马钱子碱对人结肠癌细胞SW480增殖和周期的影响及机制研究

目的探讨马钱子碱对人结肠癌细胞株SW480的增殖和周期的影响及可能的分子机制。方法将试验分为空白对照组和马钱子碱高(8μmol/L)、中(4μmol/L)、低剂量组(2μmol/L),细胞生长曲线检测马钱子碱干预前后各组SW480细胞的增殖情况;流式细胞术检测马钱子碱对各组SW480细胞周期的影响;RT-PCR检测马钱子碱对SW480细胞中Wnt3a、β-catenin、C-myc、CyclinD1的mRNA表达的调节作用;Western Blot试验检测马钱子碱对SW480细胞中Wnt3a、β-catenin、C-myc、CyclinD1蛋白表达的调节作用。结果细胞生长曲线表明,在一定范围内,马钱子碱给药浓度越高,对SW480细胞增殖的抑制作用越显著,以高剂量组为最优。流式细胞术试验表明,马钱子碱可显著升高G2/M期的SW480细胞数量,从而将SW480周期阻滞在G2/M期。RT-PCR和Western Blot试验结果显示,马钱子碱干预后Wnt3a、β-catenin、C-myc、CyclinD1的mRNA和蛋白表达相较于正常对照组其表达明显降低。结论马钱子碱可通过调节Wnt/β-catenin信号通路抑制结肠癌细胞SW480增殖并将SW480细胞周期阻滞在G2/M期。     

木香烃内酯通过PI3K/AKT信号通路调控结直肠癌细胞增殖、凋亡、侵袭和迁移

目的:探讨木香烃内酯对结直肠癌细胞增殖、凋亡、侵袭和迁移的影响及作用机制。方法:不同浓度(10、20、40μmol/L)木香烃内酯作用结直肠癌细胞SW480,并设空白对照组、溶剂对照组和紫杉醇组,MTT和平板克隆实验检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞凋亡,Transwell检测细胞迁移和侵袭,Western Blot检测与增殖、凋亡、侵袭和迁移相关蛋白、LASP1、PI3K/AKT信号通路相关蛋白表达。应用Lipofectamine~(TM)2000将真核表达载体pCDNA-LASP1和空载体pCDNA导入SW480细胞,观察LASP1过表达后木香烃内酯对SW480增殖、凋亡、迁移和侵袭及PI3K/AKT信号通路的影响。结果:与空白对照组比较,40μmol/L木香烃内酯组SW480细胞活力、细胞迁移和侵袭数量显著降低、凋亡率显著升高,CDK1、CyclinD1、MMP-2、MMP-9、LASP1、PI3K、AKT、mTOR蛋白表达显著降低,Caspase-3、Caspase-9蛋白表达显著升高。空白对照组和溶剂对照组各检测指标差异无统计学意义(P0.05)。LASP1过表达可逆转木香烃内酯对SW480细胞增殖、迁移、侵袭及PI3K、AKT、mTOR蛋白表达的抑制作用,并逆转木香烃内酯对SW480细胞的凋亡促进作用。结论:木香烃内酯可能通过抑制PI3K/AKT信号通路调控结直肠癌细胞的增殖、凋亡、侵袭和迁移。     

鼠尾草酸对人结肠癌细胞增殖抑制作用及增强其对5-氟脲嘧啶敏感性的研究

目的 研究鼠尾草酸（carnosic acid,CA）抑制人结肠癌细胞SW480增殖和增强化疗药物5-氟脲嘧啶（5-Fluorouracil,5-FU）敏感性的作用及机制。方法 结晶紫染色法检测CA对SW480增殖的抑制作用,流式细胞技术分析和MTT法检测CA和5-FU联合使用对人结肠癌细胞SW480凋亡和细胞活力的影响。采用β-catenin荧光素酶报告基因（TOP-Flash）检测CA作用后SW480细胞内β-catenin活性改变。不同浓度CA处理SW480后,Western blot检测β-catenin蛋白质表达水平变化,RT-PCR法检测其下游基因Cyclin D1和P-gp（P-glycoprotein）的mRNA表达水平变化。结果 CA对人结肠癌SW480细胞增殖有抑制作用,且CA能够增强5-FU对结肠癌细胞凋亡和细胞活力的影响。CA处理后细胞内β-catenin转录活性明显降低,Western blot法和RT-PCR法结果显示CA下调了β-catenin的蛋白水平及下游基因Cyclin D1和P-gp mRNA表达。结论 CA能够抑制人结肠癌SW480细胞增殖和增强5-FU的抗肿瘤效果,其机制可能与抑制β-catenin活性并下调其下游基因Cyclin D1和P-gp表达有关。     

