AutoPBSC程序与MNC程序采集外周血造血干细胞的比较研究

目的比较COBE Spectra血细胞分离系统的自动采集程序(AutoPBSC程序)与4.7版半自动采集程序(MNC程序)采集健康供者外周血造血干细胞的差异及对供者血常规相关指标的影响。方法 2002年3月~2008年3月期间对53例健康供者随机采用Auto PBSC程序和MNC程序进行了113例次造血干细胞采集,其中采用AutoPBSC程序63例次,MNC程序50例次。分析比较2种程序采得外周血造血干细胞(PBSC)的采集体积、单个核细胞百分数及总数、CD34+细胞百分数及总数等指标,采集前后供者红细胞、血小板变化。结果 2种程序采集外周血造血干细胞的体积、单个核细胞百分数、CD34+细胞百分数、CD34+细胞总数、采集袋中血小板及红细胞混入量、采集前后供者血小板计数的变化存在显著性差异(P<0.01);2种程序采集的单个核细胞总数无显著性差异;血小板计数在应用MNC程序组呈下降趋势,较AutoPBSC程序更加明显(P<0.01);1例地中海贫血供者应用Auto PBSC程序采集失败。结论 2种程序均可有效采集外周血造血干细胞,与MNC程序比较AutoPBSC程序具有以下优势:单个核细胞和CD34+细胞百分数提高、采集物体积减少有利于采集物的冻存、采集物中血小板数少对供者血小板影响小。地中海贫血供者需慎用Auto PBSC程序。     

血细胞分离机不同采集程序对外周血造血干细胞分离效果的影响

目的:观察COBE Spectra血细胞分离机Auto PBSC程序、MNC程序及Spectra Optia血细胞分离机MNC程序采集自体外周血造血干细胞的效果及不良反应。方法:对41例采集对象分别采用COBE Spectra血细胞分离机Auto PBSC程序、MNC程序及Spectra Optia血细胞分离机MNC程序进行自体外周血造血干细胞采集,观察3种采集程序采集的MNC及CD34~+细胞数、采集后患者血红蛋白及血小板下降的差异以及3种采集程序采集过程中的不良反应。结果:在全血处理量及采集时间基本相同的情况下,COBE Spectra和Spectra Optia的MNC程序采集的MNC数较COBE Spectra Auto PBSC程序采集的数高,但采集的CD34~+细胞数均低于Auto PBSC程序采集的CD34~+细胞数(P0.05)。COBE Spectra和Spectra Optia的MNC程序采集的终产物体积大于Auto PBSC程序采集的终产物体积。Spectra Optia血细胞分离机MNC程序与COBE Spectra血细胞分离机MNC程序相比,采集的M NC数无显著差异,但Spectra Optia血细胞分离机M NC程序采集的CD34~+细胞数大于COBE Spectra血细胞分离机MNC程序采集的CD34~+细胞数(P0.05)。Spectra Optia的MNC程序采集后患者血小板及血红蛋白较采集前下降幅度最低(P0.05)。3种程序采集过程中的不良反应相似,患者均可耐受。结论:COBE Spectra血细胞分离机Auto PBSC程序和Spectra Optia血细胞分离机MNC程序采集自体外周血造血干细胞优于COBE Spectra血细胞分离机的MNC程序。Spectra Optia的MNC程序采集后患者血小板及血红蛋白损失最低。     

