p75在乳腺肿瘤中的表达

目的 探讨神经牛长因子低亲和力受体p75在乳腺肿瘤中的表达及其意义.方法 采用PV-9000免疫组织化学方法检测101例乳腺疾病患者病灶组织中p75的表达.结果 p75在乳腺肿瘤肌上皮细胞中均有表达,而在乳腺癌中的表达率明显低于纤维腺瘤、小叶增生、导管内乳头状瘤(P＜0.05),各类乳腺痛中的p75表达未见明显差异(P＞0.05).结论 p75可能抑制乳腺肿瘤细胞的增生,诱导瘤细胞的分化.     

BRCA1在乳腺肿瘤中的表达及其临床意义

目的探讨乳腺癌易感基因（BRCA1）在乳腺癌和乳腺良性肿瘤中的表达及其临床意义。方法应用ABC免疫组化法检测52例乳腺癌、30例乳腺纤维腺瘤并上皮增生活跃和10例乳腺增生症患者中的BRCA1的表达。结果BRCA1在乳腺癌中的阳性表达率为38％（20／52），在乳腺纤维腺瘤中的阳性表达率为73％（22／30），而10例乳腺增生症患者BRCA1阳性率为90％（9／10）（Χ^2=14．78，P〈0．01），在乳腺癌患者中腋窝有淋巴结转移组的表达率明显低于无淋巴结转移组（Χ^2=15．42，P〈0．01），BRCA1的表达与肿瘤的组织学类型（Χ^2=0．156，P〉0．05）、肿块大小（Χ^2=0．587，P〉0．05）无关。结论BRCA1在乳腺癌的发生发展过程中有重要作用，可能成为临床对乳腺癌诊断和判断预后的一个重要指标，可能对乳腺癌的早期诊断及预防有重要意义。     

p27蛋白在结节性甲状腺肿中的表达研究

目的研究p2 7蛋白在结节性甲状腺肿中的表达水平、意义及与临床病理指标、相关激素的关系。方法应用免疫组化检测 42例结节性甲状腺肿、32例正常甲状腺组织及 30例甲状腺癌标本中p2 7蛋白的表达。结果p2 7蛋白表达阳性率在结节性甲状腺肿为 5 2 %± 2 9% ,正常甲状腺组织为 87%± 7 2 % ,甲状腺癌为 14%± 12 % ,三者比较差异有显著性意义 (R1,2 =5 76 ,R1,3 =1998,R2 ,3 =142 2 ,P <0 0 1)。p2 7蛋白表达阳性率与年龄、性别、病程、结节数量和大小及是否出血囊性变无关 ,而与是否伴发癌变、T3、T4和TSH浓度有关。结论p2 7蛋白在结节性甲状腺肿时呈低表达 ,而在癌变时进一步下降     

p16蛋白及PCNA在肾癌中的表达及意义

目的探讨肾癌中p16蛋白与PCNA的表达与肾癌组织学类型、临床分期、病理分级及预后的关系。方法采用免疫组织化学SP法检测41例肾癌及18例癌旁正常肾组织中p16蛋白及PC－NA的表达。结果p16蛋白在肾癌及癌旁正常肾组织中的阳性表达率间具有显著性差异（P＜0.05）,p16蛋白表达在肾透明细胞癌及颗粒细胞癌间无显著性差异,随肾癌分级、分期升高而明显降低,p16阳性表达组术后5年生存率明显高于阴性表达组;肾癌及癌旁肾组织中PCNA的阳性表达率增高,与预后有关,与肾癌的组织类型及分期无关。结论p16基因及蛋白的检测可作为肾癌的辅助诊断及预后判断的参考指标;PCNA可作为肿瘤恶性程度的判断及预后的参考指标。     

榄香烯对胃癌细胞p38丝裂原活化蛋白激酶信号通路的影响

目的 探讨榄香烯对人胃癌SGC-7901细胞株增殖的影响,以及与p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)信号通路的关系.方法 用不同浓度的榄香烯处理胃癌SGC-7901细胞,MTT法检测细胞增殖情况;光镜和透射电镜观察形态学改变;Western blot方法检测P38和磷酸化P38(P-P38)的表达.结果 榄香烯抑制胃癌细胞SGC-7901增殖,并呈浓度和时间依赖性;在光镜和透射电镜下可以观察到典型的细胞凋亡形态学改变;经0.08 mg/ml榄香烯作用4 h后,胃癌SGC-7901细胞中p38MAPK通路被激活,p-P38表达与对照组相比升高3.72倍,差异有统计学意义(P＜0.01),而P38总蛋白量未发生明显变化.预先应用p38MAPK通路抑制剂SB203580作用24 h与单用榄香烯作用组比较,p-P38表达下降54.12%,差异有统计学意义(P＜0.01).结论 榄香烯可以抑制胃癌细胞SGC-7901的增殖,诱发细胞凋亡,其机制可能与p38MAPK通路有关.     

