骨髓间充质干细胞抑制辐射诱导C57BL/6小鼠胸腺瘤的发生

目的观察骨髓间充质干细胞(MSCs)对辐射诱导胸腺瘤形成的影响,探讨辐射损伤的防治,为预防辐射诱发肿瘤的发生提供实验依据。方法按照Kaplan经典方法,取(13±2)g雌性C57Bl/6小鼠,每次照射剂量1.75 Gy,每周1次,共4次,制备小鼠胸腺瘤动物模型。无菌取乳鼠股骨骨髓,分离、培养、DAPI标记MSCs,取1.0×106个MSCs经尾静脉注入模型小鼠,每周1次,共2次。末次照射后6个月杀鼠取胸腺,10%甲醛固定、包埋、切片、HE染色,病理学检测胸腺结构,判断胸腺瘤的形成情况,计算胸腺瘤发生率。结果镜下观察可见假照射组C57BL/6小鼠胸腺组织结构正常,皮髓质结构清晰,淋巴细胞形态规则,呈圆形或卵圆形。辐射诱导模型组C57BL/6小鼠无正常胸腺结构,未见正常淋巴细胞,淋巴样肿瘤细胞弥漫分布,胞核大,深染,呈典型的淋巴瘤特征性细胞。MSCs注射组可见小鼠胸腺结构,未见淋巴瘤特征性细胞。模型组C57BL/6小鼠胸腺瘤的发生率为72.73%,MSCs注射组的发生率为20%。结论辐射诱导C57BL/6小鼠胸腺瘤模型建立成功;MSCs可降低辐射诱导C57BL/6小鼠胸腺瘤的发生率。     

FIZZ1在ApoE基因敲除鼠动脉粥样斑块中的表达

背景 FIZZ1是一种与炎症相关的缺氧诱导的有丝分裂因子,在肺部疾病缺氧状态下具有刺激肺动脉平滑肌细胞增殖等作用. 目的 探讨FIZZ1在ApoE基因敲除鼠粥样斑块表达情况及其对平滑肌细胞增殖的影响.方法 应用C57BL/6J ApoE基因敲除鼠构建动脉血管粥样硬化模型并与普通C57BL/6J野生型小鼠进行对照研究,通过对动脉血管HE染色及FIZZ1免疫检测斑块FIZZ1表达,同时给以不同浓度 FIZZ1刺激培养的平滑肌细胞,MTT法测定FIZZ1对平滑肌细胞增殖的影响.结果 ApoE基因敲除鼠高脂饲养24周后,主动脉根部明显形成动脉粥样硬化,斑块体积较大,免疫组化可见FIZZ1在粥样硬化斑块内明显表达,同龄野生型C57BL/6J鼠血管壁内,未见FIZZ1表达,重组FIZZ1能促进体外培养的平滑肌细胞增殖(与对照组比较,差别具有统计学意义,P＜0.05).结论 C57BL/6J野生型小鼠正常血管不表达FIZZ1,C57BL/6J ApoE基因敲除鼠粥样斑块表达FIZZ1,FIZZ1具有促进平滑肌细胞增殖的作用,提示其可能在动脉粥样硬化进展中起一定的作用.     

Toll样受体4对心肌缺血再灌注损伤中高迁移率族蛋白B1和肿瘤坏死因子-α表达的影响

目的 探讨Toll样受体4(TLR4)对小鼠心肌缺血再灌注损伤中的高迁移率族蛋白B1(HMGB1)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达的影响.方法 构建缺血30 min及再灌注6h时的TLR4-基因缺陷型(C3H/HeJ)小鼠和对照组小鼠(C57BL/6J)在体心肌缺血再灌注模型.两组小鼠分别设立假手术组(Sham).免疫组织化学法检测心肌细胞HMGB1蛋白的表达,实时荧光定量PCR检测心肌细胞中TNF-α mRNA的表达.结果 与C3H/HeJ sham组和C57BL/6J sham组比较,C57BL/6J I/R组和C3H/HeJ I/R组中HMGB1 (P ＜0.01)、TNF-α mRNA(P＜0.01)的表达水平均升高;与C57BL/6J I/R组比较,C3H/HeJ I/R组HMGB1 (P ＜0.01)、TNF-α (P ＜0.01)的表达水平受到抑制,而C3H/HeJ sham组和C57BL/6J sham组无显著差异(P＞0.05).结论 TLR4在心肌缺血再灌注损伤中发挥重要作用,其机制可能与其配体HMGB1结合促进TNF-α分泌,介导心肌缺血再灌注损伤的炎性反应.     

