纤溶酶原激活剂与抑制剂的测定方法和临床意义

组织型纤溶酶原激活剂（t-PA）和其抑制剂（PAI-1）是纤溶系统的主要成分，是纤溶系统关键性调节物质，在纤溶系统的活化过程中占有重要地位。两者之间的动态平衡对维持正常的血液流动有着重要意义，如失衡将导致出血或血栓形成。近年来，对t-PA和PAI的研究日益深入，笔者就其测定方法及与疾病发生发展的关系探讨如下。     

不同相对分子质量岩藻聚糖硫酸酯抗血栓活性比较及机制探讨

 目的 研究不同相对分子质量岩藻聚糖硫酸酯抗血栓作用并从抗血小板聚集和纤溶两个方面探讨其作用机制。方法 采用FeCl₃诱导大鼠颈动脉血栓模型,考察4种相对分子质量岩藻聚糖硫酸酯的抗血栓形成作用;并通过采用酶联免疫吸附测试法（ELISA）测定动物血浆血栓素B₂（TXB₂）、6-酮-前列腺素F1α（6-keto-PGF₁）和纤维蛋白溶酶原（PLG）、组织型纤维蛋白溶酶原活化剂（t-PA）、纤溶酶原激活物抑制剂1（PAI-1）几个指标观察各组药物对抗血小板聚集及纤溶活性的影响进而探讨其作用机制。结果 不同相对分子质量岩藻聚糖硫酸酯可显著减轻血栓湿重,中相对分子质量岩藻聚糖硫酸酯比低相对分子质量表现出更强的抗血栓活性。低相对分子质量组（LF1组和LF2组）显著降低TXB₂并同时升高6-keto-PGF_1α;中相对分子质量组（MFa和MFb组）只降低TXB₂,而对6-keto-PGF_1α没有影响。4组岩藻聚糖硫酸酯均使t-PA 活性升高、PAI-1 活性降低、t-PA/PAI-1 比值升高,但对PLG无影响。结论 不同相对分子质量岩藻聚糖硫酸酯均有明显抗血栓作用,其作用机制可能与抗血小板聚集和纤溶系统活性升高有关,且随相对分子质量不同发挥抗血栓作用的主要机制不同。
     

溶栓合剂对深静脉血栓形成的纤溶功能的影响

目的：观察溶栓合剂对深静脉血栓形成纤溶功能的影响。方法：制作家兔颈外静脉血栓形成模型。观测溶栓合剂对组织型纤溶酶原激活剂（ｔ－ｐＡ）活性,纤溶酶原激活抑制剂（ＰＡＩ）活性,及体内血栓干重的影响。结果：溶栓合剂治疗组ｔ－ｐＡ活性明显提高,ＰＡＩ活性,体内血栓干重明显降低,与造模组比较,差异显著（Ｐ〈０．０５）。结论：溶栓合剂有明显促进纤溶系统活性及抗血栓形成的作用。     

土鳖虫纤溶活性蛋白抗小鼠血栓形成作用研究

目的:研究土鳖虫纤溶活性蛋白的抗凝、纤溶和抗血栓形成作用。方法:小鼠灌胃土鳖虫纤溶活性蛋白后,取血浆测定白陶土部分凝血活酶时间(KPTT)、凝血酶时间(TT)和凝血酶原时间(PT),测定组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)和其抑制物(PAI)的活性;用角叉菜胶诱发小鼠体内血栓形成,测量尾部血栓形成的长度。结果:土鳖虫纤溶活性蛋白能够显著延长小鼠TT,使t-PA活性增强,同时抑制PAI的活性,显著抑制角叉菜胶所致的尾部血栓形成。结论:土鳖虫纤溶活性蛋白能部分抑制凝血途径,激活纤溶系统,抑制血栓形成。     

