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1.
目的:从蟹壳中提取壳聚糖,将胰蛋白酶固定在从蟹壳中提取的壳聚糖上。方法:以自制壳聚糖为载体,戊二醛为双官能团交联剂,将胰蛋白酶固定化。结果:0.2g壳聚糖(干)与4%戊二醛交联后再与5.0mg胰蛋白酶固定结合,效果较好。固定化酶的表现米氏常数K′m=1.5mmol/L,而天然酶Km=7.6mmol/L;固定化酶最适温度为80℃,比天然酶提高了20℃;固定化酶最适pH为7.0.而天然酶为8.0。该载体来源广,易提取,固定化酶的贮存稳定性很好,2个多月重复使用,酶活力未见明显下降 相似文献
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壳聚糖固定化胰蛋白酶的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
目的虾蛄壳提取壳聚糖,将胰蛋白酶固定在该壳体聚糖上,方法以自制壳聚糖为载体,一氯醋酸为交联剂,将胰蛋白酶固定化,结果,固相酶的最适温度为50℃,原酶为45℃固相酶最适pH值为7.0,原酶为8.0,固相酶的表面米氏常数Km=12mmol/L,原酶Km=23mmol/L,结论该固定化酶活力较高,抗酸能力强,热稳定性和储存稳定性好,是良好的检验试剂。 相似文献
3.
α-淀粉酶在壳聚糖上的固定化研究 总被引:1,自引:0,他引:1
报道从蟹壳中提取壳聚糖的方法。以壳聚糖为载体,戊二醛为双官能团交联剂,将α-淀粉酶固定化。结果表明固定化α-淀粉酶与原酶的最适pH值基本相同,且均有2个最适pH值,分别为5和6.5;固定化酶的表观米氏常数km′=0.33×10 ̄(-2)mg/ml,而原酶km=1×10 ̄(-2)mg/ml;固定化酶的热稳定性明显高于原酶,固定化酶的最适温度为65℃,原酶为50℃。 相似文献
4.
固定化牛肾氨基酰化酶拆分法制备D—丙氨酸 总被引:6,自引:0,他引:6
研究了以中空纤维固定化牛肾氨基酰化酶拆分DL-Ala制备D-Ala及反应的各种优化条件和固定化酶的动力学性质。实验结果表明,固定化酶反应的最适pH为7.0,最反应温度为30 ̄35℃;固定化酶拆分反应的酶量选择为5mg/ml,时空体积SV=1.0,在pH7.0,30℃条件下的全拆分底物浓度为0.1ml/L。固定化酶常温1周内拆分率稳定,但对热不稳定,40℃条件下放置30min活力下降30%。 相似文献
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6.
采用固定化胰蛋白酶水解酷蛋白,在pH8.0的硼酸缓冲液中40℃恒温水浴20h,得到含有磷肽的溶液;然后用壳聚糖交联珠在pH3.6的HCL-甘拟酸缓冲液中亲和吸附磷肽,再用pH8.0的Tris-HCL缓冲液洗脱,计算平均磷肽吸附量。结果显示,壳聚糖交联珠亲合吸附法与常规的硫氨络铁琼脂糖珠提取法的磷肽吸附量基本相同,但壳聚糖交联珠亲合吸附法操作简便,特异性高,价格低廉。 相似文献
7.
用硫酸铵分级沉淀法从木瓜粉提取液中分离木瓜蛋白酶,将其偶联在对氨基苯磺酰乙其次 联琼脂上,制得固定化木瓜慢白酶。实验结果表明;木瓜蛋白酶与ABSE-交联琼脂的最佳结合量是每克干交联琼脂14.0μmol/s,固定化酶的最适反应pH为8.0,最适反应温度为75℃,Km为67.6mmol/L。 相似文献
8.
目的 :对色氨酸酶基因工程菌WW 11进行固定化及培养条件研究 ,为工业化生产L 色氨酸奠定基础。方法 :通过色氨酸酶活力测定 ,考察三种固定化材料及温度、pH、单价阳离子降乙醇对固定化WW 11色氨酸酶活力的影响。结果 :以聚乙烯醇作为WW 11的固定化载体 ,其活力回收为 6 0 9%。固定化WW 1色氨酸酶降解反应最适 pH为 9 0、最适温度为 5 0℃ ;固定化WW 1色氨酸酶合成反应最适 pH为 7 5、最适温度为 45℃。K 、NH 4对固定化工程菌色氨酸酶有明显激活作用 ,而Na 则有一定的抑制作用。结论 :固定化工程菌色氨酸酶对温度… 相似文献
9.