雌激素对去势高脂血症C57BL/6模型小鼠ZFP580 mRNA表达的影响

目的 探讨雌激素对C57BL/6小鼠主动脉中ZFP580基因表达的影响.方法 建立假手术组、去势对照组(卵巢切除)、去势实验组(卵巢切除并腹腔内注射苯甲酸雌二醇)C57BL/6小鼠高脂血症模型并鉴定;提取C57BL/6小鼠主动脉总RNA,设计并合成ZFP580及β-actin基因的引物,利用半定量RT-PCR方法分析ZFP580的mRNA水平.结果 成功构建去势C57BL/6小鼠高脂血症模型;去势对照组小鼠ZFP580基因表达水平与假手术组和实验组相比均下降(P<0.05),而后两者表达水平比较无显著差异(P＞0.05).结论 小鼠在摘除卵巢失去雌激素的调控后,ZFP580基因表达下调,小鼠在去势后定期给予雌激素,ZFP580基因表达回复至假手术组水平,说明雌激素能够上调ZFP580基因表达.     

动脉粥样硬化斑块内FIZZ1表达促进平滑肌细胞清道夫受体-A上调

目的探讨ApoE基因敲除鼠动脉粥样硬化斑块内FIZZ1表达情况及其对平滑肌细胞清道夫受体A(SR-A)表达的影响.方法C57BL/6J ApoE基因敲除鼠及C57BL/6J野生型小鼠各9只,分别喂养高脂饲料及普通饲料,24周后处死小鼠,石蜡包埋血管后做连续切片,行HE染色及FIZZ1免疫组化.用氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)以及终浓度分别为3×10-6mmol/L、9×10-6mmol/L、2.7×10-5mmol/L的FIZZ1刺激培养的平滑肌细胞,激光共聚焦显微镜确认SR-A表达后,流式细胞术检测FIZZ1对ox-LDL诱导的平滑肌细胞SR-A表达的影响.结果ApoE基因敲除鼠高脂饲养24周后,主动脉根部明显形成动脉粥样硬化,可见FIZZ1在动脉粥样硬化斑块内明显表达,同龄野生型C57BL/6J鼠正常血管壁内,未见FIZZ1表达,重组FIZZ1能明显促进ox-LDL诱导的平滑肌细胞SR-A表达(与对照组比较,P<0.01).结论C57BL/6J野生型小鼠正常血管不表达FIZZ1,C57BL/6JApoE基因敲除鼠动脉粥样斑块表达FIZZ1,FIZZ1促进ox-LDL诱导的平滑肌细胞SR-A表达,提示FIZZ1可能在ApoE基因敲除鼠动脉粥样硬化进展中起一定的促进作用.     

FIZZ1在ApoE基因敲除鼠动脉粥样斑块中的表达

背景FIZZ1是一种与炎症相关的缺氧诱导的有丝分裂因子,在肺部疾病缺氧状态下具有刺激肺动脉平滑肌细胞增殖等作用。目的探讨FIZZ1在ApoE基因敲除鼠粥样斑块表达情况及其对平滑肌细胞增殖的影响。方法应用C57BL/6J ApoE基因敲除鼠构建动脉血管粥样硬化模型并与普通C57BL/6J野生型小鼠进行对照研究,通过对动脉血管HE染色及FIZZ1免疫检测斑块FIZZ1表达,同时给以不同浓度FIZZ1刺激培养的平滑肌细胞,MTT法测定FIZZ1对平滑肌细胞增殖的影响。结果ApoE基因敲除鼠高脂饲养24周后,主动脉根部明显形成动脉粥样硬化,斑块体积较大,免疫组化可见FIZZ1在粥样硬化斑块内明显表达,同龄野生型C57BL/6J鼠血管壁内,未见FIZZ1表达,重组FIZZ1能促进体外培养的平滑肌细胞增殖(与对照组比较,差别具有统计学意义,P<0.05)。结论C57BL/6J野生型小鼠正常血管不表达FIZZ1,C57BL/6J ApoE基因敲除鼠粥样斑块表达FIZZ1,FIZZ1具有促进平滑肌细胞增殖的作用,提示其可能在动脉粥样硬化进展中起一定的作用。     