茜草和茜草炭对正常大鼠凝血-纤溶系统的影响

目的:研究茜草和茜草炭对正常Wistar大鼠凝血-纤溶系统的影响,通过其药理作用探讨它们的止血化瘀机制.方法:将Wistar大鼠随机分为6组,每组7只,分别为茜草和茜草炭水煎制低剂量、高剂量组(含生药5.0,10.0 g·kg-1),阳性对照组(氨甲苯酸0.6 g·kg-1),空白对照组(生理盐水10 mL·kg-1).灌胃7d,用ELISA法检测大鼠血浆中组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)、纤溶酶原激活物抑制剂(PAI)和纤溶酶原(PLG)活性.结果:和空白对照组比较,茜草在实验剂量下均能提高t-PA的活性,且高剂量时提高t-PA的活性更显著(P＜0.01).高剂量茜草炭能使大鼠t-PA活性提高(P＜0.05),但其作用低于高剂量茜草组.低剂量时对大鼠t-PA活性影响不显著.茜草和茜草炭对PAI和PLG的活性影响均不显著.结论:茜草高、低剂量均能提高t-PA的活性,且在高剂量时提高更显著,进而影响凝血-纤溶系统,从而发挥其止血化瘀作用.茜草炭对纤溶系统也有一定作用,但可能是多种酶的综合作用.茜草和茜草炭对凝血-纤溶系统药理作用效果不同,进而影响它们的临床使用.     

蝎毒纤溶活性肽对血管内皮细胞分泌纤溶因子的影响

目的　研究蝎毒纤溶活性肽 (SVFAP)对血管内皮细胞释放组织型纤溶酶原激活剂 (t -PA)和纤溶酶原激活剂抑制物 (PAI - 1)的影响。方法　将不同浓度SVFAP与脐静脉内皮细胞共同孵育 10min及 4h后 ,分别收集培养液 ,以发色底物法测定培养液中t-PA和PAI -1的活性。结果　SVFAP在用药后 10min及 4h各浓度大多使t-PA活性增强 ,PAI - 1活性降低 ,t-PA/PAI - 1比值升高。结论　SVFAP的纤溶作用与抑制内皮细胞分泌PAI - 1和促进t-PA释放有关。     

藏红花对冠心病心绞痛患者tPA和PAI的作用

将３５例冠心病心绞痛患者，随机分为藏红花组２０例，和肠溶阿斯匹林组１５例。藏红花每日１ｇ，热水泡饮，代茶频服，最后连渣咀碎咽下；肠溶阿斯匹林５０ｍｇ／片口服，每日１次，每次１片，４周１个疗程。结果，藏红花组和肠溶阿斯匹林组组间比较，纤溶酶原激活剂（ｔＰＡ）和纤溶酶原激活剂抑制剂（ｐＡＩ），均有显著性差异（Ｐ＜０．０５）。表明藏红花有调节ｔＰＡ和ＰＡＩ的作用，而肠溶阿斯匹林无此作用。     

脑梗死患者急性期血浆PAI-1与t-PA比值的变化及临床意义

目的研究脑梗死患者急性期（发病7 d内）血浆纤溶酶原激活物抑制物-1（PAI-1）与血浆组织型纤溶酶原激活物（t-PA）比值的变化及其临床意义。方法采用酶联免疫吸附法检测67例脑梗死患者急性期血浆PAI-1t、-PA、计算PAI-1/t-PA（P/t）值,并与50名健康对照组作对照。结果脑梗死患者急性期血浆t-pA活性及PAI-1活性均升高,与正常对照组比较有统计学意义（P〈0.05）,P/t值较正常对照组降低（P〈0.05）。结论脑梗死患者急性期体内纤溶活性相对亢进。在判定体内纤溶活性指标中,P/t值较t-PA、PAI-1稳定可靠。P/t值与纤溶活性呈反比关系。     

阴阳透刺法对急性脑梗死患者t-PA及PAI-1的影响

目的观察阴阳透刺法对急性脑梗死患者的组织型纤溶酶原激活剂（t—PA）、其抑制物组织型纤溶酶原激活物抑制剂（PAI-1）的影响,探讨针刺治疗缺血性脑血管病可能的作用机制。方法将80例急性脑梗死患者分为治疗组和对照组各40例。分别观察治疗前、治疗后血浆t—PA、PAI-1的活性,并与正常组40例进行对照。结果治疗前,两组t—PA的活性较明显低下,相反,PAI-1的活性明显增高,与正常组比较差异有统计学意义（P〈0．01）。治疗后,两组t—PA的活性各与其自身治疗前比较明显增强,而PAI-1活性各与其自身治疗前比较明显降低（P〈0．01,P〈0．05）,且治疗后两组间t—PA及PAI-1活性比较差异有统计学意义（P〈0．05）。结论治疗前,急性脑梗死患者t—PA活性明显低下和PAI-1活性明显增高,阴阳透刺法可降低PAI-1活性和增高t—PA活性,调节纤溶功能,促进溶解血栓,确为临床针刺治疗急性脑梗死的一种较可靠治疗方法。     

