补肺汤对肺纤维化大鼠肺组织MMP-9、TIMP-1蛋白表达影响

目的:观察补肺汤对肺纤维化大鼠肺组织中基质金属蛋白-9(MMP-9)和组织基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)蛋白表达及肺组织病理变化的影响。方法:雄性SD大鼠,随机分成4组:空白组、模型组、强的松组、补肺汤组。除空白组外,其余3组均采用博莱霉素(BLM)制作肺纤维化大鼠模型,每日灌胃给药,造模后7、14、28天取材。通过免疫组织化学染色方法,检测肺组织MMP-9、TIMP-1蛋白表达,采用光学显微镜观察肺组织病理变化。结果:与模型组比较,补肺汤组、强的松组各时间点肺泡炎和肺纤维化程度均较轻;与模型组比较,各时间点强的松组、补肺汤组肺组织MMP-9蛋白表达明显减低;与模型组比较,各时间点的强的松组、补肺汤组肺组织TIMP-1蛋白表达明显降低。结论:补肺汤能够抑制早期肺泡炎的发生,降低肺组织MMP-9与TIMP-1蛋白表达,纠正MMP-9/TIMP-1失衡,改善细胞外基质的异常代谢,从而抑制或延缓博莱霉素致大鼠肺纤维化的发生和发展。     

补肺汤对肺纤维化大鼠肺组织成纤维细胞α-SMA表达的影响

目的：观察补肺汤对肺纤维化大鼠肺组织中成纤维细胞α-SMA及肺组织病理变化的影响。方法：雄性SD大鼠,随机分成4组：空白组、模型组、强的松组、补肺汤组。除空白组外,其余3组均采用博莱霉素（BLM）制作肺纤维化大鼠模型,每日灌胃给药,造模后7、14、28d取材。通过免疫组织化学染色方法,检测肺组织成纤维细胞α-SMA表达,采用光学显微镜观察肺组织病理变化。结果：与模型组比较,补肺汤组、强的松组各时间点肺泡炎和肺纤维化程度均较轻;与模型组比较,各时间点强的松组、补肺汤组肺组织成纤维细胞α-SMA表达明显减低。结论：补肺汤能够抑制早期肺泡炎的发生,降低肺组织成纤维细胞α-SMA表达,加速细胞外基质的降解,从而抑制肺纤维化的形成。     

补肺汤对肺纤维化大鼠肺组织TGF-β_1表达影响的研究

目的:观察补肺汤对博莱霉素致肺纤维化大鼠肺组织中转化生长因子(TGF-β1)表达的影响。方法:SD大鼠96只,随机分成正常组、模型组、补肺汤治疗组和强的松组,每组24只。除正常对照组给予生理盐水外,其余各组均予气管内注射博莱霉素诱导肺纤维化。各组在造模后第2天分别予生理盐水、生理盐水、补肺汤流浸膏、强的松混悬液灌胃,并于造模后第7、14、28天分批分组处死8只大鼠。取右肺行HE染色,观察肺组织形态学变化,免疫组化观察各组大鼠肺组织中TGF-β1蛋白的表达。结果:与模型组比较,补肺汤组和强的松组的病理形态学变化明显减轻,肺泡炎及纤维化积分明显降低;肺组织TGF-β1蛋白表达明显降低(P0.01)。结论:抑制肺组织TGF-β1的表达可能是补肺汤抗肺纤维化作用的机制之一。     

