人参皂苷Rg3对膀胱癌细胞血管生成相关蛋白的表达及癌细胞生长和转移的影响

目的探讨人参皂苷Rg3对表皮生长因子受体酪氨酸蛋白激酶(EGFR-TPK)和DNA拓扑异构酶I(DNA TOP I)的抑制作用,并阐明其对膀胱癌细胞增殖、侵袭和血管生成的抑制作用机制。方法不同浓度人参皂苷Rg3加入到EGFR-TPK、DNA TOP I和人膀胱癌细胞株S637中,用ELISA法研究人参皂苷Rg3对EGFR-TPK和DNA TOP I的抑制作用;溴化3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑(MTT)法测定人参皂苷Rg3对人膀胱癌细胞株S637细胞和人正常膀胱上皮细胞(SV-HUC-1)生长的抑制作用;Transwell法检测人参皂苷Rg3对S637细胞侵袭的抑制作用;酶标仪法检测人参皂苷Rg3对细胞凋亡蛋白Caspase-3活性的影响;Western blot法检测人参皂苷Rg3存在下,人膀胱癌细胞株S637中还氧化酶-2(COX-2)、血管内皮生长因子(VEGF)、缺氧诱导因子1α(HIF-1α)、小窝蛋白-1(CAV-1)及干细胞标志物(SOX-2)的表达。结果人参皂苷Rg3对EGFR-TPK和DNA TOP I(半抑制率IC_(50)分别为35.32±3.12和8.32±1.21μmol·L~(-1))、S637细胞生长(半抑制率IC_(50)为35.11±2.32μmol·L~(-1))都具有良好的抑制能力,但对于SV-HUC-1细胞,人参皂苷Rg3则表现了较低的毒性;人参皂苷Rg3与空白对照组比较能够诱导肿瘤细胞穿过滤膜的数量减少(P0.01);与空白对照组比较,人参皂苷Rg3能显著提高S637细胞中Caspase 3活性(P0.05);人参皂苷Rg3能够下调HIF-1α、COX-2、SOX-2及VEGF的表达,上调CAV-1的表达(P0.05,P0.01)。结论低毒性的人参皂苷Rg3通过多靶向的降低EGFR-TPK、DNA TOP I活性和HIF-1α、COX-2、SOX-2及VEGF的表达,上调CAV-1的表达和激活Caspase 3活性的方式,对膀胱肿瘤细胞的侵袭、增殖和血管生成产生抑制作用。     

清肺益气方对肺癌干细胞样细胞增殖的抑制作用及其机制研究

目的观察清肺益气方对肺癌干细胞样细胞(CICs)增殖的抑制作用及其可能的作用机制。方法人肺癌细胞株A549经传代培养后,采用清肺益气方含药血清进行干预,采用MTT比色法检测肺癌细胞的增殖情况,流式细胞术检测细胞凋亡情况,实时荧光定量PCR法和Western blot法检测p53和Caspase-3基因和蛋白的表达,ELISA法检测VEGF和HIF-1α的表达,Transwell小室侵袭实验法检测肺癌CICs体外侵袭能力变化。结果清肺益气方组细胞增殖抑制率显著高于阴性对照组和空白对照组(P0.05)。且随着含药血清浓度的增加,其抑制肺癌细胞增殖的作用逐渐增强,呈浓度依赖性,根据公式计算得到清肺益气方的IC50为80.12μmol/m L,且随着给药时间的延长,肺癌细胞形态逐渐皱缩变形,坏死脱落。与空白对照组及阴性对照组比较,清肺益气方组细胞凋亡率明显增加(P0.05)。清肺益气方处理组细胞中Caspase-3和p53基因mRNA和蛋白的表达水平均显著高于阴性对照组和空白对照组(P均0.05)。清肺益气方处理组细胞上清液中VEGF和HIF-1α的表达水平均显著低于阴性对照组和空白对照组(P均0.05)。清肺益气方处理组的侵袭细胞数显著低于阴性对照组和空白对照组(P均0.05)。结论清肺益气方对肺癌CICs具有显著的抑制作用,其机制可能通过上调凋亡抑制基因和蛋白p53和Caspase-3的表达,促进肺癌CICs的凋亡,削弱肺癌CICs的迁移与侵袭能力,并抑制VEGF和HIF-1α的表达,抑制肿瘤血管的生成等多个靶点发挥抗肿瘤增殖的作用。     

