散结镇痛片对子宫内膜异位症模型大鼠妊娠功能和激素水平的影响

目的 观察散结镇痛片对子宫内膜异位症模型大鼠妊娠功能和雌激素水平的影响.方法 采用自体种植法制备大鼠子宫内膜异位症模型.手术后将大鼠分为假手术组,模型组,达那唑胶囊(0.070 g/kg)阳性对照组,散结镇痛片低、中、高剂量(0.216、0.432、0.864 g/kg)组及散结镇痛胶囊(0.864 g生药/kg)组,每天ig给药1次,连给4周后,大鼠眼眶静脉丛取血,放射免疫法测血清中促黄体生成素、催乳素和孕激素的水平.取各组大鼠与有生育能力的雄鼠合笼交配,1周后将雄鼠取出,分笼饲养,于分笼后第12天处死雌鼠,摘取右卵巢,计数妊娠黄体数,剖开右宫角,计数着床点、活胎及死胎数,并计算着床率和死胎率.结果 与模型组比较,散结镇痛片3个剂量均能增加活胎数、排卵数,提高着床率,降低死胎率,其中高剂量增加排卵数,提高着床率的作用尤为明显;散结镇痛片3个剂量均能调节大鼠血清催乳素和孕激素水平,其中高剂量降低催乳素、升高孕激素水平的作用尤为明显.结论 散结镇痛片能增强子宫内膜异位症模型大鼠的妊娠功能,该作用可能与其调节激素水平、恢复机体正常内分泌功能有关.     

补肾活血汤对子宫内膜异位症大鼠Nrf2/Keap1通路的调节作用研究

[目的]研究补肾活血汤对子宫内膜异位症大鼠Nrf2/Keap1通路的调节作用.[方法]90只大鼠随机分为假手术组、模型组、补肾活血汤低、中、高剂量组及达那唑组,15只/组.采用自体子宫内膜移植法建立子宫内膜异位症模型大鼠,补肾活血汤低、中、高剂量组按照2.5、5、10 g/kg灌胃给予补肾活血汤,达那唑组给予达那唑(0...     

补肾活血法对子宫内膜异位症模型大鼠细胞凋亡的影响

目的 探讨补肾活血法治疗子宫内膜异位症的细胞凋亡机制. 方法 将雌性8～12周龄SD大鼠分为模型组、西药组、中药组及中西药合并组,每组15只.造模成功后,分别给药4周,采用光镜、电镜、TUNEL法及免疫组化法检测药物干预前后模型大鼠异位子宫内膜的病理形态学、凋亡细胞的阳性率及凋亡调控蛋白bcl-2、bax的阳性表达. 结果 中西药合并组的异位内膜组织发生凋亡的改变最为明显,凋亡指数最高,并可明显下调bcl-2蛋白的阳性表达和提升bax蛋白阳性的表达,从而使bcl-2/bax比值下降,其次为中药组、西药组和模型组. 结论 子宫内膜异位症的发生与细胞凋亡能力的下降有关.补肾活血中药能促进异位内膜细胞发生凋亡,使异位病灶萎缩、消退细胞.     

内异康复栓对子宫内膜异位症大鼠异位和在位内膜雌、孕激素受体的影响

目的观察内异康复栓直肠给药对子宫内膜异位症大鼠异位和在位内膜雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)表达的不同影响,探讨其作用机理。方法将子宫内膜异位症大鼠随机分为内异康复栓高、中剂量组及丹那唑组、丹莪妇康煎膏组、模型组、空白组,采用免疫组化SP法检测ER、PR的表达。结果内异康复栓高、中剂量组能显著降低异位内膜ER、PR的表达(P<0.05),并对在位内膜下降的ER、PR水平有上调作用(P>0.05)。结论内异康复栓可能通过抑制异位内膜细胞内ER、PR的合成而发挥治疗作用,且对在位内膜异常的ER、PR表达有一定的调节作用。     