基于自噬探究补肺活血胶囊对博来霉素诱发小鼠肺纤维化的抑制作用

目的 基于自噬与上皮间质转化(EMT)角度探究补肺活血胶囊对肺纤维化(PF)小鼠的作用。方法 105只C57BL/6J小鼠随机分为正常组,模型组,雷帕霉素组(2 mg/kg,腹腔注射),低、中、高剂量补肺活血组(0.32、0.63、1.62 g/kg补肺活血胶囊,灌胃)和补肺活血+3-MA组(1.62 g/kg补肺活血胶囊,灌胃;30 mg/kg 3-MA,腹腔注射)。通过对小鼠气管内单次注射2.5 mg/kg博来霉素(BLM)来诱导PF,造模成功后1 d开始给药,持续21 d。统计小鼠存活率与体质量,采集肺泡灌洗液(BALF)并测定总细胞与总蛋白,测定肺组织湿干重比与羟脯氨酸水平,苏木精和伊红(HE)染色和Masson三色染色观察肺组织病理学变化,RT-qPCR法检测肺组织EMT相关因子(E-cad、Vim、α-SMA、TGF-β1)mRNA表达,Western blot法检测肺组织EMT相关蛋白以及自噬相关蛋白(p-mTOR、mTOR、P62、LC3-Ⅱ、LC3-Ⅰ、Beclin1)表达。结果 与模型组比较,雷帕霉素与补肺活血胶囊干预后PF小鼠生存率提高,体质量增加,肺组织湿干重比...     

朝医补肺元汤对哮喘模型小鼠肺组织中p38蛋白激酶表达的影响

目的:探讨朝医补肺元汤对小鼠哮喘模型肺组织中p38蛋白激酶表达的作用及其可能机制。方法:雄性BALB/c小鼠40只随机分成5组。支气管肺泡灌洗液(BALF)中IL-5、IL-13的含量采用酶联免疫吸附法(ELISA)测出,并对支气管肺泡灌洗液中炎症细胞的病理学改变进行观察。应用免疫蛋白质印迹(Western blot)测小鼠肺组织中磷酸化的p38MAPK表达作用强弱。结果:相较于正常对照组,哮喘模型组小鼠BALF中IL-5、IL-13以及肺组织中的磷酸化p38MAPK表达增强(P0.05)。相比较于小鼠哮喘模型组,朝医补肺元汤低、高剂量组小鼠肺泡灌洗液中的IL-5、IL-13、肺组织磷酸化p38MAPK表达水平显著降低(P0.05)。综上可证明朝医补肺元汤能显著改善哮喘小鼠肺组织的病理学上的改变。结论:朝医补肺元汤显著治疗哮喘的功效密切相关于阻碍哮喘小鼠p38MAPK信号通路的表达。     

电针对慢性阻塞性肺疾病大鼠肺组织自噬相关蛋白表达的影响

目的:观察电针"足三里"和"肺俞"对慢性阻塞性肺疾病(C O PD)大鼠肺组织自噬相关蛋白及炎性因子表达的影响,探讨电针在COPD发病过程中的作用机制.方法:将雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、电针组,每组10只.采用香烟烟熏联合脂多糖(LPS)法复制COPD大鼠模型.电针组给予电针双侧"足三里"和"肺俞",隔日治疗...     

补肺益肾汤对特发性肺纤维化患者肺功能的影响

目的:观察补肺益肾汤对特发性肺纤维化患者肺功能的影响。方法:选取本院2018年6月至2019年6月门诊和住院治疗的特发性肺纤维化患者52例,按照随机数字表法分为对照组和治疗组,每组26例。治疗期间实际脱落9例,最终纳入统计分析的共43例,对照组21例,治疗组22例。两组均给予止咳化痰、解痉平喘、抗感染等治疗,喘息加重时应用沙丁胺醇气雾剂,治疗组在对照组治疗的基础上加用补肺益肾汤治疗。结果:对照组有效率为61.90%,治疗组有效率为86.36%,两组有效率比较,差异有统计学意义(P<0.05);治疗组治疗后血氧分压、1秒用力呼气容积、每分钟最大通气量、用力肺活量、一氧化碳弥散量高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);治疗组治疗后肺总量、肺活量高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);治疗组治疗后躯体生理健康评分、心理健康评分高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:补肺益肾汤治疗特发性肺纤维化,能提升患者肺功能,改善临床症状。     