两种不同程序采集外周血造血干细胞的效果比较分析

目的研究COBE Spectra血细胞分离机的2种不同程序采集外周血造血干细胞的效果与优缺点。方法将152例次外周血造干细胞采集术随机分成2组,分别使用Auto PBSC程序和MNC程序,将2组采集后的干细胞(PBSC)各种数值进行比较,同时比较2组被采集者术后的外周血液指标变化。结果在获得PBSC中的单个核细胞(MNC)总数相当的情况下,Auto PBSC程序采集的产品体积少于MNC程序(P<0.05),单个核细胞和CD34+细胞纯度提高(P<0.05),其中混有的血小板数和红细胞数也少于后者(P<0.05)。采用Auto PBSC程序的供/患者,其外周血的Plt下降明显低于采用MNC程序者(P<0.05),但Auto PBSC程序采集所耗时间与总循环血量要高于MNC程序(P<0.01),MNC程序在短时间内大容量的干细胞采集上具有优势。结论 2种程序各有优缺点,应根据供/患者具体状况选择不同的采集方法,以达到最佳采集效果。     

rhG-CSF动员健康供者CD34^＋细胞产率的影响因素分析

为探讨rhG—CSF动员健康供者年龄、性别等因素对采集物CD34^＋细胞产率的影响,分析61例健康供者外周血采集物CD34^＋细胞数量与自身特点的相关性,并进行多因素回归分析。以供者性别、年龄、身高、体重、体重指数（BMI）和采集时间作为研究参数,外周血采集物单核细胞计数、CD34^＋细胞占有核细胞百分比、CD34^＋细胞计数、CD34^＋细胞每公斤体重（供者）计数的均值作为研究变量。结果表明,供者年龄是影响CD34^＋细胞产率主要因素,呈中等负相关（-0．60〈r〈-0．45,P〈0．005）。偏相关分析排除身高、体重、BMI的影响,年龄仍和CD34^＋细胞产率呈中等负相关（-0．50〈r〈-0．35,P〈0．02）。BMI仅与CD34^＋细胞每公斤体重计数呈微弱负相关（r=-0．297,P〈0．05）,性别对CD34^＋细胞产率无明显影响,CD34^＋细胞计数的差别仅出现在男性和女性低龄组（年龄〈35岁）间,男性身高、体重、BMI为CD34^＋细胞计数增加的有利因素。供者采集时间为给药后第4天采集,70％供者CD34^＋细胞产率达峰值。结论：年龄应作为供者选择的首要因素,性别、身高、体重和BMI对CD34^＋细胞产率的影响是次要的。     

应用白细胞管路采集外周造血干细胞的效果评价

目的采用美国COBE Spectra血细胞分离机,比较Auto PBSC管路和白细胞管路采集外周血造血干细胞的效果。方法选择供者/患者接受外周血造血干细胞单采46例64人次,AutoPBSC管路采集21例31人次,平均年龄（32.75±10.26）岁,白细胞管路采集25例33人次,平均年龄（31.47±14.21）岁;比较两组采集产品MNC、CD34＋细胞数、采集效率、采集产品体积、红细胞和血小板含量,无出血倾向和不良反应。结果两组采集产品的MNC、CD34＋细胞数、采集效率、红细胞和血小板含量的差异均无统计学意义;MNC白细胞管路组采集产品体积高于Auto PBSC管路组。64例供者采集后均无出血倾向,仅有5例出现轻度不良反应。结论两组管路采集外周血干细胞的效果无差异,采集产品需超低温冰冻保存者使用Auto PBSC管路组采集更为高效经济和安全。     

