粪抗原检测法诊断犬细粒棘球绦虫感染的研究：Ⅱ.粪抗原检测 …

用细粒棘球绦虫成虫虫体抗原及其抗体建立的双抗体夹心ＥＬＳＩＡ滴定成虫抗原的结果Ａ４５０值与抗原含量呈指数曲线关系,高度相关。实验感染家犬抗原含量在２．５－８．０μｇ／ｍｌ之间,因此本法在检测粪抗原中具有足够的敏感性。家犬泡状带绦虫的感染引起的交叉反应是影响本法特异笥的主要问题。     

粪抗原检测法诊断犬细粒棘球绦虫感染的研究Ⅲ.双抗体夹心ELISA法检测粪抗原诊断家犬细粒棘球绦虫感染的现场评价

本文报道用槟榔碱驱虫法对检测粪抗原诊断家犬细粒棘球绦虫感染的应用价值进行现场比较评价的结果。７３只受试犬中有１６只对槟榔碱无反应。在导泻成功的５７ 只犬中粪抗原阳性者１１只阳性率１９．２％ 。其中驱虫阴性的３８只犬中粪抗原阳性者仅２只（５．３％ ）。在１０只驱出细粒棘球绦虫的家犬中８只粪抗原阳性。５ 只驱出泡状带绦虫的犬中粪抗原阳性者１ 只,但反应强度低。粪抗原的反应强度与细粒棘球绦虫的感染强度呈正相关（ｒ＝ ０．９４）。证明本法可用于家犬细粒棘球绦虫感染的调查。     

粪抗原检测法诊断犬细粒棘球绦虫感染的研究Ⅲ.双抗体夹心ELISA法检测粪抗原诊断家犬细粒棘球绦虫感染的现场评价

本文报道用槟榔碱驱虫法对检测粪抗原诊断家犬细粒棘球绦虫感染的应用价值进行现场比较评价的结果.73只受试犬中有16只对槟榔碱无反应.在导泻成功的57只犬中粪抗原阳性者11只阳性率19.2%.其中驱虫阴性的38只犬中粪抗原阳性者仅2只(5.3%).在10只驱出细粒棘球绦虫的家犬中8只粪抗原阳性.5只驱出泡状带绦虫的犬中粪抗原阳性者1只,但反应强度低.粪抗原的反应强度与细粒棘球绦虫的感染强度呈正相关(r=0.94).证明本法可用于家犬细粒棘球绦虫感染的调查.     

粪抗原检测法诊断犬细粒棘球绦虫感染的研究 Ⅰ.用细粒棘球绦虫成虫虫体抗原—抗体系统检测粪抗原方法的建立

用细粒棘球绦虫成虫虫体抗原及其免疫家兔血清ＩｇＧ建立了用于检测家犬粪抗原诊断细粒棘球绦虫成虫感染的双抗体夹心ＥＬＩＳＡ方法。对用离子交换层析、ＳＰＡ亲和层析、抗兔ＩｇＧ抗体亲和层析和细粒棘球绦虫成虫虫体抗原亲和层析等四种方法纯化的抗体进行了比较，以抗原亲和层析法纯化的抗体免疫活性最高，用双抗体夹心ＥＬＩＳＡ检测抗原的终点在标本缓冲液中为２．５ｎｇ／ｍｌ，在健康家犬粪便悬液的上清中为５ｎｇ／ｍｌ。检测１１只人工感染细粒棘球绦虫成虫的家犬粪便标本，粪抗原阳性率达１００％。     

粪抗原检测法诊断犬细粒棘球绦虫感染的研究：Ⅰ.用细粒棘球绦虫成虫 …

用细粒棘球绦虫成虫虫体抗原及其免疫家兔血清ＩｇＧ建立了用于检测家犬粪抗原诊断细粒棘球绦虫成虫感染的双抗体夹心ＥＬＩＳＡ方法。对用离子交换层析，ＳＰＡ亲和层析，抗兔ＩｇＧ抗体亲和层析和细粒棘球线条绦虫成虫虫体抗原亲和层析等四种方法纯化的抗体进行了比较，以抗原亲和层析化纯化的抗体免疫活性最高，用双抗体夹心ＥＬＩＳＡ检测抗原的终点在标本缓冲液中为２．５ｎｇ／ｍｌ，在健康家犬粪便悬液的上清中为５ｎｇ／ｍｌ     

