LAK／IL—2联合环磷酰胺增强荷瘤鼠抗瘤活性的作用及其机理

淋巴因子激活的杀伤细胞(LAK)与环磷酰胺(Cyclophospamide,Cy)联合应用对小鼠H_(22)肝癌模型具有显著协同抗肿瘤作用,但这种协同作用与二者用药的先后次序有显著关系.单独使用KAK/IL一2或Cy仅能轻度抑制实体瘤生长.轻度延长腹水型荷瘤鼠生存期(P>0.05).LAK/IL～2、Cy同时治疗及LAK/IL—2、Cy序贯疗法可中度延长腹水型荷瘤鼠生存(P<0.05),中度抑制实体瘤生长.而Cy、LAK/IL—2序贯疗法的抗肿瘤作用显著增强,可显著抑制实体瘤生长,显著延长腹水型荷瘤鼠生存期(P<0.01),且有25%的荷瘤鼠完全治愈.长期存活.提示Cy、LAK/IL—2序贯疗法为最佳联合治疗方案,可为临床应用提供理论基础.     

妇痛宁联合免疫法对子宫内膜异位症免疫功能的影响

目的：探讨中药妇痛宁煎剂联合过继免疫疗法（Adoptive immunotherapy AIT）对子宫内膜异位症免疫功能的影响。方法：50只S-D大鼠随机分为空白对照组、模型对照组、妇痛宁煎剂灌胃组、LAK细胞注射组、妇痛宁煎剂灌胃联合LAK细胞注射共5组。分别测定各组大鼠腹腔中自然杀伤细胞（NK细胞）活性，血清中白细胞介素-1（IL-1）、及血清B、P、PRL的水平。结果：3个治疗组腹腔液中NK细胞活性均有不同程度提高，血清IL-1水平均有所降低，且都以联合治疗组数值变化显著；血清E2、P水平妇痛宁组及联合组显著下降，LAK细胞组无明显改变。结论：妇痛宁联合过继免疫法治疗子宫内膜异位症较单独应用妇痛宁或过继免疫疗法更有效地调节内异症紊乱的免疫机制。提示中西医结合治疗子宫内膜异位症具有诱人前景。     

循环应用低剂量环磷酰胺联合白细胞介素-2对乳腺癌荷瘤小鼠调节性T细胞及生存期影响

目的了解循环应用小剂量环磷酰胺(CTX)联合白细胞介素-2(IL-2)对4T1Balb/c乳腺癌荷瘤小鼠调节性T细胞(Treg)及其生存期影响。方法通过皮下接种4T1乳腺癌细胞建立乳腺癌Balb/c荷瘤小鼠模型;荷瘤小鼠随机分为IL-2组、CTX组、IL-2+CTX组及对照组,在种瘤第10天开始对荷瘤小鼠分别经腹腔按方案给药,部分小鼠在末次给药后4天处死,流式细胞术检测小鼠脾脏中CD4+CD25+/CD4+调节性T细胞数量;余小鼠观察生存期。结果 IL-2组、CTX组、IL-2+CTX组及对照组调节性T细胞比例分别为26.00%±0.98%、11.30%±0.85%、20.15%±1.11%、17.50%±1.13%,组别之间差异均有显著性(P<0.05)。IL-2+CTX组小鼠最长存活57天,对照组小鼠最长存活46天,差异具有显著性(P<0.05)。结论 IL-2联合循环应用CTX将调节性T细胞持续维持在较低水平,从而延长小鼠生存期。     