rhG-CSF动员的骨髓和外周血干细胞混合移植物首次采集时供者外周血单核细胞计数反映混合采集物中CD34^＋细胞含量

本研究探讨人重组粒细胞集落刺激因子（rhG-CSF）动员的骨髓和外周血干细胞混合移植健康供者首次干细胞采集时供者外周血单核细胞数量与骨影外周血混合采集物中CD34^＋细胞数量的关系。对70名亲缘健康供者均皮下注射rhG-CSF5μg／（kg·d）,连续5天。第4天和第5天分别采集骨髓和外周血干细胞。首次干细胞采集时用EX2100血细胞分析仪检测供者外周血细胞计数,同时应用流式细胞仪测定骨髓和外周血混合采集物中的CD34^＋细胞数量。结果表明：rhG—CSF动员的70例供者首次干细胞采集时外周血单核细胞的数量为（1．15±0．60）×10^9／L;骨髓和外周血采集物中的CD34^＋细胞总量分别是（5．854±2．93）×10^7和（1．33±0．77）×10^8;骨髓和外周血混合采集物的CD34^＋细胞总量是（1．92±0．86）×10^8。Pearson和Spearman分析显示首次干细胞采集时供者外周血单核细胞计数（×10^9／L）与骨髓采集物中CD34^＋细胞的总量（相关系数：r=0．265,P=0．027）、外周血采集物中CD34^＋细胞总量（r=0．340,P=0．004）以及混合移植物中CD34^＋细胞的总量（r=0．398,P：0．001）均存在显著的相关性;多因素分析表明,首次干细胞采集时供者外周血单核细胞计数与骨髓采集物、外周血采集物以及混合移植物中CD34^＋细胞的总量均呈正相关关系（P值分别为0．027、0．004和0．001）。首次干细胞采集时供者外周血单核细胞数量对混合移植物中CD34^＋细胞总量预测的敏感性是71％,特异性是70％（P=0．007）。结论：rhG-CSF动员的骨髓和外周血混合移植健康供者首次干细胞采集时外周血单核细胞计数可有效预测输注给受者的CD34^＋细胞总量即采集效果。     

实体瘤患者与健康供者外周血造血干细胞未动员采集因素分析

目的研究影响外周血造血干细胞（PBSC）未动员的采集因素。 方法对同济大学附属同济医院自2016年1月至2018年6月56例实体瘤组患者及53名健康组供者未采用粒细胞集落刺激因子动员（简称未动员）就使用MCS^＋血细胞分离机采集PBSC,比较分析2组采集前白细胞（WBC）计数、红细胞比容（Hct）、血小板（PLT）计数、血红蛋白（Hb）浓度、单个核细胞（MNC）计数及采集效果差异,并分别与部分影响因素进行相关性分析。 结果所有未动员采集者均成功采集到一定数量的MNC,CD34^＋细胞。（1）健康组采集前Hct、PLT、Hb指标均高于疾病组［（44.81±3.99）% vs （38.38±4.49）%;（230.91±44.63）×10⁹/kg vs（202.88±60.39）×10⁹/kg;（146.09±16.62）g/L vs （129.07±15.54）g/L］,差异具有统计学意义（t=7.84、2.74、5.51,P<0.05）。（2）健康组采集物中MNC总数、WBC计数均高于疾病组［（2.81±1.35）×10⁸/kg vs（1.99±1.05）×10⁸/kg;（92.23±29.46）×10⁹/L vs（54.60±23.61）×10⁹/L］,CD34^＋、MNC却低于疾病组［（1.17±0.66）% vs（1.65±1.01）%;（53.68±20.19）% vs（65.11±16.45）%］,差异均有统计学意义（t=3.54、7.35、2.91、3.24,P<0.05）。（3）健康组采集物CD34^＋细胞及MNC总数均与采集前Hct指标成负相关（r=-0.30915、-0.19624,P=0.00004、0.01119）,CD34^＋细胞数与采集血总容量、采集者体质量成负相关（r=-0.04114、-0.15436,P=0.02612、0.03071）;（4）疾病组采集物CD34^＋细胞及MNC总数与采集前PLT计数、采集者体质量指数成正相关（r=0.14135、0.19609;r=0.04678、0.14765,P<0.05）,CD34^＋细胞数与采集前WBC计数、体质量成正相关（r=0.02028、0.18605,P<0.05）。 结论所有未动员采集者其PBSC采集效果与采集前WBC和PLT计数、Hct、体质量指数、采集循环血量和成品量均有关联,其中健康组采集物中MNC总数、WBC计数高于疾病组。     