抑癌基因P16与癌基因P21在膀胱肿瘤中的表达及意义

目的：探讨癌基因Ｐ２１和抑癌基因Ｐ１６的表达与膀胱癌生物学行为之间的关系。方法：采用免疫组织化学Ｓ－Ｐ法对４０例膀胱移行细胞癌癌基因Ｐ２１和抑癌基因Ｐ１６进行检测。结果：Ｐ２１和Ｐ１６阳性表达率为６７．５％和５２．５％;Ｐ２１阳性表达率与膀胱移行细胞癌的病理分级和临床分期呈正相关,而Ｐ１６阳性表达率与膀胱移行细胞癌的病理分级和临床分期呈负相关。结论：Ｐ２１、Ｐ１６基因蛋白的表达与膀胱肿瘤组织病理分     

严重烧伤大鼠肝脏p38丝裂原活化蛋白激酶对肿瘤坏死因子α表达的调控及其在肝损伤中的作用

目的观察大鼠严重烧伤后肝脏p38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)对肿瘤坏死因子(TNF)α表达的调控及其在肝损伤中的作用。方法将健康成年雄性SD大鼠随机分为假伤组;烧伤 SB203580组:30%TBSAⅢ度烫伤(以下称烧伤)后15min和12h静脉注射p38MAPK的特异性抑制剂SB203580(10mg/kg);烧伤对照组:同前致伤后给予等量等渗盐水,每组8只。测定3组大鼠伤后24h血清天冬氨酸转氨酶(AST)和丙氨酸转氨酶(ALT)活性的变化,并分别采用实时逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法和蛋白印迹(Western blot)法检测肝脏TNF-αmRNA及p38MAPK、磷酸化p38MAPK的表达水平。结果烧伤对照组大鼠血清AST和ALT活性及肝脏TNF-αmRNA的表达水平均显著高于假伤组(P<0.05或0.01);烧伤 SB203580组此3项指标均显著低于烧伤对照组(P<0.05或0.01),但与假伤组比较差异无统计学意义(P>0.05).3组大鼠肝脏p38MAPK表达水平比较,差异无统计学意义(P>0.05);其磷酸化p38MAPK表达水平之比———假伤组∶烧伤对照组∶烧伤 SB203580组为1.00∶3.90∶1.10,烧伤 SB203580组与假伤组比较,差异无统计学意义(P>0.05),与烧伤对照组比较明显偏低(P<0.01).结论大鼠严重烧伤后,肝脏中活化的p38MAPK促进了TNF-αmRNA的表达,并参与了肝损伤的发生。     

p38丝裂原活化蛋白激酶在大鼠慢性非细菌性前列腺炎模型中的表达

目的探讨p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)在慢性非细菌性前列腺炎(CNP)大鼠模型中的表达,与细胞因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、环氧合酶-2(COX-2)、基质金属蛋白酶-9 (MMP-9)的关系及它们在发病机制中可能的作用。方法将成年雄性SD大鼠去势后皮下注射苯甲酸雌二醇连续4周建模,对照组不做任何处理。HE染色,光镜下观察两组前列腺组织的病理学表现,免疫组化检测两组TNF-α、MMP-9、COX-2、磷酸化p38(p-p38)蛋白的表达,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测p38 mRNA的水平变化。结果光镜下对照组前列腺组织无炎症反应,模型组表现为明显的炎症反应。对照组前列腺组织TNF-α、MMP-9、COX-2、p-p38蛋白表达量极少,而模型组明显增加,两组差异有统计学意义(P<0.05)。对照组p38 mRNA的表达为模型组的37.3%。结论在大鼠CNP中p38 MAPK信号转导途径被激活。细胞因子TNF-α、MMP-9、COX-2的表达可能是通过p38 MAPK调节。这为CNP的研究和治疗提供了一条新的途径。     