探讨人参皂苷Rg3存在下膀胱癌细胞血管生成相关蛋白的表达与癌细胞生长和转移的关系

摘 要 目的：探讨人参皂苷Rg3对表皮生长因子受体酪氨酸激酶(EGFR-TPK)和DNA拓扑异构酶I(DNA TOP I)的抑制作用,并阐明其对膀胱癌细胞增殖、侵袭和血管生成抑制作用机制。方法 不同浓度人参皂苷Rg3组加入到EGFR-TPK、DNA TOP I和人膀胱癌细胞株S637中,利用ELISA法研究了人参皂苷Rg3对EGFR-TPK和DNA TOP I的抑制作用,利用MTT法测定山人参皂苷Rg3对S637细胞和人正常膀胱上皮细胞(SV-HUC-1)生长的抑制作用,Transwell法检测人参皂苷Rg3对人膀胱癌细胞株S637侵袭的抑制作用,酶标仪法检测人参皂苷Rg3对细胞凋亡蛋白Caspase-3活性的影响,Western blot法检测人参皂苷Rg3存在下,人膀胱癌细胞株S637中COX-2、VEGF、HIF-1α及β-Actin的表达。结果 人参皂苷Rg3对EGFR-TPK和DNA TOP I(半抑制率IC50分别为35.32±3.12和8.32±1.21 μmol/L)、人膀胱癌细胞株S637生长(半抑制率IC50为35.11±2.32 μmol/L)都具有良好的抑制能力,但对于SV-HUC-1细胞,人参皂苷Rg3则表现了较低的毒性;人参皂苷Rg3与空白组相比能够诱导肿瘤细胞穿过人工基底膜的数量减少,有显著性差别(p<0.05);与空白组相比,人参皂苷Rg3能显著提高人膀胱癌细胞株S637中凋亡蛋白 Caspase 3活性(P＜0.05);人参皂苷Rg3能够下调HIF-1α、COX-2及VEGF的表达。结论 低毒性的人参皂苷Rg3可能通过降低EGFR-TPK、DNA TOP I活性和HIF-1α、COX-2及VEGF的表达,激活Caspase 3活性的方式,对膀胱肿瘤细胞的侵袭、增殖和血管生成产生抑制作用。     

复方苦参注射液对泪腺腺样囊性癌ACC-2细胞增殖、凋亡及Caspase-3蛋白表达的影响

目的探讨复方苦参注射液对泪腺腺样囊性癌ACC-2细胞增殖、凋亡及Caspases-3蛋白表达的影响。方法体外培养人泪腺腺样囊性癌ACC-2细胞,应用MTT法检测细胞增殖;AnnexinV/PI双染色流式细胞仪检测细胞凋亡和细胞周期;ELISA法检测Caspases-3蛋白表达。结果复方苦参注射液对ACC-2细胞的体外增殖具有抑制作用,量效关系显著,与对照组比较有统计学差异(P<0.01),半数抑制浓度(IC50)为0.84g/ml。经流式细胞仪检测表明,复方苦参注射液能使ACC-2细胞G0-G1期逐渐增加,G2-M期和S期逐渐减少,并且随着剂量的增加,ACC-2细胞凋亡率明显增加(P<0.05或P<0.01)。复方苦参注射液能增强ACC-2细胞Caspases-3蛋白的表达(P<0.05或P<0.01),并呈剂量依赖性。结论复方苦参注射液能有效抑制人泪腺腺样囊性癌ACC-2细胞Caspases-3蛋白表达,诱导ACC-2细胞凋亡,抑制肿瘤细胞增殖。     