单次小剂量环磷酰胺对小鼠CD4~+CD25~+Treg细胞及抗肿瘤免疫力的影响

目的探讨单次小剂量注射常规化疗药物环磷酰胺(CTX)对小鼠CD4+CD25+Treg细胞的影响及其抗肿瘤作用。方法C57BL/6小鼠40只随机分为CTX组和对照组各20只,CTX组采用CTX 20 mg.kg-1溶于0.2 mL生理盐水中腹腔注射,对照组采用生理盐水0.2 mL腹腔注射;(1)2组于注射完成3 d后各取10只小鼠皮下注射0.5 mL细胞混悬液(含2×106个RMA肿瘤细胞),观察20 d,观察结束后取小鼠脾脏淋巴细胞,用3-2,5-二苯基四氮唑溴盐法检测刀豆蛋白A诱导的淋巴细胞增殖情况;(2)2组于注射完成4 d后各处死10只小鼠,无菌状态下取小鼠脾脏用流式细胞仪检测CD4+CD25+Treg细胞相对量;同时用western blotting技术检测scurfin蛋白在小鼠脾脏中的表达变化。结果CTX组CD4+CD25+Treg细胞占淋巴细胞百分比明显低于对照组(P<0.05);CTX组scurfin蛋白表达密度值明显低于对照组(P<0.05);CTX组肿瘤攻击后小鼠肿瘤发生率较对照组降低(P<0.05);CTX组肿瘤攻击后小鼠肿瘤质量较对照组减轻(P<0.05);对照组小鼠在接种后第5天即发现有出瘤现象,而CTX组出瘤时间延长到第8天;对照组的肿瘤生长曲线较为陡直;CTX组的生长曲线较为平缓。CTX组淋巴细胞的增殖能力明显高于对照组(P<0.05)。结论单次小剂量CTX可以改善机体的免疫功能,并具有一定的抗肿瘤作用,为肿瘤临床治疗提供了实验依据。     

肝动脉灌注LAK/IL-2及化疗药物治疗晚期肝癌

目的观察经皮肝动脉插管化疗药物灌注、栓塞术联合LAK/IL-2灌注治疗中晚期肝癌的疗效、T淋巴细胞改变及副反应.方法 96例经确诊的中晚期肝癌,随机分为动脉化疗栓塞联合LAK/IL-2观察组及单纯介入化疗栓塞组各48例.两组均采用经皮穿刺肝动脉插管灌注化疗药物及栓塞.化疗药物5-FU 1000mg+卡铂300mg+表阿霉素30mg或丝裂霉素10～20mg,栓塞剂为碘化油和明胶海绵,介入治疗3～4周1次,2次为1疗程.观察组在栓塞后沿导管灌注同种异体LAK细胞1×109/100ml及IL-240万U.2次介入间隔观察每周3次静滴1×109/100mlLAK细胞及每日肌注IL-210万U.结果观察组总有效率(CR+PR)为7.29%( 35/48).对照组总有效率(CR+PR)为58.3%(28/48),两组比较相差有显著差性(P＜0.05).观察组T淋巴细胞治疗前后变化有统计学意义(P＜0.01).而对照组无统计学意义.结论同种异体LAK细胞联合化疗及栓塞治疗中晚期肝癌较单纯介入化疗栓塞疗效明显提高,是安全可行的一种治疗方法.     

黄芪注射液对环磷酰胺治疗H22荷瘤小鼠免疫功能的影响

[目的]研究黄芪注射液对环磷酰胺(CTX)化疗H22荷瘤小鼠的增效减毒作用及机制.[方法]采用移植性H22肝癌小鼠模型,随机分为模型组、CTX处理组、CTX+黄芪注射液高、中、低剂量联合用药组.各治疗组腹腔注射CTX 20 mg/kg,隔日1次,共5次;每次注射后6h分别腹腔注射生理盐水以及12、8、4 g/kg黄芪注射液0.2 ml/只,于末次给药后24 h,检测各组小鼠的抑瘤率、外周血白细胞数、脾指数、胸腺指数、IL-2、TNF-α等指标.分析黄芪注射液对CTX的增效减毒作用及机制.[结果]单用CTX组抑瘤率为61.8％,联用黄芪注射液低、中、高剂量组的抑瘤率分别为61.3％、67.5％、77.5％,其中CTX+黄芪注射液高剂量联合用药组与单用CTX组抑瘤率比较,抑瘤率有显著性差异(P＜0.05).黄芪注射液各组联用CTX与单用CTX组比较,可不同程度地升高荷瘤小鼠的白细胞数和胸腺指数、脾指数,且能提高荷瘤小鼠血清中IL-2和TNF-α的水平(P＜0.05).[结论]黄芪注射液可明显提高化疗后免疫缺陷小鼠的免疫功能,临床上可用于化疗后的辅助治疗.     

