolium chloride,TTC)染色测定脑梗死体积,通过测定渗出血管外的伊文思蓝(Evans blue,EB)含量评价血脑屏障通透性,采用于湿重法评价脑水肿程度,免疫组化染色和原位杂交法检测MMP-9蛋白和mRNA表达.结果 与NIP组相应亚组比较,IP组缺血预处理1、3和7 d亚组神经功能缺损评分显著降低,脑梗死体积显著缩小,EB含量和脑水含量显著降低,MMP-9蛋白和mRNA表达均显著下调(P＜0.05或P＜0.01).IP组1、3和7 d亚组梗死体积和MMP-9 mRNA表达较IP组14 d和21 d亚组显著缩小或下调,3 d和7 d亚组EB含量、脑水含量和MMP-9蛋白表达较其他亚组显著降低,其中以3 d亚组降低最显著(P＜0.05).结论 缺血预处理诱导的血脑屏障通透性改变和MMP-9表达下调在脑缺血耐受中发挥着重要作用.     

脑缺血预处理对脑缺血再灌注大鼠血脑屏障通透性和基质金属蛋白酶-9表达的影响

Objective To investigate the effects of ischemic preconditioning (IP) on blood-brain barrier permeability and matrix metalloproteinase-9 expression after cerebral ischemia reperfusion in rats.Methods A total of 154 Wistar rats were randomly divided into sham operation (n = 14),non-ischemic preconditioning (NIP,n = 70),and IP (n = 70) group.The latter two groups were redivided into 5 subgroups (n = 14 in each subgroup).A middle cerebral artery occlusion model was induced by intraluminal suture method.After 10 minutes IP,re-ischemia for 2 hours and reperfusion for 22 hours were performed at day 1,3,7,14,and 21,respectively.The infarct volume was detected using 2,3,5-triphenyltetrazolium chloride (TTC)staining.The BBB permeability were evaluated by measuring the content of the extravascular exudation of Evan's blue (EB).The degree of cerebral edema was evaluated using the wet-dry weight method.MMP-9 protein and mRNA expression were detected by immunohistochemical staining and in situ hybridization.Results Compared to the corresponding subgroups in the NIP group,the neurological deficit scores,infarct volume,EB content,and brain water content were decreased significantly,and MMP-9 protein and mRNA expression were down-regulated significantly in the day 1,3,and 7 subgroups in the IP group (P ＜ 0.05 or P ＜ 0.01 ).The infarct volume and MMP-9 mRNA expression of the day 1,3,7 subgroups in the IP group were more significantly reduced or down-regulated than those of the day 14 and21 subgroups in the IP group.The EB content,brain water content,and MMP-9 protein expression of the day 3 and 7 subgroups were more significantly lower than those in other subgroups.Among them,they were decreased most significantly in the day 3 subgroup (P ＜ 0.05).Conclusions The changes of IP-induced BBB permeability and the down-regulated MMP-9 expression may play important roles in cerebral ischemic tolerance.     

金纳多对脑缺血再灌注损伤大鼠MMP-9活性和血脑屏障通透性的影响

目的探讨金纳多对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用。方法采用线栓法制备大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型,将成模大鼠随机分为假手术组、缺血再灌注组、金钠多治疗组,各组按缺血再灌注6、12、24 h三个时间点分为3个亚组,每组10只。用RT-PCR方法测定损伤侧脑组织中MMP-9活性变化,用伊文思蓝方法测定同侧脑组织血脑屏障通透性。结果 (1)随缺血再灌注时间延长,MMP-9含量、EB含量开始逐渐增加,各组之间表达差异均具有统计学意义(P<0.05)。(2)金纳多治疗组MMP-9活性及EB含量各个时间点明显低于缺血再灌注组(P<0.05)。结论金纳多通过抑制脑缺血再灌注大鼠MMP-9的活性,减轻血脑屏障通透性,可能是其发挥脑保护作用的机制之一。     