细粒棘球蚴原头节虫体和排泄分泌抗原抗体系统检测犬粪抗原的比较研究

用细 粒棘球蚴原头节虫体及排泄分泌抗原－抗体系统进行交叉酶联免疫吸附试验的实验结果显示;成虫虫体抗原和原头节虫体抗原呈现交叉反应,表明这两个发育阶段的虫体抗原具有主要的共同抗原组分;原头节排泄分泌抗原的免疫抗原是原头节的期特异性抗原,与其相应抗体具有较高的亲合力。检测犬粪标本的结果感染细粒棘球绦虫的犬粪抗原是一种广谱抗原。两种抗原－抗体系统均可成功地用于粪抗原的检测。     

现场应用粪抗原检测法诊断犬细粒棘球绦虫感染的效果评价

目的 评价粪抗原检测法在包虫病流行病学监测中的实际应用价值。方法 家犬在采集粪便后，进行槟榔碱导泻，应用粪抗原检测法检测粪样中的细粒棘球绦虫抗原，并与槟榔碱导泻法的驱虫结果比较，同时分析犬肠道中寄生的其它蠕虫对粪抗原检测结果的影响。结果 在294只槟榔碱导泻成功的家犬中，45只检出细粒棘球绦虫，粪抗原阳性犬共46只。二者的符合率为97．8％。在249只未检出细粒棘球绦虫的家犬中，粪抗原阳性者1只。结论 粪抗原检测法诊断犬细粒棘球绦虫感染具有较高的敏感性和特异性。可作为包虫病常规监测方法推广应用。     

现场应用粪抗原检测法诊断犬细粒棘球绦虫感染的效果评价

目的　评价粪抗原检测法在包虫病流行病学监测中的实际应用价值。　方法　家犬在采集粪便后 ,进行槟榔碱导泻 ,应用粪抗原检测法检测粪样中的细粒棘球绦虫抗原 ,并与槟榔碱导泻法的驱虫结果比较 ,同时分析犬肠道中寄生的其它蠕虫对粪抗原检测结果的影响。　结果　在 2 94只槟榔碱导泻成功的家犬中 ,4 5只检出细粒棘球绦虫 ,粪抗原阳性犬共 4 6只。二者的符合率为 97.8%。在 2 4 9只未检出细粒棘球绦虫的家犬中 ,粪抗原阳性者 1只。　结论　粪抗原检测法诊断犬细粒棘球绦虫感染具有较高的敏感性和特异性。可作为包虫病常规监测方法推广应用。     

澳大利亚犬自然感染或实验感染细粒棘球绦虫的粪抗原检测

细粒棘球绦虫广泛分布于世界各地,是一种重要的人兽共患寄生虫。粪检虫卵等方法用于诊断细粒棘球绦虫不可靠。用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测感染犬的粪抗原,其灵敏度高、特异性强,适用于隐性和显性感染。本文用ELISA检测粪抗原的方法调查了澳大利亚家犬和野犬的自然感染和实验感染情况。     

粪抗原检测法诊断犬细粒棘球绦虫感染的研究：Ⅲ.双抗体？…

本文报道用槟碱驱虫法对检测粪抗原诊断家犬细粒棘球绦虫感染的应用价值进行现场比较评价的结果。７３只受试犬中有１６只对槟 无反应。在导泻成功的５７只犬中粪抗原阳性者１１只阳性率１９．２％，其中驱虫阴性的３８只犬只粪抗原阳性者仅２只。     