维生素D受体在乳腺肿瘤中的表达及其临床意义

目的 探讨维生素D受体(VDR)在乳腺肿瘤中的分布及其与乳腺癌临床病理因素的关系.方法 采用免疫组织化学SP法对51例乳腺癌组织及20例乳腺良性肿瘤组织进行ER,PR,HER2和VDR检测,分析VDR与乳腺癌患者年龄、绝经状况、肿瘤大小、有无腋窝淋巴结转移、临床分期、病理类犁及组织学分级的关系.对VDR与ER,PR及HER2 3种受体在乳腺癌中的表达率以及表达强度之间的关系进行等级相关性分析.结果 VDR在乳腺癌中的表达高于乳腺良性肿瘤(χ~2=4.23,P＜0.05),乳腺癌中VDR的表达强度与PR,HER2的表达强度呈正相关(r_(sPR)=0.295,P＜0.05;r_(sHER2)=0.296,P＜0.05).结论 VDR可能影响乳腺癌的发生;维生素D治疗可能提高PR阳性患者内分泌治疗的效果,改善HER2阳性患者的预后.     

抑癌基因P16在肾脏肿瘤中的表达及意义

为探讨抑癌基因Ｐ１６与肾脏肿瘤临床病理及预后的关系，采用免疫组织化学ＳＰ法对５３例肾癌组织中Ｐ１６基因进行检测。结果显示，５３例肾肿瘤Ｐ１６基因表达的阳生率为３７．７３％，其阳性表达与肿瘤的病理分级，临床分期及预后均密切相关，有显著性差异。     

细胞外信号调节激酶及其上游激酶在人乳腺癌发生发展中的意义

目的　研究人乳腺癌组织、良性肿瘤以及瘤旁乳腺组织中细胞外信号调节激酶 (ERK1、ERK2 )及其上游激酶 (MEK1、MEK2 )的表达 ,以及术前化疗对MEK1、MEK2、ERK1、ERK2蛋白表达的影响。　方法　应用蛋白质印迹法检测 5 6例患者乳腺癌组织、8例乳腺良性肿瘤以及相应瘤旁组织中MEK1、MEK2及ERK1、ERK2蛋白的表达情况 ,其中 16例患者术前接受环磷酰胺 ,表阿霉素加 5 氟脲嘧啶或泰素加表阿霉素方案化疗。应用免疫组织化学方法检测乳腺癌组织及癌旁组织中MEK1、MEK2及ERK1、ERK2蛋白的表达。　结果　 4 0例未行术前化疗的乳腺癌组织中MEK2、ERK1、ERK2蛋白表达水平高于癌旁组织 ,分别为癌旁组织的 4 76、1 4 8和 2 0 9倍 (t值分别为 7 2 4 4 ,5 95 9,3 735 ,P <0 0 1) ;MEK1水平低于相应癌旁组织 (t=2 2 0 6 ,P <0 0 5 ) ;未行术前化疗的乳腺癌组织中MEK2、ERK1、ERK2蛋白表达水平高于乳腺良性肿瘤 (t值分别为 2 932 ,2 0 82 ,2 0 2 1,P <0 0 5 ) ;MEK1水平低于良性肿瘤 (t=2 0 75 ,P <0 0 5 ) ;雌激素受体阴性的乳腺癌中MEK2蛋白表达水平高于雌激素受体阳性的肿瘤 (t=2 4 0 ,P <0 0 5 ) ,MEK1蛋白表达水平低于雌激素受体阳性的肿瘤 (t =2 5 8,P <0 0 1) ;术前化疗的乳腺癌组织中MEK2蛋白表达     

丝裂素活化蛋白激酶p38在前列腺上皮内瘤的表达及其意义

目的：探讨丝裂素活化蛋白激酶p38（p38MAPK,p38）在前列腺肿瘤形成过程中的作用。方法：采用免疫组织化学SP法检测12例前列腺上皮内瘤（PIN）和12例前列腺增生（BPH）组织中p38的表达。结果：p38在PIN中主要分布于腺上皮和肿瘤细胞,呈片状、弥漫状分布。在BPH中主要分布于腺上皮基底细胞,分泌细胞有少量着色。PIN和BPH组织中p38的活性表达分别为（63．83±18．34）％和（48．75±16．94）％,两组间比较,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论：PIN组织中p38的活性显著高于BPH。p38活性的增强参与了前列腺上皮的恶性转化,可能在前列腺肿瘤的发生、发展中起着重要作用。     