早期血脑屏障损伤在急性缺血性卒中 tP A溶栓后出血性转化中的作用及其机制

出血性转化（hemorrhagictransformation,HT）是急性缺血性卒中患者组织型纤溶酶原激活剂（tissue type plasminogen activator, tPA）溶栓治疗后最严重的并发症,极大地限制了tPA的临床应用。早期血脑屏障（blood brain barrier, BBB）损伤可能是发生HT 的重要机制,维持BBB完整性可显著降低HT 风险。文章就早期BBB损伤在tPA溶栓后HT中的作用、机制和预防措施进行了综述。     

一种用于溶栓研究的大鼠血栓栓塞性卒中模型的改进

目的 建立并验证一种改进的大鼠血栓栓塞性卒中模型.方法 60只Sprague-Dawley大鼠取股动脉血与凝血酶混匀后注入PE-50导管制备体外血栓,通过右侧颈外动脉插入导管并将栓子注入颈内动脉,建立血栓栓塞性脑缺血模型.30只大鼠随机分为大量栓子组(12个栓子,n=10)、中等量栓子组(10个栓子,n=10)和少量栓子组(8个栓子,n=10),注入栓子后2h进行神经功能评分,比较各组模型制作成功率;注入栓子后24 h处死大鼠取脑进行2,3,5-氯化三苯基四氮唑染色,评价梗死后出血、梗死体积、出血发生率和死亡率.选择模型制作成功率高的栓子组随机分为生理盐水组(n=12)和重组组织型纤溶酶原激活剂(recombinant tissue-type plasminogen activator,rtPA)组(n=12),分别在栓子注入后3h给予生理盐水和rtPA,血栓注入前以及血栓注入后2、6、12和24h分别进行神经功能评分;栓子注入后24 h处死大鼠取脑进行2,3,5-氯化三苯基四氮唑和伊文思蓝染色,评价出血发生率、梗死体积、水肿程度以及血脑屏障通透性.结果 少量栓子组仅40％出现神经功能缺损,梗死体积仅为(10.54±2.82)％.中等量栓子组与大量栓子组成功率分别为80％和100％,均显著性高于少量栓子组(P=0.011),梗死体积亦显著性大于少量栓子组(F=40.897,P=0.000).大量栓子组给予rtPA后大鼠平均生存时间少于24 h,故选择中等量栓子组进行rtPA溶栓效果研究.rtPA组梗死体积和神经功能评分均较生理盐水组显著改善(t=7.728,P=0.000),而两组间出血发生率、脑水肿程度和血脑屏障通透性无显著性差异.结论 经过改良的注入10个栓子的血栓栓塞性脑缺血模型的稳定性和可重复性良好,且经溶栓后神经功能显著改善,适用于脑缺血病理生理学和溶栓治疗的实验研究.     

急性脑梗死患者重组组织型纤溶酶原激活物静脉溶栓后脑出血

重组组织型纤溶酶原激活物(recombinant tissue plasminogen activator,rtPA)静脉溶栓是急性缺血性卒中最有效的治疗手段,其最严重的并发症为有症状脑出血,文献撒道其总体发生率为6%,与血管损伤和通透性增加有关.某些临床特征、影像学和实验室检查可预测脑出血并发症风险.溶栓治疗后发生脑出血并发症的患者病死率和致残率极高,预后很差.文章对溶栓后脑出血的分型、发生率、预测因素和预后进行了综述.     

肝细胞癌中u-PA和MMP-9的表达及意义

目的探讨尿激酶型纤溶酶原激活物(u-PA)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)在肝细胞癌中的表达及其临床意义。方法采用免疫组化法对80例肝细胞癌标本进行u-PA和MMP-9检测,并以12例肝移植供肝作为阴性对照。结果u-PA及MMP-9在肝癌中的表达阳性率分别为83.75%、76.25%,明显高于癌旁组织(33.75%、30%),P<0.01。u-PA及MMP-9在伴转移及癌栓形成肝癌的阳性表达率分别为91.43%、85.71%,明显高于非转移者(77.78%、68.89%),P<0.05;且u-PA、MMP-9阳性表达间呈正相关。结论u-PA和MMP-9的高表达与肝细胞癌的侵袭转移有关,二者联检有助于判断肝细胞癌的预后。     