补肾温阳化瘀方对子宫内膜异位症大鼠PKC信号通路的影响

目的：研究补肾温阳化瘀方治疗子宫内膜异位症(EMs)的作用,探讨其调控蛋白激酶C(PKC)信号通路的机制。方法：将50只SPF级8～10周龄雌性SD大鼠随机分为5组,分别为假手术组、模型组、中药低剂量组、中药高剂量组和西药组,每组10只。采用自体移植法复制EMs大鼠模型,造模成功后分别给予补肾温阳化瘀方低、高剂量及孕三烯酮灌胃,假手术和模型组灌胃蒸馏水,连续21 d。HE染色观察在位内膜及异位灶的病理形态改变;Western blot测定在位内膜及异位灶磷酸化蛋白激酶C的α亚型(p-PKCα)、蛋白激酶C的α亚型(PKCα)蛋白的表达水平。结果：模型组在位内膜和异位灶p-PKCα蛋白水平升高;给予补肾温阳化瘀方治疗后,p-PKCα的蛋白表达水平降低(P<0.05),PKCα的蛋白表达水平无明显变化。结论：补肾温阳化瘀方通过抑制PKC信号通路来治疗EMs。     

补肾法、疏肝法对超促排卵大鼠子宫内膜组织形态及血管生成的影响

目的观察补肾法、疏肝法对超促排卵大鼠妊娠结局的影响及可能作用机制。方法将80只动情周期正常的雌鼠随机分为正常组、模型组、补肾组、疏肝组各20只。除正常组外,各组大鼠建立控制性超促排卵模型。造模第1天始补肾组给予补肾调经方混悬液(浓度2.78 g/ml),疏肝组给予逍遥丸混悬液(浓度0.162g/ml),均1 ml/(200 g·d)灌胃,模型组及正常组给予同等剂量蒸馏水灌胃,连续11天。比较各组大鼠血清雌二醇(E2)、孕酮(P)含量及子宫内膜雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)水平,HE染色测量子宫内膜厚度并观察子宫内膜形态,观察大鼠内膜胞饮突表达,检测子宫内膜血管内皮生长因子(VEGF)蛋白及其mRNA表达,统计各组大鼠妊娠数、胚胎着床数。结果与正常组比较,模型组大鼠妊娠数、胚胎着床数减少,血清P含量及子宫内膜ER、PR蛋白表达,VEGF蛋白及其mRNA表达,子宫内膜厚度及螺旋动脉数量降低(P0.05或P0.01);与模型组比较,补肾组、疏肝组大鼠妊娠数及胚胎着床数增加,血清P含量及子宫内膜ER、PR蛋白表达,VEGF蛋白及其mRNA表达,子宫内膜厚度及螺旋动脉数量升高(P0.05),而补肾组和疏肝组大鼠组间比较差异无统计学意义(P0.05)。结论补肾法、疏肝法均能够增加超促排卵大鼠妊娠率及胚胎着床数,其作用机制可能与调节性激素水平及雌、孕激素受体,改善大鼠子宫内膜组织形态及血管生成有关。     

补肾活血方对血管性痴呆大鼠海马的保护作用

目的：观察补肾活血方对血管性痴呆大鼠海马的保护作用。方法：选取健康成年雄性Wistar大鼠30只,随机分为假手术组、模型组、补肾活血组,制备大鼠血管性痴呆模型。补肾活血组以补肾活血方按临床成人剂量的7倍给药,即0.5 g/kg,按照大鼠体质量以0.01 mL/g的剂量灌胃给药;假手术组和模型组同时予以蒸馏水灌胃,按照大鼠体质量以0.01 mL/g的剂量灌胃。各组大鼠造模结束第2天开始给药,1次/d,连续处理4周。结果：补肾活血组大鼠海马CA1区锥体细胞排列介于模型组与假手术组之间;补肾活血组大鼠的海马CA1区细胞数与假手术组相比没有显著性差异,但是明显高于模型组大鼠的海马CA1区细胞数。结论：补肾活血方对血管性痴呆大鼠海马CA1区锥体细胞有明显保护作用。     

补肾活血方提高妊娠大鼠胚泡着床率的实验研究

[目的]观察中药补肾活血方对妊娠大鼠胚泡着床率的影响.[方法]选用妊娠SD大鼠随机分为空白组、模型组和中药低、中、高剂量组,于妊娠第5天扫描电镜观察各组子宫内膜胞饮突发育情况,妊娠第10天计数各组大鼠胚泡着床数.[结果]模型组子宫内膜表面未见明显的胞饮突发育,表现为增生早期的子宫内膜变化,中药中、高剂量组可见发育中的胞饮突,发育形态明显超前于模型组,接近于空白组;模型组胚泡着床数显著低于空白组(P<0.01),中药中、高剂量组胚泡着床数显著高于模型组(P<0.01).[结论]临床用量的补肾活血方能明显改善大鼠子宫内膜表面胞饮突的发育,有助于子宫内膜容受性的建立,从而最终提高胚泡的着床率.     

