HPLC同时测定连翘药材中5种特征性成分

目的:建立连翘药材中连翘新苷A、连翘酯苷A、松脂醇β-D葡萄糖苷、连翘苷和连翘脂素的含量测定方法。方法:采用高效液相色谱-二极管阵列检测法(HPLC-DAD),采用Welch Ultimate C18(4.6mm×250mm,5μm)色谱柱,流动相为水(A)-乙腈(B),梯度洗脱,流速1m L/min,柱温25℃。结果:连翘新苷A、连翘酯苷A、松脂醇β-D葡萄糖苷、连翘苷、连翘脂素进样浓度分别在7.81~500.00μg/m L,2.42~620.00μg/m L,1.21~620.00μg/m L,2.27~580.00μg/m L,0.59~600.00μg/m L之间有良好的线性关系。平均回收率分别为99.93%、99.95%、99.65%、99.52%、99.74%,RSD分别为2.09%、1.93%、1.17%、1.76%、0.88%。结论:该方法稳定性好,精密度高,重复性好,对于连翘药材的质量控制提供了理论依据。     

HPLC-ESI-MS/MS法测定连翘心中的8种化学成分

目的建立HPLC-ESI-MS/MS法同时测定连翘心中连翘酯苷A、连翘苷、连翘脂素、芦丁、槲皮素、异槲皮苷、阿魏酸和橙皮苷的量。方法色谱柱为Diamonsil C18柱(150 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-0.1%甲酸水,梯度洗脱,体积流量800μL/min,进样量10μL;质谱采用电喷雾离子源(ESI源),负离子模式监测,源喷射电压-4 500 V,离子源温度650℃,定量分析采用多反应监测模式(MRM)。结果连翘心中8种成分在线性范围内峰面积与质量浓度均呈良好的线性关系,加样回收率为98.1%~101.8%,精密度RSD值小于0.84%。连翘酯苷A、连翘苷、连翘脂素和芦丁的量较高,平均质量分数分别为1 609.78、80.08、86.64和373.86μg/g,槲皮素、异槲皮苷、阿魏酸和橙皮苷的量较低。结论该法灵敏度高、专属性好、结果可靠,适用于连翘心中多组分的测定。     

HPLC同时检测二十味沉香丸中4个成分

目的:建立HPLC法同时测定二十味沉香丸中紫丁香苷、松果菊苷、连翘酯苷、橄榄苦苷的含量。方法:采用Sunfire-ODS C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱;以乙腈-0.1%醋酸溶液为流动相,梯度洗脱;流速为1.0 m L/min;检测波长为280、330 nm;柱温为30℃,进样量为20μL,测定8批二十味沉香丸中上述4个成分的含量。结果:紫丁香苷、松果菊苷、连翘酯苷、橄榄苦苷分别在19.110～229.321μg/m L(r=0.9999)、2.506～30.067μg/m L(r=0.9998)、21.785～261.426μg/m L(r=0.9999)、30.151～361.817μg/m L(r=0.9999)的浓度范围内与峰面积的线性关系良好,平均加样回收率分别为99.42%、98.90%、98.37%、100.06%,RSD分别为2.39%、2.20%、2.78%、2.87%。结论:该研究建立的方法简便、准确,重复性好,可为二十味沉香丸的质量控制提供参考。     

高效液相色谱法测定抗病毒胶囊中连翘苷的含量

目的建立抗病毒胶囊中连翘苷的含量测定方法。方法采用高效液相色谱法测定该药中连翘苷的含量,色谱条件:ODS C18柱(4.6 mm×250 mm,5μm)为色谱柱,乙腈-水(28∶72)为流动相;流速:0.8 m l/m in;检测波长:230 nm。结果连翘苷浓度范围在4.96~49.6μg/m l之间峰面积与浓度线性关系良好,r=0.999 9,平均回收率为97.7%,RSD为1.77%;结论该方法准确、可靠、专属性强,可用于抗病毒胶囊的质量控制。     

