PCR与ELISA法检测乙肝血清标志物对比分析

用ＰＣＲ技术检测４８例肝病患者，５５例非肝病患者血清ＨＢＶＤＮＡ，ＥＬＩＳＡ法检测其血清五项标志物，肝病组ＰＣＲ阳性率为３１．３％，非肝病组ＰＣＡ阳性率为１１．４％。ＨＢｓＡｇ、ＨＢｃＡｂ阳性组ＨＢＶ－ＤＮＡ１００％阳性；ＨＢｓＡｇ、ＨＢｃＡｂ阳性、ＨＢｅＡｂ阳性或阴性组ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性５０％；单项ＨＢｓＡｂ阳性组ＨＢＶＤＮＡ阳性２０％；五项标志物全阴ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性４．７％。结果表明，ＰＣＲ技术特异性强、敏感度高，但两种方法各有所长，不宜取代。     

乙型肝炎血清学标志物阳性母亲初乳中HBV-DNA检测

目的探讨乙型肝炎血清学标志物阳性产妇的初乳中ＨＢＶ－ＤＮＡ的检出与其血清中ＨＢＶ标志物携带状态的关系。方法对５１例乙型肝炎血清学标志物阳性产妇的血清及初乳，用酶免法检测ＨＢＶ－Ｍ，用ＰＣＲ法检测ＨＢＶ－ＤＮＡ，并与２０例正常组进行对照。结果发现母血中传播性大的３项标志物：乙型肝炎表面抗原（ＨＢｓＡｇ）、乙型肝炎ｅ抗原（ＨＢｅＡｇ）及乙型肝炎核心抗体（抗－ＨＢＣ）中后两项易进入乳汁。３项阳性及ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ两项阳性产妇的初乳中ＨＢＶ－ＤＮＡ检出率都高，而前者出现的例数更多（８／１０）。初乳中ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性者母血中的ＨＢｅＡｇ均为阳性。结论对乙型肝炎血清学标志物阳性的产妇，最好直接检测其乳汁中的乙肝三项及ＨＢＶ－ＤＮＡ，以指导哺乳。     

乙型病毒性肝炎的基因诊断

对１２０例乙肝病毒（ＨＢＶ）感染者血清中ＨＢＶ－ＤＮＡ用ＰＣＲ技术进行检测，结果表明，ＰＣＲ法的敏感性阳性检出率７５．８％，明显高于ＥＬＩＳＡ法（ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ和ＨＢＣＡｂ）的阳性率分别为６１％、３８％和６２％）；ＰＣＲ检测ＨＢｓＡｇ和ＨＢＡｂ一血清的ＨＢＶ－ＤＮＡ，阳性率分别为２６％、５２％和２４％，ＰＣＲ检测三者均为阳性血清的ＨＢＶ－ＤＮＡ，阳性率为１００％慢性迁延肝炎、慢性活动性肝炎     

PCR法检测HBVDNA及其与乙肝病毒标志物关系探讨

采用聚合酶链反应（ＰＣＲ）法检测２５６例乙型肝炎患者血清中乙肝病毒ＤＮＡ （ＨＢ－ＶＤＮＡ），同时用ＥＬＩＳＡ法检测乙肝病毒标志物，即ＨＢｓＡｇ，抗－ＨＢｓ，ＨＢｅＡｇ，抗－ＨＢｅ，结果表明ＨＢＶＤＮＡ的检出率与肝病临床类型无明显关系，而与乙肝病毒标志物的存在状态有关。乙肝五项病毒标志物不同组合状态，血清ＨＢＶＤＮＡ检出率不同，以ＨＢｓＡｇ（＋），抗－ＨＢｃ（＋），ＨＢｅＡｇ（＋）的组合形式检出率     

聚合酶链反应在乙型肝炎病毒感染诊断中的意义

用ＰＣＲ法检测１６６例乙型肝炎病毒感染者血清ＨＢＶ－ＤＮＡ。结果显示：ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ、抗－ＨＢｃ阳性，ＨＢｓＡｇ、抗－ＨＢｅ、抗－ＨＢｃ阳性和ＨＥｂＡｇ阳性组，ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性率分别为９６．２％、２８．６％、９３．５％、ＨＢｓＡｇ单项阳性者中，检出ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性７８例（孕妇占１９．２％），阳性率８１．３％。另外，在２０例血清标志物全部阴性对照组中发现ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性１例，阳性率５．     