化浊解毒补肾祛瘀方对实验性子宫内膜异位症大鼠FIH-1α的影响

目的:观察化浊解毒补肾祛瘀方治疗前后子宫内膜异位症模型大鼠子宫内膜异位灶局部病变组织中的乏氧诱导抑制因子(FIH-1α)表达的变化,从分子学角度进一步揭示浊解理论的作用机制。方法:选用动情周期正常的健康清洁级Wistar雌性大鼠80只,随机选取24只分为正常组和假手术组(每组各12只),其余56只造子宫内膜异位症模型。将造模成功的40只大鼠按随机数字表法分为中药高剂量组、中药低剂量组、模型对照组、西药组,每组10只,分别每日灌胃相应药物或生理盐水,连续4周。末次给药后,禁食8h,选择动情期的大鼠断头处死,分别进行免疫组化染色,测定组织中的FIH-1α的表达。结果:中药高剂量组、中药低剂量组大鼠FIH-1α表达均高于模型对照组;中药低剂量组FIH-1α表达高于正常组;中药高剂量组FIH-1α表达高于中药低剂量组。结论:化浊解毒补肾祛瘀方能显著提高内异症模型大鼠异位组织中FIH-1α的表达。     

补肾活血方对小鼠HOXA10基因表达水平的影响

目的:观察补肾活血方对小鼠子宫内膜HOXA10 mRNA表达水平的影响,探讨其对子宫内膜容受性的改善作用。方法:将昆明种小鼠随机分为空白组(生理盐水)、模型组(腹腔注射GnRH-α后依次注射HMG、HCG,制造控制性超排卵模型)和中药组(造模同时给予补肾活血方汤剂),比较各组小鼠子宫指数,通过原位杂交技术检测子宫内膜中HOXA10 mRNA的表达水平。结果:1)模型组小鼠与空白组相比,子宫指数明显降低,中药组子宫指数显著高于模型组(P0.01);2)原位杂交实验结果显示:模型组小鼠子宫内膜HOXA10 mRNA表达水平明显低于空白组,中药组HOXA10表达水平则明显高于模型组。结论:补肾活血方可明显改善超排卵小鼠子宫指数,并显著增加子宫内膜HOXA10表达水平,从而改善子宫内膜容受性,提高临床体外受精-胚胎移植(IVF-ET)的着床率。     

补肾清热方对流产大鼠子宫蜕膜组织侵袭相关因素调控的影响

目的研究补肾清热方对于溴隐亭致大鼠流产模型的治疗作用及其机理。方法将受孕大鼠分为空白对照组、模型组、黄体酮组及中药高、低剂量组,皮下注射溴隐亭造模,采用补肾清热方进行治疗,以黄体酮作为阳性对照药观察,观察胎仔数,计算流产率,放射免疫法检测大鼠血清雌二醇（E2）、孕酮（P）,免疫组化法检测大鼠子宫蜕膜组织基质金属蛋白酶-9（MMP-9）、基质金属蛋白酶组织抑制物-3（TIMP-3）含量。结果与模型组比较,各治疗组大鼠子宫内胎仔数及流产率差异有统计学意义（P〈0.01）,中药高剂量组大鼠血清雌激素升高、孕激素上升,子宫蜕膜组织MMP-9表达增加、TIMP-3表达下调,差异均有统计学意义（P〈0.05,P〈0.01）。结论补肾清热方具有保胎作用,并对子宫蜕膜组织浸润相关因素具有调节平衡作用。     

