大鼠原位肝移植术后排斥反应病理动态变化

目的 观察高免疫排斥大鼠肝移植模型术后排斥反应的病理变化.方法 运用改良"二袖套法"建立大鼠肝移植模型(Wistar→SD),于连续观测时间点取大鼠的肝脏组织,石蜡包埋切片,HE染色,观察病理变化并给予病理评级和评分.结果 术后排斥反应随时间延长而逐渐增强,第5天达到高峰,5～15d维持于较高水平,随后逐渐减弱,但仍维持于轻至中度水平.结论 高免疫排斥大鼠肝移植模型术后5～15d急性排斥反应最为强烈,是研究大鼠肝移植术后急性排斥反应较为理想的时间段.     

建立近交系大鼠肝移植急性排斥模型的体会

目的:探讨近交系大鼠原位肝移植模型的建立并判断排斥反应发生的强度.方法:采用Kamada二袖套法,利用封闭群大鼠SD和Wistar进行建模技能训练,在此基础上建立近交系大鼠DA→LEW肝移植模型,根据临床表现和Banff标准判断排斥反应发生的强度.结果:共施行DA→LEW大鼠肝移植模型15例,手术成功率86.7%,死亡原因为肝上下腔静脉漏血、肝下下腔静脉血栓、胆道梗阻.术后第3天开始出现Ⅰ级排斥反应,7 d以后逐渐达到高峰,除术后并发症致死外,剩余均在12 d内死于Ⅲ级排斥反应.结论:DA→LEW为稳定、强烈的大鼠肝移植急排模型,是研究肝移植排斥及免疫耐受的理想动物模型.但近交系大鼠在组织结构上有其自身特点,给建模带来一定难度.     

大鼠原位肝移植急性排斥反应模型的建立

目的 建立大鼠原位肝移植急性排斥反应模型.方法 采用改进的Limmer和Kamada的二袖套法建立大鼠肝移植模型.将大鼠分为2组:①实验组:急性排斥反应组(Wistar→SD);②对照组:免疫耐受组(SD→SD).结果 免疫排斥组肝存活时间(7.4±1.7) d低于对照组(18.9±7.6)d,差异有统计学意义0.05 (P<0.05). 结论 Wistar→SD大鼠之间的原位肝移植模型可产生中、重度的免疫排斥反应,是一种较理想的可作为研究急性排斥反应的动物模型.     

大鼠原位肝移植术后排斥反应病理动态变化

目的观察高免疫排斥大鼠肝移植模型术后排斥反应的病理变化。方法运用改良“二袖套法”建立大鼠肝移植模型(Wistar→SD),于连续观测时间点取大鼠的肝脏组织,石蜡包埋切片,HE染色,观察病理变化并给予病理评级和评分。结果术后排斥反应随时间延长而逐渐增强,第5天达到高峰,5-15 d维持于较高水平,随后逐渐减弱,但仍维持于轻至中度水平。结论高免疫排斥大鼠肝移植模型术后5-15 d急性排斥反应最为强烈,是研究大鼠肝移植术后急性排斥反应较为理想的时间段。     

同种异体肝移植急性排斥反应的诊断和治疗

排斥反应贯穿于肝移植后全过程,可分为“超急性排斥”、“急性排斥”和“慢性排斤”。其中,急性排斥在人同种异体肝移植受体中是最重要和最常见的。国外报道发生率为67％,同时在肝脏再移植术中有5％～30％的病例是由于发生了不可逆性急性排斥反应。现结合文献,对急性排斥反应的发生机制、诊断、预防、处理原则综述如下。一、急性排斥发生的免疫学机制 1.细胞介导的肝移植排斥:细胞免疫在肝移植急性排斥反应中起主导作用,细胞因子则在其中发挥调节功能。目前普遍承认的是Lafferty的双信号学说,涉及免疫排斥反应的主要细胞为刺激细胞、反应细胞和靶细胞。一般来说,供者的淋巴细胞在移植物内或转移到受者的其它地方提供抗原刺激。此外,移植物(肝)的实质细胞也可提供刺激。淋巴细胞则是肝移植排斥反应中的主要反应细胞,CD4~ 细胞启动及放大反应免疫排斤,而 CD8~     