依达拉奉对于急性脑梗死溶栓患者MMP-9水平及出血性转化的影响

<正>重组组织型纤溶酶原激活物(rt-PA)是美国食品和药品监督管理局(FDA)唯一批准使用于急性缺血性卒中溶栓治疗的药物,时间窗内rt-PA静脉溶栓为目前公认的改善缺血性卒中结局最有效的治疗方法,有效改善血管再通及神经功能损伤〔1〕。NINDS〔2〕、亚特兰蒂斯(ALTLANTIS)以及欧洲协作急性卒中研究(ECASS)等临床研究结果都证明了卒中3 h内使用rt-PA静脉溶栓安全有效〔3〕,ECASSⅢ用13年研究把时间窗扩     

高龄脑梗死患者重组组织型纤溶酶原激活剂静脉溶栓的有效性和安全性

目的探讨高龄脑梗死患者应用重组组织型纤溶酶原激活剂(rt -PA)静脉溶栓治疗的有效性和安全性。方法选择急性脑梗死患者196例,根据患者年龄分为<80岁组141例和≥80岁组55例,发病<4.5 h的患者给予rt-PA静脉溶栓治疗,比较2组患者溶栓前、溶栓后14 d的美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分,观察溶栓后颅内出血(ICH)和症状性颅内出血(sICH)的发生率。90 d随访时,采用改良Rankin's评分评定临床结局。结果 2组溶栓后14 d的NIHSS评分都较溶栓前显著降低(P<0.01),<80岁组较≥80岁组NIHSS评分降低更明显(P<0.01)。≥80岁组的病死率显著高于<80岁组(P<0.05);<80岁组和≥80岁组预后良好的比例分别为57.5%和45.5%(P>0.05),ICH发生率分别为16.3%和21.8%,sICH发生率分别为6.4%和14.5%(P>0.05)。结论高龄脑梗死患者应用rt-PA静脉溶栓和年龄<80岁者同样是安全有效的。     

尿激酶溶栓对大脑中动脉血栓栓塞模型大鼠MMP-9、血脑屏障通透性和脑出血的影响

目的 观察栓塞性脑缺血后及应用尿激酶(urokinase,UK)溶栓后基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)的表达及对脑出血量和血脑屏障通透性的影响,探讨MMP-9与血脑屏障通透性和溶栓后脑出血之间的关系.方法 通过颈动脉内注射自体血制作大鼠血栓栓塞性大脑中动脉闭摩模型,缺血6h后静脉应用UK,24 h后分别采用免疫组化法检测脑组织MMP-9表达、伊文思蓝渗出法检测血脑屏障通透性、TTC染色法检测脑梗死体积、分光光度法检测脑出血量.结果 脑缺血组MMP-9表达显著高于假手术组(P＜0.01),UK溶栓组显著高于脑缺血组(P＜0.01).脑缺血组伊文思蓝含量为(5774.00±1659.70)ng/g,显著高于假手术组的(643.33±151.34)ng/g(P＜0.01),UK溶柃组为(6283.83±1099.28)ng/g,有高于脑缺血组的趋势.UK溶柃组和脑缺血组脑出血量分别为(3.16±8.84)μl(中位数±四分位数)和(0.00±1.48)μl,脑出血发生率分别为25.00%和4.17%.结论 UK溶栓可能上调 MMP-9表达,MMP-9表达与BBB通透性增加与溶栓后脑出血有关.     

基质金属蛋白酶-9与脑缺血后血脑屏障破坏和神经血管重塑

基质金属蛋白酶-9在血脑屏障破坏中起着重要作用.脑缺血后,血脑屏障破坏会直接影响神经血管单元修复.对基质金属蛋白酶-9介导的缺血性脑损伤和神经血管重塑进行深入的研究,有望为临床脑缺血的诊治开辟一条新途径.     