HPLC同时测定连翘花及叶中绿原酸等活性成分的含量

目的:建立同时测定绿原酸、连翘酯苷、芦丁、连翘苷含量的高效液相色谱测定方法;比较连翘花、不同生长时期连翘叶、连翘药材中的含量差异。方法:采用高效液相色谱(HPLC)法,以Supelcosil C18柱(4.6 mm×250 mm,5μm)为色谱柱,甲醇-0.8%醋酸水溶液为流动相梯度洗脱,流速1.0 mL.min-1,检测波长280 nm,柱温25℃。结果:绿原酸在0.125～12.500μg、连翘酯苷在0.125～12.500μg、芦丁在0.175～17.500μg、连翘苷在0.125～12.500μg线性关系良好,平均加样回收率为98.43%～99.97%,RSD<5%(n=6)。结论:该方法准确可靠,结果稳定,可用于连翘样品中绿原酸、连翘酯苷、芦丁和连翘苷的同时测定,且各活性成分在连翘花、不同生长时期连翘叶及连翘药材的含量存在差异。     

不同干燥条件连翘叶茶有效成分含量比较

目的比较不同干燥条件下连翘叶茶中总黄酮、连翘酯苷A和连翘苷含量,确定连翘叶茶最佳干燥方式。方法采用紫外分光光度法,以亚硝酸钠-三氯化铝-氢氧化钠溶液体系为显色剂,在波长500 nm处测定总黄酮含量;采用HPLC同时测定连翘酯苷A和连翘苷含量,色谱柱为Diamosil C18(2)柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为乙腈-0.4%乙酸水溶液,梯度洗脱,检测波长277 nm,柱温30℃,流速1.0 m L/min。结果不同干燥条件连翘叶茶中总黄酮含量基本相同;不同干燥条件连翘叶茶中连翘酯苷A和连翘苷含量顺序为:通风阴干干燥真空干燥鼓风干燥。结论不同干燥条件对连翘叶茶中总黄酮含量无明显影响,对连翘酯苷A和连翘苷的含量影响较大,通风阴干比鼓风干燥和真空干燥更有利于连翘酯苷A和连翘苷成分的保存。     

HPLC-MS/MS测定连翘中连翘酯苷A、阿魏酸、槲皮素、松脂醇β-D葡萄糖苷、连翘苷的含量

[目的]建立采用HPLC-MS/MS测定连翘中连翘酯苷A、阿魏酸、槲皮素、松脂醇β-D葡萄糖苷、连翘苷的含量的方法,为其开发应用提供方法参考。[方法]色谱柱选用Phenomenex Luna C18柱(150 mm×2. 0 mm,5μm);流动相A:0. 1%甲酸溶液,流动相B:100%乙腈;流速为0. 7 m L/min;进样量为12μL;洗脱梯度设定为:0～5 min,10%～55%B; 5～11 min,55%～100%B。质谱选择负离子扫描,离子源为电喷雾式(ESI)。采用多反应监测的检测模式,喷雾电压:-4. 7 k V,雾化气压0. 5 MPa,雾化温度620℃,氮气压力0. 65 MPa。[结果]本次研究所检测的连翘在可测定浓度的范围内5种成分的峰面积与浓度都表现出较好的线性关系,加样后的回收率在97. 8%～99. 5%之间。[结论]采用HPLC-MS/MS测定连翘中5中成分的含量效果较好,灵敏度高、结果可靠,为连翘的开发应用以及质量控制提供了参考。     

HPLC法测定蒙药甘露解毒丸中连翘酯苷A的含量研究

目的:建立高效液相色谱法测定蒙药甘露解毒丸中连翘酯苷A的含量。方法:色谱柱为SHISEIDO CAPCELL PAK C₁₈色谱柱(250 mm×4.6 mm, 5μm),以乙腈-0.4%冰醋酸(15∶85,V/V)为流动相,流速为0.8 mL/min,检测波长330nm,柱温为30℃,进样量为10μL。结果:连翘酯苷A在0.1～1.4μg范围内呈现良好线性关系,线性方程为Y=2302379X+2377(r=0.9999,n=6);专属性良好;精密度和稳定性的RSD分别为0.40%和0.80%。平均加样回收率为94.34%,RSD为1.26%(n=9)。测定两批甘露解毒丸样品,平均含量为0.7772 mg/g, RSD为0.71%。结论:高效液相色谱法测定连翘酯苷A的含量操作简便,重现性好,灵敏度较高,适用于甘露解毒丸中连翘酯苷A的含量测定。     