莪黄汤对结肠癌SW480细胞中β-catenin及下游靶基因cyclin D1表达的影响

目的:了解莪黄汤含药血清对人结肠癌SW480细胞增殖的影响及对Wnt/β-catenin信号通路中β-catenin、cyclin D1蛋白表达的影响。方法:通过莪黄汤不同浓度含药血清处理SW480细胞,MTT法检测细胞增殖,流式细胞技术检测细胞周期,免疫组化及Western blot检测Wnt/β-catenin通路中β-catenin、Cyclin D1蛋白的表达。结果:MTT检测显示不同浓度莪黄汤含药血清在体外对结肠癌SW480细胞增殖有明显抑制作用,呈时间依赖及浓度依赖关系;流式细胞检测显示莪黄汤可抑制SW480细胞增殖,并提示莪黄汤可能在S期发挥作用,阻止细胞进入G2/M期,其中7.14g/kg组抑制作用最明显;免疫组化及Western检测提示莪黄汤可降低β-catenin及其下游cyclin D1蛋白的表达。结论:莪黄汤可能通过Wnt/β-catenin信号通路抑制SW480细胞增殖发挥抗肿瘤作用。     

牡蛎调控肠道肿瘤细胞维生素D受体信号通路的研究

目的:维生素D受体(VDR)信号通路在肿瘤的防治中起有重要作用,研究牡蛎对结肠肿瘤细胞增殖、侵袭、转化的影响,从VDR信号通路阐明牡蛎抗癌的机制。方法:制备牡蛎酶解产物,用Aqueous法研究牡蛎对SW480结肠癌细胞体外增殖的影响;用细胞Transwell侵袭试验研究牡蛎对SW480细胞侵袭的影响;用软琼脂克隆形成试验研究牡蛎对SW480细胞转化的影响;用qRT-PCR研究牡蛎对SW480细胞中癌基因c-Myc和cyclin D1表达的影响,以及对VDR信号通路基因VDR和E-cadherin转录的影响。结果:终浓度为100μg/ml、200μg/ml和400μg/ml的牡蛎酶解产物可以剂量依赖性地抑制SW480结肠癌细胞体外增殖、侵袭、转化,下调SW480细胞中c-Myc和cyclin D1 mRNA水平,抑制VDR和E-cadherin转录表达。结论:牡蛎具有良好的抗肠道肿瘤作用,其机制在于增强VDR信号通路的活性。     

蜘蛛香提取物对人结肠癌SW480细胞增殖抑制及抗转移作用

目的:观察蜘蛛香提取物对体外培养人结肠癌SW480细胞增殖抑制及抗转移作用。方法:观察蜘蛛香提取物(400μg/m L)及80μg/m L的5-FU(阳性对照组)对SW480细胞的影响;通过MTT法、细胞脱落实验、病理观察、流式细胞仪检测观察蜘蛛香提取物对结肠癌SW480细胞的增殖抑制、促进凋亡等作用;通过划痕和同质性黏附实验观察其抗结肠癌SW480细胞转移作用。结果:MTT法检测显示蜘蛛香提取物及5-FU均能对SW480细胞产生明显的抑制作用;病理观察发现,经蜘蛛香提取物及5-FU作用后的SW480细胞,呈明显的凋亡状态;流式细胞仪检测发现,蜘蛛香提取物能使S期和G2/M期细胞百分比增加;细胞脱落实验进一步表明,与空白对照组相比,各药物组均能增强细胞的脱落率,抑制细胞的增殖,具有极显著性差异(P<0.01);划痕和同质性黏附实验表明,蜘蛛香提取物能显著降低结肠癌SW480细胞的移动能力(P<0.05)。结论:蜘蛛香提取物对人结肠癌SW480细胞有明显的增殖抑制和抗转移作用。     