全蝎纯化液对凝血酶诱导血管内皮细胞纤溶活性的影响

目的观察不同浓度全蝎纯化液对凝血酶诱导血管内皮细胞（VEC）释放组织型纤溶酶原激活物（t-PA）、纤溶酶原激活物抑制物（PAI）活性的影响。方法以凝血酶和不同剂量的全蝎纯化液同时作用于培养的人脐静脉内皮细胞（VEC-340）,12h后收集细胞液测定t-PA和PAI活性。结果与空白组比较,凝血酶组t-PA活性降低,PAI活性增高,差异有统计学意义（P〈0.01）,与凝血酶组比较,全蝎大剂量、中剂量、小剂量组t-PA活性均增高,PAI活性降低,差异均有统计学意义（P〈0.01）。结论凝血酶对VEC-340细胞具有损伤作用,可诱导内皮细胞抗血栓性发生变化。全蝎纯化液可促进血管内皮细胞释放t-PA,抑制PAI分泌,对纤溶平衡具有调节作用。提示这可能与全蝎纯化液增加血管内皮细胞抗血栓能力有关。     

水蛭注射液对小鼠血栓形成及血浆纤溶酶原激活物及抑制物的影响

目的：研究水蛭注射液对小鼠体内血栓形成和血浆纤溶酶原激活物（t-PA)及抑制物（PAI）的影响。方法：给不同组小鼠分别注射不同剂量水蛭注射液，用角叉菜胶诱发小鼠体内血栓形成，发色底物法测定血浆，t-PA及PA1活性，结果：水蛭组与血栓对照组相比，尾部血栓形成长度百分数明显缩短，PA1明显降低（P＜0．05），结论：水蛭注射液具有抗栓作用，其作用机理可能主要与减少血浆PAI的释放有关。     

全蝎纯化液对实验性动脉血栓形成t-PA、PAI-1的影响

目的观察全蝎纯化液对新西兰白兔颈总动脉血栓形成组织型纤溶酶原激活物（t-PA）、纤溶酶原活化物抑制剂（PAI-1）、血小板计数（Pt）的变化。方法将50只健康新西兰白兔随机分成5组：空白组、模型组、全蝎纯化液大剂量组（20mg/kg）、全蝎纯化液中剂量组（10mg/kg）和全蝎纯化液小剂量组（5mg/kg）。耳缘静脉注射药物（空白组、模型组注射同等体积的生理盐水）后,采用H2O2损伤新西兰白兔颈总动脉制备血栓模型,造模2h后,采血并取血栓,酶联免疫吸附法（ELISA法）检测血浆t-PA、PAI-1的含量。结果与空白组比较,模型组t-PA明显降低,PAI-1明显升高,差异有统计学意义（P〈0.01）;与模型组相比,全蝎纯化液各剂量组能明显抑制PAI-1活性,增加t-PA活性,差异均有统计学意义（P〈0.01）,而各组的血小板计数差异无统计学意义（P〉0.05）。结论全蝎纯化液各剂量组可明显促进血浆t-PA的分泌,抑制血浆PAI-1活性,提示全蝎纯化液抗血栓作用机制可能与其促纤溶作用有关。     