血满草多糖介导巨噬细胞M1型极化抑制肺癌的作用机制研究

目的：探讨血满草多糖（SPS-1）调控巨噬细胞极化对小鼠肺癌细胞Lewis细胞迁移、侵袭及凋亡的影响。方法：采用Western blot检测SPS-1对IL-4诱导的M2型巨噬细胞RAW264.7膜表面分子CD206、CD86的表达水平，采用RT-qPCR检测RAW264.7细胞炎性因子TNF-α、IL-10、TGF-β及特异性iNOS和Arg-1 mRNA表达水平的影响。共培养条件下，采用Transwell法检测SPS-1对Lewis细胞迁移与侵袭能力的影响，采用ELISA技术检测Lewis细胞中HIF-1α和VEGF的分泌量，采用流式细胞术检测Lewis细胞的凋亡，采用Western blot检测转移相关蛋白N-Cadherin、E-Cadherin和Vimentin及凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax的表达水平。结果：SPS-1可显著增加M2型RAW264.7细胞膜表面分子CD86/CD206的比例，TNF-α和iNOS mRNA显著上调，IL-10、TGF-β和Arg-1 mRNA的表达量显著下调。共培养条件下，SPS-1显著抑制Lewis细胞的侵袭和迁移，并降低HIF-1α和VEGF的分泌及N-cadherin和Vimentin的表达，同时显著上调E-Cadherin的表达。凋亡实验结果显示，SPS-1亦可显著促进Lewis细胞的凋亡。结论：SPS-1可通过调控RAW264.7细胞极化抑制Lewis细胞的转移和凋亡。     

天冬多糖低氧下抑制肝癌作用的体外实验研究

目的探讨低氧环境下天冬多糖对人肝癌细胞生长的影响及初步作用机制。方法氯化钴(CoCl2)化学模拟低氧下培养4种人肝癌细胞株(HepG2、Hep3B、SMMC-7721及Bel-7402),加入不同浓度的天冬多糖(0mg/m L、0. 9 mg/m L、1. 2 mg/m L、1. 8 mg/m L、2. 4 mg/m L、2. 7 mg/m L、3. 6 mg/m L)培养,CCK-8法检测天冬多糖对4种人肝癌细胞株细胞增殖的影响,根据IC50选取0. 9 mg/m L、1. 8 mg/m L、2. 7 mg/m L作为后续实验的天冬多糖低、中、高剂量浓度。后续实验4种细胞均设6组:常氧对照组只加入培养液培养;低氧对照组加入200μmol/L CoCl2培养;低氧低剂量组加入200μmol/L CoCl2+0. 9 mg/m L天冬多糖培养;低氧中剂量组加入200μmol/L CoCl2+1. 8 mg/m L天冬多糖培养;低氧高剂量组加入200μmol/L CoCl2+2. 7 mg/m L天冬多糖培养;常氧高剂量组加入2. 7 mg/m L天冬多糖培养。培养24 h后,Real-time PCR检测各组血管内皮生长因子(VEGF)、Bax、Bcl-2 mRNA表达情况,Western-blot方法检测各组缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、VEGF、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、Cleaved Caspase-3蛋白表达情况。结果低氧下天冬多糖可明显抑制人肝癌细胞株的生长,且抑制作用呈剂量依赖性。天冬多糖可明显抑制HIF-1α、VEGF、MMP-9蛋白表达及VEGF mRNA、Bcl-2mRNA表达,促进Cleaced Caspase-3蛋白及Bax mRNA表达,且低氧下高剂量作用最明显。结论天冬多糖在体外低氧条件下能抑制肝癌细胞的生长,其可能通过抑制HIF-1α/VEGF表达及肝癌细胞的侵袭、促进肝癌细胞凋亡起到抗肝癌的作用。     

亚麻木酚素对肺癌A549细胞的抑制作用及其机制

目的观察亚麻木酚素(SDG)对肺癌A549细胞增殖、侵袭和凋亡的影响及机制。方法在体外培养的肺癌A549细胞株中加入不同浓度的SDG(5、10、20、40μmol/L),MTT观察细胞增殖情况;Transwell小室评价细胞侵袭能力;Hochest染色观察细胞凋亡情况;比色法检测半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)活性;Real Time PCR、Western Blotting检测基质金属蛋白酶-2(MMP-2)mRNA和蛋白表达。结果 SDG呈时间-浓度依赖性抑制A549细胞的增殖(P<0.05)。细胞侵袭能力明显下降、凋亡比率和Caspase-3活性明显升高、MMP-2 mRNA和蛋白的表达显著下降(P<0.05)。结论 SDG呈时间和剂量依赖性抑制A549细胞的增殖和侵袭,其机制可能与其促凋亡、抑制MMP-2的表达有关。     