汉黄芩素调控胆绿素还原酶A对结肠癌细胞的抑制作用

目的探讨汉黄芩素对结肠癌HT29及SW620细胞的抑制作用及可能机制。方法取筛选出的结肠癌HT29及SW620细胞,分别予不同质量浓度汉黄芩素(0、20、40、80、160μg/mL)及5-FU(12.5μg/mL)干预后,采用MTT检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,Transwell检测细胞迁移和侵袭,Western blot检测凋亡因子BAX、Bcl-2及EMT相关蛋白表达,Western blot、RT-PCR检测BLVRA蛋白及mRNA表达。结果汉黄芩素能抑制结肠癌HT29及SW620细胞的增殖,且呈时间及浓度依赖性(P0.01);促进细胞凋亡,抑制Bcl-2蛋白的表达,促进BAX蛋白的表达,抑制结肠癌细胞的迁移和侵袭能力,呈浓度依赖性(P0.01);汉黄芩素能够增加E-Cadherin的表达,降低Vimentin及snail蛋白的表达,抑制EMT进程,呈浓度依赖性(P0.05,P0.01);不同浓度汉黄芩素均能降低两种CRC细胞中BLVRA的蛋白表达(P0.05,P0.01)。结论汉黄芩素能够抑制结肠癌HT29及SW620细胞的增殖及迁移和侵袭能力,促进肿瘤细胞凋亡,抑制肿瘤EMT进程,且随着药物浓度升高其抑制作用呈现出时间和浓度依赖性,这些作用可能是通过下调胆绿素还原酶A(BLVRA)的表达发生。     

苦参碱抑制Akt信号通路诱导结肠癌SW480细胞凋亡

目的:研究苦参碱对人结肠癌SW480细胞的促凋亡作用及其可能的分子机制。方法:噻唑蓝比色法(MTT)测定苦参碱对SW480细胞株增殖的影响;Hoechst33258染色检测苦参碱对SW480细胞凋亡的影响,流式细胞术检测细胞凋亡率;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测苦参碱对SW480细胞中总蛋白激酶B(Akt),磷酸化蛋白激酶B(p-Akt),B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2),Bcl-2相关X蛋白(Bax)表达的干预作用。结果:苦参碱(0.25,0.5,1.0,1.5,2.0 g·L~(-1))能浓度和时间依赖性地抑制SW480细胞增殖。作用24,48,72 h的半数抑制浓度(IC50)分别为1.72,1.08,0.67 g·L~(-1),Hochest33258染色和流式细胞术结果显示苦参碱能显著诱导细胞凋亡(P0.01),随着药物质量浓度的提高,细胞凋亡率逐渐上升。Western blot检测显示,SW480细胞加入苦参碱后,胞内总Akt的含量无显著变化,但p-Akt的生成被显著抑制,凋亡抑制性蛋白Bcl-2表达降低,促凋亡蛋白Bax表达增高(P0.05)。结论:苦参碱能够诱导SW480细胞凋亡,该药理作用可能与苦参碱对Akt信号通路的抑制有关。     

紫草素对宫颈癌细胞株Caski侵袭迁移及Wnt/β-catenin信号通路的影响

目的:探讨紫草素对宫颈癌细胞株Caski细胞侵袭迁移及Wnt/β-catenin信号通路的影响。方法:采用MTT法检测细胞增殖抑制情况;采用Transwell小室侵袭迁移实验检测Caski细胞侵袭迁移情况;采用qPCR方法检测Caski细胞GSK-3β、Wnt2B表达情况;采用Western bloting方法检测Caski细胞β-Catenin、p-β-Catenin蛋白含量。结果:紫草素可抑制Caski细胞的增殖,具有时间-浓度依赖性,并可抑制细胞的侵袭迁移,增加Caski细胞GSK-3β mRNA和p-β-Catenin蛋白的表达量,减少Caski细胞Wnt mRNA和β-Catenin蛋白的表达量。结论:紫草素可能通过抑制Caski细胞Wnt/β-Catenin信号通路抑制Caski细胞的侵袭迁移。     