ICAM-1在同种大鼠肝移植物中的表达及其意义

目的细胞粘附现象与移植免疫排斥的关系愈来愈为人们所关注,本研究通过对细胞间粘附分子-1（ICAM-1）在大鼠同种肝移植物中的表达情况的分析,探讨ICAM-1与急性肝移植排斥反应的关系.方法采用免疫组织化学技术ABC法检测大鼠30例移植肝组织ICAM-1的表达.结果肝细胞膜、胆管上皮及炎性细胞均有大量的ICAM-1表达,中央静脉内皮细胞呈低表达,而正常大鼠肝细胞无ICAM-1表达.结论大鼠肝移植后ICAM-1在移植肝组织中的诱导表达可能是产生急性排斥的主要步骤,其机制可能是通过促进移植物浸润细胞的粘附而加剧移植排斥反应的进程.     

10例肝移植患者术后肝活检标本的临床病理分析

目的:研究10例肝移植患者术后27次肝活检标本的临床病理特点.以期对肝移植排斥反应的病理诊断有所帮助.方法:收集北京大学第三医院10例肝移植患者术后27次肝活检标本.先常规病理诊断,分析与急性排斥反应有关的病理形态特点.然后再随机计数每张病理切片中汇管区内浸润的嗜酸粒细胞数目,比较急性排斥反应与浸润的嗜酸粒细胞数目(平均嗜酸粒细胞数目/每个汇管区)之间的关系.结果:与急性排斥反应密切相关的肝穿组织病理学表现依次是:(1)汇管区多量混合性炎细胞浸润;(2)汇管区嗜酸粒细胞浸润;(3)汇管区小叶间胆管炎症和破坏;(4)汇管区小叶间静脉内皮下炎细胞浸润;(5)汇管区中性粒细胞浸润;(6)中央静脉内皮下炎细胞浸润;(7)胆汁淤积.每个汇管区内浸润的嗜酸粒细胞平均数目:无排斥反应为0.3;急性轻度排斥反应为2.8;急性中度排斥反应为14.5.汇管区浸润的嗜酸粒细胞数目与急性排斥反应的程度密切相关:急性排斥反应越重,汇管区浸润的嗜酸粒细胞数目越多(P=0.028).结论:嗜酸粒细胞在肝移植物急性排斥反应中起重要作用.     

肝移植106例术后急性排斥反应的诊断和治疗

目的:总结肝移植急性排斥反应的新表现及诊治经验. 方法:回顾我中心106例肝移植资料,对其中发生急性排斥反应病例的临床表现、病理组织学改变、诊治方案加以分析. 结果:106例肝移植中,术后发生急性排斥反应17例(16.0%);其中临界型1例,轻度6例,中度7例,重度3例. 这些病例在具备病理组织学改变的同时缺乏典型的临床特征和肝功能生化指标的改变. 结论:由于强效免疫抑制剂的应用,肝移植术后急性排斥反应发生的临床症状和体征不典型,我们应该重视急性排斥反应的诊断并积极治疗.     

肝移植后急性排斥反应的诊断和防治

目的:探讨原位肝移植术后急性排斥反应的诊断和防治.方法:回顾分析2002年6月至2003年8月71例人原位肝移植术后急性排斥反应患者诊治的临床资料.结果:14例肝移植后8～200 d共出现16次急性排斥反应,平均46 d,6例有典型临床表现,所有病例均出现血清学改变并经肝穿刺活检确诊.经大剂量激素冲击治疗后,15次急性排斥反应被控制.结论:细针肝穿活检术是确诊急性排斥反应的惟一手段;预防急性排斥反应发生的关键在于合理应用免疫抑制剂;临床治疗应注重对病理学诊断、血清学检查和临床表现的综合分析和判断.     

ICAM-1在同种大鼠肝移植物中的表达及其意义

目的细胞粘附现象与移植免疫排斥的关系愈来愈为人们所关注,本研究通过对细胞间粘附分子-1（ICAM-1）在大鼠同种肝移植物中的表达情况的分析,探讨ICAM-1与急性肝移植排斥反应的关系.方法采用免疫组织化学技术ABC法检测大鼠移植肝组织ICAM-1的表达.结果30例移植肝组织中,均见肝细胞膜、胆管上皮及炎性细胞有大量的ICAM-1表达,中央静脉内皮细胞呈低表达,而正常大鼠肝细胞无一例有ICAM-1表达.结论大鼠肝移植后ICAM-1在移植肝组织中的诱导表达可能是产生急性排斥的主要步骤,其机制可能是通过促进移植物浸润细胞的粘附而加剧移植排斥反应的进程.     