旋毛虫抗C57BL/6小鼠体内Hepa1-6肝癌细胞作用的研究

目的观察旋毛虫对C57BL/6小鼠体内Hepa1-6肝癌细胞生长的抑制作用。方法将C57BL/6小鼠随机分成8组,每组10只。第1和5、2和6、3和7组分别感染未处理旋毛虫、^60Co处理和紫外线处理旋毛虫,4和8组为不感染旋毛虫对照组,1～4组和5～8组分别于接种旋毛虫前7 d和接种后11 d接种Hepa1-6肝癌细胞。荷瘤后25 d后处死小鼠,测量肿瘤体积、重量及脾脏CD3^＋、CD4^＋、CD8^＋淋巴细胞数量。结果未处理旋毛虫组、^60Co处理组和紫外线处理组小鼠肿瘤体积和重量均显著低于对照组（P〈0.05）;脾脏CD3^＋、CD4^＋百分率和CD4^＋/CD8^＋、CD4^＋/CD3^＋的比值显著高于对照组（P〈0.01或P〈0.05）。结论未处理的旋毛虫、经^60Co和紫外线处理的旋毛虫对C57BL/6小鼠体的Hepa1-6肝癌细胞的生长均有抑制作用,未处理旋毛虫的抑瘤效果最好。     

迷迭香精油吸嗅对C57BL/6鼠学习记忆及海马CA1区乙酰胆碱酯酶表达的影响

目的观察迷迭香精油对C57BL/6鼠学习记忆及海马CA1区乙酰胆碱酯酶(Ach E)表达的影响。方法通过神经行为学筛选及制备嗅上皮毁损模型,用Lashley-Ⅲ水迷宫测定迷迭香精油吸嗅对C57BL/6鼠的空间学习记忆的影响,并采用免疫组化法观察各组C57BL/6鼠海马CA1区Ach E表达。结果水迷宫试验中,在吸嗅第7、14天嗅上皮完整+迷迭香精油组潜伏期缩短,与对照组差异显著(P0.05);在海马CA1区,与对照组比较,嗅上皮完整+迷迭香精油组Ach E阳性细胞数和平均吸光度值明显减少(P0.05)。结论迷迭香精油吸嗅通过嗅觉通路提高C57BL/6鼠学习记忆能力,机制可能为抑制海马CA1区Ach E活性。     

MSCs对紫外线诱导皮肤光老化大鼠模型凋亡的影响

目的 研究骨髓间充质干细胞(MSCs)对紫外线诱导皮肤光老化模型大鼠皮肤细胞凋亡的影响.方法 采用15 W UVA和UVB紫外灯,每日照射大鼠背部裸露皮肤区2h,共照射60d.随机分为对照组、模型组及MSCs治疗组,每组10只.体外分离培养MSCs,在大鼠背部裸露皮肤区多点注射,1次/w,共8 w.取皮肤组织,利用RT-PCR方法检测.结果 治疗组Bax mRNA表达明显低于模型组(P＜0.05),但接近于对照组(P＞0.05).治疗组Bcl-2 mRNA表达高于模型组(P＜0.05),低于对照组(P＜0.05).结论 MSCs对紫外线诱导的皮肤光老化模型大鼠皮肤细胞有抑制凋亡作用.     