以壳聚糖固定化米曲霉β-半乳糖苷酶,连续催化合成半乳糖寡糖(GOS),在填充床固定化酶反应器中,研究底物浓度、pH,反应温度和停留时间对GOS连续合成的影响,最佳反应条件为:底物浓度400g/L,反应温度50℃,pH5.8,停留时间35min,产物的最高得率为62%。 相似文献
10.
基因工程菌CTB2的固定化及其制备L—苯丙氨酸的研究 总被引:2,自引:0,他引:2
对以卡拉胶为载体固定化基因工程菌CTB2制备L-苯丙氨酸进行了研究。比较了固定化细胞的最适温度和最适PH,考察了该固定化细胞的柱以应特性以及产物L-苯丙氨酸的分离方法。结果表明,固定化细胞的最适温度为30℃,最PH为7.0,柱反应最佳空时速度SV=0.19h^-1底转化率为20%,固定化酶半衰期大于30d。 相似文献
11.
壳聚糖固定α-淀粉酶的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
目的 从虾蛄壳提取壳聚糖 ,将α-淀粉酶固定在壳聚糖上。 方法 以自制壳聚糖为载体 ,一氯乙酸或三氯乙酸为交联剂 ,将α-淀粉酶固定化。 结果 三氯乙酸是较好的交联剂。固定化酶与原酶的最适 p H及最适温度基本相同 ,均为 6.5 ,5 0℃ ;固定化酶在 65℃仍有较高热稳定性 ,而原酶活力明显下降 ;固定化酶的表观米氏常数 Km =0 .6× 10 -2 g/ml,原酶 Km =1.1× 10 -2 g/ml;一定浓度 Cl-、Br-离子有助提高固定化酶活力。 结论 该固定化酶活力较高 ,热稳定性和贮存稳定性好 ,是良好的检测试剂。 相似文献
12.
研究了以甲壳素为载体固定化L-天冬酰胺酶的最适条件,探讨了固定化L-天冬酰胺酶的一系列理化性质。交联剂用量、缓冲液pH值和载体活化时间均对L-天冬酰胺酶的固定化有一定影响,得到的固定化L-天冬酰胺酶的活力回收可达25.4%。固定化L-天冬酰胺酶理化性质的实验研究表明,酶经固定化后,对蛋白水解酶的稳定性及存贮稳定性均较游离酶有很大程度的提高。 相似文献
13.
高效液相色谱法测定人血浆中尼卡地平及药代动力学参数 总被引:5,自引:0,他引:5
建立了反相高效液相色谱法检测正常人口服尼卡地平片剂后的血药浓度。样品经硼酸缓冲液(pH90)碱化后,用正己烷 正丁醇混合溶剂(12∶1,V/V)提取,以C18化学键合硅胶为固定相,乙腈 KH2PO4缓冲液(0015mol/L,pH=55) 三乙胺为流动相,尼莫地平为内标,在236nm波长定量检测。血药浓度在5~200ng/ml范围内线性良好,最低检测浓度为25ng/ml。日内(n=7)及日间(n=5)测定相对标准偏差分别小于54%和64%,血样测定回收率为928%1008%。用本法监测了10名健康人口服盐酸尼卡地平片剂后不同时间的血药浓度变化,测得血浆中尼卡地平浓度在16±03h达到峰值1098±387ng/ml,T1/2=535±228h,血药浓度曲线下面积为3221±696ng·h/ml。 相似文献
14.
以壳聚糖为载体,用物理吸附固定化脂肪酶,对影响固定化过程的各种因素进行了考察,确定了最优条件,并比较了游离酶和固定化酶的最适温度、pH、酶的热稳定性以及表观Km。固定化酶水解的最适pH(pH7.0)稍低于游离酶(pH8.0),最适温度为50℃(游离酶为40℃)。固定化酶在50℃的半衰期(0.96h)是游离酶(0.32h)的3倍,在4℃的冰箱中贮存3个月活力变化很小。 相似文献
15.
从人肝中分离获得谷胱甘肽过氧化物酶,其最适pH为8.5,最适温度为37℃。该酶以H2O2或GSH为底物时表现Km值分别为0.27mmol/L和1.3mmol/L。酶与多分子底物作用的动力学研究表明人肝谷胱甘肽过氧化物酶的作用为乒乓机制。并观察了一些金属离子和烷化剂对该酶具有不同程度的抑制作用。 相似文献
16.