p38MAPK在地塞米松诱导的人乳腺癌MCF-7细胞系凋亡中的作用

目的 研究地塞米松对人乳腺癌MCF-7细胞株增殖及凋亡的影响,并初步探讨其作用机制.方法 MTT方法检测细胞增殖,流式细胞技术检测细胞凋亡,免疫细胞化学方法、RT-PCR技术检测地塞米松干预前、后细胞中p38MAPK蛋白及基因的表达.结果 分别用不同浓度的地塞米松作用于MCF-7细胞,作用3～5 d时,各种浓度下细胞增殖均明显受抑制,且与药物作用浓度及作用时间呈正相关,并以作用4 d时MCF-7表现出来的增殖抑制最为明显.地塞米松作用于MCF-7细胞后,可见细胞发生凋亡形态改变增多.流式细胞仪检测示地塞米松作用3～5 d后三组细胞凋亡率均较对照组升高,以10-6mol/L浓度作用4 d时凋亡率可达31.85％,与对照组的14.63％相比有明显升高,升高2倍以上,与其他干预组相比,差异有统计学意义(P＜0.05).细胞免疫染色检测结果显示,p38MAPK在MCF-7胞质、胞核均有表达,通过对染色结果进行分析发现,Dex干预后,MCF-7中p38MAPK蛋白表达升高,尤以10-6 mol/L浓度作用时最为明显(P＜0.05).对干预后细胞提取RNA行半定量PCR检测,见目的基因条带清晰,与Marker各条带相比与扩增长度(184 bp)较接近,经灰度分析可得,MCF-7细胞在予以Dex处理后,p38基因表达较对照组明显升高,尤以10-6mol/L浓度时最明显,与其他干预组相比,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 地塞米松可抑制人乳腺癌MCF-7细胞增殖,并诱导其凋亡,其作用机制可能与促进p38基因表达有关.     

丝裂霉素诱导胆管癌细胞凋亡过程中p38MAPK表达的研究

目的研究丝裂霉素诱导胆管癌细胞凋亡过程中p38MAPK表达的变化 ,探讨p38MAPK在其中的作用。方法用AnnexinV PI染色及流式细胞技术分析丝裂霉素及p38MAPK抑制剂SB2 0 35 80对胆管癌细胞凋亡的影响 ,同时利用Westernblot法测定经丝裂霉素及SB2 0 35 80处理人胆管癌RBE细胞后 ,p38MAPK及其下游ATF 2 (反映p38MAPK激酶活性 )的表达水平。结果丝裂霉素诱导RBE细胞凋亡率为 (8 91± 0 83) % (P <0 0 1) ,同时p38MAPK和ATF 2 (p38MAPK下游基因 ,反映其激酶活性 )表达显著升高 (P <0 0 1)。用SB2 0 35 80阻断p38MAPK通路后 ,丝裂霉素诱导凋亡的作用进一步加强 ,凋亡率达 (2 2 2± 2 6 ) % (P <0 0 1)。结论丝裂霉素可以活化p38MAPK通路 ,p38MAPK可能起到保护胆管癌RBE细胞逃避丝裂霉素诱导的凋亡 ,阻断该通路可增强丝裂霉素诱导胆管癌细胞凋亡的作用。     

JNK、p38 MAPK在移植静脉血管重塑过程中的表达研究

目的　研究c Jun氨基末端激酶 (JNK)和p38蛋白激酶 (MAPK)在移植静脉血管重塑过程中的表达。方法　Wistar大鼠 80只 ,建立自体移植静脉模型 ,术后随机分为 6h ,1、3、7,1 4、2 8、4 2、5 6d等 8组 ,于相应时点取材 ,逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)检测JNK和p38MAPK的mRNA表达 ,Western蛋白印迹检测JNK和p38的蛋白产物及磷酸化蛋白产物表达 ,原位杂交和免疫组化方法定位mRNA及蛋白产物表达 ,脱氧核苷酸转移酶末端标记法 (TUNEL)检测血管平滑肌细胞 (VSMC)凋亡的变化。结果　移植静脉术后 6h ,JNK和p38的mRNA表达增强 ,在术后 1 4d达到高峰 ,表达值分别为(2 6± 1 0 ) %和 (5 9± 2 6 ) %,与各时点比较差异有统计学意义 (P <0. 0 1 )。JNK、p38的蛋白产物表达在1 4～ 2 8d达高峰 ,在 5 6d时仍维持一定表达量 (1 .4～ 1 . 2 )。原位杂交及免疫组化提示阳性表达多位于移植血管中层或增生内膜中的血管平滑肌细胞 (VSMC) ,p38与凋亡呈正相关 (r =0 . 892 2 ,P <0. 0 1 )。结论　JNK和p38MAPK通路的激活是移植静脉内膜增生以及血管重塑的关键环节 ,可能成为新的治疗靶点。     