血小板因子4对环磷酰胺损伤小鼠骨髓细胞增殖能力的影响

目的 探讨血小板因子4(PF4)对环磷酰胺(CTX)诱导的化学损伤小鼠骨髓细胞增殖能力的影响. 方法 36只小鼠随机分为PF4组、CTX组和对照组.小鼠腹腔注射CTX 200 mg/kg制备化学药物损伤小鼠模型.在注射CTX前26 h和20 h,PF4组和CTX组各注射PF4(40μg/kg)和等体积的PBS缓冲液,对照组只注射等体积的PBS缓冲液.通过体外双层琼脂培养法测定PF4对CTX损伤小鼠骨髓细胞粒一巨噬细胞集落(CFU-GM)形成的影响,流式细胞仪测定细胞周期的变化.结果 注射CTX后第5天CTX组骨髓细胞数(BMK)较对照组显著减少(P<0.01);第8天PF4组BMK较CTX组显著增多(P<0.01).注射CTX后第5天CTX组骨髓CFU-GM数量较对照组和PF4组显著减少(P<0.01);第8天PF4组与CTX组的骨髓CFU-GM数量均有不同程度的上升,但两组间差异仍有统计学意义(P<0.05).注射CTX后第5天PF4组骨髓有核细胞GO/G1期细胞百分率比CTX组显著提高,且细胞坏死、凋亡率显著下降(P<0.01),而与对照组相比差异无统计学意义(P>0.05).第8天各组间G0/G1期细胞百分率、细胞坏死/凋亡率差异均无统计学意义(P>0.05). 结论 PF4使处于G0/G1期的骨髓细胞数增多,降低了其坏死和凋亡率,增加骨髓细胞CFU-GM集落形成率.     

小剂量环磷酰胺治愈荷膀胱癌小鼠动物模型的建立

[目的]建立单一剂量环磷酰胺（cyclophosphamide,CTX）治愈荷膀胱癌小鼠的动物模型。[方法]T739小鼠皮下接种小鼠可移植性膀胱移行细胞癌组织建立荷瘤小鼠模型。肿瘤接种后第7天,不同剂量的CTX单次腹腔内注射,观察荷瘤小鼠用药后体重和肿瘤结节直径的变化,找出CTX可治愈多数荷瘤小鼠的最低有效剂量。然后再取12只荷瘤T739小鼠随机分成两组,最低有效剂量的CTX单次腹腔内注射,等量生理盐水作对照,分别在治疗后第4、14天内眦静脉取血进行白细胞计数。[结果]接种2 mm^3的小鼠膀胱癌肿瘤组织可使T739小鼠肿瘤进行性生长,接种后第7天肿瘤直径约为2-4 mm。15-400 mg/kg的CTX单次腹腔内注射后1周内,荷瘤小鼠肿瘤结节缩小的速率和毒性反应均与所用CTX的剂量呈正相关。CTX治疗后2月,100-200 mg/kg CTX治疗组的荷瘤小鼠全部死亡;40 mg/kg CTX治疗后20%的荷瘤小鼠存活;15 mg/kg CTX治疗组60%的荷瘤小鼠存活,与对照组比较差异具有统计学意义（P〈0.01）。15 mg/kg CTX治疗后第4天荷瘤小鼠外周血WBC为（11.36±0.30）×10^9/L,对照组为（11.14±2.14）×10^9/L,两组数据比较差异无统计学意义（P〉0.05）;治疗后第14天,治疗组小鼠WBC计数降为（8.46±0.76）×10^9/L,与CTX治疗后第4天WBC计数比较差异具有统计学意义（P〈0.05）,但与对照组（9.86±3.40）×10^9/L比较差异无统计学意义（P〉0.05）。[结论]15 mg/kg CTX单次腹腔内注射后荷瘤小鼠无明显毒性反应,并可使多数荷瘤小鼠肿瘤治愈,因此,小剂量CTX治愈荷膀胱癌小鼠模型成功建立。     