补肾助孕方对肾虚薄型子宫内膜大鼠内膜容受性的影响及机制研究

目的：观察补肾助孕方对肾虚薄型大鼠子宫内膜容受性的影响,探讨中药的作用机制。方法：雌性SD大鼠30只,随机分为对照组10只,造模组20只,通过羟基脲灌胃建立肾虚合并着床障碍型子宫内膜大鼠模型。随后将20只造模组大鼠随机分为模型组和补肾助孕方组,每组10只。对照组、模型组均灌服蒸馏水10 mL/kg;补肾助孕方组灌服中药0.3 mg/kg,均1次/d,持续3个动情周期(15 d)。在第3个动情期后处死大鼠,酶联免疫吸附法检测动脉血中雌二醇、孕酮的水平。取子宫标本,光镜下观察子宫内膜形态,测量子宫内膜厚度、子宫间质厚度、子宫腺体数、子宫血管数。免疫组化法检测各组内膜组织中整合素β3和白血病抑制因子的表达。结果:与正常对照组比较,模型组大鼠动脉血雌二醇、孕酮的水平减少;子宫内膜腺体稀少,上皮变薄,间质致密,血管少;子宫内膜厚度、子宫间质厚度、子宫腺体数、子宫血管数均减少;整合素β3和白血病抑制因子的表达减少。补肾助孕方组较之模型组,有明显的改善。结论：补肾助孕方可改善肾虚合并着床障碍型状态大鼠子宫内膜的容受性,可能与提高血中激素水平,增加内膜中整合素aβ3和白血病抑制因子的表达有关。     

补肾活血通淋方对良性前列腺增生症大鼠模型Ki-67 及凋亡小体的影响

目的：观察补肾活血通淋方对良性前列腺增生症大鼠模型Ki-67、凋亡小体的影响。方法：72只Wistar大鼠随机分为6组,即假手术组、模型组、保列治组、补肾活血通淋方低、中、高剂量组。除假手术组外,余组摘除大鼠双侧睾丸后连续注射丙酸睾丸酮（5mg·kg-1）30天建立模型,造模同时,给药组灌胃给药,给药剂量：保列治组（0.8mg·kg-1）、补肾活血通淋方低、中、高剂量组（7.5、15.0、22.5g·kg-1）,每天1次,连续30天。采用免疫组化法测定Ki-67的阳性平均灰度值,采用TUNEL法测定凋亡小体的表达率。结果：与模型组比较,各给药组Ki-67表达均降低（P<0.05）;与保列治组、补肾活血通淋方低剂量组比较,补肾活血通淋方高、中剂量组Ki-67表达降低（P<0.05）,与中剂量组比较,高剂量Ki-67表达降低（P<0.05）;与模型组比较,各治疗组均能上调前列腺增生中凋亡小体的表达（P<0.05）。其中补肾活血通淋方高剂量组凋亡小体表达率高于中、低剂量组、保列治组（P<0.05）。结论：补肾活血通淋方可以降低良性前列腺增生症大鼠Ki-67的表达,提高细胞凋亡率,为临床治疗良性前列腺增生症提供了客观依据。     

少腹逐瘀汤含药血清对子宫内膜异位症在位内膜分泌IL-8的影响

目的：研究少腹逐瘀汤含药血清对子宫内膜异位症在位内膜分泌IL-8的影响。方法：实验分为少腹逐瘀汤含药血清高剂量组、低剂量组及空白对照组。收集接收手术治疗的子宫内膜异位症病人的在位子宫内膜组织,经体外分离、培养,以实时荧光定量PCR分析不同浓度少腹逐瘀汤含药血清对在位内膜细胞表达IL-8的影响。结果：少腹逐瘀汤含药血清能剂量依赖性抑制在位内膜细胞表达IL-8。结论：少腹逐瘀汤含药血清可抑制体外培养的子宫内膜异位症在位内膜细1胞IL-8的分泌,提示少腹逐瘀汤对于治疗子宫内膜异位症可能具有-定的作用。     

少腹逐瘀丸对子宫内膜异位症大鼠MMP-9和TIMP-1mRNA表达的影响

目的 探讨少腹逐瘀丸(当归、赤芍、川芎等)对患子宫内膜异位症大鼠子宫内膜组织中基质金属蛋白酶-9(MMP-9)和基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)表达的影响.方法 采用自体移植法建立子宫内膜异位症大鼠模型,将造模成功的大鼠随机分为模型组、孕三烯酮组、少腹逐瘀丸高剂量组、低剂量组,另设假手术组.给药30 d后,以RT-PCR法检测大鼠在位以及异位内膜组织中MMP-9和TIMP-1 mRNA表达.结果 少腹逐瘀丸能显著降低子宫内膜异位症大鼠MMP-9 mRNA的表达(P＜0.01),显著升高TIMP-1 mRNA的表达(P＜0.01).结论 少腹逐瘀丸可调节MMP-9/TIMP-1的平衡,这可能是其治疗子宫内膜异位症的作用机制之一.     