HPLC法监测金英黄归汤制备过程中绿原酸和连翘酯苷A含量

目的采用高效液相色谱(HPLC)法建立绿原酸和连翘酯苷A的含量测定方法,并对制备过程中绿原酸和连翘酯苷A含量进行监测,为金英黄归汤制备工艺改进提供质控标准。方法采用Hypersil C18色谱柱(150mm伊4.6 mm,5μm);绿原酸和连翘酯苷A的流动相分别为乙腈-0.2%磷酸(11颐89)与乙腈-0.4%冰醋酸(17颐83);检测波长分别为327 nm和330 nm;柱温分别为35益和30益;流速分别为0.8 m·min-1和1.0 m L·min-1。结果绿原酸和连翘酯苷A的线性范围分别为:13.56耀217.00μg·m L-1(r2=0.9997),0.0536耀0.2680 mg·m L-1(r2=0.9996);稳定性试验RSD分别为0.14%和0.47%;中间精密度试验RSD分别为0.63%和0.56%;重复性试验RSD分别为0.68%和1.00%;平均回收率分别为绿原酸99.23%,RSD为0.61%;连翘酯苷A100.24%,RSD为1.15%。结论建立的绿原酸和连翘酯苷A含量检测方法,可为金英黄归汤制备过程提供质控数据。     

RP-HPLC测定六味五灵片中齐墩果酸和连翘苷的含量

目的:建立六味五灵片中齐墩果酸和连翘苷的含量测定方法。方法:采用HPLC法,Diamonsil C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,测定齐墩果酸的流动相为甲醇-2g/L磷酸水溶液(80∶20),流速1.0 m L/min,检测波长205 nm,柱温25℃;测定连翘苷的流动相为乙腈-水(25∶75),流速1.0 m L/min,检测波长277 nm,柱温25℃。结果:齐墩果酸和连翘苷的线性范围分别为0.6~1.2μg和0.143 7~2.874 0μg,平均回收率分别为99.34%(RSD=1.53%)和100.16%(RSD=0.68%)。结论:建立的含量测定方法重复性好、简单易行,适用于六味五灵片的质量控制。     

双波长高效液相色谱法同时测定双黄连口服液中黄芩苷、绿原酸、连翘苷、连翘酯苷A的含量

目的:建立同时测定双黄连口服液中黄芩苷、绿原酸、连翘苷、连翘酯苷A 4种成分含量的高效液相色谱法。方法:采用Hedera ODS-2色谱柱(4.6mm×250mm,5μm),柱温30℃,甲醇-0.2%磷酸溶液为流动相梯度洗脱,流速为1.0mL/min,检测波长为324、280nm。结果:黄芩苷、绿原酸、连翘苷、连翘酯苷A分别在28.53-285.25、4.86-48.60、2.05-20.50、2.01-20.10μg/mL范围内线性关系良好,相关系数分别为0.9998、0.9993、0.9993、0.9997,4种成分平均回收率均符合含量测定要求。结论:本法简单易行,可用于双黄连口服液的质量控制。     

UPLC-MS/MS同时测定双黄连口服液中17种有效成分

目的建立超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)同时测定双黄连口服液中17种成分(新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、咖啡酸、3,5-二咖啡酰奎宁酸、3,4-二咖啡酰奎宁酸、异连翘酯苷、连翘酯苷A、连翘苷、芦丁、黄芩素、黄芩苷、野黄芩苷、汉黄芩苷、千层纸素A-7-O-β-D-葡萄糖苷、汉黄芩素、千层纸素A)的分析方法。方法采用Acquity UPLC BEH C18色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.7μm),以乙腈-甲醇(4∶1)-0.4%甲酸水为流动相,梯度洗脱,体积流量为0.4 m L/min,柱温40℃,采用电喷雾电离源(ESI),多反应离子监测(MRM)扫描方式进行检测,分析时间为7 min。结果所测17种有效成分在测定质量浓度范围内线性关系良好,r2均大于0.990 1,实验精密度、准确度和稳定性良好,平均加样回收率为95.81%~102.42%,所测5批样品中17种成分定量范围依次为新绿原酸782.68~1 034.27μg/m L、绿原酸786.35~1 103.77μg/m L、隐绿原酸898.00~1 238.94μg/m L、咖啡酸82.85~115.17μg/m L、3,5-二咖啡酰奎宁酸226.02~461.63μg/m L、3,4-二咖啡酰奎宁酸191.59~404.21μg/m L、异连翘酯苷243.62~298.51μg/m L、连翘酯苷A 978.43~1 487.37μg/m L、连翘苷351.97~435.82μg/m L、芦丁41.19~75.65μg/m L、黄芩素40.28~73.73μg/m L、黄芩苷10 080.54~10 820.35μg/m L、野黄芩苷40.88~50.51μg/m L、汉黄芩苷187.73~204.85μg/m L、千层纸素A-7-O-β-D-葡萄糖苷144.92~335.08μg/m L、汉黄芩素9.30~25.58μg/m L、千层纸素A 7.51~16.58μg/m L。结论方法简单、快速、准确度及灵敏度高、专属性好,可用于双黄连口服液中3大类17个主要成分的快速定量测定。     