三七总皂苷联合环磷酰胺对荷肝癌H22细胞移植瘤小鼠的治疗作用

目的 探究三七总皂苷（PNS）联合环磷酰胺（CTX）对肝癌H22荷瘤小鼠的治疗作用。方法 不同浓度的PNS体外干预肝癌H22细胞24~72 h后,CCK8比色法检测PNS对肝癌H22细胞增殖的影响;Annexin V/PI双荧光染色法检测PNS对肝癌H22细胞凋亡的影响;体内构建肝癌H22荷瘤小鼠模型,随机分为模型组、CTX组（25 mg/kg）、PNS低剂量组（120 mg/kg）、PNS中剂量组（240 mg/kg）、PNS 高剂量组（480 mg/kg）及 PNS 低剂量+CTX 组（120 mg/kg+25 mg/kg）、PNS 中剂量+CTX 组（240 mg/kg+25 mg/kg）、PNS高剂量+CTX组（480 mg/kg+25 mg/kg）,连续给药10 d后处死小鼠,取材,检测PNS及PNS联合CTX对肝癌H22荷瘤小鼠单核-巨噬细胞的吞噬能力、脾淋巴细胞增殖能力、肿瘤坏死因子（TNF-α）、白介素-2（IL-2）的水平、血清溶血素抗体水平、血液指标、抑瘤率和生存期的影响。结果 PNS对肝癌 H22细胞的增殖抑制呈浓度依赖性,能显著促进肝癌H22细胞的凋亡（P<0.01）。体内单用PNS及PNS联合CTX能增强单核-巨噬细胞的吞噬、刺激脾淋巴细胞的增殖、促进TNF-α、IL-2释放、促进血清溶血素抗体的生成,增加外周血中白细胞、红细胞、淋巴细胞的数量,PNS高剂量+CTX组的抑瘤率高达83.28%（P<0.01）、生命延长率达131.25%（P<0.05）。结论 PNS及PNS与CTX联用可提高机体的免疫力和抑瘤率,延长肝癌H22荷瘤小鼠的生存期。     

黄芪多糖、刺五加多糖和枸杞多糖在体内对LAK细胞抗肿瘤活性的调节作用

黄芪多糖(APS)、刺五加多糖(PAS)和枸杞多糖(LBP)5-10 mg/kg体重分别腹腔注射C57BL/6小鼠,发现3种多糖均可明显促进小鼠脾细胞增殖。将这种脾细胞以2×10~6/ml经125-1000 U/ml IL-2体外诱导4天,用[~(125)I]UdR释放分析测LAK活性,发现注射APS组小鼠脾细胞LAK活性比注射生理盐水(NS)组提高70％-120％。注射PAS组提高20％-90％,注射LBP组提高26％-80％。体外IL-2用量可分别降低75％、50％、50％。LBP注射老龄小鼠可显著促进脾细胞增殖外,LAK活性可提高120％-200％,体外IL-2用量可降低75％以上。     

多西紫杉醇/顺铂化疗同步放疗对局部晚期非小细胞肺癌疗效观察

目的研究多西紫杉醇/顺铂化疗同步放疗对晚期非小细胞肺癌的疗效及毒副作用。方法76例Ⅲ期非小细胞肺癌患者被随机分为两组,多西紫杉醇/顺铂化疗同步放疗组(同步组), 多西紫杉醇/顺铂化疗序贯放疗组(序贯组);两组放疗方法相同,放疗剂量DT 60～70Gy,每次2Gy,每周5次,化疗方案为多西紫杉醇40mg/m²,第1、8天用药,顺铂20mg/d,第1、5天用药。21天为一周期。同步组化疗第1天即开始放疗,序贯组在化疗2周期后放疗。结果同步组和序贯组的有效率分别为65.7%和41.5%(P＜0.05),两组的完全缓解率分别为17.1%和7.3%(P＞0.05) ,放射性肺炎及食管炎发生率同步组高于序贯组(P＜0.05)。结论放疗同步多西紫杉醇/顺铂化疗治疗晚期非小细胞肺癌疗效优于序贯化放疗方法,副反应虽增加,但可耐受。     