参白解毒方基于Wnt/β-catenin信号通路对结直肠癌细胞增殖和迁移的抑制作用

目的：研究参白解毒方对结直肠癌细胞增殖和迁移的药效及其作用机制。方法：用参白解毒方处理人结直肠癌细胞HT29、SW480和SW620,MTT和平板克隆形成实验检测细胞的增殖和自我更新能力;细胞划痕实验检测HT29细胞的迁移能力;实时定量PCR或Western Blot检测上皮-间充质转化（EMT）相关标记物（E-Cadherin、N-Cadherin和Vimentin）、Wnt5a和β-catenin的表达水平;实时定量PCR检测Wnt/β-catenin信号通路下游的结直肠癌肿瘤干细胞标志物CD44和CD133的表达水平。结果：参白解毒方可抑制结直肠癌细胞HT29、SW480和SW620的增殖（P<0.01,P<0.05）,减少HT29细胞形成克隆的数目（P<0.05,P<0.01）;细胞划痕实验结果表明参白解毒方可以显著抑制HT29细胞的迁移（P<0.05,P<0.01）,且具有剂量依赖性。实时定量PCR和Western Blot结果显示,参白解毒方可以剂量和时间依赖性的上调上皮细胞标志物E-Cadherin mRNA和蛋白的表达,下调间质细胞标...     

基于PI3K/Akt通路探讨健脾清热活血方含药血清对人结肠癌SW480细胞增殖、凋亡、周期及P-β-catenin表达的影响

目的:观察健脾清热活血方对人结肠癌SW480细胞凋亡、增殖、周期及P-β-catenin蛋白的影响,探讨该方防治结肠癌可能机制。方法:培养人结肠癌SW480细胞,分别予空白胎牛血清、不同浓度健脾清热活血方含药血清及PI3K阻断剂LY294002干预24 h,MTT法及流式细胞术检测细胞增殖、凋亡及细胞周期,免疫荧光染色法检测P-β-catenin核内转位。结果:健脾清热活血方含药血清组细胞增殖抑制率及凋亡率显著高于空白对照组(P0.05);同时S期细胞比例显著升高、G1期细胞比例显著降低(P0.05)。健脾清热活血方含药血清组及LY294002组细胞P-β-catenin以膜表达为主,而空白对照组P-β-catenin以膜表达缺失及核内表达增加为主。结论:健脾清热活血方可能通过调控P-β-catenin核内转录,阻滞SW480细胞周期于G1期,诱导细胞凋亡,抑制细胞增殖,从而发挥防治结肠癌的效用。     

西黄丸含药血清对SW480人结肠癌细胞迁移及侵袭的影响

目的:研究西黄丸对人结肠癌细胞SW480迁移及侵袭的影响,并初步探讨其作用机制。方法:以人结肠癌细胞SW480为研究对象,细胞划痕试验检测不同剂量西黄丸含药血清对SW480细胞迁移的影响,并Transwell侵袭实验检测西黄丸含药血清对细胞侵袭能力的改变;用Western blot的方法检测细胞外调节蛋白激酶(ERK)和p-ERK蛋白表达水平,RTq PCR法检测E-钙黏蛋白(E-cadherin),多聚腺苷二磷酸核糖聚合酶1(PARP-1)、波形蛋白(Vimentin)和转录因子Snail的mRNA水平。结果:与空白组比较,西黄丸含药血清可降低SW480细胞迁移及侵袭的能力,增加E-cadhenrin mRNA表达水平,并抑制PARP-1,Vimentin和Snail mRNA表达水平,明显降低ERK蛋白的磷酸化水平,均具有统计学意义(P0.05)。结论:西黄丸含药血清可抑制SW480细胞的体外侵袭及迁移,并影响上皮-间皮转化(EMT)相关基因E-cadherin,PARP-1,Vimentin和Snail的mRNA表达,其机制可能与ERK/MAPK信号通路有关,本研究为西黄丸抑制结肠癌转移提供了科学证据。     