高效液相色谱法测定复方鱼腥草颗粒多组分含量

目的:采用HPLC建立复方鱼腥草颗粒中多成分的含量测定方法。方法:采用月旭C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱;以甲醇-0.1%磷酸溶液为流动相,梯度洗脱;流速为1.0 m L/min;检测波长为275 nm;柱温为35℃。结果:异连翘酯苷、连翘酯苷A、金丝桃苷、连翘苷、黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素分别在5.2～520μg/m L、0.8～80μg/m L、1.5～150μg/m L、1.2～120μg/m L、1.6～160μg/m L、1.4～140μg/m L、1.8～180μg/m L、1.3～130μg/m L的范围内与峰面积的线性关系良好,r≥0.9990;10批复方鱼腥草颗粒中上述8个成分的平均含量分别为2.4231、0.2652、0.4361、0.3284、0.4743、0.3747、0.5515、0.3535 mg/g。结论:该研究建立的多成分含量测定方法快速简便,重复性好,可为复方鱼腥草颗粒的质量控制提供依据。     

HPLC-MS/MS法测定不同采收期连翘叶中9种成分

目的 建立HPLC-MS/MS法同时测定连翘叶中连翘苷、连翘脂素、连翘酯苷A、连翘酯苷F、芦丁、槲皮素、异槲皮苷、绿原酸、(＋)-表松脂素-4′-O-葡萄糖苷的量。方法 采用Dikma Diamonsil C₁₈色谱柱（150 mm×4.6 mm,5 μm）,柱温30 ℃,以甲醇-0.02%甲酸水溶液为流动相进行梯度洗脱,体积流量0.8 mL/min,进样量10 μL;采用电喷雾离子源进行负离子模式监测,多反应监测模式（MRM）用于定量分析,源喷射电压为?4 500 V,离子源温度为650 ℃。结果 9种化学成分的峰面积和浓度在测定浓度范围内均具有良好的线性关系,加样回收率为97.20%～101.2%,精密度RSD为0.54%～1.24%。结论 本法简便快速、灵敏度高、专属性好,可用于连翘叶中9种活性成分的测定。通过对结果进行分析,连翘叶以5月份采收最佳。     

HPLC法测定牛黄至宝丸中连翘苷的含量

目的:建立高效液相色谱法(HPLC)测定牛黄至宝丸中连翘苷含量的方法。方法:采用HPLC进行测定,色谱柱为DikmaC1(8 250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:为乙腈-水(25∶75),检测波长:278 nm,流速:1 ml/min;柱温:25℃。结果:连翘苷在一定色谱条件下能完全分离,连翘苷在6.08～60.8μg.ml-1浓度范围内线形关系良好,线性回归方程Y=50396.3X 892.4,γ=0.9996,加样回收率为96.70%;相对标准偏差RSD%为1.0%(n=6)。结论:本方法用于测定牛黄至宝丸中连翘苷的含量,准确可靠,方法简便。     

青翘炮制方法的研究

目的:确定青翘的最佳炮制方法。方法:采用HPLC直接测定,Alltima C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),甲醇-水梯度洗脱,检测波长280 nm,室温,流速0.8 mL.min-1。结果:连翘酯苷的回归方程为Y=959 631.703 1X+250 467.648 4,r=0.999 4,线性范围1.5～15μg;连翘苷的回归方程为Y=883 203.205 8X-9 047.738 3,r=0.999 4,线性范围0.145～1.45μg;连翘酯苷和连翘苷的加样回收率分别为97.9%,99.2%,RSD分别为2.30%,2.27%(n=6)。青翘药材蒸制20～30 min,连翘酯苷和连翘苷的含量最高。结论:该测定方法准确、可靠,重复性好,可用于连翘中连翘酯苷和连翘苷的含量测定;青翘的炮制以蒸制20～30 min为宜。     