重组鼠白细胞介素18在肝癌小鼠体内的抗肿瘤作用

目的：探讨不同剂量和输注方式的重组鼠白细胞介素18（rmIL-18）对肝癌小鼠生存时间和肿瘤生长的影响,阐明rmIL-18在体内抗肿瘤的合理应用方式。方法：60只Babl/C小鼠皮下接种小鼠肝癌H22细胞（1×10⁶个）,随机分为5μg rmIL-18腹腔内注射治疗组、0.5μg rmIL-18腹腔内注射治疗组、0.5μg rmIL-18肿瘤内注射治疗组、细胞毒性T淋巴细胞（CTL）腹腔内注射治疗组、CTL肿瘤内注射治疗组和生理盐水腹腔注射对照组,每组10只。从接种肿瘤细胞的第10天起,各rmIL-18组小鼠每隔1d进行对应剂量和方式的注射治疗,CTL组小鼠分别腹腔和肿瘤内注射肿瘤特异性CTL（1×10⁶/只）,生理盐水腹腔注射对照组小鼠腹腔内注射注射等体积（100μL）生理盐水,共计10次。每周测量小鼠肿瘤直径,并记录生存时间。结果：与0.5μg、5μg rmIL-18腹腔内注射治疗组和生理盐水腹腔注射对照组比较,0.5μg rmIL-18肿瘤内注射治疗组小鼠肿瘤生长速度减慢（P<0.01）,小鼠生存时间延长（P<0.01）;与0.5μg rmIL-18腹腔内注射治疗组比较,CTL腹腔内注射治疗组小鼠肿瘤生长速度降低（P<0.01）,小鼠存活率升高（P<0.01）;与0.5μg rmIL-18肿瘤内注射治疗组比较,CTL肿瘤内注射治疗组小鼠肿瘤生长速度降低（P <0.01）,小鼠存活率升高（P <0.01）。结论：rmIL-18抗肿瘤作用的最好途径为瘤内注射,并存在剂量依赖性。     

大鼠肝癌模型脾内转染IL-2和(或)IL-12基因对NK细胞的激活作用

目的 :研究脾内直接注射携带 IL- 2和 (或 ) IL- 1 2基因的逆转录病毒包装细胞株对血 IL- 2和 IL- 1 2以及 NK细胞活性的影响。方法 :构建携带 h IL- 2和 (或 ) m IL- 1 2基因的逆转录病毒载体。将肝癌细胞 CBRH3注入大鼠腹腔 ,形成肿瘤 ,断颈处死 ,剖腹取出肿瘤组织 ,剪碎后接种于 5 0只 Wistar大鼠肝脏一叶 ,制备肝癌模型。模型大鼠随机分为生理盐水对照组、空载体对照组、IL- 1 2基因治疗组、IL- 2基因治疗组及 IL- 2 / IL- 1 2联合基因治疗组 ,每组 1 0只。含 IL- 2和 (或 ) IL- 1 2基因的包装细胞于肝癌接种后 1、3、5、7d进行脾内注射转染脾细胞。 EL ISA法检测大鼠血 IL- 2和 IL- 1 2浓度 ,放射性活度测定法检测 NK细胞活性 ,并进行病理学和免疫组化检查。结果 :IL基因治疗后 3d,IL - 2 / IL - 1 2联合基因组血清 h IL - 2与单基因治疗组相比无显著差异。病理示治疗后肝癌组织中淋巴细胞浸润明显增多。 IL治疗组 NK细胞活性较对照组显著增高 (P<0 .0 1 )。治疗后 3d血清 IL达高峰 ,以后逐步下降。 IL - 2 / IL - 1 2联合基因组较 IL单基因组增高 (P<0 .0 5 )。 结论 :脾内直接注射携带 IL -2和 (或 ) IL - 1 2基因的逆转录包装细胞株可明显增强 NK细胞活性 ,IL联合基因治疗优于 IL单基因     

水流动力学注射介导的IL-12基因对小鼠恶性腹水的治疗作用

目的：应用水流动力学注射基因转移法转移白细胞介素12（IL-12）基因，观察其对小鼠恶性腹水的治疗效果。方法：通过小鼠腹腔注射H₂₂肿瘤细胞建立恶性腹水模型。将小鼠分为3组，接种后第3天通过水流动力学注射方法分别注射质粒pCMV-mIL-12、pCMVβ和生理盐水(NaCl)进行治疗。治疗后一定时间点取血检测血清中IL-12、干扰素-γ（IFN-γ）和一氧化氮（NO）的含量。注射后第14天各组分别处死3只小鼠，测量腹水体积，腹水细胞进行HE和AO/EB染色。其余小鼠用于观察生存期。结果：与只注射pCMVβ或生理盐水的小鼠相比，接受pCMV-mIL-12治疗的小鼠的生存时间明显延长（P<0.01），而且小鼠血清中IL-12、IFN-γ和NO水平明显升高（P<0.01或P<0.05），小鼠腹水中有活力的肿瘤细胞明显减少（P<0.01），凋亡的细胞增多（P<0.01）。结论：水流动力学注射介导的IL-12基因表达减少了恶性腹水小鼠的血性腹水生成并诱导肿瘤细胞凋亡，从而延长了小鼠生存期。     