用粘度测定法和还原糖测定法,研究了中性蛋白酶非专一性降解壳聚过程中温度,pH值,反应时间,酶浓度,底物浓度,金属离子及壳聚糖的脱乙酰度对中性蛋白酶降解壳聚糖反应速度的影响,确定了以壳聚糖为底物的中性蛋白酶的一些催化特性:最适温度为50℃;最适pH值为6.0;米氏常数Km值为1.1×10^-2g/mL;一定浓度的Cu62+,Ba^2+,Mn^2+抑制该酶的活性; 相似文献
17.
国产力康结核片在健康人体内的药代动力学 总被引:2,自引:0,他引:2
目的:采用高效液相色谱法(HPLC),对8名男性健康志愿者顿服国产力康结核片(pasiniazide)与进口力排肺疾片(dipasic)1200mg后的药代动力学进行研究。方法:采用HypersilBDSC18(10μm46×250mm)色谱柱,甲醇∶002molNa2HPO4=5∶95(pH7.4V∶V)为流动相,流速08ml/min,检测波长254nm进行测定。结果:力康结核片和力排肺疾片的主要动力学参数分别为:消除半衰期:T1/2682±025h和666±017h;峰浓度Cmax:803±026mg/ml和808±03mg/ml;达峰时间Tmax:339±010h和377±031h;血药浓度-时间曲线下面面积为:11882±1028mg/L.h和12107±1168mg/L.h。结论:国产力康结核片与进口力排肺疾片的主要药动学参数基本相似。两者的相对生物利用度为9814%,属生物等效。 相似文献
18.
研究了NaOCL/H2O2协同氧化制备壳寡糖的适宜工艺条件,即用0.6mol摩尔配比为0.25的NaOCL/H2O2协同氧化剂氧化降解60g壳聚糖,反应pH为6,温度为55℃,时间8h,可使98%的壳聚糖转化为壳寡糖。通过对降解产物的氨基含量及红外图谱分析,证明该氧化反应主要是以开裂壳聚糖的β(1,4)糖苷键来进行 了,并对该反应的机理进行了讨论。 相似文献
19.
目的 制备一种可溶性固定化木瓜蛋白酶并对其部分酶学性质进行研究.方法 将木瓜蛋白酶偶联在亲水性高分子聚合物羧甲基纤维素醋酸琥珀酸酯(AS-L)上制备得到水溶性固定化木瓜蛋白酶.在相同的条件下测定游离的木瓜蛋白酶和水溶性固定化木瓜蛋白酶的活力,得到两种状态的酶的最适作用pH值和最适作用温度,再于它们各自的最适条件下测定活力,得到各自的Km值;在相同的条件下测定两种状态的酶的热稳定性、酸碱稳定性、低温稳定性和回收稳定性.结果 游离木瓜蛋白酶和可溶性固定化木瓜蛋白酶的最适作用pH值分别为6.0和5.0,最适作用温度分别为60℃和70℃,Km值分别为2.53、3.07mg·ml-1;可溶性固定化木瓜蛋白酶在60℃条件下,保温12h,仍有62%的活性;在4℃条件下,30d后活性保留达90%以上;在pH6.0时稳定性最好,在pH4.0-7.0范围内也比较稳定(相对活性>80%).结论 可溶性固定化木瓜蛋白酶能够在pH5.5以上的溶液中完全溶解,最适作用pH值范围变窄,最适作用温度和Km值升高;热稳定性和酸碱稳定性均明显增强. 相似文献
20.
报道间羟基苯基乙酰基甲醇的高产酵母菌株筛选,并将其固定化,海藻酸钙包埋法比聚乙烯醇(PVA)-海藻酸钙包埋法效果好,其浓度为1%,包埋量为3g/10ml。固定化细胞的最佳底物浓度、糖浓度和最佳反应时间与游离细胞一致,分别为10mg/ml、100mg/ml和6h;但最适反应温度比游离细胞高5℃,为30℃;最佳pH比游离细胞高1~2个pH单位,为pH6。固定化细胞能反复用于羟基苯基乙酰基甲醇生产5次。但在柱式反应器中,转化效率大大下降。固定化细胞在4℃时贮存30d活性基本上无损失。 相似文献