未动员的外周血造血干细胞采集效果及影响因素

目的探讨未动员的外周血造血干细胞(PBSC)采集效果及影响因素。方法应用血细胞分离机对112例未经重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)动员的健康供者进行PBSC采集,并分析年龄、体质量指数(BMI)、采集前血常规指标、采集循环血容量、处理血量及循环次数等因素对男女两组供者所采集获得的单个核细胞(MNC)、CD34+计数的影响,同时比较分析男女两组供者采集前血常规指标及采集过程、采集物等指标。结果男性组年龄,BMI,采集前血细胞比容(Hct)、血红蛋白(Hb)、MNC计数、白细胞(WBC)计数,总循环血量高于女性组,而采集处理血量、采集物中MNC计数低于女性组,差异均有统计学意义(P<0.05)。在男性组中,采集物中MNC计数的影响因素为采集循环数(P=0.018),CD34+计数的影响因素为采集前血小板(PLT)计数(P=0.048)。女性组年龄、采集前PLT计数、WBC计数、MNC百分比、MNC计数是采集物中MNC计数的影响因素(P<0.05),采集前Hct、PLT计数及采集处理血量是采集物中CD34+计数的影响因素(P<0.05)。结论未经rhG-CSF动员的健康供者其外周血中存在一定数量的MNC、CD34+细胞,并能采集到满足临床嵌合抗原受体T细胞疗法所需要的MNC阈值。健康供者不同年龄、性别、总循环血量等可致采集效果不一致;采集前关注血常规中PLT计数有助于预测PBSC采集效果。     

单中心191例健康供者应用G-CSF动员造血干细胞的影响因素分析

本研究旨在探讨粒细胞集落刺激因子（G-CSF）动员外周血造血干细胞的影响因素及对健康供者的影响。181例志愿健康供者应用G-CSF5-10μg/（kg·d）动员,10例应用G-CSF3．3-4．9μg/（kg·d）动员,12h1次,连续动员4-5d;采集、检测外周血中单个核细胞（MNC）数与CD34＋细胞数,并观察供者动员及采集过程中的不良反应。结果表明,与动员前相比,动员后（采集前）供者外周血白细胞数平均升高7倍（P〈0．01）;血小板数明显下降（P〈0．01）;血红蛋白含量无明显差异性。动员第4或5天采集效果无差异。男性供者采集的MNC、CD34＋细胞数高于女性（P〈0．01）,高体重供者采集的MNC、CD34＋数高于低体重供者,年龄对采集效果无明显影响。G-CSF剂量与采集效果无线性关系。供者不良反应轻微。结论：G-CSF可以有效动员外周血造血干细胞,供者无明显的不良反应。     

两种血细胞分离机干/祖细胞采集效果及供者采集前后血液指标变化的比较

目的比较Fenwal CS-3000 Plus(以下简名称Fenwal)与Amicus 2种血细胞分离机分离外周血造血干/祖细胞的效果及干/祖细胞采集后供者血液指标的变化。方法共有56名供者入组,Fenwal组32名,年龄(36.2±11.6)岁,选择单个核细胞采集程序,共循环37次;Amicus组24名,年龄(35.4±12.1)岁,选择MNC采集程序共循环27次。比较2组采集物白细胞总数、单个核细胞百分率、CD34+细胞数及采集前后供者Hct、Plt的变化。结果2组采集物的白细胞数、单个核细胞百分率、CD34+细胞数、采集效率均差异无统计学意义;2组采集后供者Plt下降率Fenwal组供者较Amicus组高;2组采集后供者Hct下降率差异无统计学意义;2组采集物中MNC、CD34+细胞数均与外周血中MNC呈正相关,CD34+细胞百分率与外周血MNC无相关性。结论在分离外周血干/祖细胞方面Fenwal与Amicus没有明显差异。     