藤黄酸对人结肠癌SW480细胞增殖及VEGFR2表达的影响

目的:观察藤黄酸对人结肠癌SW480细胞增殖和血管内皮细胞受体2(VEGFR2)表达的影响,探讨其可能抗肿瘤的作用机制。方法:以不同浓度的藤黄酸干预体外培养的人结肠癌细胞株SW480,分别于24、36、48h后,应用MTT法检测细胞增殖活性,流式细胞仪检测细胞周期分布和细胞凋亡率,Western-blot分析VEGFR2蛋白的变化。结果:藤黄酸对结肠癌细胞株SW480生长增殖具有明显抑制作用,其效应呈浓度和时间依赖性。流式细胞仪分析显示SW480细胞呈G2/M期阻滞;SW480细胞的凋亡率随藤黄酸浓度增加逐步上升。用不同浓度的藤黄酸处理SW480细胞株24h,VEGFR2蛋白的表达随药物浓度的增加而减少(P<0.01)。结论:藤黄酸能够明显抑制人结肠癌细胞株SW480的增殖,诱导SW480细胞发生G2/M期阻滞,其作用机制可能与抑制VEGFR2表达有关。     

桂枝茯苓丸对宫颈癌细胞生物学行为的影响及作用机制

目的:探究桂枝茯苓丸对宫颈癌Hela细胞生物学行为的影响及其作用机制。方法:通过MTT检测不同浓度(200、400mg/ml)桂枝茯苓丸处理宫颈癌Hela细胞24、48h后对其增殖的影响;克隆形成实验检测不同浓度(200、400mg/ml)桂枝茯苓丸对宫颈癌Hela细胞克隆形成的影响;Transwell法检测桂枝茯苓丸对Hela细胞侵袭与迁移的影响;通过western blot检测PTEN和p-AKT等通路蛋白在Hela细胞中的表达水平,探究桂枝茯苓丸对Hela细胞可能存在的作用机制。结果:桂枝茯苓丸可显著抑制Hela细胞的增殖,且呈一定的时间和浓度依赖性;200和400mg/ml的桂枝茯苓丸均可显著降低Hela细胞的克隆形成、抑制其侵袭和迁移,且呈剂量依赖性。使用400mg/ml的桂枝茯苓丸处理Hela细胞48h,发现桂枝茯苓丸能够上调PTEN蛋白的表达,同时下调p-AKT蛋白的表达,进而抑制宫颈癌细胞恶性表型。结论:桂枝茯苓丸可通过上调PTEN蛋白的表达抑制AKT途径中AKT蛋白的磷酸化,进而抑制Hela细胞的增殖、克隆形成以及迁移侵袭等恶性细胞行为。     

黄芩苷对人结肠癌SW480细胞增殖和凋亡的影响及机制研究

目的基于STAT3/Bcl-2信号通路探究黄芩苷对人结肠癌SW480细胞增殖和凋亡的影响。方法实验分为空白组及黄芩苷25,50,100,200,400μg/mL组,空白组用不含黄芩苷Gibco RPMI 1640培养基培养,黄芩苷各组采用相应浓度黄芩苷培养,分别处理结肠癌SW480细胞24 h后,采用CCK-8法、Edu染色法、Annexin V-FITC/PI法检测经上述处理细胞的增殖和凋亡情况,采用Western blot法检测人结肠癌SW480细胞中促进凋亡相关蛋白Bax、Caspase-3和抑制凋亡相关蛋白Bcl-2以及转录相关蛋白STAT-3的表达情况。结果黄芩苷各组的细胞增殖率均明显低于空白组(P均0.05),且细胞增殖率随着黄芩苷浓度的增高而缓慢下降,当黄芩苷浓度达400μg/mL时,增殖率下降1/4;人结肠癌SW480细胞凋亡率有随着黄芩苷浓度的增加而逐渐升高的趋势。随着黄芩苷浓度的增加,Bax蛋白表达量逐渐增加,黄芩苷100,200,400μg/mL组明显高于空白组(P均0.05),但黄芩苷200μg/mL和400μg/mL组比较差异无统计学意义(P0.05);STAT-3和Bcl-2蛋白表达量逐渐降低,黄芩苷50,100,200,400μg/mL组均明显低于空白组(P均0.05);黄芩苷50,100,200,400μg/mL组Caspase-3蛋白表达量呈下降趋势,但与空白组比较差异均无统计学意义(P均0.05)。结论黄芩苷能诱导人结肠癌SW480细胞凋亡并抑制其增殖,且与黄芩苷浓度呈一定的量效关系,其机制可能与调节STAT3/Bcl-2通路有关。     