急性冠脉综合征患者纤溶活性与脂蛋白（a）的关系探讨

目的通过测定急性冠脉综合征（ACS）患者血浆中组织型纤溶酶原激活剂（t—PA）、纤溶酶原激活剂抑制物（PAI～1）抗原含量及脂蛋白（a）[Lp（a）]的水平,探讨纤溶活性与Lp（a）对冠脉血栓形成的影响及相互关系。方法选取54例发病1h～8h以内的ACS患者作为病例组,并据病情分为不稳定型心绞痛（UAP）组及急性心肌梗死（AMI）组;42名健康体检者作为对照组。用ELISA法检测研究对象血浆t—PA、PAI—1抗原含量,用免疫透射比浊法检测Lp（a）的浓度,比较两组中各指标的变化。结果UAP组及AMI组血浆t—PA、PAI-1含量较对照组明显升高（P〈0．05或P〈0．01）,t—PA在UAP组与AMI患者之间无统计学意义,而AMI组PAI-1含量较UAP组明显增高。UAP组及AMI组血浆Lp（a）浓度较对照组明显升高,AMI组又较UAP组明显升高。血浆Lp（a）水平与PAI-1含量存在着显著的正相关,而与t—PA含量之间无显著的相关关系。结论冠脉血栓疾病发生时,血浆纤溶活性下降,t—PA、PAI-1抗原含量增加,以PAI-1增加为明显;血浆Lp（a）水平增高。Lp（a）促进PAI-1的分泌,抑制t-PA的分泌,减弱t—PA活性,打破了t—PA与PAI-1的动态平衡。     

柔肝冲剂对血瘀型肝纤维化大鼠纤溶酶原激活系统影响的研究

目的：探讨柔肝冲剂对血瘀型肝纤维化大鼠纤溶酶原激活系统[尿激酶型纤溶酶原激活物（uPA）、尿激酶型纤溶酶原激活物受体（uPAR）、纤溶酶原激活抑制因子-1（PAl-1）]在肝组织蛋白表达的调控作用。方法：将大鼠随机分为正常组、血瘀组和柔肝组。主要观察项目：大鼠血瘀体征；用免疫组化、酶联免疫吸附法检测肝组织中uPA、uPAR、PAl-1的表达。结果：血瘀组出现明显的血瘀表现，正常组与血瘀组体征差异显著。经柔肝冲剂治疗后，血瘀体征有明显改善。通过免疫组化、蛋白定量发现PAl-1、uPA、uPAR在各组大鼠肝组织中均有表达。PAI-1、uPA、uPAR表达在血瘀组较正常组为高，其差异有统计学意义，P〈0．01。经柔肝冲剂治疗后它们表迭均有下降，其差异有统计学意义，P〈0．01。结论：uPA、uPAR、PAl-1在正常大鼠肝组织中有表达。血瘀型肝纤维化时，其在肝组织中蛋白表达增高，柔肝冲刑可降低其表达。柔肝冲剂可能通过影响纤溶酶原激活系统，起到抗肝纤维化作用。     

水蛭地龙提取液对急性脑梗死大鼠纤溶影响的实验研究

目的：探讨水蛭地龙提取液对局灶脑缺血大鼠组织型纤溶酶原激活物(tissue-type plasminogen activator；tPA)及其抑制剂(plasminogen activator inhibitor-1；PAI-1)活性和含量及DD二聚体(D-dimer；DD)含量的影响。方法：采用自体血栓阻塞大脑中动脉建立局灶脑缺血模型，分别用发色底物法及ELASA方法测定实验各组DD含量及tPA、PAI-1活性和含量。结果：水蛭地龙提取液治疗组DD含量、tPA活性和含量均高于假手术组及局灶脑缺血对照组；而PAI-1活性及含量均低于其他两组。结论：水蛭地龙提取液能够提高纤溶活性，从而促进血栓的溶解。     

益气活血方对大鼠凝血一纤溶系统影响的实验研究

目的：研究中药益气活血方对血瘀证大鼠凝血－纤溶系统的影响，探讨其防治心脑血管栓塞性疾病作用机理。方法：用益气活血方混悬液给予大鼠灌胃1周，第7日同时对大鼠皮下注射2次0.1％肾上腺素0.08ml/kg，其间进行一次冷刺激（冰水，0℃）5min，于第8日晨复制成血瘀实验模型，并采用测定血凝血－纤溶各指标。结果：益气活血方能明显降低纤维蛋白原（Fib)含量，延长凝血酶原时间（PT）及白陶土部分凝血活酶时间（APTT），提高血浆组织型纤溶酶原激活物（tPA)、纤溶酶（PL）活性，降低纤溶酶原激活物抑制剂（PAI）活性、纤溶酶原（PLg)活性，且大剂量组优于小剂量组及对照组。结论：益气活血方具有调节凝血－纤溶系统功能活性作用，这可能是临床上使用其防治缺血性心脑血管栓塞性疾病的机制之一。     