三轴套法金黄地鼠至大鼠原位肝移植模型建立

三袖套法金黄地鼠至大鼠原位肝移植模型建立张绍庚谈景旺杨甲梅陈汉吴孟超肝移植是治疗终末期肝病的唯一手段，免疫排斥反应是肝移植的主要障碍之一。为建立有效的实验动物模型，我们采用三袖套法行金黄地鼠至大鼠原位肝移植术，并在Ｈａｒｉ－ｈａｒａ法［１］的基础上进...     

近交系大鼠肝移植急性排斥模型的建立及排斥反应观察

目的 建立近交系大鼠肝移植急性排斥模型并观察其排斥反应的规律.方法 近交系大鼠随机分为G1(BN-BN)、G2(SD-Wistar)和G3(LEW-BN)3组,每组18对.采用改良"二袖套法"大鼠原位肝移植模型,观察一般情况,生存期,术后第3、7、14、21天血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、总胆红素(TBIL)及移植肝病理学变化,根据Banff标准判断排斥反应强度.结果 G1、G2大鼠1月存活率为100%;G3大鼠急性排斥反应于术后第3天始发生,第7天后逐渐加重,第14天达到高峰,除并发症致死外,余大鼠均在20天内死于Ⅲ级排斥反应.G3术后各时相点ALT、TBIL均明显高于G1、G2(P<0.05).G3移植肝病理检查呈典型的排斥反应,而G1、G2没有.结论 LEW-BN大鼠组合为稳定的大鼠肝移植急性排斥模型;但近交系大鼠手术耐受性差,建模难度大,熟练的显微外科技术是模型成功的关键.     

肝移植术后免疫耐受诱导方法研究进展

肝移植是治疗终末期肝病最有效方法的方法之一.近年来随着肝移植技术的日趋成熟,各种肝移植技术得到了蓬勃发展.但是,急性和慢性排斥反应仍然是肝移植术后移植物丢失的主要原因之一,而且免疫抑制剂的长期乃至终生应用,除了经济负担之外,与过度免疫抑制相关病毒感染以及恶性肿瘤等也给移植患者带来了十分不利的影响.因此,移植界正在寻找一种有效的降低排斥反应水平,甚至诱导免疫耐受的方法.目前,肝移植术后诱导免疫低反应,或者免疫耐受的研究方法有很多种.     

肝移植大鼠肝内一氧化氮合酶的表达

目的 :探讨移植肝一氧化氮合酶的表达与急性排斥反应间关系及其细胞定位。方法 :应用近交系 BN至 Lew大鼠原位肝移植急性排斥反应及同基因 ( Lew- Lew)肝移植动物模型 ,用免疫组化法检测移植肝组织中诱导型一氧化氮合酶 ( i NOS)的表达。同时观察 i NOS抑制剂氨基胍和免疫抑制剂 FK5 0 6对肝移植术后急性排斥反应的影响。结果 :在急性排斥组 i NOS表达强阳性 ,与氨基胍组、FK5 0 6组及同基因对照组比较差异显著。结论 :在大鼠原位肝移植发生急性排斥反应时 i N-OS增高程度与排斥反应的强度有明显关系。氨基胍、FK5 0 6可以抑制 i NOS的表达。抑制 i NOS的表达可明显减轻移植肝组织的急性排斥反应     

大鼠肝移植术后一氧化氮和白细胞介素2的变化

目的 :探讨一氧化氮 ( NO)在 BN至 Lew大鼠异种原位肝移植急性排斥反应中的价值。方法 :应用 BN至 Lew近交系大鼠异种原位肝移植急性排斥反应及同基因 ( Lew- Lew)肝移植动物模型 ,检测肝移植术后血浆 NO和白细胞介素 2 ( IL- 2 )的变化。结果 :大鼠异种原位肝移植急性排斥反应时血浆 NO含量明显升高 ,且变化早于 IL - 2 ;FK5 0 6显著抑制 NO的合成 ,氨基胍减轻排斥反应的程度 ;同基因组 NO不升高。结论 :NO可作为大鼠肝移植急性排斥反应的诊断指标     