熊果酸对肺癌细胞A549自噬相关蛋白的影响

目的研究自噬在熊果酸抑制人肺癌A549细胞增殖中的作用及机制。方法应用CCK8法检测熊果酸对A549细胞增殖的影响;实时荧光定量PCR法检测自噬相关基因LC3、 Beclin-1及p62的表达情况;Western Blot检测自噬相关蛋白LC3、 Beclin-1及p62的表达情况。采用自噬抑制剂3-甲基腺嘌(3-MA)观察熊果酸对A549细胞增殖的抑制作用。结果熊果酸可以显著抑制人肺癌A549细胞的活力(P0.01)且随着熊果酸剂量增加,对细胞的生长抑制率显著上升。熊果酸可诱导A549细胞自噬发生,诱导自噬相关基因、蛋白LC3Ⅱ/Ⅰ、 Beclin-1表达的增加;p62表达降低(P0.01);3MA使得自噬相关基因、蛋白LC3Ⅱ/Ⅰ、 Beclin-1表达明显降低;p62表达明显增加(P0.01)。自噬抑制剂3-MA提高了熊果酸对A549细胞的抑制作用(P0.01)。结论熊果酸抑制A549细胞的增殖,可能通过调节LC3Ⅱ/Ⅰ、 Beclin-1及p62蛋白表达诱导细胞发生自噬。自噬抑制剂3-MA能够增强熊果酸抑制A549细胞的增殖抑制作用,有望为肺癌的临床治疗提供新的联合治疗方案。     

复方苦参汤对溃疡性结肠炎小鼠结肠组织中炎症因子及自噬水平的影响

目的 观察复方苦参汤对溃疡性结肠炎（UC）小鼠结肠组织中炎症因子及自噬水平的影响,并探讨其作用机制。方法 将20只SPF级C57BL/6雄性小鼠随机分为正常组、模型组、复方苦参汤组、美沙拉嗪组,每组5只。适应性喂养7 d后,除正常组外,其余3组予以3%葡聚糖硫酸钠（DSS）自由饮用7 d制备UC小鼠模型。同时在造模第1天开始,正常组和模型组每日均以质量分数为0.9%的氯化钠溶液灌胃,复方苦参汤组与美沙拉嗪组分别予复方苦参汤（7.28 g/kg）、美沙拉嗪（0.52 g/kg）灌胃,每日1次,连续灌胃7 d。每天记录小鼠体质量、大便性状及便血情况,进行疾病活动指数（DAI）评分。末次灌胃结束后,取各组小鼠结肠组织,测量结肠长度,肉眼观察肠黏膜炎症损伤程度进行结肠黏膜损伤指数（CMDI）评分。采用苏木精-伊红染色（HE）法观察结肠组织病理变化,酶联免疫吸附试验（ELISA）检测白介素-1β(IL-1β)、白介素-18(IL-18)含量;免疫印迹（Western blot）法及实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应（RT-qPCR）法检测自噬相关分子蛋白及mRNA表达。结果 与正常组比较,模型组大...     

加减补肺汤对肺纤维化大鼠的抗氧化作用

目的:探讨加减补肺汤对肺纤维化(PF)大鼠抗氧化作用.方法:SD雄性大鼠40只,随机分为假手术组、模型组、加减补肺汤组,采用一次性气管滴注博来霉素复制PF模型(1mg/只),假手术组滴注等量的生理盐水.术后2d加减补肺汤组ig中药水煎液10 mL·kg-1(含生药16 g·kg-1),模型组和假手术组ig等量生理盐水,14,28 d处死动物,取血和肺脏,测定血清超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)和肺组织中羟脯氨酸(Hyp)的含量,实时荧光PCR测定肺组织中细胞外超氧化物歧化酶(ECSOD)mRNA的表达.结果:加减补肺汤明显改善肺纤维化大鼠的生存状态,降低肺组织中Hyp的含量,降低血清MDA含量,增加ECSOD mRNA的表达.结论:加减补肺汤能提高肺纤维化大鼠生存状态,改善纤维化指标,其机制可能与降低血清中MDA含量,上调ECSOD mRNA表达有关.     