重复经颅磁刺激对帕金森病鼠纹状体生长相关蛋白和突触素表达的影响

目的 探讨重复经颅磁刺激 (repetitive transcranial magnetic,rTMS)对帕金森病(PD)模型鼠纹状体生长相关蛋白(Growth activty protein-43,GAP-43)和突触素(synaptophysin,p38)表达的影响.方法 40只雄性C57BL/6J小鼠随机分为:对照组,PD模型组,假磁刺激(srTMS)组,rTMS组,每组10只.小鼠皮下注射MPTP(15 mg·kg-1·2 h-1·次-1,注射4次)复制PD模型,rTMS干预,利用免疫组织化学染色技术检测GAP-43和p38的表达变化,并借助图像分析系统对其进行定量分析.结果 PD模型组、srTMS组及rTMS组GAP-43阳性产物较对照组明显增多,以rTMS组GAP-43表达升高最为明显,且着色深,PD模型组和srTMS组校正光密度值(COD)均明显高于对照组(P＜0.05),rTMS组COD显著高于对照组(P＜0.01)及PD模型组和srTMS组(P＜0.05).PD模型组和srTMS组及rTMS组p38表达较对照组反应产物明显减少,PD模型组和srTMS组 COD均显著低于对照组(P＜0.01),rTMS组 COD值明显低于对照组(P＜0.05),但rTMS组p38表达较PD模型组和srTMS组增多,COD显著高于PD模型组和srTMS组(P＜0.05).结论 rTMS可诱导受损的纹状体区GAP-43和p38的表达上调,从而推测rTMS可能通过促进轴突再生和突触重塑,进而对受损的多巴胺转运通路起修补作用,增加多巴胺转运,从而达到治疗作用.     

光学标测技术评价异丙肾上腺素诱导的应激性心肌病小鼠心脏电活动

目的 筛选异丙肾上腺素(ISO)诱导应激性心肌病(SIC)模型小鼠的最佳方案,建立光学标测技术评价SIC对小鼠心脏电活动影响的方法.方法 选择6～8月龄雌性C57BL/6J小鼠60只,分为对照组10只,其余50只根据ISO剂量不同分为给药1组,给药2组,给药3组,给药4组,给药5组,每组10只;另取C57BL/6J小鼠...     

鼠神经生长因子抗C57BU/6J小鼠毛细胞凋亡与保护作用的研究

目的研究C57BU/6J小鼠耳蜗内神经生长因子(NGF)随年龄改变的分布特点及鼠神经生长因子干预小鼠耳蜗毛细胞的凋亡机制。方法对不同月龄C57BU/6J小鼠注射NGF后,通过Western blot方法检测各组耳蜗基膜中NGF蛋白的表达,同时检测caspase-3的表达变化情况。结果与对照组相比,注射NGF处理组小鼠耳蜗基膜NGF蛋白表达明显高于对照组(P0.001),而caspase-3在对照组中的表达显著低于NGF处理组小鼠(P0.001)。结论 NGF注射后可提升小鼠耳蜗基底膜中该蛋白的表达,通过降低耳蜗组织中caspase-3的表达,抑制老龄大鼠内耳毛细胞凋亡而发挥相应保护作用。     