重组组织型纤溶酶原激活剂静脉溶栓治疗急性心肌梗死60例

目的：重组组织型纤溶酶原激活剂静脉溶栓对冠脉再通率的影响。方法：60例具有溶栓指征的急性心肌梗死患者在多参数检测下用重组组织型纤溶酶原激活剂静脉溶栓,观察其静脉再通状况。结果：发病3h溶栓较6h与12h再通率显著增高（P〈0．01）。早期溶栓町提高再通率,重组组织型纤溶酶原激活剂具有选择性溶栓作用,出血并发症少,对发病时间较久的血栓（5—6h）仍有作用。结论：重组组织型纤溶酶原激活剂是治疗急性心肌梗死较理想的静脉溶栓剂。     

活血化瘀中药的纤溶和纤溶抑制作用

分别用尿激酶型纤溶酶原激活剂(u-PA)、组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)激活纤溶酶原的纤溶试验,观察了20余种常用活血化瘀药对纤溶的影响。结果表明,11味中药的水浸液在含纤溶酶原和不含纤溶酶原的纤维蛋白板上都出现同样程度的纤溶活性,按由强到弱的排列是益母草、三棱、水蛭、五灵脂、炮山甲、姜黄、川穹、红花、土鳖虫、桃仁、元胡,但未发现对t-PA、u-PA激活纤溶的增强作用。部分药物不同程度抑制t-PA、u-PA激活纤溶。其中,完全抑制t-PA激活纤溶的前10味由强到弱是大黄、复方丹参片、毛冬青片、丹参、赤芍、泽兰、丹参注射液、牛膝、红花、炮山甲;不完全抑制t-PA激活纤溶的前10味由强到弱是毛冬青片、赤芍、复方丹参片、丹参、桃仁氯仿液、牛膝、大黄、泽兰、丹参注射液、益母草;不完全抑制u-PA激活纤溶的前10味由强到弱是毛冬青片、赤芍、复方丹参片、丹参、大黄、桃仁氯仿液、牛膝、泽兰、丹参注射液、益母草。推测抑制纤溶系统活性的活血化瘀药也能调节其它丝氨酸蛋白酶的活性,从而对控制凝血、纤溶平衡、抗炎症、抗肿瘤的生长与转移都可能发挥作用。     

灯盏花素注射液治疗心绞痛45例——附灯盏花素注射液对血浆纤溶活性的影响

本文观察了灯盏花素注射液治疗冠心病心绞痛４５例。结果提示：心绞痛缓解有效率为８８．９％，心电图改善率为６６．７％。灯盏花素能提高血浆组织型纤溶酶原激活物（ｔ－ＰＡ）的活性及降低其抑制物（ＰＡＩ）的活性，而血浆血栓素Ｂ２（ＴＸＢ２）降低，６－酮－前列腺素ＦＩα也有提高（但检验无显著性）。提示：该药有扩张血管、抗凝、促进纤溶、抗血栓作用。     

肢体缺血再灌注家兔凝血和纤溶系统的变化及葛根素的干预

目的：观察家兔肢体缺血再灌注时凝血和纤溶系统活性的变化及葛根素对其的影响并探讨其机制。方法：健康寥兔加只，随机分为四组：Ⅰ组为假手术对照组，Ⅱ组为缺血再灌注组，Ⅲ组为葛根素低剂量治疗组，Ⅳ组为葛根素高剂量治疗组。检测血浆超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、组织纤溶酶原激活物（tPA）、纤溶酶原激活物抑制物（PAI）、凝血酶原时间（PT）、活化部分凝血活酶时间（APT）的动态变化。结果：与缺血前和缺血4h比较，Ⅱ组在再灌注后tPA活性明显降低、APTT缩短，再灌注4h，PAI活性明显升高，TT缩短；Ⅱ组在再灌注后2h和4h时tPA活性明显降低，Ⅲ组和Ⅳ组各时间点之间PAI、APTT、PT及Ⅳ组各时间点之间tPA比较均无显著性差异。SOD活性与tPA活性正相关，MDA含量与tPA活性负相关。结论：肢体缺血再灌注使机体凝血功能增强，纤溶功能抑制，葛根素对凝血和纤溶功能异常有明显的改善作用，其机制与抗氧自由基，保护内皮功能有关。