泻肺汤对肺纤维化大鼠肺组织及血清自由基代谢的影响

目的观察泻肺汤对博来霉素所致肺纤维化大鼠自由基代谢的影响,探讨泻肺汤防治肺纤维化可能的作用机制。方法按照随机数字表法将SPF级SD大鼠随机分为正常对照组,模型对照组,泻肺汤低、中、高剂量组,阳性对照组,每组14只。除正常对照组外,采用经典的博来霉素气管内注射给药法制备大鼠肺纤维化模型,24 h后灌胃给药,正常对照组及模型对照组给予等体积生理盐水,泻肺汤低、中、高剂量组及阳性对照组,连续28 d。第29天腹主动脉采血处死大鼠,取肺组织标本。比色法观察肺组织NO的含有量、一氧化氮合成酶(NOS)的活性、超氧化物歧化酶(SOD)的活性、血清过氧化氢酶(CAT)的活性和羟脯氨酸(Hyp)的含有量。结果与正常对照组相比,模型对照组大鼠体质量明显下降,肺重及肺系数明显升高,肺组织的NO含有量和NOS的活性均明显升高、SOD的活性明显降低,血清中CAT的活性明显降低、Hyp的含有量明显升高(P0.05或P0.01)。与模型对照组比较,泻肺汤高剂量组大鼠体质量明显升高,各干预组大鼠肺重及肺系数明显下降,肺组织的NO含有量和NOS活性均明显降低、SOD的活性明显增强,血清中CAT的活性明显增强、Hyp的含有量明显降低(P0.05或P0.01)。结论泻肺汤对肺纤维化具有一定的保护作用,呈现出量效关系。     

加味小苦辛汤对博来霉素肺纤维化小鼠肺组织病理形态学、肺系数及HYP含量的影响

目的：观察加味小苦辛汤对博来霉素（BLM）致肺纤维化小鼠肺组织病理形态学及羟脯氨酸（HYP）含量的影响。方法将C57BL-6小鼠70只随机分为正常组、模型组、强的松组、加味小苦辛低剂量组、加味小苦辛汤高剂量组5组,每组14只（每组再随机分2批,每批7只）。小鼠腹腔注射BLM造模。各药物组于造模成功后第2日起每日连续给予相应药物。给药第14,28日分批随机处死小鼠。观察4各组病理切片肺组织形态学改变,计算肺系数和肺组织HYP的含量。结果空白组小鼠肺组织无纤维化形成;模型组肺组织可见肺泡破坏,肺泡间隔大量纤维化,肺系数值及肺组织中HYP含量较空白组显著增高（P＜0.01）。各治疗组肺组织纤维化程度较模型组明显减轻,且肺系数值和HYP含量较模型组显著降低（P＜0.01）。结论加味小苦辛汤可显著降低博来霉素致肺纤维化小鼠的肺泡炎程度与肺纤维化程度,并且可以抑制造模状态下PF小鼠肺组织中HYP含量的异常增高。     

黄芪糖蛋白对肺纤维化小鼠肺组织中α-SMA表达的影响

目的观察黄芪糖蛋白(Huang Qi Glycoprotein,HQGP)对肺纤维化小鼠肺组织病理形态、细胞因子及α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)蛋白表达的影响。方法将80只雌性ICR小鼠随机分为空白组、模型组、地塞米松组、HQGP组,每组20只。空白组鼻腔滴注生理盐水,其余3组鼻腔滴注博来霉素(15 mg/kg)诱导肺纤维化,造模后第1天起,各组小鼠给予相应药物腹腔注射,连续治疗14 d。给药后的第7、28天分两批取材,用HE染色和ELISA测定肺组织TNF-α和IL-1β含量来观察对肺泡炎程度的影响;Masson染色评价对肺纤维化程度的影响;采用免疫组化和Western Blot法分别检测肺组织中α-SMA蛋白表达。结果与模型组比较,第7、28天HQGP组小鼠的肺泡炎、肺纤维化程度明显减轻;第7、28天HQGP组小鼠肺组织中α-SMA蛋白表达显著降低(P0.01)。结论 HQGP对肺纤维化的干预机制可能与抑制肺组织中α-SMA的表达有关。     