T细胞分化群40补体免疫球蛋白基因修饰骨髓间充质干细胞在肝移植排斥反应中的作用

目的探讨T细胞分化群40补体免疫球蛋白(CD40LIg)基因修饰骨髓间充质干细胞(MSCs)肝移植排斥反应中的作用。方法采用双袖套法建立DA-Lewis大鼠原位肝移植模型,经门静脉输注CD40LIg基因转染的MSCs,观察大鼠肝移植术后肝功能的变化、生存情况和移植肝病理形态学的改变,检测肝移植大鼠干扰素(INF-γ)和白细胞介素4(IL-2)水平的变化。结果(1)基因转染MSCs组生存时间显著长于对照组、单纯MSCs组和基因转染组,而单纯MSCs组和基因转染组又较对照组显著延长(P<0.05)。(2)对照组谷丙转氨酶(ALT)、总胆红素(TBil)、IL-2和INF-γ水平在肝移植术后急剧升高,各时段均显著高于3个治疗组(P<0.05);(3)肝脏组织病理检查,对照组呈重度排斥反应,单纯MSCs组和基因转染组为轻度排斥反应,而基因转染MSCs组无明显排斥反应。结论 CD40LIg基因修饰MSCs可以延长肝移植大鼠的存活时间,抑制大鼠肝移植的排斥反应。     

抗CD134抗体封闭肝移植术后急性排斥反应的实验研究

目的 研究抗CD134抗体封闭肝移植术后急性排斥反应在免疫耐受中的作用.方法 通过抗CD134抗体抑制共刺激途径,研究排斥反应出现免疫耐受的情况.结果 空白对照组:SD对Wistar组存活时间因有排斥反应致存活时间短,平均7±2.3天;移植治疗对照组:抗CD134组肝移植因未见明显的排斥反应,存活时间长,平均12±2.5天,有统计学差异.结论抗CD134抗体可以诱导免疫耐受的产生.     

穿孔素和颗粒酶B基因对肝移植急性排斥早期诊断实验研究

免疫排斥反应是肝移植面临的主要障碍之一。急性排斥对移植肝和受肝病人危害极大,而目前其诊断仅依赖临床推断和病理活检,一旦诊断成立,移植肝往往已严重损害。目前认为器官移植急性排斥反应主要是细胞介导的细胞毒作用,而后者主要由穿孔素和颗粒酶介导,穿孔素将靶细胞形成孔,颗粒酶进入细胞而使之破坏。本研究通过建立简化三袖套法大鼠原位肝移植的基础上,建立国际公认的稳定的金黄地鼠至大鼠原位肝移植急性排斥模型,并确定细胞免疫在该急性排斥反应模型中的作用。应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测该模型移植     

肝移植术后免疫抑制剂应用后的护理干预

肝移植是目前治疗各种终末期肝病的最有效手段。排斥反应为肝移植术后最常见的并发症,免疫抑制剂在预防和治疗排斥反应中起着重要的作用。现将免疫抑制剂的应用、不良反应的观察与护理综述如下。     

近交系LEWIS→BN大鼠原位肝移植急性排斥模型的建立

目的 建立近交系LEWIS→BN大鼠原位肝移植急性排斥模型,分析手术成功率的影响因素及该模型的稳定性,并总结该模型区别于常规使用的SD、Wistar等封闭群大鼠间原位肝移植的特点.方法 实验组选择近交系雄性LEWIS及BN大鼠各30只分别作为供、受体,对照组选择雄性BN大鼠各9只作为供、受体.采用Kamada"二袖套"法实施原位肝移植术,不吻合肝动脉;于术后3,5,7,9,11,13,15 d处死受体获取肝脏组织,用中性甲醛固定后制作石蜡切片进行HE染色以判定急性排斥的程度.结果 原位肝移植术成功率约为74%,导致手术失败的原因依次为:肝上下腔静脉出血,门静脉出血,麻醉意外和其他;LEWIS→BN组出现不同程度的排斥现象, 而BN→BN组则无排斥现象.与封闭群大鼠肝移植比较,该模型具有自身特点,即在排斥出现的时间、程度和结果转归上表现并非完全一致,然而所有受体均出现了排斥现象.结论 大鼠肝移植是目前研究肝移植理想模型,本研究采用Kamada的"二袖套"法成功建立了大鼠肝移植急性排斥模型.