姜黄素调控结肠癌SW480细胞skp2-p27kip通路的研究

目的：探讨姜黄素抑制结肠癌细胞增殖并促进其凋亡的分子机制。方法：通过MTT检测不同浓度姜黄素（0,7.5,15,30,60μmol/L）处理结肠癌细胞SW480后凋亡情况;通过蛋白免疫印迹方法检测不同浓度姜黄素（0,7.5,15,30,60μmol/L）处理结肠癌细胞后细胞中skp2、p27kip蛋白表达情况。结果：姜黄素能抑制结肠癌细胞SW480增殖并促进其凋亡,有浓度和时间依赖;姜黄素降低了结肠癌细胞SW480中skp2蛋白的表达（P〈0.05）,而促进了p27kip蛋白的表达,有时间和剂量依赖,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论：姜黄素能抑制结肠癌细胞SW480的增殖并促进其凋亡,有时间和剂量依赖,这种抗癌效应可能与干扰skp2-p27kip通路有关。     

消痰通腑方对结肠癌SW480细胞磷脂酶A2、环氧合酶2表达及细胞生物学行为的影响

目的观察消痰通腑方对结肠癌SW480细胞增殖、迁移的影响,探讨其分子作用机制。方法采用不同浓度消痰通腑方作用结肠癌SW480细胞,CCK8法和平板克隆形成实验检测细胞增殖,Transwell小室实验检测细胞迁移能力,RT-q PCR检测磷脂酶A2(PLA2)和环氧合酶2(COX-2)m RNA表达,Western blot检测PLA2和COX2蛋白表达,RNA干扰技术沉默SW480细胞株中PLA2基因表达。结果消痰通腑方低、高剂量组较对照组结肠癌SW480细胞增殖能力明显减弱(P0.05),克隆形成率及迁移能力明显下降(P0.05,P0.01),PLA2、COX-2 m RNA和蛋白表达均明显下调(P0.05),并呈浓度依赖性;与质粒对照组和对照组比较,PLA2 sh RNA干扰组细胞PLA2和COX2蛋白表达明显下调(P0.05)。结论消痰通腑方可抑制结肠癌SW480细胞增殖和迁移,其机制可能与PLA2及COX-2的表达下调有关。     