当归补血汤对再障小鼠骨髓单个核细胞线粒体膜电位与自噬相关蛋白的作用研究

目的:观察当归补血汤含药血清对调节再障小鼠骨髓单个核细胞线粒体膜电位及自噬相关蛋白的作用。方法:利用皮下注射苯油及腹腔注射环磷酰胺溶液50 mg/kg的方法制备再障小鼠模型,提取、分离骨髓单个核细胞,分别置于当归补血汤含药血清0.5%、2.5%、10%的培养基中进行体外培养,观察其对再障小鼠骨髓单个核细胞线粒体膜电位及线粒体自噬标志物PINK1和泛素结合蛋白P62表达的影响。结果:与正常对照组相比较,模型对照组骨髓粒细胞线粒体膜电位明显降低,P62的蛋白表达明显下调(P<0.05),自噬泡的数量明显增高,PINK1蛋白表达明显上调(P<0.05);而与模型对照组比较,不同浓度当归补血汤20 g/kg含药血清使线粒体膜电位明显增加,P62的蛋白表达明显上调(P<0.05),自噬泡的数量明显降低,PINK1的蛋白表达明显下调(P<0.05)。结论:当归补血汤能够调节再障小鼠线粒体膜电位和自噬相关蛋白的表达,从而调节其线粒体自噬,影响造血细胞的凋亡。     

电针对胰岛素抵抗大鼠肝脏组织自噬相关蛋白表达的影响

目的 观察电针对胰岛素抵抗(insulin resistance, IR)大鼠肝脏组织自噬相关蛋白表达的影响,探讨电针治疗IR的潜在机制。方法 将Wistar雄性大鼠随机分为正常组、模型组和电针组,每组8只。电针干预选取中脘、关元、足三里及丰隆穴,每周干预3次,共8周。检测各组大鼠的餐后血糖(postprandial blood glucose, PBG)、腹腔糖耐量实验(intraperitoneal glucose tolerance test, IPGTT)血糖、葡萄糖输注率(glucose infusion rate, GIR)。采用高压尾静脉注射GFP-LC3质粒,观察肝细胞GFP-LC3荧光斑,Western Blot法检测大鼠肝脏组织中微管相关蛋白1轻链3B-Ⅱ(microtubule-associated protein 1 light chain 3B-Ⅱ, LC3B-Ⅱ)、p62(sequestosome 1, p62)、蛋白激酶B(protein kinase B, AKT)、磷酸化蛋白激酶B(phosphorylated-AKT, p-AKT)、胰岛素受体底物-...     

针灸对佐剂性关节炎大鼠滑膜组织自噬相关蛋白的影响

摘要：目的 观察针刺、艾灸对类风湿关节炎大鼠滑膜组织自噬相关蛋白表达的影响,探究针灸治疗RA的可能作用机制。方法 将50只大鼠随机分为正常组、模型组、阳性药组、针刺组、艾灸组,每组10只,将正常组以外的4组大鼠足跖底部注射0.1ml完全弗氏佐剂造模,阳性药组按照 0.1 mg/100 g 的剂量进行甲氨蝶呤灌胃,1 次/3d（每周2次）;针刺组针刺肾俞、足三里,每穴20分钟;艾灸组艾条温和悬灸针刺相同穴位,每穴20分钟;每组治疗21d;正常组和模型组不予治疗。分别在造模成功后、治疗结束后测量AI指数和足爪容积的指标, ELISA法检测大鼠血清TNF-α,IL-1β水平,Western blot法检测滑膜组织中LC3-II、Beclin-1蛋白表达。结果 造模后大鼠关节均明显肿胀,治疗后的大鼠关节肿胀度均有改善;与正常组比较,模型组LC3-II蛋白表达上升（P＜0.05）、Beclin1蛋白表达明显上升（P＜0.01）,阳性药组和针刺组Beclin1蛋白表达上升显著（P＜0.01）;与模型组相比,针刺组LC3-II蛋白表达明显下降（P＜0.01）、Beclin1蛋白表达上升（P＜0.05）,艾灸组LC3-II蛋白表达下降（P＜0.05）、Beclin1蛋白表达显著升高（P＜0.01）。结论 针刺、艾灸均对类风湿关节炎有治疗效果,其机制可能与抑制自噬相关蛋白LC3-II、Beclin1蛋白表达有关。     