阿奇霉素对哮喘小鼠气道炎症和Th2细胞因子的影响

目的观察不同浓度阿奇霉素对哮喘小鼠气道炎症细胞和辅助性T细胞2(Th2)型细胞因子IL-4、IL-5的影响。方法BALB/c小鼠40只随机分为5组:A组(哮喘模型组,8只)、B组(小剂量阿奇霉素治疗组,8只)、C组(中剂量阿奇霉素治疗组,8只)、D组(大剂量阿奇霉素治疗组,8只)、E组(正常对照组,8只)。A、B、C、D组小鼠于第1、13天分别给予卵清蛋白(OVA)20μg和氢氧化铝1mg的混悬液腹腔注射致敏,于第21～30天每天给予雾化吸入2%OVA生理盐水溶液建立哮喘模型,第14～30天,A组每天激发前30min给予生理盐水0.2ml腹腔注射作为阳性对照组,B、C、D组每天激发前30min分别给予阿奇霉素50、100、150mg.kg-1.d-1腹腔注射,均为每天1次。E组以生理盐水代替OVA致敏和激发。所有动物于第31天处死,收集支气管肺泡灌洗液(BALF),制备肺组织石蜡切片,用计数板检测BALF中炎症细胞总数及嗜酸性粒细胞(EOS)数,用酶联免疫吸附法(ELISA)检测BALF中IL-4、IL-5水平。结果A、B、C、D组的BALF中炎症细胞总数、EOS数及IL-4、IL-5水平较E组明显增高,HE染色显示A、B、C、D组支气管黏膜周围有EOS、淋巴细胞等炎症细胞浸润,EOS分别与IL-4、IL-5呈显著正相关。阿奇霉素可明显降低哮喘小鼠的气道炎症和IL-4、IL-5水平。结论阿奇霉素具有明显抗哮喘气道炎症的作用,可通过抑制Th2反应,减轻慢性气道炎症。     

环磷酰胺对人腺泡状横纹肌肉瘤细胞裸鼠移植瘤生长和形态结构的影响

目的 检测环磷酰胺(cyclophosphamide,CTX)对人腺泡状横纹肌肉瘤细胞株PLA-802裸鼠移植瘤生长和形态结构的影响.方法 16只裸鼠右腋皮下接种PLA-802移植瘤细胞悬液后分成空白对照组(5只)、生理盐水对照组(5只)和20 mg/kg CTX治疗组(6只).接种后第7天开始,经腹腔注射给药,隔日1次,共注射10次.每2天测量1次肿瘤大小绘制移植瘤生长曲线.接种后第26天杀鼠摘取移植瘤称重,组织经制片染色后用光镜和电镜检查.结果 ①CTX治疗组移植瘤生长被明显抑制(P＜0.05),抑瘤率85.55%.②治疗后瘤细胞疏松排列成腺泡状,由纤维间质分隔,血管稀少;瘤细胞椭圆形、网拍状或短梭形;核椭圆或类圆形,大小不一;核分裂相减少.电镜见瘤细胞质内有不等量肌(微)丝,甚至有横纹肌肌原纤维结构形成.结论 CTX对人腺泡状横纹肌肉瘤PLA-802移植瘤生长具有一定程度的抑制作用,治疗后瘤组织形态结构改变.     

IL-2和IL-12的单/联合基因治疗对肝癌大鼠体内IL基因表达和T细胞亚群的影响

目的:探讨大鼠诱发性肝癌模型中脾内直接注射IL-2和(或)IL-12基因对血清IL-2和IL-12,以及T细胞活性的影响.方法:全部肝癌大鼠(以二乙基亚硝胺诱发制备)48只分为4组(空载对照组、IL-2单基因治疗组、IL-12单基因治疗组、IL-2/IL-12联合基因治疗组),构建携带IL-2和(或)IL-12基因的逆转录病毒载体及其包装细胞,含IL-2和(或)IL-12基因的包装细胞于不同时间对诱发性肝癌大鼠进行脾内注射转染细胞,比较大鼠血清IL-2和IL-12浓度、T细胞活性和毒性反应.结果: IL单基因治疗后血清IL-2或IL-12明显增高,IL-2/IL-12基因联合治疗组中血清IL较单基因组显著增高(P<0.01),病理示肝癌组织中淋巴细胞浸润明显增多.IL单基因治疗组T细胞活性较对照组显著增高,IL-2/IL-12基因联合组T细胞功能较IL单基因组增强,且持续时间长.结论: 脾内直接注射IL-2和(或)IL-12基因可增强T细胞活性,IL基因联合治疗优于IL单基因治疗.     