活血消异方对子宫内膜异位症模型大鼠骨桥蛋白、肿瘤坏死因子-α 表达的影响

目的探讨OPN、TNF-α与子宫内膜异位症不孕的相关性以及活血消异方改善子宫内膜异位症不孕可能的作用靶点。方法采用改良同种异体移植法建立子宫内膜异位症模型大鼠,设空白组、模型组、假手术组、西药组、中药低剂量组、中药高剂量组,连续给药3周后,RT-PCR方法检测腹腔液中OPN含量,ELISA方法检测血清和腹腔液中TNF-α含量。结果子宫内膜异位症模型大鼠腹腔液中OPN、TNF-α以及血清中TNF-α的含量明显高于空白组和假手术组(P<0.05);经活血消异方和GnRH-α干预的中药低剂量组、中药高剂量组和西药组OPN、TNF-α的含量较模型组显著降低(P<0.05);西药组、中药高剂量组OPN、TNF-α的含量明显低于中药低剂量组(P<0.05),中药高剂量组与西药组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论子宫内膜异位症可导致大鼠OPN、TNF-α的过表达;活血消异方可有效降低子宫内膜异位症大鼠OPN、TNF-α的表达水平,且存在量效关系。     

丹莪妇康煎膏对子宫内膜异位症大鼠基质金属蛋白酶-9和基质金属蛋白酶抑制剂-1 mRNA表达的影响

 目的 探讨子宫内膜异位症大鼠在位和异位子宫内膜组织中基质金属蛋白酶-9（MMP-9）和基质金属蛋白酶抑制剂-1（TIMP-1）表达的差异以及丹莪妇康煎膏对其影响。方法 采用自体移植法建立子宫内膜异位症大鼠模型,将造模成功的大鼠随机分为模型组、孕三烯酮组、丹莪妇康煎膏高剂量组、低剂量组以及假手术组,共5组。给药30 d后,以反转录聚合酶链反应法检测大鼠在位以及异位内膜组织中基质金属蛋白酶-9和基质金属蛋白酶抑制剂-1 mRNA表达。结果 丹莪妇康煎膏能显著降低子宫内膜异位症大鼠基质金属蛋白酶-9 mRNA的表达（P＜0.01）,显著升高基质金属蛋白酶抑制剂-1 mRNA的表达（P＜0.01）。结论 丹莪妇康煎膏可调节基质金属蛋白酶-9/基质金属蛋白酶抑制剂-1的平衡,这可能是其治疗子宫内膜异位症的作用机制之一。     

补肾活血方配伍二甲双胍对PCOS大鼠子宫内膜容受性的作用研究

目的观察补肾活血方配伍二甲双胍对促排卵PCOS模型大鼠子宫内膜HOXA11、雌孕激素受体表达的影响,及对子宫内膜容受性的作用。方法将40只6周龄雌性SD大鼠随机分为空白对照组10只和PCOS建模组(来曲唑诱导法)30只。将建模成功的大鼠随机分为模型组10只、方剂组10只、克罗米芬组10只,分别予以1%CMC溶液、补肾活血方+二甲双胍+克罗米芬溶液、克罗米芬溶液,连续灌胃5 d,处死大鼠并取其子宫内膜。利用免疫组化法检测ER、PR的表达,利用免疫印迹法检测HOXA11的表达。结果 (1)与正常组大鼠相比,模型组、方剂组、克罗米芬组子宫内膜上的ER和PR表达均增多(P 0.05);HOXA11表达却低于正常组(P 0.05);(2)与模型组相比,方剂组的ER、PR表达较弱(P 0.05),HOXA11的表达量明显增加(P 0.05);且方剂组HOXA11的表达量与正常组无明显差异(P0.05)。结论补肾活血方配伍二甲双胍可以通过调节促排卵PCOS大鼠子宫内膜上雌孕激素受体含量,并增加HOXA11的表达来改善子宫内膜的容受性,增加妊娠成功几率。     