刺山柑对类风湿关节炎大鼠滑膜组织自噬相关蛋白表达的影响

目的:观察刺山柑果风湿止痛贴对类风湿关节炎大鼠滑膜组织自噬相关蛋白表达的影响,并探究刺山柑治疗类风湿关节炎（RA）的可能作用机制。方法:将40只无特定病原体（SPF）级SD大鼠采用随机数字法分为正常组,模型组,阳性药组和刺山柑组,每组10只,对造模的大鼠在足跖底部注射0.1 mL完全弗氏佐剂。模型组、阳性药组和刺山柑组分别于大鼠左后足跖部外敷空白凝胶、伤湿止痛膏以及刺山柑果风湿止痛贴,每组持续干预21 d。观测关节炎（AI）指数和足爪容积的指标,酶联免疫吸附测定（ELISA）法检测大鼠血清肿瘤坏死因子-α（TNF-α）水平,蛋白质印迹法检测滑膜组织中微管相关蛋白轻链3-Ⅱ(LC3-Ⅱ)、Beclin蛋白复合物-1（Beclin-1）蛋白表达。结果:与正常组比较,模型组和阳性药组LC3-Ⅱ、Beclin-1蛋白表达均上升（P<0.05,P<0.01）,刺山柑组LC3-Ⅱ蛋白表达降低（P<0.01）,Beclin-1蛋白表达升高（P<0.01）;与模型组比较,阳性药组Beclin-1、LC3-Ⅱ蛋白表达差异无统计学意义,刺山柑组LC3-Ⅱ蛋白表达降低（P<0.01）,Beclin-1蛋白表达升高（P<0.01）。结论:刺山柑果风湿止痛贴治疗AA大鼠比伤湿止痛膏疗效更加显著,从而为刺山柑治疗RA提供一定的科学依据,其相关机制可能与蛋白LC3-Ⅱ、Beclin-1表达有关。     

加味涤痰汤对脑缺血再灌注损伤大鼠脑细胞自噬相关蛋白表达的影响

目的:探讨加味涤痰汤对脑缺血再灌注损伤大鼠脑细胞自噬相关蛋白表达的影响。方法:采用可逆性脑中动脉闭塞线栓法栓塞右侧大脑中动脉,构建脑缺血再灌注(CIR)损伤模型,随机分为假手术组、模型组、加味涤痰汤高、低剂量组(0. 768,0. 384 g·kg~(-1))和吡拉西坦组(0. 1 g·kg~(-1))。假手术组和模型组灌胃生理盐水,加味涤痰汤高、低剂量组灌胃加味涤痰汤,吡拉西坦组灌胃吡拉西坦片,灌胃10 m L·kg~(-1);给药7 d。给药24 h内,处死后行组织病理学检查,比较脑梗死体积、神经细胞凋亡和血清炎症因子水平,蛋白免疫印迹法(Western blot)测定脑组织中自噬相关蛋白微管相关蛋白轻链3(LC3)Ⅱ,Beclin1,B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)和p62的表达。结果:模型组脑组织梗死灶内细胞和血管坏死,神经元肿胀,间质水肿;加味涤痰汤高、低剂量组及吡拉西坦组脑组织少数神经细胞死亡,水肿减轻,神经细胞肿胀减轻。加味涤痰汤高、低剂量组及吡拉西坦组脑梗死体积和神经细胞凋亡低于模型组(P 0. 05),加味涤痰汤高、低剂量组及吡拉西坦组肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白细胞介素-2(IL-2)和白细胞介素-8(IL-8)水平降低(P 0. 05)。与假手术组比较,模型组LC3Ⅱ,Bcl-2和Beclin1蛋白及mRNA表达明显升高,p62蛋白及mRNA表达明显下降;与模型组比较,加味涤痰汤高、低剂量组及吡拉西坦组LC3Ⅱ和Beclin1蛋白及mRNA表达均明显降低,p62蛋白及mRNA表达明显升高,差异均具有明显性(P 0. 05)。结论:加味涤痰汤可改善MCAO/R脑组织损伤和自噬,减轻炎症反应,调节自噬活性,可能与下调LC3Ⅱ,Beclin1表达,上调p62表达有关。     