胞质转导肽-HBcAg18-27-Tapasin体外诱导HBV转基因小鼠髓源性树突状细胞成熟及在T淋巴细胞增殖中的作用

目的:观察融合蛋白胞质转导肽(cytoplasmic transduction peptide,CTP)-HBcAg18-27-Tapasin体外诱导HBV转基因小鼠髓源性树突状细胞(dendritic cell,DC)成熟和对T淋巴细胞增殖的作用.方法:体外分离、培养HBV转基因小鼠及近交系C57BL/6小鼠髓源性DC,加入重组粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子和白介素(interleukin,IL)-4培养5d,再加入实验组10μg/mL CTP-HBcAg18-27-Tapasin、对照组10μg/mL CTP-HBcAg18-27、10μg/mL HBcAg18-27-Tapasin及空白组RPMI1640完全培养液.流式细胞术测定DC表面分子CD80、CD83、MHC-1的表达,ELISA法测定DC培养上清液中的IL-12p70的水平,细胞计数试剂盒(CCK-8)检测T淋巴细胞增殖反应,流式细胞仪检测增殖的T淋巴细胞内的细胞因子.结果:体外成功诱导小鼠髓源性DC;CTP-HBcAg18-27-Tapasin能明显上调DC表面分子CD80、CD83、MHC-1的表达;并且CTP-HBcAg18-27-Tapasin组诱导DC分泌的IL-12p70水平及诱导DC增殖T淋巴细胞增殖能力明显高于对照组及空白组[IL-12p70转基因小鼠(F=205.85,P=0.000);C57BL/6小鼠(F=406.20,P=0.000)];流式细胞仪检测实验组融合蛋白诱导的CTL水平也高于对照组[转基因小鼠(F=155.45,P=0.000);C57BL/6小鼠(F=392.90,P=0.000)],同时HBV转基因小鼠DC表面分子及在T淋巴细胞增殖中的作用要比C57BL/6小鼠低.结论:分子伴侣Tapasin修饰胞内化抗原肽能促进HBV转基因小鼠髓源性DC的分化、成熟,并能增强DC刺激T淋巴细胞增殖能力及诱导CTL的产生.     

泮托拉唑对二乙基亚硝胺联合四氯化碳诱导C57BL/6J小鼠肝癌模型肝细胞增殖的影响

目的:探讨泮托拉唑对二乙基亚硝胺(diethylnitrosamine,DEN)联合四氯化碳(carbon tetrachloride,CC14)诱导C57BL/6J小鼠肝癌模型肝癌细胞增殖的影响.方法:将78只C57小鼠采用DEN联合CCl_4共同诱导C57BL/6J小鼠肝癌,第9周将制模小鼠随机分为模型组、泮托拉唑低剂量组(40mg/kg)、高剂量组(80 mg/kg),并开始腹腔注射泮托拉唑,同时取12只正常小鼠为对照.第25周处死小鼠,取正常肝组织、肝癌组织和癌旁组织,肉眼观察拍片,并作HE染色光镜检查.采用生化法检查小鼠血清谷丙转氨酶(alanine transaminase,ALT)、谷草转氨酶(aspartate aminotransferase,AST)、尿素(urea)、肌酐(creatinine,Cr)水平;采用Realtime PCR方法来检测正常肝、肝癌及癌旁组织甲胎蛋白(α-fetoprotein,AFP)、细胞增殖核抗原Ki67,增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)mRNA的表达,采用Western blot法检测Ki67、PCNA蛋白的表达.结果:小鼠死亡率为21%,成瘤率为100%.肝脏组织巨检:模型组与高低剂量组肝体积增大,表面有大小不等的结节,与模型组比较,高、低剂量组结节个数明显减少.HE染色显示:与模型组比较,高、低剂量组异型增生明显减少.血清生化检测显示:模型组、高、低剂量组血清ALT、AST水平明显高于正常组(P0.05),高剂量组ALT、AST水平明显低于模型组(P0.05).RT-PCR结果提示,与正常组相比较,模型组和高、低剂量组AFP、Ki67和PCNA mRNA表达明显增高(P0.05,F=7.94;P0.05,F=15.62;P0.01,F=45.58).与模型组比较,高剂量组Ki67和PCNA mRNA表达降低(P0.05,F=5.89;P0.05,F=10.34).Western blot结果显示,与正常肝组织比较,模型组和高剂量组的肝癌及癌旁组织Ki67和PCNA蛋白表达明显增高(P0.05,F=20.41;P0.05,F=20.31).与模型组比较,高剂量组肝癌及癌旁组织Ki67和PCNA蛋白表达明显减少(P0.05,F=16.47;P0.05,F=12.38).结论:泮托拉唑DEN联合CCl_4诱导C57BL/6J小鼠肝癌模型肝细胞增殖有抑制作用.     