丁苯酞对局灶性脑梗死大鼠脑水肿、血脑屏障通透性和皮质RhoA表达的影响

目的 探讨丁苯酞对局灶性脑梗死大鼠脑水肿、血脑屏障通透性和皮质RhoA表达水平的影响.方法 雄性Sprague-Dawley大鼠220只,按随机数字表法分为假手术组、脑缺血组和丁苯酞组（40 mg/kg,1次/d,灌胃）.采用光化学法建立大鼠局灶性脑梗死模型.分别于模型制作后3、12、24、72和144 h时,采用干湿重法和伊文思蓝渗出法检测脑组织含水量和血脑屏障通透性.在模型制作后24 h,采用免疫组化染色和蛋白质印迹法检测梗死周围皮质RhoA蛋白表达水平.结果 与假手术组比较,脑缺血组和丁苯酞组脑组织含水量（除6h时间点外）和血脑屏障通透性均显著性增高（P均＜0.05）.免疫组化染色和蛋白质印迹分析提示,脑缺血组和丁苯酞组梗死周围皮质RhoA表达显著上调.与脑缺血组比较,丁苯酞组各时间点脑组织含水量和血脑屏障通透性均显著性降低（P均＜0.05）,RhoA表达水平也显著性降低（P＜0.05）.结论 丁苯酞可减轻局灶性脑梗死大鼠脑水肿,抑制血脑屏障的破坏,下调RhoA表达.     

静脉溶栓治疗后并发远隔部位有症状颅内出血的急性缺血性卒中患者的临床特征和转归

目的 探讨静脉溶栓后远隔部位有症状颅内出血(remote symptomatic intracranial hemorrhage, sICHr)的急性缺血性卒中患者临床特征和转归.方法 回顾性纳入静脉溶栓治疗后sICHr的急性缺血性卒中患者,收集其临床资料并结合文献进行分析和总结.结果 共纳入6例静脉溶栓治疗后发生sICHr的急性缺血性卒中患者,其中4例为男性,3例有抗血小板药使用史,2例伴有心房颤动,4例有高血压,3例有既往卒中史,4例有吸烟史,4例在静脉溶栓后2 h内发生.在总共14个出血灶中(除外梗死区出血),10个出现在大脑皮质区.3例在1周内死亡,1例呈植物状态.结论 急性缺血性卒中患者静脉溶栓后sICHr多位于大脑皮质.静脉溶栓后sICHr的急性缺血性卒中患者转归差,病死率高.     

大脑中动脉闭塞部位对急性缺血性卒中患者静脉溶栓治疗后转归的影响

目的 探讨大脑中动脉(middle cerebral artery,MCA)闭塞部位对急性缺血性卒中患者静脉重组组织型纤溶酶原激活剂(recombinant tissue plasminogen activator,rtPA)溶栓治疗后转归的影响.方法 连续纳入在发病4.5h内接受rtPA静脉溶栓治疗的急性MCA闭塞性卒中患者.将MCA闭塞部位分为MCA近段(M1近段)和MCA远段(M1远段、M2段及以远).早期神经功能改善定义为溶栓后24 h美国国立卫生研究院卒中量表(National Institutes of Health Stroke Scale,NIHSS)评分较基线时改善≥4分或NIHSS评分为0分.根据90 d时改良Rankin量表(modified Rankin Scale,mRS)评分分为转归良好组(0～2分)和转归不良组(3～6分).结果共纳入70例MCA闭塞缺血性卒中患者,其中MCA近段闭塞患者22例(31.4％),MCA远段闭塞患者48例(68.6％);转归良好52例(74.3％),转归不良18例(25.7％).MCA近段闭塞组心房颤动(x2=4.541,P=0.033)患者比例以及入院时(t=5.192,P=0.026)和溶栓后24 h时(-5.365,P=0.024)NIHSS评分均高于MCA远段闭塞组.MCA近段闭塞组早期神经功能改善的患者比例显著低于MCA远段闭塞组(x2 =9.434,P=0.002),而有症状颅内出血发生率(x2 =9.563,p=0.002)和7d内病死率(x2=14.491,P＜0.001)均显著高于MCA远段闭塞组.转归不良组发病至溶栓时间(t=6.346,P=0.014)以及入院时(t=4.498,P=0.038)和溶栓后24 h时(=4.866,P=0.028)NIHSS评分以及MCA近段闭塞的患者比例(x2=18.710,P＜0.001)显著长于或高于转归良好组.多变量logistic回归分析显示,MCA近段闭塞[优势比(odds ratio,OR) 14.385,95％可信区间(confidence interval,CI)2.525 ～ 81.925;P=o.003]、发病至溶栓时间较长(OR 12.927,95％ CI2.624 ～ 61.748;P=0.002)、溶栓后24 h时NIHSS评分较高(OR 3.492,95％ CIl.027～11.880;P=0.045)是90 d时转归不良的独立预测因素.结论 不同部位MCA闭塞患者静脉溶栓的转归存在差异.MCA闭塞部位、发病至溶栓时间、溶栓后24 h时NIHSS评分和年龄是MCA供血区急性缺血性卒中患者静脉溶栓后转归的独立预测因素.     