犬细粒棘球绦虫感染LAMP检出日期的确定

目的确定犬细粒棘球绦虫感染环介导等温扩增技术(LAMP)最早检出日期。方法家犬8只,口服喂饲细粒棘球绦虫原头节,建立细粒棘球绦虫感染动物模型。感染后40d收集犬粪,用LAMP检测粪便中细粒棘球绦虫目的基因并与传统的PCR比较。结果 8只犬均获得细粒棘球绦虫感染,感染后第18dLAMP法检查犬粪中细粒棘球绦虫目的基因均阳性,较普通PCR法提早2d。结论 LAMP法简便、快捷、灵敏,有望成为早期诊断犬细粒棘球绦虫感染的重要手段。     

应用单抗酶联免疫吸附试验检测细粒棘球蚴实验感染和自然感染犬粪抗原

单抗EmA9能识别多房棘球绦虫(E.m.)体被、实质及排泄抗原,初步研究显示它能检出细粒棘球蚴(E.g.)实验感染犬粪抗原。本文评价了该单抗用于夹心ELISA诊断E.g.实验感染和自然感染犬粪抗原的价值。 13只杂交犬分别于实验室感染不同数量和不同来源的E.g.头节,于感染后不同时间定量收集粪样,经甲醛处理加热后,离心、取上清保存备用。另有1只犬感染羊源泡状带绦虫六钩蚴,采粪样后以蔗糖悬浮法检查虫卵。各组犬在感染后32—55天间处死,剖     

棘球绦虫感染犬粪抗原检测研究新进展

摘要：棘球绦虫（Echinococcus spp）感染的犬目前是人畜棘球蚴病主要传染源,因此对感染犬的动态监测、合理驱虫治疗是预防和彻底消灭包虫病流行的关键性措施之一。近年来,为了克服槟榔碱导泻法鉴定虫种和虫卵以及检测血清特异性循环抗原及抗体等方法的不足,各实验室开始应用ELISA双抗夹心法,试图建立棘球绦虫感染犬粪抗原的快速检测系统。本文对犬感染棘球绦虫的特异性粪抗原检测技术的最新进展作一综述。     

PCR诊断犬感染细粒棘球绦虫方法检出日期的确定

目的确定犬细粒棘球绦虫感染PCR检测的窗口期。方法家犬8只,口服喂饲细粒棘球绦虫原头节,感染后40 d,收集犬粪,用PCR方法检测粪便中的目的DNA。结果6只犬获得细粒棘球绦虫重度感染,感染后21 dPCR检出目的DNA片段。结论犬重度感染细粒棘球绦虫后粪便PCR检测的窗口期为20 d。     

检测粪抗原用作犬、人棘球绦虫病和带绦虫病的免疫诊断

在带绦虫和棘球绦虫感染时,由于宿主粪便并不经常出现虫卵,以及其虫卵在光学镜下的形态极难区别,以致传统诊断方法的敏感性和特异性都很低。本文报道了用抗绦虫成虫抗原和超免疫兔血清进行ELISA检测宿主粪便中特异性抗原。以感染兔的豆状带绦虫囊尾蚴经口感染     

用ELISA方法检测原头节及EgM免疫犬IgG变化情况

目的 用不同的抗原检测免疫犬后的血清,判定所引起的IgG变化和有无与其他虫种的交叉反应.方法 在用原头节可溶性粗抗原和Eg M家族重组表达蛋白对犬的免疫保护实验中,以原头节可溶性粗抗原、细粒棘球绦虫成虫可溶性粗抗原和多头绦虫可溶性粗抗原包被检测时,通过间接ELISA的方法检测其中的特异性抗体IgG的变化规律及与多头绦虫抗原有无交叉反应.结果 原头节可溶性粗抗原检测出相对应免疫组实验犬IgG 应答变化情况,同时用细粒棘球绦虫成虫包被抗原亦检测出IgG存在一定差异,但不十分明显,与多头绦虫无交叉反应.检测EgM重组蛋白免疫组IgG时它们存在一定差异,但不十分明显.结论 原头节可溶性粗抗原免疫组通过ELISA 的方法较为准确地检测出其IgG的应答情况;EgM重组蛋白免疫组的抗体检测仍需进一步完善.     