带有HPV-16 E6/E7基因的DC疫苗抑制裸鼠宫颈癌生长的机制

目的 观察由携带HPV-16 E6/E7基因的树突细胞(dendritic cell,DC)疫苗免疫得到的细胞毒性T淋巴细胞(CTL)在裸鼠体内对官颈癌的抑制作用及相关机制.方法 诱导培养C57B L/6小鼠骨髓的未成熟DC(imDC),将已经成功构建的携带人乳头状瘤病毒(HPV)-16 E6/E7基因的重组腺病毒感染imDC,Western印迹检测E7蛋白的表达;构建裸鼠官颈癌细胞移植瘤模型,应用DC疫苗诱导的CTL处理后,观察裸鼠肿瘤的体积变化;CCK8(cell counting kit8)法检测经DC疫苗免疫的BALB/c小鼠脾脏T淋巴细胞的增殖;免疫组化法检测裸鼠脾脏组织CD4+T淋巴细胞的表达.结果 成功培养出DC并制备出DC疫苗;第28天各组裸鼠肿瘤体积pAd-E6E7-DC-CTL-CaSki组与对照组pAd-mock-DC-CTL-CaSki组、DC-CTL-CaSki组、CaSki组相比较,pAd-E6E7-DC-CTL-CaSki组裸鼠肿瘤体积最小(P＜0.05);CCK8法检测经DC疫苗免疫的BALB/c小鼠脾脏T淋巴细胞的增殖,结果pAd-E6/E7-DC组淋巴细胞OD值明显高于pAd-mock-DC组、DC组和PBS组(P＜0.01);免疫组化检测各组裸鼠脾脏组织CD4 T淋巴细胞的表达结果显示,pAd-E6E7-DC-CTL-CaSki组CD4表达量最高,pAd-mock-DC-CTL-CaSki组和DC-CTL-CaSki组CD4表达量次之,CaSki组CD4表达量最低.结论 带有HPV-16 E6/E7基因修饰的DC疫苗,能够促进小鼠体内T淋巴细胞的增殖,诱导CTL抑制裸鼠宫颈癌移植瘤的生长.     

Caspase-3在骨髓间充质干细胞回输脑缺血再灌注模型大鼠脑组织中的表达

目的 观察骨髓间充质干细胞回输脑缺血再灌注模型大鼠后脑组织中caspase-3的表达.方法 无菌分离骨髓间充质干细胞,用培养液DMEM/F12(含2% B27,EGF 40 ng/ml,bFGF 20 ng/ml)诱导骨髓间充质干细胞向神经样细胞分化,免疫组化检测NSE表达.线栓法建立大鼠缺血再灌注模型.RT-PCR 检测 MSCs 回输脑缺血再灌注模型大鼠脑组织中caspase-3 mRNA的表达.结果 骨髓间充质干细胞诱导神经样细胞后,免疫组化检测NSE呈阳性表达.RT-PCR检测caspase-3 mRNA 表达,治疗组 caspase-3表达明显低于模型组(P<0.05).治疗组Caspase-3低于对照组,但无统计学意义(P>0.05).结论 骨髓间充质干细胞回输脑缺血再灌注模型大鼠后脑组织caspase-3基因下调,抑制神经细胞凋亡.     

CD137和CD137配体信号通过低氧诱导因子1α调控糖酵解影响巨噬细胞吞噬及迁移功能

目的 探讨CD137-CD137配体(CD137L)信号通过低氧诱导因子1α(HIF-1α)调控糖酵解影响巨噬细胞吞噬及迁移功能.方法 通过巯基乙酸盐腹腔灌洗法获取C57BL/6J小鼠腹腔巨噬细胞(PM),采用混合气体饱和法建立细胞低氧环境.PM分为对照组、低氧组、CD137激动组、HIF-1α过表达组和糖酵解激动组....     