乙型肝炎病毒DNA和血清标志物与肝癌相关性检测分析

目的 为了解乙型肝炎病毒ＨＢＶ ＤＮＡ和血清标志物与肝癌的关系。方法 对经影像及甲胎蛋白阳性诊断确诊的５８例肝癌患者，采用ＰＣＲ和ＥＬＩＳＡ技术，分别进行了ＨＢＶ ＤＮＡ和血清标志物检测。结果 肝癌患者乙型肝炎标志物阳性为９４．８２％，标志物ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ、抗－ＨＢｃ阳性组占２２．４１５。ＨＢＶ ＤＮＡ检测８例全部阳性；ＨＢｓＡｇ、抗－ＨＢｅ阳性组占５５．１７％，ＨＢＶ ＤＮＡ检测１５例，     

HBV DNA在HBsAg阴怀的原发性胆管细胞性肝癌石蜡包埋肝…

对２４例酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）ＨＢｓＡｇ阴性的生胆管细胞肝癌的石蜡包埋肝组织，ＰＣＲ－ＥＢ法检测了乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）ＤＮＡ，并与ＥＬＩＳＡ法检测的血表免疫学标志物（乙肝５项；ＨＢｓＡｇ、抗－ＨＢｓ、ＨＢｅＡｇ抗０－ＨＢｅ、抗－０ＨＢｃ）结果进行对比。结果显示血肖学乙肝５项均阴性的及ＨＢｓＡｇ阴性但其它４项中至少有１项阳性的胆和细胞性肝癌石蜡包埋肝组织中，ＨＢＶＤＮＡ阳性检出率分别为３８     

同步检测183例血清乙肝病毒标志物,Pre—S2,pHSA—R,HBsAg—Ig …

为探讨乙肝病毒标志物、Ｐｒｅ－Ｓ２、ＰＨＳＡ－Ｒ、ＨＢｓＡｇ－ＩｇＭ及ＨＢＶ－ＤＮＡ之间的关系,对１８３例既往乙肝病毒标志物阳性的ＨＢＶ感染者,同步采用放免方法定量检测乙肝病毒标志物、Ｐｒｅ－Ｓ２、ＰＨＳａ－Ｒ、ＨＢｓＡｇ－ｉｇＭ,用ＰＣＲ方法检测ＨＢＶ－ＤＮＡ。结果显示,ＨＢＶ－ＤＮＡ、Ｐｒｅ－Ｓ２、ＰＨＳＡ－Ｒ、ＨＢｓＡｇ０ＩｇＭ在“大三阳”中检出率分别为８６．３６％、９６．９７％、９３．９４     

应用PCR技术及ELISA法检测HBV的结果分析

本文报道用酶联免疫吸附法（ＥＬＩＳＡ）及聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术检测６４６例似肝火患者血清乙肝病毒标志物（ＨＢＶ－Ｍ）－乙肝二对半及乙肝病毒ＤＮＡ（ＨＢＶ－ＤＮＡ）的分析结果。用ＥＬＩＳＡ法检出ＨＢｓＡｇ（＋），ＨＢｅＡｇ（＋）及ＨＢｅＡｇ（＋）ＨＢｃＡｂ（＋）这两种模式ＨＢＶ－ＤＮＡ（＋）检出率分别高达９５．６％（４４／４６）及９１．１％（１２３／１３５），在虽然有ＨＢｓＡｇ（＋）出现，无（或     