人参皂苷Rg3在低氧条件下诱导人喉鳞癌细胞(Hep-2)凋亡及对HIF-1α表达的影响

目的:研究在低氧条件下人参皂苷Rg3对人喉鳞癌细胞(Hep-2)生长的抑制作用以及可能的机制.方法:体外低氧培养Hep-2人喉鳞癌细胞株,同时设立阴性对照组与阳性对照组(顺铂),采用MTT法检测常氧和低氧条件下,人参皂苷Rg3对Hep-2生长的抑制作用;流式细胞术测定各组细胞周期分布及细胞凋亡情况;应用免疫细胞化学技术和流式细胞技术检测Hep-2细胞在人参皂苷Rg3作用下HIF-1α蛋白表达的变化;应用RT-PCR技术检测HIF-1α mRNA表达的变化.结果:不同浓度的Rg3对Hep-2细胞的生长均有抑制作用,且呈剂量依赖关系.常氧和低氧条件下Rg3处理后细胞均阻滞于G0/G1期,低氧Rg3组凋亡率增加.Rg3不同氧供条件下均能下调因缺氧增加的HIF-1α的蛋白表达,同时下调HIF-1α mRNA水平.结论:人参皂苷Rg3对人喉鳞癌细胞Hep-2生长有抑制作用,其抑制作用可能是通过抑制细胞周期进程,诱导细胞凋亡实现的.缺氧条件下Rg3抑制HIF-1α的表达,可能是Rg3抗肿瘤作用的机制之一.     

金雀异黄酮对体外培养成骨细胞抗缺氧的机制研究

目的:观察金雀异黄酮对缺氧成骨细胞的抗缺氧作用。方法:以大鼠成骨细胞为材料,用三气培养箱建立缺氧模型。设常氧对照组、缺氧对照组和含不同浓度金雀异黄酮的缺氧加药组。比较各组缺氧36 h后细胞活力、ROS含量、细胞凋亡、细胞周期、PCNA表达i、NOS活性和钙化结节面积等,荧光定量PCR检测HIF-1α、BCL-2及Caspase-3 mRNA的表达。结果:金雀异黄酮显著提高缺氧成骨细胞存活率、G1期细胞百分比、钙化结节面积、HIF-1α和BCL-2 mRNA的表达水平,降低凋亡、ROS含量、PCNA表达量i、NOS酶活性和Caspase-3 mRNA表达。结论:金雀异黄酮能保护缺氧成骨细胞并促进其分化。     

术前应用复方苦参注射液对结肠癌细胞的影响及机制研究

目的 观察术前应用复方苦参注射液对结肠癌细胞的影响,并对其机制进行分析.方法 将42例结肠癌并接受手术的患者分为2组.治疗组22例术前予复方苦参注射液治疗5d后进行手术,对照组20例直接手术.记录2组手术及术后情况,术后检测2组肿瘤组织细胞周期及凋亡率,比较2组肿瘤细胞水通道蛋白1 (AQP1) mRNA、增殖细胞核抗原(PCNA) mRNA及生存素(Survivin) mRNA水平变化.结果 2组手术及术后情况比较差异均无统计学意义(P＞0.05).与对照组比较,治疗组G0/G1期肿瘤组织细胞增加(P＜0.05),S期、G2/M期肿瘤组织细胞减少(P＜0.05),凋亡率增高(P＜0.05).治疗组AQP1 mRNA、PCNA mRNA及Survivin mRNA水平均明显低于对照组(P＜0.05).结论 复方苦参注射液可抑制结肠癌细胞增殖,促进凋亡,其机制可能与调控AQP1 mRNA、PCNA mRNA及Survivin mRNA表达有关.     

隐丹参酮通过调节SIRT3/HIF-1α信号轴和线粒体自噬抑制MDA-MB-231细胞增殖迁移的研究

目的:研究隐丹参酮对MDA-MB-231细胞SIRT3/HIF-1α信号通路和线粒体自噬的影响,探讨隐丹参酮抑制MDA-MB-231细胞增殖和迁移的机制。方法:培养三阴性乳腺癌细胞(MDA-MB-231),分为空白对照组及隐丹参酮低(5μmol/L)、中(10μmol/L)、高(20μmol/L)浓度组,Western blot检测各组细胞SIRT3、HIF-1α、VEGF、Parkin、PINK1蛋白表达;划痕实验检测各组细胞迁移率;流式细胞术检测各组细胞凋亡情况。结果:与空白对照组比较,隐丹参酮处理组SIRT3、Parkin、PINK1表达上调,HIF-1α、VEGF表达下调,MDA-MB-231迁移率显著降低,细胞凋亡率显著升高。结论:隐丹参酮可通过调节SIRT3/HIF-1α信号通路,促进线粒体自噬进而抑制MDA-MB-231细胞的增殖和迁移。     