NALP3炎性体在小鼠非酒精性脂肪性肝炎发病中的作用

目的 探讨NALP3炎性体在非酒精性脂肪性肝炎(NASH)小鼠发病中的作用.方法 予C57BL小鼠高脂饮食(高脂组)及脂多糖建立非酒精性脂肪肝模型(NASH组),同时设立正常饮食组作为对照.观察各组小鼠血清ALT、AST值与计算肝指数,评定脂肪性肝炎程度,ELISA法测定肝脏TNF-α水平,蛋白质印迹法测定NF-κB、NALP3、caspase-1、ASC的表达;实时荧光定量反转录-PCR检测NALP3、caspase-1、ASC mRNA的表达水平.数据处理采用单因素方差分析及LSD法.结果 NASH组小鼠ALT、AST及肝指数明显高于高脂组,差异有统计学意义(P＜0.05),高脂组和NASH组的NALP3 mRNA表达高于正常对照组(P＜0.05).NASH组caspase-1和ASC mRNA表达水平明显高于正常对照组及高脂组(P＜0.01),高脂组caspase-1和ASC mRNA表达高于正常对照组(P＜0.05).NASH组NALP3、caspase-1和ASC表达水平明显高于正常对照组(P＜0.01),NASH组NALP3、caspase-1和ASC表达水平明显高于高脂组(P＜0.05),高脂组NALP3、caspase-1和A SC表达水平与正常对照组无明显差异(P＞0.05).结论 NALP3炎性体参与胰岛素抵抗的形成,可能是影响NASH发生和发展的重要因素.     

甲强龙对实验性变态反应性脑脊髓炎小鼠的协同刺激分子CD80和CD86的影响

目的探讨甲强龙对实验性变态反应性脑脊髓炎小鼠的协同刺激分子CD80和CD86的影响。方法实验性变态反应性脑脊髓炎(EAE)模型通过以髓鞘少突胶质细胞糖蛋白多肽35-55(MOG35-55)为抗原诱导。将30只雌性C57BL/6J小鼠随机分为甲强龙组、EAE组和正常组,每组10只。采用蛋白质印迹法检测大脑的CD80和CD86表达水平。结果甲强龙组神经功能缺损症状轻于EAE组,大脑CD80表达水平明显低于EAE组(P0.05),而CD86表达明显高于EAE组(P0.05)。结论甲强龙能改善EAE小鼠的症状,其作用机制之一是抑制CD80表达并上调CD86的表达。     

经卡介苗活化的树突状细胞疫苗治疗胰腺癌的基础及临床运用展望——暨向2011年诺贝尔医学奖得主Ralph Steinman教授致敬

目的 探讨经卡介苗(BCG)活化的树突状细胞(DC)疫苗体外直接抗胰腺癌细胞Panc02的机制,以及观察经不同部位注射DC疫苗抗小鼠胰腺癌移植瘤的效应.方法 从C57BL/6小鼠骨髓中诱导培养DC,并予以BCG促成熟,用流式细胞技术检测DC成熟度,CCK-8细胞计数检测DC直接抑制Panc02增殖情况,流式细胞仪检测BCG促成熟DC表面凋亡诱导配体(TRAIL)的表达量.C57BL/6小鼠皮下接种Panc02胰腺癌细胞制成荷瘤小鼠,第7d予以DC疫苗注射免疫治疗(DC疫苗为经Panc02细胞冻融抗原致敏后BCG促成熟的DC),分为3组:瘤内注射生理盐水组、皮下注射DC疫苗组和瘤内注射DC疫苗组,1周后再治疗1次,第2次治疗后15d处死小鼠,观察不同治疗抗肿瘤的效果.结果 BCG活化后DC疫苗成熟度明显增加,其表型CD86表达增加;经BCG活化成熟的DC能直接抑制Panc02细胞生长,这一作用可被TRAIL抗体部分抑制,且流式细胞术检测发现成熟DC表面分子TRAIL明显高于未经BCG促成熟组未成熟DC.肿瘤体重:瘤内注射DC疫苗组＜皮下注射DC疫苗组＜瘤内注射生理盐水组(P＜0.01).结论 BCG活化的胰腺癌DC疫苗的生物活性明显增加,并可通过TRAIL这一途径直接杀伤肿瘤细胞;且经BCG活化的DC疫苗瘤内注射免疫治疗抗肿瘤作用更强.