COAEP联合粒细胞集落刺激因子动员及采集造血干细胞在自体外周血干细胞移植中的应用

目的：探讨COAEP化疗方案联合粒细胞集落刺激因子（G-CSF）治疗对血液病患者外周血干细胞（PBSC）动员的效果。方法：选择恶性血液病患者24例，其中非霍奇金淋巴瘤（NHL）15例，多发性骨髓瘤（MM）6例，霍奇金病（HD）3例？以COAEP方案动员[dl（第1天）：环磷酰胺（CTX）400mg／m^2，长春地辛（VDS）2mg/m^2；dl-5应用阿糖胞苷（Ara—C）60mg／m^2．依托泊甙（VP-16）60mg／m^2，泼尼松（Pred）30mg／m^2]。将患者随机分为试验组和对照组。试验组取患者化疗后白细胞抑制达最低点开始稳定回升（第二次回升）时为节点．予G-CSF（惠尔血）300μg／d；而对照组以动员方案结束后向细胞跌至低谷首次回升时即使用G—CSF300μg/d。2组患者开始使用G—CSF后每日查血常规，当白细胞计数〉10．0×10^9／L和单个核细胞（MNC）计数〉1．0×10^9/L时使用COBE血细胞分离机，以自动单个核细胞分离程序采集PBSC．结果：使用COAEP方案动员后，24例恶性血液病患者平均获得的CD34＋细胞数达每例17．25×10^6/kg。试验组患者平均使用G—CSF的时间为4．17d，采集PBSC次数为1～2次，采集液CD34＋细胞数为每例11．73×10^6/kg（何均值）：对照组患者平均使用G—CSF的时间为5．92d，采集PBSC次数为1～2次，采集液CD34＋细胞数为每例1．79×10^6/kg（几何均值），2组间差异有统计学意义（P〈0．0028），结论：COAEP联合化疗可作为血液病患者自体PBSC动员的方案，并能获得良好的干细胞产率：患者白细胞开始稳定回升时使用G—CSF，可显著提高PBSC产率：根据患者外同血白细胞计数及单个核细胞数决定PBSC采集时机有效可行，值得临床推广。     

预判急性白血病患者Auto—PBSCT动员、采集效果影响因素的临床研究

目的：探讨急性白血病患者外周血干细胞动员、采集的效率及影响因素。方法对37例急性白血病患者经化疗＋生长因子动员,动员第5～10天,当外周血WBC＞5×109/L,CD34＋＞20个/μl时,使用CS-3000 Plus血细胞分离机（Baxter公司）进行外周血干细胞采集;采集前外周血WBC分类单个核细胞（MNC,包括幼稚细胞、淋巴细胞及单核细胞）,计算MNC%×WBC计数＞（4～6）×109/L预计需要采集循环血容量。分析不同化疗动员时机、疾病、年龄、性别的动员采集,并对采集前外周血进行白细胞计数、分类以及干细胞采集物进行WBC计数、分类和CD34＋检测。结果所有患者均成功动员和采集到了外周血干细胞（MNC＞6×108/kg,CD34＋＞2×106/kg）,并成功造血重建。急性髓细胞白血病患者采集所获得的 MNC 与急性淋巴细胞白血病患者采集获得无明显差异;但急性淋巴细胞白血病患者采集获得CD34＋细胞明显较多（P＝0.015）;动员时机的化疗病程与采集物的CD34＋细胞呈负相关,动员时机≤3个疗程与≥6个疗程比较,前者CD34＋细胞明显较好,具有统计学差异（P＝0.028）;外周血MNC数值与采集物MNC及CD34＋细胞具有相关性（r＝0.600,P＝0.00;r＝0.510,P＝0.001）。结论根据不同的疾病、性别、年龄,采用不同的动员采集方案,一般可以成功采集。外周血 MNC 数值对采集物中 CD34＋细胞的总量具有一定预测意义。     