连翘提取物通过 PI3K-AKT-mTOR 信号通路逆转结肠癌氟尿嘧啶耐药细胞株的研究

目的:通过体外实验观察中药连翘提取物对结肠癌氟尿嘧啶(5-FU)耐药细胞株的作用及机制。方法:构建结肠癌5-FU耐药细胞株SW480R,并运用MTT、流式细胞术、Western Blot检测不同浓度连翘提取物对SW480R的抑制增殖、诱导凋亡以及蛋白磷脂酰肌醇3-激酶(Phosphatidylinositide 3-kinases,PI3K)、磷酸化蛋白激酶B (Phosphorylated-protein kinase B,PAKT)、蛋白激酶B (Protein kinase B,AKT)、磷酸化雷帕霉素靶蛋白(Phosphorylated-mammalian target of rapamycin,P-mTOR)、雷帕霉素靶蛋白(Mammalian target of rapamycin,mTOR)、磷酸化真核翻译起始因子4E结合蛋白1 (Phosphorylated-eukaryotic translation initiation factor 4E-binding protein 1,P-4EBP1)、真核翻译起始因子4E结合蛋白1 (Eukaryotic translation initiation factor4E-binding protein 1,4EBP1)的表达。结果:经过5-FU长期诱导,构建培养而得到结肠癌5-FU耐药细胞株SW480R的半抑制浓度(The half maximal inhibitory concentration,IC50)为62.68μmol/L,而正常结肠癌细胞SW480的IC50为13.54μmol/L。与对照组比较,不同浓度连翘提取物对SW480R有抑制增殖作用(P 0.05),且呈剂量依赖性,其IC50剂量为13.63μmol/L。与对照组比较,不同浓度连翘提取物能使活化型半胱天冬酶3 (Cleaved-Caspase 3)、活化型半胱天冬酶9 (Cleaved-Caspase 9)的表达增加,原型Caspase 3、Caspase 9的表达下降,同时显著下调信号通路蛋白PI3K、P-AKT、P-mTOR、P-4EBP1的表达(P 0.05)。结论:连翘提取物能从体外明显抑制结肠癌5-FU耐药细胞株SW480R的生长,诱导凋亡,其作用机制可能通过抑制PI3K-AKTmTOR信号通路,最终起到抑制肿瘤生长的作用。     

Effects of Arctigenin on Cell Proliferation of Colorectai Cancer and Its Mechanism

目的:探讨牛蒡子苷元对结肠癌细胞系SW480增殖的影响及相关机制.方法:以结肠癌细胞系SW480为研究对象,通过MTT比色法检测牛蒡子苷元对SW480细胞生长速度和倍增时间的影响;通过软琼脂克隆形成实验观察牛蒡子苷元对SW480细胞软琼脂集落形成率的影响;应用RT-PCR技术探讨牛蒡子苷元对SW480细胞增殖的相关机制.结果:①不同浓度牛蒡子苷元处理的SW480细胞生长速度明显减慢,倍增时间显著延长,并且呈现一定的浓度和时间依赖性;②SW480亲本细胞和牛蒡子苷元(20 mg/L)处理24h的SW480细胞的克隆形成率分别为24.933％和4.533％(P＜0.01),与SW480亲本细胞相比,牛蒡子苷元(20 mg/L)处理24小时的SW480细胞形成的克隆体积较小;③与SW480亲本细胞相比,20 mg/L牛蒡子苷元处理的SW480细胞中,eyclin A 基因表达没有明显变化,p21基因表达上调,而cyclin B.cyclin E基因表达下调.结论:①牛蒡子苷元可抑制SW480细胞的增殖能力.②诱导p21基因表达上调,cyclin B和cyclin E基因表达下调是牛蒡子苷元抑制SW480细胞增殖的可能机制.     

姜黄素联合氟尿嘧啶对结肠癌细胞增殖凋亡迁移作用

目的:探索姜黄素调控上皮细胞间质转化(EMT)增敏5-FU的抗肿瘤作用。方法:采用姜黄素、5-FU不同给药浓度诱导结肠癌细胞株HCT8的凋亡,MTT法及克隆形成实验检测细胞增殖;划痕实验检测细胞迁移能力;Compusyn软件分析姜黄素的增敏效力;流式细胞术检测细胞凋亡情况;WesternBlot检测E-Cadherin、N-Cadherin、vimentin、cleaved-Caspase3、snail、β-catenin蛋白的表达量。结果:姜黄素能抑制HCT8细胞的增殖;6μmol/L姜黄素显著促进8μmol/L 5-FU对HCT8细胞的生长抑制和凋亡作用,联合药物指数(CI)值=0.7576;联合用药后降低HCT8细胞迁移能力,上调cleaved-Caspase3、E-Cadherin蛋白表达,同时抑制N-Cadherin、snail、β-catenin、vimentin蛋白表达。结论:姜黄素增加5-FU对HCT8细胞的敏感性,其机制可能与抑制EMT、诱导细胞凋亡有关。