抑制AMPK观察清燥救肺汤对肺癌细胞自噬启动相关蛋白表达的影响

目的 观察应用腺苷酸活化蛋白激酶（AMPK）抑制剂（compound C）后,清燥救肺汤对肺癌细胞自噬启动相关蛋白AMPK,哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）,UNC-51样激酶1（ULK1）表达的影响。方法 雄性C57BL/6J小鼠随机分为模型组,环磷酰胺（CTX）组（50 mg·kg^-1）,清燥救肺汤组（11 g·kg^-1）,AMPK抑制剂组（10 mg·kg^-1）,清燥救肺汤加AMPK抑制剂组（清燥加抑制剂组）（11 g·kg^-1+10 mg·kg^-1）。小鼠右腋皮下注射Lewis肺癌细胞构建肺癌荷瘤模型。造模24 h后,CTX组腹腔注射给药,隔日1次,共7次,AMPK抑制剂组与清燥加抑制剂组腹腔注射compound C,每日1次,共14 d。清燥救肺汤组和清燥加抑制剂组,造模前后14 d均以中药设定剂量灌胃给药。实验结束后处死各组小鼠并取荷瘤组织,统计各组瘤质量;透射电镜（TEM）观察各组肺癌组织自噬溶酶体的生成情况;蛋白免疫印迹法（Western blot）检测AMPK,磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶（p-AMPK）,mTOR,磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（p-mTOR）,ULK1,磷酸化UNC-51样激酶1（p-ULK1）,微管相关蛋白1轻链3B（LC3B）和p62蛋白的表达;苏木素-伊红（HE）染色观察各组肺癌组织病理学变化。结果 与模型组比较,清燥救肺汤组瘤质量降低（P<0.01）,电镜下发现自噬溶酶体生成,p-AMPK,p-ULK1,LC3B,LC3B-Ⅱ蛋白表达和p-AMPK/AMPK,p-ULK1/ULK1,LC3B-Ⅱ/LC3B-Ⅰ均升高（P<0.05,P<0.01）,p-mTOR,p62蛋白表达和p-mTOR/mTOR均降低（P<0.05）。与清燥救肺汤组比较,清燥加抑制剂组电镜下未见自噬溶酶体生成,p-AMPK,p-ULK1,LC3B,LC3B-Ⅱ蛋白表达和p-AMPK/AMPK,p-ULK1/ULK1,LC3B-Ⅱ/LC3B-Ⅰ均明显降低（P<0.05,P<0.01）,p62蛋白表达升高（P<0.05）。HE染色结果显示,各给药组肺癌组织与模型组比较,病理有明显改善。结论 清燥救肺汤能促进自噬发生标志蛋白LC3B-Ⅱ升高及p62蛋白表达降低从而诱导自噬发生,其自噬启动机制可能不是调控AMPK/mTOR/ULK1通路介导,而是通过AMPK/ULK1通路实现的。     

电针对阿尔茨海默病小鼠海马细胞内β-淀粉样蛋白及自噬相关蛋白表达的影响

目的:通过观察电针对阿尔茨海默病(AD)模型小鼠海马细胞内β-淀粉样蛋白(Aβ)及自噬相关蛋白表达的影响,探讨电针治疗AD的机制。方法:将18只6月龄雄性APP/PS1双转基因小鼠随机分为模型组和电针组,每组9只;以9只同月龄同性别的C57BL/6野生型小鼠作为正常对照组。电针组小鼠给予针刺“百会”及电针双侧“涌泉”,20 min/次,隔日1次,共治疗21次。采用Morris水迷宫实验观察小鼠空间学习记忆能力,透射电镜法观察小鼠海马自噬相关病理变化,免疫荧光染色法观察小鼠海马CA1区微管相关蛋白1轻链3(LC3)及Aβ的表达,Western blot法检测小鼠海马组织中LC3、p62蛋白的表达水平。结果:与正常对照组比较,模型组小鼠逃避潜伏期延长(P<0.01),原平台象限停留时间缩短(P<0.05),海马CA1区LC3、Aβ阳性表达均升高(P<0.01),海马组织中LC3Ⅱ、p62蛋白表达水平及LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值均升高(P<0.01,P<0.05)。与模型组比较,电针组小鼠逃避潜伏期缩短(P<0.05),原平台象限停留时间延长(P<0.0...