CD7阳性急性髓系白血病骨髓干／祖细胞5个基因表达的研究

本研究探讨abca5、mdr-1、kdr、dapk和irf-1 5个基因在CD7^＋急性髓细胞性白血病干／祖细胞的表达。利用实时定量RT—PCR（RQ—PCR）方法检测了15例正常骨髓（NBM）和16例AML患者骨髓单个核细胞（MNC）中5个基因的表达。采用流式细胞仪（FCM）分选8例NBM和21例AML患者骨髓CD34^＋CD38^＋祖细胞和CD34^＋CD38-干细胞,利用微量细胞RQ—PCR方法检测分选细胞中5个基因的表达。结果表明：NBMMNC均表达这5个基因,其中irf-1与dapk表达水平最高,相对表达量分别为4．08和3．86;abca5和mdr-1表达水平较低,为0．49和0．84;kdr表达最低为0．02。在经分选的CD34^＋CD38^＋祖细胞中,dapk和irf-1表达明显减低（P〈0．05）,kdr表达明显增加（P〈0．05）,其余2个基因无明显变化。在CD34^＋CD38^＋Lin-干细胞中,5个基因的表达均高于CD34^＋CD38^＋祖细胞,普遍增加至近2倍,而kdr增加了3倍,其中kdr和irf-l表达的增加具有统计学差异（P〈0．05）。与NBM相比,AMLMNC中5个基因的表达水平均有不同程度减低,以abca5、mdr-1、kdr和dapk最为显著（P〈0．05）。与AMLMNC相比,AMLCD34^＋CD38^＋细胞中,irf-1和dapk表达明显减低（P〈0．05）,其余3个基因表达增加,以kdr表达增加有统计学意义（P〈0．05）。AMLCD34^＋CD38^＋与CD34^＋CD38^-细胞比较,发现5个基因在CD34^＋CD38^＋细胞中的表达均增加,尤以kdr和irf-1的表达增加有意义（P〈0．05）。AMLCD34^＋CD38^＋CD7^＋细胞与CD34^＋CD38^-CD7-细胞中5个基因的表达均比CD34^＋CD38^＋细胞中的高,其中只有CD34^＋CD38^- CD7^＋细胞中KDR和CD34^＋CD38^-CD7^-细胞中KDR和irf-1的表达增加并具有统计学差异（P〈0．05）。结论：NBM中kdr主要表达在干／祖细胞中,而dapk和irf-1主要表达在较分化的细胞中。5个基因在干细胞阶段的表达均高于祖细胞阶段。AMLCD34^＋CD38^-CD7^＋细胞与CD34^＋CD38^＋CD7^-都具有干／祖细胞的基因表达特点。     

骨髓增生异常综合征患者CD34、CD95的表达及临床意义

目的研究骨髓增生异常综合征（MDS）患者骨髓CD34^＋细胞比率及CD34^＋细胞CD95（Fas）表达率并探讨其临床意义。方法应用流式细胞术检测26例MDS患者骨髓单个核细胞（BMMNC）中CD34^＋细胞比率及CD34^＋细胞Fas表达率。结果MDS患者CD34^＋细胞比率RAEB、RAEB—T组较RA组、正常对照组显著增高（P〈0．01）;RAEB、RAEB-T组间比较差异有显著性（P〈0．01）;RA组与正常对照组之间则无显著性差异（P〉0．05）。CD34^＋细胞Fas表达率RA、RAEB、RAEB—T组均较正常对照组显著增高（P〈0．01）;RA与RAEB、RAEB—T组间比较差异有显著性（P〈0．01）;RAEB与RAEB—T组间比较则无显著性差异（P〉0．05）。结论CD34^＋细胞比率进行性升高系提示MDS病情进展的标志;CD34^＋细胞Fas表达率在MDS显著增高但于疾病恶性转化过程中其表达率逐渐降低;细胞增殖与凋亡异常可能系MDS主要发病机制之一。     