复方苦参注射液诱导自噬促进膀胱癌细胞凋亡机制的研究

目的 探究复方苦参注射液对膀胱癌T24细胞增殖、凋亡及自噬的影响,并探究其可能的分子机制,为复方苦参注射液在临床上治疗膀胱癌提供理论依据。方法 CCK-8法检测复方苦参注射液对T24细胞增殖的影响。流式细胞术检测复方苦参注射液对T24细胞凋亡的影响。MDC染色法检测复方苦参注射液对T24细胞自噬的影响。蛋白免疫印迹和免疫荧光实验检测复方苦参注射液对T24细胞凋亡关键蛋白和自噬关键蛋白的影响。结果 复方苦参注射液能有效抑制T24细胞增殖。复方苦参注射液能诱导T24细胞发生凋亡和自噬。蛋白免疫印迹和免疫荧光实验结果表明,随着复方苦参注射液剂量的升高,T24细胞中B细胞淋巴瘤2（Bcl-2）、自噬选择性底物（P62）的表达逐渐下降,B细胞淋巴瘤2相关X蛋白（Bax）、活化的天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶（cleaved-Caspase 3）、自噬关键分子酵母Atg6同系物（Beclin1）、微管相关蛋白B轻链3-Ⅱ（LC3Ⅱ）的表达逐渐升高（P<0.05）,Bcl-2/Bax比值逐渐减小（P<0.05）。结论 复方苦参注射液能抑制T24细胞的增殖、调节T24细胞自噬,诱导T24细胞凋亡。     

清脑滴丸下调HIF-1α/BNIP3表达拮抗氧糖剥夺/复氧诱导C6胶质细胞凋亡

目的研究清脑滴丸对氧糖剥夺诱导C6胶质细胞损伤的HIF-1α/BNIP3以及细胞凋亡的影响及机制。方法采用氧糖剥夺/复氧方法建立C6胶质细胞损伤模型。细胞分为正常组、模型组、清脑滴丸组。采用Western Blot法检测各组HIF-1α、BNIP3、Cleaved Caspase-3蛋白表达,免疫荧光染色法观察各组HIF-1α、Cleaved Caspase-3的表达,流式细胞术检测细胞凋亡率。结果与正常组比较,模型组细胞活力降低(P0.01),HIF-1α、BNIP3、Cleaved Caspase-3表达增加(P0.01,P0.05),细胞凋亡率明显升高(P0.01);与模型组比较,清脑滴丸1.25 g/L组细胞活力升高(P0.05),HIF-1α、BNIP3、Cleaved Caspase-3表达和细胞凋亡率均降低(P0.01,P0.05)。结论清脑滴丸抑制C6胶质细胞凋亡的作用机制可能与通过下调HIF-1α和BNIP3过表达,降低Cleaved Caspase-3表达有关。     

益气养精方对人肺癌A549细胞糖酵解通路中HIF-1α和PFKFB3蛋白的调节作用

目的:研究益气养精方对人肺癌A549细胞糖酵解过程及糖酵解相关蛋白的调节作用。方法:采用不同浓度益气养精方干预A549后肺癌细胞,CCK-8法检测不同时间内的增殖抑制作用;采用乳酸试剂盒检测细胞乳酸生成量;Annexin V-PI双染法检测A549细胞的凋亡率; Western blot法检测A549细胞中糖酵解相关蛋白缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、6-磷酸果糖-2-激酶(PFKFB3)的表达。结果:益气养精方能抑制A549肺癌细胞株的增殖,高浓度的益气养精方对A549细胞具有明显的促进凋亡作用,益气养精方能降低肺癌细胞糖酵解产物即乳酸生成量,在蛋白水平对肺癌细胞糖酵解相关蛋白HIF-1α、PFKFB3的表达有下调作用。结论:益气养精方能抑制肺癌A549增殖作用,可能与抑制肺癌细胞糖酵解有关,其中抑制细胞糖酵解相关蛋白HIF-1α和PFKFB3可能是作用机制之一。     