携带白细胞介素12基因逆转录病毒载体包装细胞株体内直接注射治疗肝癌的实验研究

目的研究体内直接注射携带白细胞介素12（mIL-12）逆转录病毒载体包装细胞株对体内肝癌细胞生长抑制作用,探索基因治疗新途径。方法构建携带mIL-12的逆转录病毒载体,将载体转染包装细胞株,用该细胞株分别在大鼠腹腔内与肝癌细胞株混合接种,在肝癌局部及脾内直接注射,观察对肝癌细胞生长抑制作用及其对大鼠毒性反应、免疫功能变化。结果应用该细胞株与肝癌细胞株在腹腔进行混合接种,1：10以下治疗组可使大鼠长生存,而大于1：10治疗组则只能延长生存期。肝癌局部和脾内治疗组中第1天、第3天治疗能使大鼠长期生存,第5天、第7天治疗组则生存期明显延长,二者疗效无明显差别,但脾内治疗组副作用明显减少。免疫学分析与对照组相比,治疗组肝癌组织中浸润的淋巴细胞明显增多,以NK细胞及细胞毒T细胞为主。病理学结果治疗组肿瘤组织血管壁明显增厚,管腔狭窄。结论体内直接注射携带白细胞介素12的逆转录病毒包装细胞株可抑制肝癌细胞生长,早期治疗优于晚期治疗,脾内直接注射治疗是一条安全且有效的肝癌基因治疗的新途径。     

环磷酰胺对早期小鼠S_(180)“治愈性”化疗评价

目的 :探讨环磷酰胺 (CTX)对早期小鼠S180 最佳治疗方案 ,为“治愈性”化疗提供科学依据。方法 :六组S180 荷瘤小鼠中 ,五组用CTX腹腔内注射治疗 ,一组用生理盐水对照。治疗后 80天处死全部小鼠并经病理证明无瘤 ,评价为治愈。结果 :在每天CTX 2 0mg/kg和 10 0mg/kg 1次组中 ,治愈率分别为 90 %和 5 0 % (P >0 .0 5 ) ;肿瘤生长死亡率分别为 10 %和 2 0 % (P>0 .0 5 ) ;毒性死亡率分别为 0 %和 30 % (P >0 .0 5 )。在每天 1次CTX 40mg/kg腹腔内注射 ,连续 5次、2 0 0mg/kg 1次和 10 0mg/kg2次组中 ,治愈率分别为 5 0 %、45 %和 30 % ;三组全部无瘤生长 ,毒性死亡率分别为 5 0 %、5 5 %和 70 %。结论 :CTX对早期小鼠S180 有治愈作用 ,CTX每天 2 0mg/kg ,连续 5次治疗是最佳治愈性化疗方案。     

表柔比星-聚乳酸缓释微球局部治疗肝癌

目的研究表柔比星-聚乳酸缓释微球(EPI-PLA-MS)局部给药治疗肝癌的效果。方法复乳-溶剂挥发法制备EPI-PLA-MS。将40只昆明小鼠随机分为5组,每组8只,分别腹腔注射不同剂量的游离表柔比星(FEPI),计算最大耐受量(MTD)。H22皮下实体瘤肝癌荷瘤小鼠3组,每组5只,分别用生理盐水(normalsaline,NS)、空白微球和含药微球(含EPI9mg/kg)瘤内注射给药,2周后取瘤称重。H22腹水型肝癌荷瘤小鼠3组,每组5只,分别用NS、空白微球和含药微球(含EPI9mg/kg)腹腔注射给药,计算动物生命延长率。结果FEPI腹腔注射的MTD为9mg/kg。EPI-PLA-MS瘤内给药后含药微球组和空白微球组的抑瘤率分别为40.35%和36.09%。腹腔给药后能显著延长荷瘤鼠的生存时间,含药微球组和空白微球组生命延长率分别为153.49%和142.22%。结论EPI-PLA-MS是一种有效低毒的药物新剂型,在局部治疗肝癌方面具有良好的临床应用前景。