不同类型乙肝病毒感染者病毒复制状态与乙肝病毒标志物关系的研究

乙肝病毒 (ＨＢＶ)感染者的传染性常用乙肝病毒ｅ抗原 (ＨＢｅＡｇ)、ＨＢｃＡｂ ＩｇＭ及ＰｒｅＳ2 Ａｇ等指标反映。随着分子生物学技术的发展 ,许多研究表明 ,即使上述指标均阴性 ,体内仍有病毒复制 ,具有传染性。我们采用灵敏的多聚酶链反应技术检测不同类型的ＨＢＶ感染者血清的ＨＢＶ ＤＮＡ ,以了解病毒复制状态 ,同时用ＥＩＡ法检测其血清中乙肝病毒表面抗原 (ＨＢｓＡｇ)、乙肝病毒表面抗体 (ＨＢｓＡｂ)、乙肝病毒核心抗原 (ＨＢｃＡｇ)、ＨＢｅＡｂ ＩｇＭ、ＰｒｅＳ2 Ａｇ和ＰｒｅＳ2 Ａｂ等标志物 ,以此来评价各种标志物的意义…     

Positive Rate of Different Hepatitis B Virus Serological Markers in Peking Union Medical College Hospital,a General Tertiary Hospital in Beijing△

Objectives To investigate the positive rate of different hepatitis B virus (HBV) serological markers, and the demographic factors related to HBV infection.
Methods We enrolled all patients tested for HBV serological markers, such as HBV surface antigen (HBsAg), HBV surface antibody (HBsAb), hepatitis B e antigen (HBeAg), hepatitis B e antibody (HBeAb), HBV core antibody (HBcAb), and HBV-DNA from July 2008 to July 2009 in Peking Union Medical College Hospital. The positive rate of each HBV serological marker was calculated according to gender, age, and de- partment, respectively. The positive rates of HBV-DNA among patients with positive HBsAg were also analyzed.
Results Among 27 409 samples included, 2681 (9.8%) were HBsAg positive. When patients were divided into 9 age groups, the age-specific positive rate of HBsAg was 1.2%, 9.6%, 12.3%, 10.9%, 10.3%, 9.7%, 8.0%, 5.8%, and 4.3%, respectively. The positive rate of HBsAg in non-surgical department, surgical department, and health examination center was 16.2%,5.8%,and 4.7%, respectively. The positive rate of HBsAg of males (13.3%) was higher than that of females (7.3%,P=0.000). Among the 2681 HBsAg (+) patients, 1230 (45.9%) had HBV-DNA test, of whom 564 (45.9%) were positive. Patients with HBsAg (+), HBeAg (+), and HBcAg (+) result usually had high positive rate of HBV-DNA results (71.8%,P=0.000).
Conclusions Among this group of patients in our hospital, the positive rate of HBsAg was relatively high. Age group of 20-29, males, and patients in non-surgical departments were factors associated with high positive rate of HBsAg.     

荧光定量PCR检测HBV-DNA与血清标志物的关系探讨

目的:探讨乙型肝炎血清HBV-DNA水平与乙肝抗原抗体模式的关系。方法:对320例血清标本同时用荧光定量PCR(FQ-PCR)检测HBV DNA和用酶联免疫吸附法(ELISA)检测乙肝标志物,根据不同检测结果进行对比分析。结果:320份血清中,乙型肝炎病毒标志物不同组合HBV-DNA阳性率有差异(P<0.01),320份血清中,有188例HBV-DNA阳性,占56.2%,HBsAg HBeAg HBcAb阳性者HBV-DNA阳性率占98.6%,>10copies/ml占64.5%,HBsAg HBeAb HBcAb阳性者HBV-DNA阳性率占37.5%,10 copies/ml占18.2%。结论:HBeAg和HBV-DNA有明显的相关性,PCR定量检测HBV-DNA含量更有助于判断体内HBV复制的情况及传染性强弱,在临床上有重要意义。     