补肾活血外治法对肾虚血瘀型大鼠种植窗期子宫内膜组织形态学的影响

目的：探讨补肾活血外治法对肾虚血瘀模型大鼠子宫内膜组织形态学的影响。方法：采用阴道涂片法选取处于动情前期普通级健康未交配雌性SD大鼠50只,随机分为空白组、模型组、补肾活血方高、低剂量组、五子组。除空白组外,其余各组采用羟基脲灌胃建造肾虚模型,与此同时,空白组、模型组给予蒸馏水灌肠,高、低剂量组分别给予高、低剂量补肾活血方药灌肠,五子组给予五子衍宗丸灌胃。妊娠第4天,各组大鼠均于末次给药后1 h,尾静脉快速推注10%的高分子右旋糖苷造成血瘀模型后处死,取子宫组织切片苏木精-伊红（HE）染色观察。结果：①模型组子宫内膜被覆上皮厚度低于空白组（P<0.05）;补肾活血方药高、低剂量组和五子组子宫内膜被覆上皮厚度与模型组相比有显著性差异（P<0.01）。②模型组腺体数、腺体面积总和及最大直径/最小直径明显低于空白组（P<0.05或P<0.01）;形状因子最接近“1”,与空白组相比有显著性差异（P<0.01）。补肾活血方高、低剂量组腺体数及腺腔面积总和较模型组有不同程度的增多（P<0.05或P<0.01）。五子组腺体数、腺腔面积总和、形状因子及最大直径/最小直径与模型组相比有显著性差异（P<0.05或P<0.01）。③模型组间质细胞核面积总和、间质细胞核积分光密度及间质血管数均低于空白组（P<0.01）;补肾活血方高、低剂量组间质细胞核面积总和、间质细胞核积分光密度和间质血管数较模型组均明显增高（P<0.05或P<0.01）;五子组间质细胞核面积总和及间质细胞核积分光密度明显高于模型组（P<0.01）。结论：外用补肾活血法能够有效改善肾虚血瘀模型大鼠子宫内膜组织形态,促使子宫内膜腺体与间质同步发育,从而发挥改善子宫内膜容受性的作用。     

补肾活血中药对薄型子宫内膜大鼠子宫内膜干细胞标志物的影响

目的探讨补肾活血中药对薄型子宫内膜大鼠子宫内膜干细胞标志物的影响。方法取处于动情期的雌性大鼠36只随机分为正常对照组、模型组、补佳乐组以及补肾活血中药高、中、低剂量组。除正常对照组外,其余各组大鼠建立肾虚血瘀薄型子宫内膜模型。正常对照组灌服蒸馏水,模型组建立模型后灌服蒸馏水,补佳乐组建立模型后灌服补佳乐0.3 mg/(kg·d),补肾活血中药高、中、低剂量组建立模型后分别灌服补肾活血中药8.64、4.32、2.16 mg/kg。经过3个动情周期后,处死大鼠,取材。免疫组织化学检测活化β-catenin蛋白的表达、RT-PRC检测Oct4基因表达以及Wertern blot法检测ABCG2蛋白的表达。结果 1)活化β-catenin蛋白的表达:模型组较对照组极显著降低(P0.001),给药后各组β-catenin不同程度增加,低剂量组较模型组有显著性差异(P0.05),中剂量组、高剂量组、补佳乐组与模型组有极显著性差异(P0.001)。2)Oct4基因的表达:模型组较对照组极显著降低(P0.001),给药后各组OCT4表达量不同程度增加,其中低剂量、中剂量与模型组无显著性差异,高剂量与模型组有极显著性差异(P0.001),补佳乐组与模型组有显著性差异(P0.05)。3)ABCG2蛋白的表达:模型组较对照组极显著降低(P0.001),给药后各组ABCG2表达量不同程度增加,其中低剂量与模型组无显著性差异,中剂量组与模型组有显著性差异(P0.05),高剂量、补佳乐组与模型组有极显著性差异(P0.001)。结论补肾活血中药可以不同程度的增加β-catenin蛋白、OCT4基因及ABCG2蛋白的表达。