复方苦参注射液联合表柔比星对膀胱癌细胞凋亡的影响

目的:探究复方苦参注射液、表柔比星及两药联合应用对人膀胱癌T24细胞增殖、凋亡的影响及其机制。方法:将膀胱癌T24细胞分为空白对照组、复方苦参注射液60μl/ml组、表柔比星4.6μmol/L组及联合给药(复方苦参注射液60μl/ml+表柔比星4.6μmol/L)组。CCK-8法观察膀胱癌T24细胞增殖,流式细胞术检测膀胱癌T24细胞凋亡,蛋白免疫印迹实验检测膀胱癌T24细胞凋亡关键蛋白的表达情况。结果:与空白对照组相比,复方苦参注射液60μl/ml和表柔比星4.6μmol/L能显著抑制膀胱癌T24细胞增殖(P<0.01),且联合用药能起到协同增效作用(P<0.01)。复方苦参注射液60μl/ml和表柔比星4.6μmol/L能显著诱导膀胱癌细胞凋亡(P<0.01),两药联合使用促进凋亡作用更加明显(P<0.01)。复方苦参注射液60μl/ml和表柔比星4.6μmol/L能下调膀胱癌细胞凋亡相关蛋白pro-Caspase 3和Bcl-2的表达(P<0.05),上调Cleaved PARP、Bax和Cleaved-Caspase 3蛋白的表达(P<0.05),降低Bcl-2/Bax比值(P<0.05),联合用药作用更加明显(P<0.05)。结论:复方苦参注射液与表柔比星能够抑制膀胱癌细胞增殖,促进膀胱癌细胞凋亡,两药联合应用起到协同增效作用。     

黄芪甲苷通过调控ET-1对糖氧剥夺致损伤星形胶质细胞中 NLRP3通路的影响北大核心

目的:研究黄芪甲苷通过调控内皮素(ET-1)影响星形胶质细胞中NLRP3通路的作用机制。方法:糖氧剥夺构建星形胶质细胞损伤模型,用qRT-PCR检测细胞中ET-1 mRNA表达,鉴定造模成功与否。CCK-8法筛选黄芪甲苷对模型细胞干预的最佳作用浓度(30μmol/L)和时间(24 h)。细胞分为5组:正常对照组、模型组、心钠肽(ET-1抑制剂)组、黄芪甲苷组、联合组。CCK-8检测各组细胞的增殖能力;流式细胞术检测细胞凋亡情况;qRT-PCR检测Bax、Bcl-2、Caspase-3 mRNA表达;ELISA检测炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-18水平;Western Blot检测NLRP3通路蛋白NLRP3、Caspase-1表达。结果:与正常对照组比较,模型组细胞增殖能力及Bcl-2蛋白表达显著降低,细胞凋亡率、炎症因子水平及Bax、Caspase-3 mRNA表达和NLRP3、Caspase-1蛋白表达显著升高(P<0.05)。与模型组比较,各给药组细胞增殖能力及Bcl-2蛋白表达显著升高,细胞凋亡率、炎症因子水平及Bax、Caspase-3 mRNA表达和NLRP3、Caspase-1蛋白表达显著降低(P<0.05),其中联合组的效果最显著。结论:黄芪甲苷可通过抑制ET-1表达进而抑制NLRP3信号通路来保护缺血性星形胶质细胞损伤。     

雷公藤内酯醇联合HIF-1α抑制剂对人乳腺癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响

目的:本研究基于雷公藤内酯醇对缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)-血管内皮生长因子(VEGF)-细胞致瘤基因(c-MYC)信号通路的调控作用，探讨其与HIF-1α抑制剂联用对人乳腺癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响及作用机制。方法:不同浓度雷公藤内酯醇处理人乳腺癌细胞MCF-7不同时间，CCK-8法检测细胞增殖活力。将MCF-7细胞分为模型对照组、雷公藤内酯醇0.05μmol/L组、HIF-1α抑制剂20μmol/L组和雷公藤内酯醇0.05μmol/L+抑制剂20μmol/L组，CCK-8法检测细胞增殖活力；Transwell小室检测细胞侵袭能力；划痕试验评估细胞迁移能力；qRT-PCR法检测细胞Cmyc、Hif1a和Vegf mRNA表达；Western blot法检测细胞中兔抗基质金属蛋白酶-2抗体(MMP-2)、MMP-9、c-MYC、HIF-1α和VEGF蛋白表达。结果:随着雷公藤内酯醇处理浓度的升高及作用时间的延长，细胞增殖活力逐渐降低，雷公藤内酯醇最佳浓度为50 nmol/L,最佳作用时间为48 h。与模型对照组相比，雷公藤内酯醇组与HIF-1α抑制剂组细胞增殖和侵袭能力均明显下...     