p38MAPK信号转导通路在大鼠骨癌痛中的作用

目的 探讨p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)信号转导通路在大鼠骨癌痛中的作用.方法 雌性sD大鼠56只,体重150～170 g,随机分为4组(n=14):生理盐水对照组(NS组)、骨癌痛组(BC组)、二甲基亚砜组(DMSO组)和p38MAPK抑制剂组(SB203580组).骨髓腔内注射Walker256细胞悬液制备大鼠骨癌痛模型,注射后10 d,DMSO组和SB203580组分别鞘内注射5%二甲基亚砜和SB203580(10 μg)10 μl.各组随机取8只大鼠,于注射Walker256细胞悬液前、注射后1、3、5、7、10 d,鞘内给药后1、3、6、12、24 h时采用von Frey纤维丝测定术侧后爪机械缩足反射阈值(MWT);各组余6只大鼠鞘内给药后6 h时取L_(4,5)脊髓,采用免疫组化法检测脊髓背角磷酸化环磷酸腺苷反应元件结合蛋白(pCREB)的表达水平.结果 骨髓腔内注射Walker256细胞悬液后7 d大鼠术侧后爪MWT开始降低,鞘内注射SB203580提高了MWT;骨髓腔内注射Walker256细胞悬液后脊髓背角pCREB表达上调,鞘内注射SB203580后脊髓背角pCREB表达下调.结论 鞘内注射SB203580可通过抑制脊髓背角pCREB的表达减轻骨癌痛;p38MAPK信号转导通路在骨癌痛中起重要作用.     

乳腺癌及癌前病变3号染色体短臂杂合性缺失的研究

目的研究乳腺癌及癌前病变中3号染色体短臂（3p）杂合性缺失（loss of heterozygosity,LOH）的发生情况。方法采用聚合酶链式反应及硝酸银染色等方法检测41例原发性乳腺癌及12例癌前病变中3p的11个微卫星位点LOH发生情况;用免疫组化方法检测40例乳腺癌中雌激素受体（ER）、孕激素受体（PR）、脆性组氨酸三联体（fragile histidine triad,FHIT）及人类MutL基因的同源基因（human MutL homologue,hMLH1）的表达情况。结果97％乳腺癌患者发生3p的LOH,检出率较高的位点是D3S1295（53．1％）、D3S1029（43．6％）和D3S1038（52．5％）,分别位于3p14、3021-p22和3p25。D3S1038位点LOH及hMLH1蛋白表达与部分临床病理学参数相关（P〈0．05）。D3S1295的LOH与FHIT蛋白表达负相关（P〈0．05）。癌前病变患者3pLOH发生率为41．7％,检出率较高的位点是D3S1295（27．3％）和D3S1029（16．7％）。最小共同丢失区位于3p14-p25。结论3p14-p25区段可能有与乳腺癌发生发展相关并影响乳腺癌生物学行为的候选抑癌基因,基因的部分缺失可影响其蛋白的表达。     

乳腺癌的位置与血液供应及其与术前介入化学药物治疗效果的关系

目的探讨乳腺癌的位置与血液供应及其与术前介入化学药物治疗（下称化疗）疗效的关系。方法应用Ｓｅｌｄｉｎｇｅｒ技术对１５例Ⅲ期乳腺癌患者造影,并经乳腺癌癌灶供血动脉采用顺铂、阿霉素、丝裂霉素和５氟尿嘧啶（ＰＡＭＦ）进行灌注化疗。结果乳腺癌的肿瘤供血与部位有关：外侧病灶１１例主要由胸外侧动脉供血,内侧病灶４例主要由胸廓内动脉供血。乳腺癌采用ＰＡＭＦ进行介入化疗后,肿瘤及腋窝淋巴结明显缩小,根治术后１５例均获随访,随访时间２～６年,７例生存期达５年以上,仅２例于术后３年后复发,与同期Ⅲ期乳癌未作介入化疗者相比,复发率明显降低,差异有非常显著意义（Ｐ＜００１）。结论晚期乳腺癌如无化疗禁忌症,应考虑作术前介入化疗,以提高疗效。介入化疗时应仔细全面观察,确认其主要供血动脉是术前介入化疗成功的关键     

核磁共振在乳腺癌诊断中的应用

目的：探讨核磁共振（MRI）在乳腺癌诊断中的临床应用价值。方法：对45例乳腺肿物患者进行乳腺MRI检查,分析影像学表现,并对其中17例患者进行病变的增强扫描,对增强扫描曲线作出评价。结果：45例患者经术后病理证实：乳腺癌24例,乳腺良性病变21例,MRI对乳腺癌的术产诊断与病理符合率为96％（23／24）,假阳性率为2％（1／45）。结论：乳腺MRI作为一种新的检查方法,对乳腺癌诊断有较大的临床应用价值。