丹参素对小鼠外周血造血干细胞动员作用的研究

目的:探讨丹参素对小鼠外周血造血干细胞的动员作用及其对小鼠外周血细胞和骨髓基质细胞黏附分子的影响。方法:30只BALB/c小鼠随机分为三组:丹参素组、G-CSF组、生理盐水组,腹腔注射d1～d7,每日1次,第2～8天,采用外周血WBC和MNC计数、流式细胞术、造血祖细胞体外培养、免疫细胞化学等检测各组给药后对外周血WBC、MNC、CD34+细胞、CD49d阳性细胞、CFU-GM、CFU-MK、CFU-E的产率及小鼠骨髓基质细胞VCAM-1阳性细胞百分率的影响。结果:丹参素组给药第7天外周血WBC、MNC数量达到高峰,分别为给药前的3倍和3.5倍;丹参素组外周血CD34+、CD49d阳性细胞及骨髓基质细胞VCAM-1阳性细胞百分率分别为(1.03±0.24)%、(12.59±2.64)%和(50.86±8.77)%,均明显高于生理盐水组(P<0.05);其CFU-GM、CFU-MK和CFU-E产率分别为(14.90±2.88)%、(12.50±4.06)%和(16.10±6.36)%,均明显高于生理盐水组(P<0.01)。结论:丹参素对小鼠外周血造血干细胞有一定的动员作用,且这一作用可能与其上调小鼠外周血细胞和骨髓基质细胞黏附分子的表达有关。     

影响外周血CD34^＋细胞纯化的相关因素

背景：造血干细胞具有良好的自我复制和更新的能力,CD34^＋细胞具备有造血干细胞的标志。目的：分析影响外周血CD34^＋细胞纯化的因素。方法：90例患者,经粒细胞集落刺激因子5μg/（kg·d）动员1～3d后,应用COBE血细胞分离机采集外周血单个核细胞液80～100mL,经CliniMACS免疫磁珠分选技术纯化CD34^＋细胞。结果与结论：90例CD34^＋细胞平均数为（1.73±1.15）×107,经流式细胞仪分析,CD34^＋细胞阳性率大于80%。COBE血细胞分离机单次收集的循环血量在980～1100mL时,利于CD34^＋细胞收集（P=0.005）;动员后白细胞浓度在（16～21）×109L-1时,利于CD34^＋细胞收集（P〈0.05）;中间细胞和淋巴细胞总比例超11%时,利于CD34^＋细胞收集（P〈0.05）;单个核细胞液血小板小于2100×10^9L^-1时,利于CD34^＋细胞的收集（P〈0.05）;年龄小于16岁,CD34^＋细胞数高（P=0.003）;CD34^＋细胞抗体的温度、磁性标记及细胞处理时离心力的大小,均有影响。结果提示,经CliniMACS免疫磁珠细胞分选技术纯化的CD34^＋细胞能满足临床需要,实验稳定性好,重复性好;注重相关因素的影响,可提高纯化的CD34^＋细胞数量。     

幼儿外周血造血干／祖细胞采集方法的建立

本研究探索采集体重低于20kg幼儿外周血造血干／祖细胞的方法及安全性。在采集外周血造血干／祖细胞时，在患儿股静脉处放置7F双腔导管作为采血及回输通道，采用COBE Spectra血细胞分离机的自动干／祖细胞采集程序及管路，在预冲管路完成后，向管路中灌注体外辐照的异体悬浮红细胞，采集后仅回输管路中的红细胞成分。对采集物计数单个核细胞、CD34^＋细胞和细胞存活率。结果表明：对7例低体重幼儿采集外周血造血干／祖细胞13次均获得成功。获得单个核细胞平均数为4．44×10^8／kg[（3．46—6．45）×10^8／kg]，CD34^＋细胞平均计数为2．20×10^6／kg[（1．34—3．79）×10^6／kg]，细胞存活率98．45％（97％-100％）。在采集过程中患儿生命体征平稳。结论：采用COBE Spectra血细胞分离机，可以在保持低体重幼儿生命体征平稳的前提下获得含有足够数量CD34^＋的单个核细胞。