乙肝患者血浆HBVDNA水平与乙肝五项指标关系分析

目的探讨乙型肝炎病毒核酸（HBV-DNA）水平与乙型肝炎免疫标志物五项指标之间的关系。方法回顾性分析来我院就诊的267例乙型肝炎患者的HBV-DNA含量与乙型肝炎免疫标记物（乙肝五项）的表达关系。患者血浆标本中HBV-DNA含量的检测采用实时荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）,根据含量高低分为四个等级（小于103/ml、103-105/ml、105-107/ml、大于107/ml）;乙肝五项指标（HBsAg、抗HBsAb、HBeAg、抗HBeAb、抗HBcIgM）的检测采用酶联免疫法,按照阳性、阴性统计。结果乙肝患者血浆中HBV-DNA检出率为61.8%,HB-sAg、抗-HBsAb、HBeAg、抗-HBeAb、抗-HBcIgM的检出率分别为98.50%、1.12%、42.70%、40.45%、96.25%。在HBV-DNA含量不同的患者中,乙肝五项的检出率也不相同,随着HBV-DNA含量的升高,HBsAg、抗-HBcIgM的检出率变化不大,而HBeAg的检出率逐渐升高,抗-HBeAb检出率逐渐降低。结论血浆中HBVDNA含量与乙型肝炎免疫标志物之间存在密切的关系,随着HBV-DNA水平的升高,乙型肝炎免疫标志物出现不同的表达,这对临床医生更准确地判断患者病情及指导抗病毒药物的应用具有重要价值。     

乙肝患者前S1抗原与HBeAg和HBV-DNA关系探讨

目的探讨慢性乙肝患者前S1（Pre-S1）与HBeAg及HBV-DNA的相互关系。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应技术（FQ-PCR）和酶联免疫吸附试验（ELISA）对931份乙肝不同阳性模式及35份乙肝阴性血清进行HBV-DNA及标志物检测。结果931份不同阳性模式乙肝患者中,HBeAg阳性总检出率为20.7%,Pre-S1抗原阳性总检出率为30.2%,HBV-DNA阳性总检出率为45.3%。在422例HBV-DNA阳性乙肝患者中,Pre-S1抗原阳性率为57.3%,HBeAg阳性率为44.1%,在281例Pre-S1阳性乙肝患者中,HBV-DNA阳性符合率86.1%,在Pre-S1阴性组HBV-DNA阳性率仅为27.7%（p〈0.01）。结论HBV-DNA检测是反映HBV复制最直接的分子生物学指标,Pre-S1抗原比HBeAg更能灵敏反映HBV复制的血清学指标。     

血液病患者中HCV和HBV感染及其复制分析

对１２６例血液病患者ＨＣＶ和ＨＢＶ感染及其病毒复制进行了研究，结果：（１）１２６例患者中ＨＣＶ抗体阳性８例（６．４％）大约比献血员感染率高１０倍（Ｐ〈０．０１），在抗体阳性者中有７例ＨＣＶ－ＲＮＡ阳性（８７．５％）（２）所测患才中ＨＢＶ五项标志物单项或多项阳性２６例（２０．６％）其中ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性１２例（４６．２％）在８例ＨＣＶ感染者中有３例与ＨＢＶ重叠感染（３７．５％）５例有既往输血史（６２     

乙型肝炎病毒血清学标志物与HBV-DNA含量的相关性分析

目的分析乙型肝炎病毒载量（HBV-DNA）与乙肝病毒血清标志物（HBVM）之间的关系。方法运用酶联免疫吸附测定法（ELISA法）、荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）技术对200例乙型肝炎患者分别检测血清标志物及HBV-DNA含量。结果当HBV-DNA含量在107-108U/ml时,HBeAg阳性的大三阳模式组即HBsAg＋HBeAg＋HBcAb＋的血清学检测率（45.3%）明显高于其他模式组,HBV-DNA含量在不同模式组有显著性差异（P〈0.01）;当HBV-DNA含量在103-104U/ml时,小三阳模式组即HBsAg＋HBeAb＋HBcAb＋的血清学检测率（61.3%）明显高于其他模式组,HBV-DNA含量在不同模式组有显著性差异（P〈0.01）;而在4例HBV血清标志物全阴性的标本中仍检出HBV-DNA;1例HBsAb＋患者也检出了HBV-DNA.结论在各种HBV模式中,以HBeAg阳性者病毒复制水平最高,而血清中未检出标志物者并不能排除HBV感染,HBsAb＋的病人也可能有传染性。两种方法联合检测对临床有不同的指导意义。     