鸡屎藤苷酸诱导SGC-7901胃癌细胞凋亡并抑制细胞恶性增殖和侵袭

目的：初步探索鸡屎藤苷酸(PA)诱导SGC-7901胃癌细胞凋亡并抑制细胞恶性增殖和侵袭的可能机制。方法：选取SGC-7901胃癌细胞为研究对象,利用CCK-8法进行浓度梯度实验确定后续实验浓度,利用流式细胞术检测0、20、40、80μg/mL的PA处理后SGC-7901胃癌细胞凋亡率以及线粒体膜电位变化情况,BrdU法和Transwell小室实验SGC-7901胃癌细胞的增殖活性以及侵袭能力,qRT-PCR检测抑癌基因P53、P21的mRNA相对表达水平,Western Blotting检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、Caspase-3、c-Myc和转移相关蛋白VEGF、波形蛋白表达水平。结果：CCK-8梯度浓度试验发现PA浓度从40μg/mL开始对SGC-7901胃癌细胞活性产生了明显抑制作用(P<0.05),后续以20、40、80μg/mL为试验浓度;与0μg/mL的PA处理比较,40、80μg/mL的PA处理后SGC-7901胃癌细胞凋亡率、Bax/Bcl-2、Cleaved-Caspase-3/Caspase-3蛋白表达水平以及P53、P21相对表达量升高,线粒体膜...     

放疗与中药“君-佐”相伍的理论运用于肝癌细胞放疗增敏效果分析

目的:分析采用放疗与中药"君-佐"相伍的理论对肝癌细胞放疗增敏效果,为临床应用提供依据。方法:将HepG2细胞分为5组,检测各组细胞克隆形成数及克隆形成率,检测各组细胞凋亡率,并分析HIF-1α、CA-9、VEGF或β-actin的蛋白及mRNA水平。结果:药物加放疗组HepG2细胞克隆形成数及克隆形成率显著低于其他组(P0.05);药物加放疗组HepG2细胞凋亡率明显高于其他组,且差异存在统计学意义(P0.05);药物加放疗组HepG2细胞HIF-1α/β-actin及VEGF/β-actin蛋白及mRNA水平显著低于其他组,但药物加放疗组HepG2细胞CA-9/β-actin蛋白及mRNA水平显著高于其他组。结论:采用放疗与中药"君-佐"相伍的理论对肝癌细胞处理后,可能提高细胞凋亡率及放疗增敏效果。     

黄芩苷通过影响miRNA的表达抑制乳腺癌细胞的侵袭转移

目的:从miRNA角度探讨黄芩苷对乳腺癌侵袭与转移的影响及可能的机制。方法:黄芩苷作用于乳腺癌MCF-7细胞,运用免疫组化检测TGF-β和VEGF表达的变化,筛选最佳药物浓度;用miRNA芯片筛选受黄芩苷调控的差异miRNA,qRT-PCR对芯片结果中上调的miRNA进行验证,Western-blot检测Bcl-2、Caspase-9、Caspase-3、p-p38、p53的表达,MTT法检测细胞生存率,Transwell实验检测细胞侵袭与转移,流式细胞术检测细胞凋亡。结果:用25μmol/L、50μmol/L、100μmol/L、200μmol/L的黄芩苷作用于乳腺癌细胞,免疫组化显示TGFβ、VEGF的表达下降,筛选出最佳药物浓度为50μmol/L;黄芩苷干预后miRNA芯片筛选出miR-126表达上调最明显,并以qRT-PCR验证。黄芩苷或miR-126 mimics作用于乳腺癌细胞后Bcl-2表达水平下降,Caspase-9和Caspase-3的裂解产物、p-p38、p53表达水平提高。Transwell试验表明黄芩苷干预或转染miR-126 mimics后乳腺癌细胞的侵袭转移能力降低,MTT法显示黄芩苷或miR-126 mimics均可抑制乳腺癌细胞的增殖,流式细胞术显示黄芩苷与miR-126 mimics促进癌细胞凋亡。结论:黄芩苷能抑制乳腺癌细胞的增殖及侵袭转移,其机制可能与上调miR-126的表达有关。