HPLC法测定鼻炎胶囊中连翘苷的含量

目的:建立鼻炎胶囊中连翘苷的含量测量方法.方法:采用反相高效液相色谱法,色谱柱:Kromasil C18柱(4.6mm×150mm,5μm),填充剂为十八烷基硅烷键合硅胶;流动相:乙腈-水(21:79);检测波长277nm.结果:样品中连翘苷的平均回收率为98.3%,RSD=0.8%,连翘苷在0.4～2.0μg之间峰面积与浓度线性关系良好(r=0.9999),对鼻炎胶囊中连翘苷的含量测定,结果样品中连翘苷的平均含量为0.4580mg/g.结论:该实验方法简便,重现性好,回收率高,可作为鼻炎胶囊中连翘苷的含量测定方法.     

HPLC法同时测定银翘马勃散中5种有效成分的含量

目的建立同时测定银翘马勃散中绿原酸、连翘酯苷A、牛蒡苷、连翘苷、次野鸢尾黄素5种成分含量的方法。方法采用HPLC法。COSMOSIL 5 C_(18)-AR-Ⅱ色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);以甲醇-0.4%磷酸水为流动相,梯度洗脱;流速:1.0 m L·min~(-1);柱温:30℃;检测波长:272 nm。结果绿原酸、连翘酯苷A、牛蒡苷、连翘苷、次野鸢尾黄素的保留时间分别为24.963,39.996,45.863,47.983,63.868 min;线性范围分别为0.992~9.92(r=0.9999),0.498~4.98(r=0.9996),2.66~26.6(r=0.9999),0.092~0.92(r=0.9998),0.0149~0.149μg(r=0.9997);平均加样回收率分别为99.82%、96.38%、96.69%、103.23%、98.70%。结论该方法简单、准确、稳定,可用于银翘马勃散中绿原酸、连翘酯苷A、牛蒡苷、连翘苷、次野鸢尾黄素的同时测定,为银翘马勃散及其类方制剂的新药开发与质量评价提供参考。     

HPLC法测定藏药白花龙胆花中4种成分的含量

目的:采用HPLC法测定藏药白花龙胆花中龙胆苦苷、异荭草苷、芒果苷、齐墩果酸的含量。方法:色谱条件为:Agilent Eclipse XDB-C18(150 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱;流动相为甲醇-0.5%乙酸溶液,梯度洗脱;流速为1.0 m L/min;柱温为30℃;检测波长为220 nm。结果:测得藏药白花龙胆花中龙胆苦苷、异荭草苷、芒果苷、齐墩果酸在0.24~3.68μg/m L、0.28~4.48μg/m L、0.22~3.52μg/m L、0.26~4.16μg/m L浓度范围内与各自峰面积线性关系良好,含量依次为0.50%、0.37%、0.20%、0.26%。结论:运用该方法测定藏药白花龙胆花中龙胆苦苷、异荭草苷、芒果苷及齐墩果酸的含量简便易行,有较高的准确性。     

HPLC同时测定连翘中芦丁、连翘酯苷A和连翘苷含量

目的:采用HPLC法同时测定连翘中芦丁、连翘酯苷A和连翘苷的含量。方法:色谱柱为Sunfire C18,流动相为乙腈(A)-0.2%冰醋酸溶液(B),梯度淋洗(0min,14%A;15min,18%A;30min,30%A),柱温为40℃,流速为1mL/min;结果:芦丁、连翘酯苷A与连翘苷分别在0.098~5.1μg、0.24~11.9μg、0.1~4.9μg进样量范围内与其峰面积积分呈良好的线性关系,回收率分别为99.4%~100.6%、98.5%~99.9%、99.4%~101.7%。结论:采用HPLC法同时测定连翘中芦丁、连翘酯苷A和连翘苷含量重复性好、精密度高,可用于连翘药材的质量控制。