云南保山市聋哑学校乙型肝炎血清流行病学调查

目的了解保山市聋哑学校乙型病毒性肝炎(乙肝)病毒(HBV)感染状况,为聋哑学校乙肝预防控制提供科学依据。方法对在校的90名师生采集静脉血,用ELISA方法检测HBV5项血清学指标。结果 90名调查对象中,聋哑学生68人,教师22人,均无乙肝疫苗免疫史,全校HBsAb阳性率仅为23.3%。HBsAg阳性聋哑学生4人,阳性率为5.9%;HBsAg阳性教师1人,阳性率为4.5%。聋哑学生及本校教师分别有83.8%、31.8%为乙肝易感人群。聋哑学生与同年龄自然人群、本市正常学生HBsAg阳性率相近(P>0.05),HBsAb阳性率及HBV感染率均低于本校教师及自然人群(P<0.05)。结论聋哑学生感染HBV机会较自然人群小,但是聋哑学生面临HBV感染的潜在威胁。     

乙型肝炎表面抗原及抗体同时阳性特殊模式的临床流行病调查分析

目的　了解乙型肝炎表面抗原及抗体同时阳性患者的临床流行病特点。方法　应用ELISA方法对乙型肝炎感染者HBV标志物进行初筛后 ,对乙肝表面抗原及抗体同时阳性患者 ,应用MEIA定量法确证检测HBsAg、抗 HBs、HBeAg、抗 HBe ,应用PCR方法定量检测HBV DNA ,并对患者的临床特点进行综合分析。 结果及结论　①HBsAg与抗 HBs同时阳性的检出率 2 91% ,检出率最高为重型肝炎 7 4 1% ,其次依次为慢性肝炎 4 90 %、无症状乙肝病毒携带者 2 6 %、肝硬化 1 98%、急性肝炎 0。②无症状感染者、急性肝炎和肝硬变三者合并后的检出率与慢性肝炎、重型肝炎组比较 ,差异具有显著性 (P <0 0 5 )。③HBsAg高滴度组HBV DNA量及阳性率明显高于低滴度组 ,差异具有显著性 (P <0 0 5 )。④抗 HBs值与HBV DNA量间无相关性。     

乙型肝炎患者HBV-DNA载量与HBV血清标志物、前S1抗原的相关性

目的 探讨乙型肝炎患者HBV-DNA载量与血清标志物、前S1抗原的关系.方法 对1 384例乙型肝炎患者用荧光定量PCR法检测HBV-DNA,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测HBV血清标志物和前S1抗原.结果 HBV-DNA总检出率为64.8%,HBeAg阳性率为37.9%,前S1抗原阳性率为64.5%;HBeAg(+)者,其HBV-DNA检出率为95.4%,且定量对数值高,其阳性率明显高于HBeAg(-)组,差异有统计学意义(P<0.05);前S1抗原(+)组中HBV-DNA阳性率比前S1抗原(-)组高,其差异有统计学意义(P<0.05);随着HBV-DNA定量对数值的增高,大三阳的检出率具有逐渐增加的趋势;当HBV-DNA≥105时,转氨酶异常的检出率显著增加.结论 HBV-DNA与HBeAg高度相关,均为评价乙型肝炎病程及病毒复制的良好指标.联合检测HBV血清标志物、前S1抗原及HBV-DNA的含量,对准确了解患者感染状态具有重要的临床应用价值.前S1抗原可作为HBeAg阴性、无条件开展HBV-DNA检测时的补充指标.     

慢性乙肝患者血清标志物、基因型与病毒载量关系的研究

目的:采用化学发光的方法对718例患者乙肝血清标志物进行定量检测,并采用序列特异性引物多重PCR。方法:对所有慢性乙肝患者的乙型肝炎病毒进行基因分型,乙型肝炎病毒DNA水平应用实时荧光定量PCR方法进行检测。结果:56.7%的HBsAg阳性患者HBV-DNA阳性,84.8%的HBeAg阳性患者HBV-DNA阳性。乙型肝炎病毒B型395例,C型229例,BC混合型62例,未分型32例,所占比例分别为55.01%,31.89%,8.64%,4.46%。不同基因型之间乙型肝炎病毒DNA载量无明显差别。结论:HBeAg与HBV-DNA高度相关;慢性乙肝患者中,C型是乙型肝炎病毒基因型的主体,感染的乙型肝炎病毒基因型与血清病毒载量之间没有明显的相关性。