心房颤动对静脉溶栓治疗急性缺血性卒中转归的影响

目的 探讨心房颤动(atrial fibrillation,AF)对急性缺血性卒中患者静脉溶栓后临床转归和出血性转化(hemorrhagic transformation,HT)的影响.方法 回顾性纳入接受静脉重组组织型纤溶酶原激活剂溶栓治疗的急性缺血性卒中患者.90 d时改良Rankin量表评分0～2分定义为转归良好.采用多变量logistic回归分析确定AF与静脉溶栓后临床转归的相关性.结果 共纳入160例接受静脉溶栓治疗的急性缺血性卒中患者,其中67例(41.88％)合并AF.与非AF组相比,AF组年龄更大[中位数和四分位数间距:77(71 ～83)岁对69(59 ～78)岁;Z=4.142,P＜0.001],基线美国国立卫生研究院卒中量表(National Institutes of Health Stroke Scale,NHISS)评分更高[11(6～17)分对7(4 ～14)分;Z=2.623,P=0.009].AF组溶栓后24 h[3.0(1.0～4.5)分对2.0(0～6.0)分;Z=-0.312,P=0.775]和7 d[4.0(2.0～5.0)分对5.0(2.0～8.0)分;Z=1.574,P=0.115]时NIHSS评分较基线降低值以及90 d时转归良好患者比例(38.81％对25.82％;x2 =3.063,P=0.080)与非AF组差异均无统计学意义,但24 h内HT(14.93％对5.38％;x2=4.179,P=0.041)和90 d内死亡(16.42％对6.45％;x2 =4.073,P=0.044)患者比例显著高于非AF组.多变量logistic回归分析显不,AF与90 d时临床转归[优势比(odds ratio,OR0.95,95％可信区间(confidence interval,CI)0.381～2.366;P=0.912]、24 h内HT(OR1.992,95％ CI 0.580 ～6.369;P=0.285)以及90 d内死亡(OR 2.483,95％ CI0.727～8.586;P=0.146)均无独立相关性.结论 AF不是影响急性缺血性卒中患者静脉溶栓后90 d时临床转归和24 h内HT的独立危险因素.     

陷窝蛋白在脑缺血后血脑屏障破坏中的作用

陷窝蛋白是陷窝的主要组成蛋白,也是实现其生理功能的重要蛋白。陷窝蛋白表达于平滑肌细胞、内皮细胞和脂肪细胞。陷窝既参与了细胞的脂肪摄取、胞吞和胞饮等基本生理过程,也对细胞的信号转导以及大分子物质的转运和通透起着非常重要的作用。随着对陷窝蛋白的分子构成和生物化学功能研究的深入,越来越多的研究表明陷窝及其主要成分陷窝蛋白在脑血管病的病理生理学过程起着重要作用。文章就陷窝蛋白在脑缺血后血脑屏障破坏中的作用进行了综述。     

缺血性卒中患者溶栓治疗后出血性转化的预测因素

出血性转化是缺血性卒中后,特别是溶栓治疗后的常见并发症,其致残率和病死率都很高,因此限制了溶栓治疗的临床应用。文章对缺血性卒中溶栓治疗后出血性转化的类型、可能的机制和预测因素进行了综述,期望为缺血性卒中的临床治疗和研究提供参考。