犬体内细粒棘球绦虫和多房棘球绦虫的混合感染

目的 证实家犬体内是否存在细粒棘球绦虫和多房棘球绦虫混合感染。方法 从新疆和静县巴音布鲁克草原现场收购的30条牧羊犬,经麻醉后处死解剖,在1只雌性牧羊犬小肠内发现棘球绦虫成虫1万条以上,经显微镜观察,疑为细粒棘球绦虫和多房棘球绦虫混合感染。用Eg1f/r和EM-15/17EM引物分别对两种棘球绦虫的线粒体DNA特异目的片段进行序列分析鉴定。结果 形态学观察:细粒棘球绦虫孕节长大,生殖孔偏后,位于节片一侧中部。子宫有不规则的分支和侧突(侧囊),内含虫卵200~800个。多房棘球绦虫较短小,4~5体节。孕节中子宫呈简单的囊状,无侧囊。生殖孔开口于侧缘的前半部。线粒体12S RNA序列鉴定,扩增样本DNA经同源序列比较发现,与细粒棘球绦虫G1型具有相同的序列;扩增样本与多房棘球绦虫具有相同的序列。分别确定为细粒棘球绦虫和多房棘球绦虫两种虫种。结论 首次证实家犬体内存在细粒棘球绦虫和多房棘球绦虫的混合感染。     

应用抗细粒棘球绦虫Ag5和AgB的单克隆抗体分析带绦虫抗原

细粒棘球绦虫是最重要的带绦虫之一。其它带绦虫与细粒棘球绦虫一样,其幼虫阶段常感染相同的宿主,以致免疫学上常常难与细粒棘球绦虫区分。自在细粒棘球绦虫囊液中鉴定出抗原5(Ag5)和抗原B(AgB)以来,人畜包虫病诊断的特异性已大有改进,但由于在感染多房棘球绦虫、伏氏绦虫(E.vogeti)和猪囊尾蚴的病人血清中以及感染水泡绦虫、羊绦虫的     

家犬粪便中的细粒棘球绦虫DNA PCR检测方法的建立

目的 建立检测家犬粪便中细粒棘球绦虫DNA的PCR方法，为开展流行病学监测提供检测手段。方法 犬粪经液氮反复冻溶后提取DNA，PCR扩增编码细粒棘球绦虫12srDNA检测该靶DNA片段（255bp）。结果 10只细粒棘球绦虫感染犬，8只（体内成虫数〉80条）阳性，2只（体内成虫数分别为4条和5条）阴性。4只未感染家犬粪样及其他3种绦虫DNA样本均为阴性。结论 初步建立了灵敏、特异的检测家犬粪便中细粒棘球绦虫的PCR方法。     

环介导等温扩增技术检测细粒棘球绦虫DNA的初步研究

目的评价环介导等温扩增技术（LAMP）检测细粒棘球绦虫的敏感性。方法提取细粒棘球绦虫虫卵及成虫DNA,根据棘球绦虫线粒体12SrRNA基因序列及LAMP法原理,设计4条细粒棘球绦虫特异性引物,进行LAMP反应,反应产物经SYBRGreenⅠ显色及1.5%琼脂糖电泳鉴定,同时设置泡状带绦虫及空白对照。用1000、100、10、1个虫卵/200μl细粒棘球绦虫虫卵DNA进行LAMP反应,评价其敏感性。结果细粒棘球绦虫检测管反应液呈混浊沉淀,显色后为绿色;对照组澄清,显色后为棕色。虫卵产物电泳后呈LAMP特征性梯状条带,对照组无扩增产物。LAMP可检测到的虫卵最低数量为1个。结论 LAMP法敏感、特异、简便,可用于棘球蚴病病原检测和疾病监测。